Anhang zum Schlussbericht des Forschungsvorhaben ... · Makrolid-Antibiotika Keine Keine (Schlüsener et al., 2005) Chromabond HR-P Halogenessigsäuren Chlorung Keine (Loos et al.,

Abschlussbericht „Metabolitenbildung beim Einsatz von Ozon – Phase 2“ 2014

Anhang zum Schlussbericht des

Forschungsvorhaben

„Metabolitenbildung beim Einsatz von Ozon – Phase 2 “

AZ IV-7-042 600 001J

Vergabenummer 08/058.1

Elimination von Arzneimitteln und organischen Spurenstoffen: Entwicklung von Konzeptionen und innovativen, kostengünstigen Reinigungsverfahren

Anhang I

Anhang zum Abschlussbericht „Metabolitenbildung beim Einsatz von Ozon – Phase 2“ 2014

Inhaltsverzeichnis 8 Anhang ................................................................................................................... 1

8.1 Probenvorbereitung ................................................................................................ 1

8.1.1 Übersicht Probenlogistik ................................................................................... 1

8.1.2 Auswahl der Festphasenmaterialien ................................................................. 3

8.1.3 SPE-Methode ................................................................................................... 5

8.1.4 Leitsubstanzen ................................................................................................. 6

8.1.5 HPLC-UV-Methode .......................................................................................... 8

8.1.6 HPLC-MS-Methode (ISA/IUTA) .......................................................................10

8.1.7 SPE-Methodenvalidierung ...............................................................................12

8.1.8 Präparatives HPLC-Verfahren – Fraktionierung ..............................................16

8.1.9 Ergebnisse – Fraktionierung ............................................................................18

8.2 Systemparameter der Ionenchromatographie zur Bestimmung von Bromat ..........19

8.3 Beschreibung der Systemparameter zur Bestimmung von Nitrosaminen ...............20

8.4 MS-Screening ........................................................................................................22

8.4.1 GC-MS-Methode .............................................................................................22

8.4.2 GC-MS Screening – Ergebnisse......................................................................23

8.4.3 HPLC-MS Methoden und Ergebnisse des LC-MS Screenings ........................25

8.4.4 Ergebnisse der Untersuchten Filtrate. .............................................................41

8.5 Biologische Testsysteme (Experimentelles) ..........................................................43

8.5.1 Zytotoxizität und Östrogenität ..........................................................................43

8.5.2 Ames-Test und Comet Assay ..........................................................................48

8.5.3 Ökotoxikologische In-vivo-Tests ......................................................................55

8.5.4 In-vivo-Tests im Durchfluss .............................................................................61

8.6 Ergebnistabellen und Abbildungen ........................................................................63

8.6.1 Ergebnistabellen Zytotoxizität und Östrogenität ...............................................63

8.6.2 Ergebnistabellen Ames-Test ......................................................................... 101

8.6.3 Ergebnistabellen Comet Assay ..................................................................... 129

8.6.4 Ergebnistabellen der ökotoxikologischen In-vivo Tests .................................. 142

Anhang II


8.6.5 In-vivo-Tests im Durchfluss ........................................................................... 159

Anhang 1


8 Anhang

8.1 Probenvorbereitung

8.1.1 Übersicht Probenlogistik

Abbildung 8-1: Übersicht Probenlogistik (1. Projekt phase).

Abbildung 8-2: Übersicht Probenlogistik (2. Projekt phase).

Anhang 2


Tabelle 8-1: Übersicht über das Gesamtvolumen der h ergestellten und untersuchten Extrakte.

Probenbezeichnung Untersuchtes Extraktvolumen [mL]

gaiac IWW RUB ISA /

IUTA

UDE Rückstellproben Summe

VO-BS 1 1 3 2 2 13 22

NO-BS 1 1 3 2 2 13 22

NOB-BS 1 1 3 2 2 13 22

Blank-BS 1 1 3 1 1 2 9

Summe/Probenahme 4 4 12 7 7 41 75

Summe (BS/1-E bis BS/9-E)1 31 31 93 58 58 359 630

VO-DU 1 1 3 2 2 13 22

NOIB-DU 1 1 3 2 2 13 22

NOD-DU 1 1 3 2 2 13 22

NOI-DU 1 1 3 2 2 13 22

Blank-DU 1 1 4 1 1 2 10


Summe (DU/1-E bis DU/6-E2) 28 28 90 50 50 298 544

PS-S bzw. PAK-S 1 1 3 2 2 13 22

VO-S 1 1 3 2 2 13 22

NO-S 1 1 3 2 2 13 22

Blank-S 1 1 4 1 1 2 10


Summe (S/1-E bis S/4-E) 16 16 52 28 28 164 304

Gesamtsumme 75 75 235 136 136 821 1478 1Abzüglich der Blindwerte, die in der ersten Projektphase nicht hergestellt wurden. 2Für DU/1 und DU/2 wurden nur 3 von 4 Probenahmen durchgeführt.

Anhang 3


8.1.2 Auswahl der Festphasenmaterialien

Tabelle 8-2: Festphasenmaterialien, die in Kombinat ion mit verschiedenen Oxidationsverfahren verwendet wurden (Tabelle wir a uf der nächsten Seite fortgeführt).

