192 Br~ves commun ica t i ons - Brevi comunicaz ion i [ EXPERIENTIA VOL. VII/5]

reasonably deny a tonus increase of the efferent ar tery alone, because, al though such an event could easily ex- plain the reduction of the tubular excretion of PAH, as a consequence of the diminished blood supply of the tubu- lus, it could by no means explain the reduction of the glomerular f i l trat ion which, on the contrary, logically should be augmented by the increase of the intraglomeru- lar pressure. cm d

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Fig. 2. - The same b i t c h as in f igure 1, a f ter a week. A t the arrow, i . m . in jec t ion of the Vulgaris e x t r a c t cor responding to 5 g fresh

s a l i v a r y t issue pe r kg b o d y weight .

- - rena l p l a sma flow em3/min/kg. . . . . g lomerular f i l t ra t ion cm3/min/kg. . . . . . . ur ine flow cma]min/dog.

Noteworthy indirect evidence for the inhibi t ion of the glomerular fi l tration caused by enteramine may also be obtained from s tudying the course of thiosulphatemia in the dog. More about this will be reported in a forth- coming publication. However, it is already quite clear from our prel iminary experiments that , whereas thio- sulphatemia uniformly and rather quickly decreases in the control dog, in the enteramine-t reated animal the decrease after the injection of a Vulgaris extract is sud- denly interrupted, giving way, for the dura t ion of the renal inhibit ion, to an almost horizontal thiosulphatemia tracing.

Four and an half hour after the i. v. adminis t ra t ion of thiosulphate one may, for instance, still observe thio- sulphatemia values of 40-50 mg per cent in those animals which were given enteramine; comparatively, thiosut- phatemia values of < 10 mg per cent in the control ani- mals.

The results here obtained with massive, surely extra- physiological doses of enteraminic extracts were largely confirmed by other experiments, carried out in the rat with a dosage of enteramine 100-200 t imes less than above.

This investigation, a full acount of which will be published elsewhere, was supported by a grant from the I ta l ian Research Council.

V. E R S P A M E R a n d A . OTTOLENGHI

Pharmacological Ins t i tu te , Univers i ty of Bari, August 14, 1950.

Zusammen/assung Durch Clearance-Experimente beim Hunde konnte

bewiesen werden, dab die antidiuretische Wirkung von En te ramin ausschlie~lich oder haupts~chlich einer Drosselung der aiferenten Gef~Be des Glomerulus zuzu- schreiben ist.

Adrenalin- und Arterenolgehalt der M~iuse- und Rattennebenniere

Die hormonale Zusammensetzung des Nebennieren- marks weist innerhalb der Tierreihe charakteristische artspezifische Unterschiede auf. WAhrend das Mark- inkret der meisten untersuchten Tierarten - Schwein, Rind I, Katze, Hund ~, Frosch ~ - u n d des Menschen ~ neben Adrenalin betr~chtliche Mengen Arterenol (Nor-adrena- lin) enth~lt - 20 bis 60% -, konnten wir* im Neben- nierenmark yon Kaninchen und Meerschweinchen nur Adrenalin nachweisen. Bei diesen beiden Tierarten ist vermutl ich der ftir die Llberfiihrung der ((Vorstufe, Arterenol in Adrenalin erforderliche Methylierungsmecha- nismus besonders wirksam. DaS andererseits das bei den meisten Tierarten im Nebennierenmark sich findende Arterenol hier nicht nu r die Funk t ion des chemischen Intermedi~irproduktes zu er/iillen hat, sondern daneben auch die Funk t ion des setbst~indigen V¢irkstoffs, wird dadurch wahrscheinlich, dab es unter der Einwirkung ad~iquater Reize (Druckentlastung des Carotissinu#, Splanchnicusreizung e) zu einer Abgabe von Arterenol aus der Inkretdfiise kommt.