Analyt Oxidationsmethode Toxikologische Tests Literatur

Polymermaterialien

DVB-H2O phobic Speedisk

Steroidhormone,

Verhüttungsmittel und

Makrolid-Antibiotika

Keine Keine (Schlüsener et al., 2005)

Chromabond HR-P

Halogenessigsäuren Chlorung Keine (Loos et al., 2001)

Isolute ENV+


LiChrolut EN


Non-target Ozone Gammarus fossarum (Bundschuh et al., 2011)

TP von

Chlorphenylurease

Ozon/H2O2 Keine (Tahmasseb et al., 2002)

Oasis HLB


TP von Imidacloprid UV/Fe2+/H2O2,

UV/TiO2

Daphnia magna (Malato et al., 2001)

TP von Methadon UV, UV/Fe2+/H2O2,

UV/TiO2

Vibrio fischeri (Postigo et al., 2011)

Non-target UV/H2O2 Comet assay, Ames (Heringa et al., 2011)

Oseltamivir phosphate

ester (Tamiflu)

Photoabbau Keine (Goncalves et al., 2011)

Strata X

Non-target Ozonung Ames, umu, ROS (Happel 2012)

XAD resin

TP aus der

Desinfizierung

Chlorung, Ozonung Tierversuche mit

Ratten

(Richardson et al. ,2008;

Richardson 2012)

Anhang 4


Analyt Oxidationsmethode Toxikologische Tests Literatur

Kohlenstoffmaterialien

EnviCarb

TP von Imidacloprid UV/Fe2+/H2O2, UV/TiO2 Daphnia magna (Malato et al., 2001)

C18 und C18-Empore disk

TP von

Chlorphenylurease

Ozon/H2O2 Keine (Tahmasseb et al.,

2002)

TP von Alachlor UV, UV/FeCl3, UV/TiO2 Keine (Penuela et al., 1996)

TP von Atrazin Ozonung und

Ozon/H2O2

Keine (Adarns et al., 1992)

TP von Carbamazepin,

Diazepam, Diclofenac

und Clofibrinsäure

Ozon, UV/Ozon,

UV/H2O2

Keine (Gebhardt et al., 2007)

TP von Diuron Ozon, Ozon/H2O2 Keine (Ramirez et al., 1999)

TP von Endosulfan UV, UV/FeCl3/H2O2,

UV/TiO2/H2O2

Keine (Penuela et al., 1998)

TP von fluorierte

Tensiden

Ozon, Ozon/UV,

Ozon/H2O2,

Ozon/Fe2+/H2O2

Keine (Schröder et al., 2005)

Anhang 5


8.1.3 SPE-Methode

Chemikalien und Materialien:

• Supra Solv Ethylacetat für Gaschromatographie, Merck

• LiChrosolv Methanol für Flüssigchromatographie, Merck

• Supra Solv Toluol für Gaschromatographie, Merck

• Wasser, HPLC gradient grade, J.T. Baker

• Bakerbond Speedisk® H2O-Phobic DVB Bakerbond Speedisk, 50 mm, J.T. Baker

• SPE-Kartuschen Oasis HLB, 6 mL, 200 mg, Waters

• Syncore® Polyvap-Einheit, Büchi

• Vakuumstation, J. T. Baker

Extraktion - 1. Projektphase:

Die H2O-Phobic DVB Bakerbond Speedisk wurde mit jeweils 20 mL Methanol und Wasser

konditioniert, bevor 1 L der unfiltrierten Wasserprobe mit einer maximalen

Anreicherungsgeschwindigkeit von 200 mL/min extrahiert wurde. Das Probengefäß wurde

mit 20 mL Wasser nachgespült. Anschließend wurden die Analyten mit jeweils 15 mL

Ethylacetat und Methanol vom Phasenmaterial desorbiert.

Extraktion - 2. Projektphase:

Nach Konditionierung der Oasis HLB SPE-Kartusche (6 mL, 200 mg, Waters) mit 2 x 3 mL

Methanol und 2 x 3 mL Wasser, wurde 1 L der unfiltrierten Wasserprobe mit einer

Maximalgeschwindigkeit von 20 mL/min auf dem Phasenmaterial angereichert. Das

Probengefäß wurde mit 5 mL Wasser nachgespült, um die Probe vollständig zu überführen.

Durch 30 minütige Trocknung des Sorbens wurde das residuale Wasser entfernt, bevor die

sorbierten Substanzen mit jeweils 2 x 5 mL Methanol und Ethylacetat eluiert wurden.

Lösungsmittelwechsel:

Im Anschluss an die Elution erfolgte in beiden Projektphasen ein Lösungsmittelwechsel auf

ein Wasser/Methanol-Gemisch von 10:1 (v/v) für die öko- und toxikologischen Tests und auf

Methanol (HPLC-MS/MS) bzw. Toluol (GC-MS) für die analytischen Verfahren. Dazu wurden

die Eluate jeweils auf ein 1 mL (60 °C) aufkonzentr iert und zweimal mit 10 mL Lösungsmittel

versetzt. Das Endvolumen betrug 1 mL. Der nominelle Anreicherungsfaktor aller Extrakte zur

ursprünglichen Probe betrug stets 1:1000. Bis zu ihrer weiteren Verwendung wurden die

Extrakte bei -18 °C unter Argon-Atmosphäre aufbewah rt.

Anhang 6


8.1.4 Leitsubstanzen

Tabelle 8-3: Leitsubstanzen nach Freigabe durch da s LANUV und ihre Transformationsprodukte wurden (Tabelle wir auf der nächsten Seite fortgeführt).

Gruppe Leitsubstanz Transformationsprodukt(e) Literatur

Pharmaka Carbamazepin

(Antiepileptika)

1-(2-Benzaldehyde)-4-hydro-

(1 h,3H)-quinazoline-2-one

(BQM), 1-(2-Benzaldehyde)-

4-hydro-(1 h,3H)-quinazoline-

2-one (BQD), 1-(2-benzoic

acid)-(1 h,3H)-quinazoline-

2,4-dione (BaQD)

McDowell et al.,

2005, Gebhardt und

Schröder, 2007

Diclofenac

(Nichtopioid-

Analgetika)

Diclofenac-2,5-iminoquinone

2,6-Dichloranilin

5-Hydroxy-diclofenac

Sein et al., 2008

Metoprolol

(Betablocker)

Muconaldehyde,

Muconsäuren, Benzochinon

Benner und Ternes,

2009, Sein et al.,

2009

Sulfamethoxazol

(Antibiotika)

7 Abbauprodukte identifiziert,

u. a. Nitroaromaten aus

Oxidation des aromatischen

Amins und Folgeprodukte,

wie 4-Nitrophenol

Abellán et al., 2008

Korrosions-

schutzmittel

1 H-Benzotriazol - -

Diagnostika Amidotrizoesäure

(Röntgenkontrast

mittel)

- -

EDCs Bisphenol A Catechol, ortho-Chinon,

Muconsäuren, Benzochinon,

2-(4-Hydroxyphenyl)-propan-

2-ol

Deborde et al., 2008

PFTs Perfluoroctan-

sulfonsäure

(PFOS)

Keine Transformation durch

Ozon

Takagi et al., 2011

Perfluoroctan-

säure (PFOA)

Keine Transformation durch

Ozon

Takagi et al., 2011

Phosphor-

organische

Verbindungen

TCCP - -

Anhang 7


Gruppe Leitsubstanz Transformationsprodukt(e) Literatur

Bromat - - -

Moschusduft-

stoffe

AHTN - -

- HHCB - -

Komplexbildner EDTA Glyoxylic acid,

Iminodiacetic acid,

Formaldehyd

Munoz und von

Sonntag, 2000

Anhang 8


8.1.5 HPLC-UV-Methode

Die HPLC/UV-Methode zur Trennung von Catechol, t,t-Muconsäure, Benzochinon,

1 H-Benzotriazol, p-Nitrophenol und 2,6-Dichloranilin in wässrigen Lösungen in einem

Konzentrationsbereich von 0,01 bis 1 mg/L.


• Milli Q-Wasser, pH = 2 (Salzsäure)

• Methanol HiPerSolv Chromanorm for HPLC gradient, VWR

• Salzsäure ≥ 37 %, Sigma-Aldrich

• HPLC-Säule, ProntoSIL 120-5-C18, 5,0 µm, 250 x 0,4 mm

HPLC-UV Gerätinformationen:

• Software: LabSolution, Version 1.21 SP1© 2002-2005 Shimadzu Corporation

• Steuereinheit: CBM-20A prominence communication bus module, Shimadzu

• Autosampler: SIL-20A prominence autosampler, Shimadzu

• Pumpe: LC-20AT prominence liquid chromatograph, Shimadzu

• Degasser: DGU-20A5 prominence degasser, Shimadzu

• Säulenofen: CTO-10ASvp column oven, Shimadzu

• Detektor: SPD-20A prominence UV/VIS detector, Shimadzu

HPLC-Methode:

Autosampler:

• Injektionsvolumen: 100 µL

• Injektionsgeschwindigkeit: 15 µL/sec

Pumpe:

• Pumpen-Modus: Niederdruckgradient

• Fluss: 0,500 mL/min

• Lösungsmittel A: Wasser, pH = 2 (Salzsäure)

• Lösungsmittel B: Methanol

Säulenofen:

• Säule: ProntoSIL 120-5-C18, 5,0 µm, 250 x 0,4 mm

• Temperatur: 25 °C

Detektor:

• Lampen-Typ: D2

• Temperatur der Messzelle: 40 °C

• Wellenlänge 1: 228 nm

• Wellenlänge 2: 278 nm

Anhang 9


Tabelle 8-4: Lösungsmittelgradient der HPLC-UV/VIS -Methode.

Zeit [min] Wasser [%] Methanol [%]

0,01 90,0 10,0

10,00 90,0 10,0

35,00 27,5 72,5

45,00 0,0 100,0

55,00 0,0 100,0

57,00 90,0 10,0

65,00 90,0 10,0

Abbildung 8-3: Lösungsmittelgradient der HPLC-UV/V IS-Methode.

Abbildung 8-4: Beispielchromatogramm der HPLC-UV/V IS-Methode.

0,00

20,00

40,00

60,00

80,00

100,00

0,00 10,00 20,00 30,00 40,00 50,00 60,00

Ant

eil i

n%

Zeit in min

Methanol

Wasser

Anhang 10


8.1.6 HPLC-MS-Methode (ISA/IUTA)

LC-(HR)-MS Methode – 1. und 2.Projektphase:

Die Messungen des Vergleichs der Oasis HLB Kartusche und der DVB-H2O phobic Speedisk

wurden analog dem Vorgehen in der 1. Projektphase am ISA durchgeführt.

Die flüssigchromatographischen Trennungen mit nachfolgender massenspektrometrischer

Detektion (LC-MS) wurden auf einer Hypersil/Gold aQ Säule (RPC18, 5 µm, sphärisch;

125 x 2,1 mm i.D.; Thermo Fisher Scientific (Deutschland)), der eine entsprechende

Hypersil/Gold aQ C18-Vorsäule (10 x 2,1 mm i.D., gefüllt mit 5 µm, sphärischem Material)

vorgeschaltet war, durchgeführt. Eine Surveyor MS Plus Pumpe (Thermo Electron, San

Jose, CA, USA) generierte den Gradienten, mittels eines HTC-PAL LC Autosampler Systems

(CTC Analytics, Zwingen, Schweiz) wurden die Proben der analytischen Säule zugeführt. Es

wurde eine Gradientenelution mit Methanol (Eluent A) und Milli-Q-Wasser (Eluent B)

durchgeführt. Beide Laufmittel enthielten 2 mM Ammoniumacetat. Der Gradientenverlauf war

wie folgt: Die Trennung begann mit 20 % A / 80 % B, wobei die Konzentration von Eluent A

innerhalb von 12 min linear auf 90 % A / 10 % B gesteigert wurde. Sodann wurde die

Eluentenzusammensetzung 20 min lang konstant gehalten. Der Gesamtfluss betrug

0,2 mL/min. Für die Detektion sowohl im positiven wie im negativen ESI-MS und -MSn-

Ionisierungsmodus wurde ein LTQ Orbitrap Massenspektrometer (Thermo Electron)

eingesetzt und die bei Gebhardt et al. (2007) für die Aufnahme der MS- und MSn-Daten

beschriebenen Einstellungen der Orbitrap gewählt.