Mit biologischen Differenzierungsmethoden unterVer- wendung des Katzenblutdruchs, Rattenuterus und Kanin- chendarmes als Testobjekte finden wir, dab ~thnlich wie bei den meisten Tierarten auch bei der Maus das Neben- nierenmark ein Gemisch von Adrenalin und Arterenol enth~tlt - ungef~thr 75 % Adrenalin, 25 % Arterenol -, bei der Ratte hingegen nur Adrenalin. Die Ratte wiirde dem- nach zusammen mit Meerschweinchen und Kaninchen eine Tiergruppe bilden, in deren Nebennierenmark prak- tisch nur Adrenalin, kein Arterenol vorhanden ist.

Wir haben wiederholt die Vermutung ge~ul3ert, dab die pharrnakologischen Befunde vielleicht einmal eine Parallele und Best~itigung auch im ((S/Iorphologischem, fiinden, derart, dab der histologische Nachweis zweier verschiedener Zelltypen im Nebennierenmark der Tier- arten, bei denen wit beide Wirkstoffe antreffen, gelAnge: eines arterenol- und eines adrenal inbi ldenden Typs. Das scheint jetzt der Fall zu sein, da es B~NDER~ (am Phar- makotogischen Ins t i tu t in Marburg) ohne Kenntnis un- serer Befunde offenbar gelungen ist, mi t einer modi- fizierten GiemsafXrbung im Nebennierenmark yon Katze

1 p. HOLTZ, K. CREDNER und G. KRONEBERG, Naunyn-Schmie- debergs Arch. 204, 228 (1944-47). - P. HOLTZ und H. J. SCHOMANN, Na tu rwissenschaf ten 35, 159, 191 (1948); Klin. Wschr. 26, 605 (1948) ; Naunyn-Schmiedebe rgs Arch. 206,475 (1949). - U. v. EULER, Na tu re 163, 642 (1949). - S. BERGSTROM, U . S . V . EULER und U. HAMBERG, A c t a chem. scand. 3, 305 (1949). - B . F . TULLAR, Science 109, 536 (1949).

P. HOLTZ und H. J. SCHOMANN, Naunyn-Schmiedebe rgs Arch. 210, 1 (1950).

s H. J. SCHOMASN, UnverSffent l ichte Versuche. a p. HOLTZ und H . J . SCHf3MANN, Na tu re 165, 683 (1950); Arch.

iu te rna t . P h a r m a e o d y m 8a, 417 (1950). - Siehe dagegen U.S. v. EULER, Exper . 5, 451 (1949), sowie W. SCHVLER und P. HEIN- amH, Helv . Physiol . e t Pharmaco l . Ac ta 7, 515 (1949).

5 p. HOLTZ und H. J . SCHOMANN, Naunyn-Schmiedebe rgs Arch. 206, 49 (1949); 211, 1 (1950).

e E. BOLBRING und H. J . BURN, Br i t . J . Pharmaco l . 4,202 (1949). - J . H. GADDUM und F. LEMBECK, E b e n d a ~, 401 (1949).

A. B~NDER, PersSni iche Mit te i lung.

[I5. V. 1951] Kurzc Mi t te i lungen - Brief Repor t s 193

und Maus zwei Ze l l typen zu di f ferenzieren, eine sich violett f~trbende, wahrsche in l i ch ~dnaktive,~ F o r m und eine sich b lau f~rbende, wahrsche in l i ch ~aktive, , Fo rm. Bei drei T i e r a r t en j edoch f inde t er im ch romaf f inen Gewebe der Nebenn ie r en nu r e inen einzigen, sich grfin fiirbenden Ze l l typ : bei Ratte, Meerschweinchen und Ka- ninchen. P. HOLTZ und H. J . SCHUIVlANN

Pharmako log i sches I n s t i t u t der Univers i t f i t Ros tock , den 2. S e p t e m b e r 1950.