LC-(HR)-MS Methode - 2. Projektphase:

Die Messungen wurden gemeinsam von ISA und IUTA mit dem Systemaufbau beim

CVUA-MEL in Münster durchgeführt. Für die Unterstützung durch Herrn Dr. Bernsmann

(CVUA-MEL) und Herrn Dr. Westrup (Thermo Scientific) recht herzlichen Dank.

LC-(HR)-MS Gerätinformationen:

• Software: Xcalibur, Version 2.2; Aria; Sieve, Version 2.1; Tracefinder Version 3.1; Thermo Scientific

• Autosampler: CTC-PAL, CTC-Analytics AG

• Säulenofen: Hot Dog 5090, Prolab

• HPLC: Transcend: 2x Accela 1250 Pump, Thermo Scientific

• Massenspektrometer: Exactive Plus, Thermo Scientific

LC Parameter:


• Trennsäule: Hypersil Gold aQ 100 mm x 2,1 mm, 3 µm, Thermo Scientific


Anhang 11


• Flussrate: 400 µL/min

• Eluent A: Wasser mit 0,1 % Ameisensäure

• Eluent B: Methanol mit 0,1 % Ameisensäure

• Gradientenprogramm: 5 % - 99 % B in 7 min, 99 % B bis 10 min, 5 % B bis 15 min

MS Parameter:

• Ionisation: Elektrospray positiv und negativ

• Scanbereich: m/z 100-1500 (Full scan modus), Massenauflösung 70000

• Fragmentierung: All Ion Fragmentation (AIF)

• Kollisionsenergie: 35 eV

• Scanbereich: m/z 50-750 (AIF) , Massenauflösung 70000

Methode IUTA Methodenvalidierung und Fraktionierung :

In Phase 2 wurden für die Methodenvalidierung und Fraktionierung HPLC-MS/MS

Messungen mit der nachfolgend beschriebenen Methode durchgeführt. Eine ausführliche

Methodenbeschreibung ist im Abschlussbericht zu TP6 aufgeführt

(www.lanuv.nrw.de/wasser/abwasser/forschung/pdf/Phase2_Abschlussbericht_2014.pdf).

LC-MS Geräteinformationen:


• HPLC Pumpe: 1100, Agilent Technologies

• Massenspektrometer: API 3000, AB Sciex

• Säulenofen: Mistral, Spark Holland

LC-Parameter:


• Trennsäule: Synergi 4u Polar-RP 80A 150 mm x 2 mm, 4 µm,

Phenomenex

• Temperatur: 35°C



• Eluent B: Acetonitril mit 0,1 % Ameisensäure

MS-Parameter:

• Ionisation: Elektrospray positiv und negativ

• Temperatur Ionenquelle: 450 °C

• Ionisierungsspannung: positiv 5000 V, negativ -4500 V

Anhang 12


8.1.7 SPE-Methodenvalidierung

Tabelle 8-5: Konzentration der verwendeten Lösungen bei der Methodenvalidierung; Lösungsmittel: Wasser, Spikevo lumen: 200 µL, Probenvolumen: 1000 mL, Extraktvolumen: 1000 µL (Ta belle wird auf der nächsten Seite fortgeführt).

Name Substanz Konzentration der Lösung

Konzentration in der

Wasserprobe

Konzentration im Extrakt

[mg/L] [µg/L] [mg/L]

Mix TP 4, K0 1 H-Benzotriazol 0,00 0,00 0,00

2,6-Dichloranilin 0,00 0,00 0,00

t,t-Muconsäure 0,00 0,00 0,00

p-Benzochinon 0,00 0,00 0,00

p-Nitrophenol 0,00 0,00 0,00

Catechol 0,00 0,00 0,00






Catechol 0,50 0,10 0,10






Catechol 1,26 0,25 0,25

Anhang 13


Name Substanz Konzentration der Lösung

Konzentration in der

Wasserprobe

Konzentration im Extrakt

[mg/L] [µg/L] [mg/L]






Catechol 2,01 0,40 0,40






Catechol 2,77 0,55 0,55






Catechol 3,52 0,70 0,70






Catechol 4,28 0,86 0,86






Catechol 5,03 1,01 1,01

Anhang 14


Tabelle 8-6: Kalibriergleichungen (y = b • x + a) m it den zugehörigen Korrelationskoeffizient (r) für das SPE/HPLC-UV Ver fahren für die sechs Testsubstanzen in einem Konzentrationsbereich von 0,1-1,0 µg/L in Wasser aus dem Zulauf der Ozonanlag e der Kläranlage Duisburg-Vierlinden am 05.02.2013.

Substanz tR λ b a r S/N = 3:1

S/N = 3:1 HPLC-UV

[min] [nm] [µg/L] [µg/L]

Catechol 26,4 278 2184 608 0,927 3 0,3

t,t-Muconsäure 28,6 228 44737 -61309 0,902 3 0,2

p-Benzochinon 30,7 278 -20599 4325 0,912 5 0,1

1 H-Benzotriazol 34,6 278 535316 200452 0,975 2 0,01

p-Nitrophenol 40,1 278 357865 -53025 0,956 2 0,3

2,6-Dichloranilin 48,3 228 33642 -5463 0,941 1 0,02 tR: Retentionszeit, λ: Wellenlänge, b: Empfindlichkeit, a: Achsenabschnitt, S/N: Signal-zu-Rausch-Verhältnis.

Abbildung 8-5: Exemplarisches Chromatogramm einer gespikten Realwasserproben (orange) und der dazugehörigen Referenz (rot).

0 10 20 30 40 50 60 min

0

25000

50000

75000

100000

125000

150000

175000

200000

225000

250000

275000

300000

325000

4 5 3 1

2

6

LC080139, 278 nm, gespikte Probe LC080133, 278 nm, Referenzlösung

cAnalyt = 0,5 µg/L

1 Catechol 2 t,t-Muconsäure 3 Benzochinon

4 1H-Benzotriazol

5 p-Nitrophenol 6 2,6-Dichloranilin

Anhang 15


Abbildung 8-6: Wiederfindungsraten der im Rahmen de s TP 6 definierten und mittels

HPLC-MS/MS analysierten Leitparameter in Reinstwass er nach SPE-Anreicherung mittels Oasis HLB-Kartusche (grün) und DVB-H2O phobic Speedisk (blau).

0

20

40

60

80

100W

ider

findu

ngsr

ate

[%]

HLB

Speedisk

Anhang 16


8.1.8 Präparatives HPLC-Verfahren – Fraktionierung


• LiChrosolv Methanol für Flüssigchromatographie, Merck

• Wasser, HPLC gradient grade, J.T. Baker

• HPLC-Säule: Synergie 4 µm Polar-RP 80A, 75 x 4.6 mm, Phenomenex

HPLC Gerätinformationen:

• Software: ChemStation for LC systems, Rev. B.04.02 SP1 [212] ©Agilent Technologies (2001-2010)

• Steuereinheit/Fraktionssammler: Agilent 1120 Series, G 1364C Analyt FC, Agilent

• Autosampler: Agilent 1120 Series, G1367C HiP-ALS SL, Agilent

• Pumpe: Agilent 1100 Series, G1312A BinPump, Agilent

• Degasser: Agilent 1100 Series, G1379 A Degasser, Agilent

HPLC-Methode:

Autosampler:


• Injektionsgeschwindigkeit: 600 µL/min

Pumpe:

• Pumpen-Modus: Niedrigdruckgradient

• Fluss: 1 mL/min

• Lösungsmittel A: Wasser

• Lösungsmittel B: Methanol

Säulenofen:

• Säule: Synergie 4 µm Polar-RP 80A, 75 x 4.6 mm, Phenomenex

• Temperatur: Raumtemperatur

Fraktionierung:

• Anzahl der Fraktionen: 10

• Dauer pro Fraktion: 3 min

Anhang 17


Tabelle 8-7: Lösungsmittelgradient des präparative n HPLC-Verfahren für die Fraktionierung.

Zeit [min] Wasser [%] Methanol [%]

0,0 100,0 0,0

2,0 100,0 0,0

15,0 100,0 100,0

22,0 100,0 100,0

25,0 0,0 0,0

30,0 0,0 0,0

Abbildung 8-7: Lösungsmittelgradient der präparativ en HPLC-Methode für die Fraktionierung.

Im Anschluss an die Fraktionierung wurden die einzelnen Fraktionen regulär auf das

ursprüngliche Gesamtinjektionsvolumen aufkonzentriert und ein Lösungsmittelwechsel

analog zur SPE-Methode durchgeführt (Kapitel 8.1.3).

0

20

40

60

80

100

0 5 10 15 20 25 30

Ant

eil i

n%

Zeit in min

Methanol

Wasser

Fraktionsende

Anhang 18


8.1.9 Ergebnisse – Fraktionierung

Abbildung 8-8: Wiederfindung der Testsubstanzen na ch Fraktionierung einer wässrigen Lösung mittels HPLC-UV; c = 0,5 mg/L.

0102030405060708090

100

Fraktion 8-10

Fraktion 7

Fraktion 6

Fraktion 5

Fraktion 4

Fraktion 3

Fraktion 2

Fraktion 1

Anhang 19


8.2 Systemparameter der Ionenchromatographie zur Be stimmung von Bromat

Tabelle 8-8: Systemparameter der Ionenchromatograph ie zur Bromatbestimmung.

Gerätebezeichnung: Metrohm Compact IC 761

Säule: 6.1006.530 Metrosep A SUPP 5 – 250

Vorsäule: 6.1006.500 Metrosep A SUPP 4/5

Guard (on-column)

Eluent: 1,0 mmol/L Natriumhydrogencarbonat

3,2 mmol/L Natriumcarbonat

Suppressor: Metrohm Suppressor Module

(MSM, 50 mmol/L H2SO4)

Fluss des Eluenten: 0,8 mL/min

Fluss der Regenerationslösung

des Suppressors: 0,8 mL/min

Injektionsvolumen 1000 µL

Automatisches Injektionssystem:

Metrohm 813 Compact Autosampler

mit einer Kapazität von 36

Probengefäßen jeweils 15 mL Nutzvolumen

Injektionsprogramm:

1) 3 Minuten zur Einstellung der Grundleitfähigkeit

2) Injektionsnadel herunterfahren

3) Spülen der Probenschleife für 5,5 Minuten

4) Starten der Messung durch Injektion der Probe

Laufzeit der Detektion: 40 min

Messbereich des Detektors: 0-50 µS/cm

Arbeitsdruck: 12-13 MPa

Anhang 20


8.3 Beschreibung der Systemparameter zur Bestimmung von Nitrosaminen

Tabelle 8-9: Verwendete Geräte und Materialien.

Geräte / Materialien Firma

SPE-Kartuschen, Bakerbond Carbon (1 g Aktivkohle) Baker

Absaugstation Baker

GC mit automatischem Probengeber, MS,

temperaturgesteuerter Injektor, Kapillarsäule (J&W DB1701 I.D.

0,25 mm x 30 m; Filmdicke 0,25 µm)

Agilent 6890, 5973

Gerstel, Agilent

Turbo Vap Zymark

Mikroliterspritzen Hamilton

Vollpipetten Brand

Messkolben Brand

Rollrandgläschen und Mikroeinsätze, Bördelkappen

(PTFE-beschichteten Septen)

Verschiedene Hersteller

Stickstoff (5.0) Air Liquide

Tabelle 8-10: Verwendete Chemikalien.