Summary The supra rena l s of m o s t an imal -spec ies - pig, ca t t le ,

dog, cat , f rog and m a n - c o n t a i n beside ad rena l ine more or less no r -ad rena l ine (ar terenol) : 20-60 %. T h e supra - renals of r abb i t s and guinea-p igs b e h a v e d excep t iona l ly in t h a t t h e y con ta ined on ly adrenal ine . Now i t was found t h a t ra ts also belong to the l a t t e r group, whereas the secret ion of mice-suprarena l s is a m i x t u r e of 75 % adrenaline and 25 % nor-adrena l ine . These resul ts are in agreement w i t h t he h is to logica l f indings of B~.NDER, that for e x a m p l e in ca t and mice supra rena l s two diffe- rent t ypes of ch romaf f ine cells are to be found, b u t on ly one chromaf f ine cell t y p e in suprarena ls of rabbi t s , guinea-pigs, and rats.

P R O L A B O R A T O R I O

Le ~S6parateur de germes~ Les m i c r o m a n i p u l a t e u r s , appare i l s pa r fa i t s dans leur

principe, sont d ' u n e m a n i p u l a t i o n d61icate, et l ' i so lement , grace ~ eux, d ' u n e seule bact6r ie ex ige s o u v e n t un t emps assez prolong6.

J ' a i pens6 qu ' i l 6 taf t possible de r6aliser d ' u n e au t re faqon la s6para t ion ~ l ' 6 t a t de cellules isoI6es des microbes en se basan t sur un au t r e pr incipe .

Si, en effet , on t r a n s f o r m e en a6rosol une 6muls ion bact6rienne, les microbes se t r o u v e n t ent ra tn6s m6cani- quement avec les gou t t e l e t t e s du broui l lard , un seul germe se t r o u v a n t dans une seule g o u t t e l e t t e du fair de leurs d imens ions respec t ives . Chaque g o u t t e l e t t e de brouillard pro je t6e sur un mi l ieu de cu l tu re f avorab le pourra donne r na issance ~ une colonie isol6e. Les ex- p6riences su ivan t e s le p r o u v e n t .

a) Appareillage et manipulation. Nous nous se rvons d 'un appare i l p r o d u c t e u r d 'a6rosols, m u n i d ' u n en ton- noir, reli6 pa r un t u b e de c a o u t c h o u c ou soud6 ~t l 'or i f ice de sortie du broui l la rd . L ' e n s e m b l e de l ' appa re i l est con~u de te l le sor te qu ' i l se pose f ac i l emen t et que l 'op6- rateur a l e s ma ins l ibres.

On place s t6 r i l ement dans le fond de l ' appare i l , st6rilis6 lui-m~me, l '~muls ion bac t6 r i enne a v e c laque l le on d6sire exp6rimenter . On envoie , grace g une poire, de Fair qui est filtr6 ~ t r ave r s un coton plac6 dans la t u b u l u r e d ' in t roduc t ion . L 'a6rosol , i n s t a n t a n 6 m e n t form6, est projet6 sur un mil ieu de cu l tu re favorable . D e u x ou t ro is secondes de f o n c t i o n n e m e n t suf f i sent pour ob ten i r un r fsul ta t (fig. 1).

b) Colonies isoldes obtenues 3~ partir d'une dmulsion d'une scale esp~ce bactdrienne, Trans fo rm6e en a6rosol, une 6mulsion bac t6r ienne donne des colonies p a r f a i t e m e n t isol6es, don t le h o m b r e et l ' e s p a c e m e n t son t li6s essen- t ie l lement au t e m p s de m a r c h e de l ' appare i l .