Chemikalien Firma Dichlormethan (zur Rückstandsanalyse) LGC Promochem Aceton (zur Rückstandsanalyse) LGC Promochem

Methanol (zur Rückstandsanalyse) LGC Promochem Natriumsulfat zur Analyse (98 %) Merck Blindwertwasser (durch Aktivkohle vorgereinigtes Trinkwasser) Referenzsubstanzen (> 98 %) Verschiedene Hersteller

Die Abwasserproben wurden stets kühl und lichtgeschützt bei einer Temperatur von 4 bis

8 °C gelagert, innerhalb von vier Tagen aufgearbeit et und gemessen. In jeder Messsequenz

wurde ein Blindwert sowie der Zulauf, Ablauf der Ozonungsanlage und die biologische

Nachbehandlung analysiert. Die zu untersuchenden Substanzen wurden aus einem Liter

Abwasser mittels SPE unter Verwendung von 1 g Aktivkohle angereichert, mit Dichlormethan

eluiert und unter Stickstoffstrom bei 30 °C auf exa kt 1 mL aufkonzentriert. Die folgende

Prozedur wurde bei der Anreicherung ausgeführt:

• Konditionierung der SPE-Kartuschen:

Die Aktivkohle in den Kartuschen wurde jeweils mit 4 x 2 mL Dichlormethan und

anschließend mit 4 x 2 mL Methanol gewaschen. Im Anschluss wurde 8 x 2 mL

Blindwertwasser aufgegeben.

Anhang 21


• Probenaufgabe:

Die Abwasserproben (1000 mL) wurden mittels Unterdruck in etwa 60 Minuten durch

die konditionierten SPE-Kartuschen gesaugt. Anschließend wurde das Sorbens

10 Minuten im Luftstrom getrocknet.

• Elution:

Das Phasenmaterial wurde mit 6 x 2 mL Dichlormethan eluiert. Das Eluat wurde über

7 g Natriumsulfat filtriert, auf ca. 0,8 mL eingeengt und quantitativ in einen

1 mL-Messkolben überführt. Der Messkolben wurde mit Dichlormethan bis zur

Eichmarke aufgefüllt. Nach Durchmischung wurde das Eluat in ein Rollrandgläschen

überführt, mit einer Bördelkappe verschlossen und bis zu der

gaschromatographischen Messung im Kühlschrank (bei ca. 4 bis 8 °C) lichtgeschützt

aufbewahrt.

Die analytische Messung erfolgte an einem GC-MS. Zur Messung wurde ein

temperaturprogrammierter Injektor (Kaltaufgabesystem) verwendet. Die Kapillarsäule (J&W

DB1701) besaß eine Filmdicke von 0,25 µm. Das Injektionsvolumen betrug 1 µL und wurde

bei einer Anfangstemperatur des Kaltaufgabesystems von 50 °C aufgegeben. Die

Aufheizrate war 12 °C/s und wurde bei einer Tempera tur von 280 °C für 4 min gehalten. Die

Injektion erfolgte splitlos in den GC, das Temperaturprogramm war wie folgt ausgewählt:

50 °C wurden für 2 min gehalten und anschließend mi t 10 °C/min auf 280 °C aufgeheizt. Die

Detektion der Substanzen erfolgte im selektiven und sensitiven Selected-Ion-Mode (SIM).

Die ausgewählten Masse-zu-Ladungsverhältnisse für die Quantifizierung und Identifizierung

sind in der Tabelle 8-11 dargestellt.

Tabelle 8-11: Ausgewählte Molekül- und Fragment-Ion en die für die Identifizierung und Quantifizierung (fett gedruckte Massenzahlen) d er Nitrosamine verwendet wurden.

Bezeichnung Quantifizierungs- und

Identifizierungsmassen m/z

N-Nitroso-dimethylamin 74 43 42

N-Nitroso-ethylmethylamin 88 43 42

N-Nitroso-diethylamin 102 44 42

N-Nitroso-di-n-propylamin 70 130 43

N-Nitroso-morpholin 116 86 56

N-Nitroso-pyrrolidin 100 42 41

N-Nitroso-piperidin 114 55 42

N-Nitroso-di-n-butylamin 84 158 116 41

Anhang 22


8.4 MS-Screening

8.4.1 GC-MS-Methode

GC-MS Gerätinformationen:

• Software: Thermo Finnigan Xcalibur®, Version 1.4 SR1; Termo Electron Cooperation

(1998-2003)

• Autosampler: ThermoFinnigan AS 2000, Thermo

• Gaschromatograph: ThermoFinnigan Trace GC Ultra, Thermo

• Quadropolmassenspektrometer: ThermoFinnigan Trace DSQ, Thermo

GC-MS Methode - 1. Phase:

Injektor:


• Temperaturprogramm: 115 °C (0,1 min), 12 °C/min a uf 280 (1,20 °C)

Gaschromatographie:

• Kapillarsäule DB-5MS (15 m x 0,25 mm x 0,25 µm, J&W Scientific)

• Gas / Gasfluss: He (5.0) / 1,3 mL/min

• Temperaturprogramm: 70 °C (4 min), 8 °C/min auf 22 0 °C (0 min),

30 °C/min a uf 280 °C (7 min)

Massenspektrometer:

• Ionisation: Elektronenstoßionisation (70 eV)/MS

• m/z-Bereich: 50-650 (full scan modus)

GC-MS Methode - 2. Phase:

Injektor:


• Temperaturprogramm: 70 °C (0,1 min), 12 °C/min au f 280 (1,20 °C)

Gaschromatographie:

• Kapillarsäule Optima-5-ms (30 m x 0,25 mm x 0,25 µm, Macherey-Nagel)

• Gas / Gasfluss: He (5.0) / 1.0 mL/min

• Temperaturprogramm: 50 °C (5 min), 10 °C/min auf 3 00 °C (5 min),

Massenspektrometer:

• Ionisation: Elektronenstoßionisation (70 eV)/MS

• m/z-Bereich: 50-250, 250-450 und 450-650 (full scan modus)

Anhang 23


8.4.2 GC-MS Screening – Ergebnisse

Tabelle 8-12: Substanzvorschläge nach Abgleich der Daten des GC-MS Screenings mit der NIST-Datenbank mit n > 5 unabhängig von der Probenahmestelle und Kläranlage; n: Häufigkeit des Substanzvorschlages, M: Molare Masse in g/mol (Tabe lle wir auf der nächsten Seite fortgeführt).