c) La p r e u v e de la s6para t ion par fa i t e des 616ments cellulaires apr~s usage du ~<S6parateur de germes~ a 6t6 apport6e pa r le D o c t e u r IZLEURY de la S t a t i on f6dfra le d'essais v i t icoles h Lausanne . Ce t au teur , en effet , a projet6 sur une g rande l a m e de ve r re (genre p l aque

pho tog raph ique ) une 6muls ion de levures . L a l ame rut ensui te color6e et l ' e x a m e n mic roscop ique de t ous l e s 616ments projet6s sur la lame m o n t r a qu ' i t s 6 ta len t tous s6par6s, un p o u r cen t s eu lemen t se t r o u v a n t c6te ~ c6te.

d) Colonies isoIdes obtenues d~ partir d'une dmulsion de plusieurs esp~ces bactdriennes. M61angeons dans une seule 6muls ion des germes diff~rents (exemple : E. coli, 13acille pyocyan ique , S t aphy locoque , 13. mesenter icus) . Trans- form6e en a6rosol et p ro je t6e sur un mi l ieu convenab le , ce t t e 6muls ion donne naissance ~t des colonies pa r fa i t e - m e n t isol6es, don t chacune cor respond h une esp6ce bac- t6r ienne.

COLONNE produclmce d'ae~N

TUBLILLbeEe~.

PO/,~Epour/acornp ....... ~ / / ' / ' ; TUBLILURE b, ~. /

i L.jusfor~er en mar~S~/

/TONNO/Rp~o/e¢/eur

/ -X,

BOITE 7[ PETR/ a*ec ;e ~,l,~a de ~Jtutc

Fig. I,

L 'appa re i l util is6 m6ri te donc bien le nom d e , S6para- t e u r de germes~, que nous lui avons donn6, et p e r m e t un i so lement stir, rap ide et tr~s s imple de microbes h pa r t i r d ' u n m61ange.

e) InJluence de la densitd des dmulsions. La to ta l i t~ des germes con tenus dans t ' 6muls ion ne passe pas dans les g o u t t e l e t t e s de l 'a6rosol : une tr~s faible pa r t i e seu tement est pro je t6e ~ l ' ex t6 r i eu r . Les appare i l s don t nous nous sommes servis d6b i t en t env i ron 1 / 5 0 0 e de cen t imSt re cube par seconde sous une press ion de 500 g rammes . P r e n a n t une 6muls ion c o n t e n a n t 4 mi l l ia rds de germes au cent i - m~tre cube, on d e v r a i t donc sor t i r t h 6 o r i q u e m e n t de l ' appare i l , aprSs 3 secondes de marche , env i ron 24 mil- l ions de germes. On ob t i en t en r6ali t6 300 ~ 500 colonies, ce qu i cor respond k une 6muls ion c o n t e n a n t env i ron 80

100000 germes au cen t im~t re cube. I1 se fair pa r ail- leurs une c o n c e n t r a t i o n consid6rable des germes dans l '6muls ion. Un seul e x e m p l e : une 6muls ion c o n t e n a n t 4 mi l l ia rds de germes par cen t im~t re cube au d6but de l ' e x p f r i e n c e , en con t i en t 37 mil l iards apr~s v ing t minu- tes de marche .

En r6sum6, l e , S6para t eu r de ge rmes , , c o n v e n a b l e m e n t mani6, p e r m e t d 'ob ten i r , ~ pa r t i r de cu l tures ou d '6muI- sions c o n t e n a n t un ou p lus ieurs microbes diff6rents, des colonies p a r f a i t e m e n t isol6es, ndes de cellules uniques. Cet te t e c h n i q u e nouve l le peut , dans bien des cas, r em- p lacer du fa i t de sa s impl ic i t6 de manoeuvre et de la rapidi t6 de son fonc t ionnemen t , les m i c r o m a n i p u l a t e u r s .

Fig. 2.

Le , S6para teur de germes,} a de nombreuses appl ica- t ions pra t iques . II pe rme t , pa r exemple , de pur i f ie r des cu l tu res pollu6es e t de r e t r o u v e r I ac i l emen t le ge rme original . On peu t l ' u t i l i se r dans l ' ana lyse des p r o d u i t s

13 Exper,