n Substanzvorschlag der NIST-Datenbank Summenformel M m/z

49 Tetratetracontane C44H90 618 57, 43, 71

36 Hexadecane C16H34 226 57, 43, 71

29 Heptadecane C17H36 240 57, 43, 71

29 Heptadecane, 9-octyl- C25H52 352 57, 43, 71

23 Tetradecane, 2,6,10-trimethyl- C17H36 240 57, 43, 71

22 Undecane, 4,7-dimethyl C13H28 184 43, 57, 71

17 Propanoic acid, 2-(3-acetoxy-4,4,14-

trimethylandrost-8-en-17-yl)-

C27H42O4 430 355, 43, 41

16 Bis(2-ethylhexyl) phthalate C24 h38O4 390 149, 167, 57

15 Heneicosane, 11-(1-ethylpropyl)- C26H54 366 43, 57, 71

14 Dodecane C12H26 170 57, 43, 71

14 Eicosane C20H42 282 57, 43, 71

14 Tetradecane C14H30 198 57, 43, 71

13 1-Decanol, 2-hexyl- C16H34O 242 57, 55, 43

13 Hexadecane, 2,6,11,15-tetramethyl- C20H42 282 57, 71, 43

12 2,3,7,8,12,13,17,18-Octapropyl-21 h,23H-porphine C36H46N4 534 534, 535, 267

12 Benzene, (2-methyloctyl)- C15H24 204 57, 92, 43

12 Nonane, 4,5-dimethyl- C11 h24 156 43, 57, 71

12 Phenol, 2,4-bis(1,1-dimethylpropyl)- C14H22O 206 177, 206, 178

10 Decane, 2,6,8-trimethyl- C13H28 184 57, 43, 71

9 2-Hexadecanol C16H34O 242 45, 43, 57

9 7,9-Di-tert-butyl-1-oxaspiro(4,5)deca-6,9-diene-2,8-

dione

C17H24O3 276 57, 205, 55

9 Heptasiloxane, 1,1,3,3,5,5,7,7,9,9,11,11,13,13-

tetradecamethyl-

C14H44O6Si7 504 73, 207, 355

9 Octadecane, 5-methyl- C19H40 268 85, 71, 57

9 Pentadecane C15H32 212 57, 43, 71

9 Vitamin k1(20),heptafluorobutyric deriv. C35H47F7O3 648 57, 55, 69

8 Acetic acid, chloro-, octadecyl ester C20H39ClO2 346 57, 83, 55

8 Cyclopentasiloxane, decamethyl- C10H30O5Si5 370 355, 267, 73

8 Dibutyl phthalate C16H22O4 278 149, 150, 29

8 Heptadecane, 8-methyl- C18H38 254 57, 71, 43

Anhang 24


n Substanzvorschlag der NIST-Datenbank Summenformel M m/z

8 Methoxyacetic acid, 3-tetradecyl ester C17H34O3 286 45, 57, 43

8 Methylenebis(2,4,6-triisopropylphenylphosphine) C31 h50P2 484 441, 442, 249

8 Octasiloxane,

1,1,3,3,5,5,7,7,9,9,11,11,13,13,15,15-

hexadecamethyl-

C16H50O7Si8 578 73, 207, 281

8 Squalen C30H50 410 69, 81, 41

7 1-Hexadecanol, 2-methyl- C17H36O 256 57, 43, 55

7 Cyclotetrasiloxane, octamethyl- C8H24O4Si4 296 281, 282, 283

7 N,N'-Bis(Carbobenzyloxy)-lysine methyl(ester) C23H28N2O6 428 91, 43, 44

7 Pentacyclo[19.3.1.1(3,7).1(9,13).1(15,19)]octacosa

-1(25),3,5,7(28),9,11,13(27),15,17,19(26),21,23-

dodecaene-25,26,27,28-tetrol, 5,11,17,23-

tetrakis(1,1-dimethylethyl)

C44H56O4 648 57, 41, 536

7 Undecane, 4-methyl- C12H26 170 43, 71, 57

6 17-(1,5-Dimethylhexyl)-10,13-dimethyl-

2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-

tetradecahydro-1 h-cyclopenta[a]phenanthren-3-ol

C27H44O 384 384, 43, 122

6 2,6-Dimethyldecane C12H26 170 43, 57, 71

6 4-Iodo-N-(3-oxo-3H-benzo[f]chromen-2-yl)-

benzamide

C20H12INO3 441 231, 441, 76

6 5-(p-Aminophenyl)-4-(p-tolyl)-2-thiazolamine C16H15N3S 281 281, 282, 280

6 Carbamazepine C15H12N2O 236 193, 192, 236

6 Cyclohexasiloxane, dodecamethyl- C12H36O6Si6 444 73, 429, 341

6 Dodecane, 5,8-diethyl- C16H34 226 57, 43, 41

6 Eicosane, 10-methyl- C21 h44 295 57, 43, 71

6 Tetradecane, 5-methyl- C15H32 212 43, 57, 85

Anhang 25


8.4.3 HPLC-MS Methoden und Ergebnisse des LC-MS Scr eenings

LC-(HR)-MS Methode - 2. Phase:

Die Messungen wurden gemeinsam von ISA und IUTA mit dem Systemaufbau beim

CVUA-MEL in Münster durchgeführt. Für die Unterstüt zung durch Herrn

Dr. Bernsmann und Herrn Dr. Westrup recht herzliche n Dank.

LC-HRMS Gerätinformationen:

• Software: Xcalibur, Version 2.2; Aria; Sieve, Version 2.1; Tracefinder Version 3.1; Thermo


• Säulenofen: Hot Dog 5090, Prolab

• HPLC: Transcend: 2x Accela 1250 Pump, Thermo

• Massenspektrometer: Exactive Plus, Thermo

LC Parameter:


• Trennsäule: Hypersil Gold aQ 100 mm x 2,1 mm, 3 µm, Thermo




• Eluent B: Methanol mit 0,1 % Ameisensäure

• Gradientenprogramm: 5 % - 99 % B in 7 min, 99 % B bis 10 min, 5 % B bis 15 min

MS Parameter:

• Ionisation: Elektrospray positive und negative

• Scanbereich: m/z 100-1500 (Full scan modus), Massenauflösung 70.000

• Fragmentierung: All Ion Fragmentation (AIF)

• Kollisionsenergie: 35 eV

• Scanbereich: m/z 50-750 (AIF) , Massenauflösung 70.000

Anhang 26


Ergebnisse der Transformationsprodukte auf der Klär anlage Bad Sassendorf

Tabelle 8-13: Zusammenfassung der detektierten Tran sformationsprodukte nach Ozonung in Bad Sassendorf (auf den nächsten Seiten fortgeführt).

Summenformel Mögliche

Ursprungssubstanz

NO

-BS

/7-E

NO

-BS

/8-E

NO

-BS

/9-E

Literatur

C10H10O4 Ibuprofen

X Caviglioli et al., 2002

C10H13N3O5S Sulfamethoxazol X

X Trovo et al., 2009

C10H9O5N3S Sulfamethoxazol X X X Abellan et al., 2008

C11 H10I2N2O5 Amidotrizoesäure X X X Jeong et al., 2010

C13H11Cl2NO Diclofenac X X X Perez-Estrada et al.,

2005

C13H11FN2O3 Ciprofloxacin X X X

An et al., 2010, Cardoza

et al., 2005, De Witte

2010, Hu et al., 2011,

Paul et al., 2007, Paul et

al., 2010, Torniainen et

al., 1997, Turiel et al.,

2005, Zhang et al., 2005

C13H11O4N2F Levofloxacin X X X De Witte 2010, Lam et

al., 2004

C13H16O3N3F Ciprofloxacin

X X De Witte 2010

C13H9Cl2NO Diclofenac

X

Aguera et al., 2005,

Perez-Estrada et al.,

2005


X


Calza et al., 2006,


2005

C13H9Cl2NO2 Diclofenac X X X



2005

C13H9FN2O5 Ciprofloxacin X

Hu et al., 2011


Calza et al., 2006,

Hofmann et al., 2007,

Nietzschmann et al.,

2011, Perez-Estrada et

al., 2005, Sein et al.,

2008, Vogna et al., 2004

Anhang 27


Summenformel Mögliche Ursprungssubstanz

NO

-BS

/7-E

NO

-BS

/8-E

NO

-BS

/9-E

Literatur


Hu et al., 2011, Paul et

al., 2007, Paul et al.,

2010

C14H11NO2 Diclofenac,

Carbamazepin X

X

Doll et al., 2005,

Gebhardt et al., 2007,

McDowell et al., 2005,

Poiger et al., 2001

C14H11NO3 Diclofenac X X X Aguera et al., 2005,

Poiger et al., 2001

C14H11NO4 Diclofenac X X X Aguera et al., 2005,

C14H9Cl2NO Diclofenac X X

Calza et al., 2006,


2011

C14H9Cl2NO2 Diclofenac


2005


Calza et al., 2006,


2005, Sein et al., 2008

C14H9Cl2NO4 Diclofenac X X X Perez-Estrada et al.,

2005

C15H10N2O2 Carbamazepin X X X Chiron et al., 2006

C15H10N2O3 Carbamazepin

X

Chiron et al., 2006,

Kosjek et al., 2011,


Vogna et al., 2004

C15H11FN2O6 Ciprofloxacin

Hu et al., 2011

C15H12N2O2 Carbamazepin X X X Chiron et al., 2006, Doll

et al., 2005

C15H12N2O3 Carbamazepin X X Doll et al., 2005

C15H12N2O4 Carbamazepin Andreozzi et al., 2002

C15H13ClN2O2 Carbamazepin X X X Chiron et al., 2006

C15H14FN3O3 Ciprofloxacin X Turiel et al., 2005

C15H14N2O2 Carbamazepin X X X Vogna et al., 2004

C15H14O3 Bisphenol A Deborde et al., 2008

C15H16O5 Bisphenol A X X X Deborde et al., 2008

C15H17N3O3 Ciprofloxacin X Cardoza et al., 2005,

Turiel et al., 2005

C15H25NO5 Metoprolol X Benner et al., 2009, Türk

et al., 2011

Anhang 28


Summenformel Mögliche Ursprungssubstanz

NO

-BS

/7-E

NO

-BS

/8-E

NO

-BS

/9-E

Literatur


X

Calza et al., 2008, De

Witte 2010, Hu et al.,

2011, Paul et al., 2010,

Zhang et al., 2005

C16H17N3O4 Ciprofloxacin

X

Paul et al., 2010

C16H21NO4 Propranolol X

X Benner et al., 2009

C16H21NO5 Propranolol

X

Benner et al., 2009

C17H16O5N3F Ciprofloxacin X X X


Witte 2010, Hu et al.,

2011, Paul et al., 2007,

Paul et al., 2010, Zhang

et al., 2005

C17H18FN3O5 Ciprofloxacin,

Levofloxacin X


Witte 2010, Lam et al.,

2004, Zhang et al., 2005

C17H19N3O4 Ciprofloxacin X

Cardoza et al., 2005,

Paul et al., 2010, Turiel

et al., 2005

C18H21N3O4 Ofloxacin X Türk et al., 2011

C18H22O4 17a Ethinylestradiol X Vieira et al., 2010

C18H24O2 HHCB, Bisphenol A,

AHTN X X X

Irmak et al., 2005,

Santiago-Morales et al.,

2012, Türk et al., 2011,

Valdersnes et al., 2006

C18H24O3 Bisphenol A X X X Irmak et al., 2005

C18H26O3 AHTN X X X Valdersnes et al., 2006

C33H62N2O13 Roxythromycin X Radjenovic et al., 2009

C41 H76N2O16 Roxythromycin X X X Radjenovic et al., 2009

C5H12N2O Ofloxacin X X Calza et al., 2008, Türk

et al., 2011

C6H15NO2 Metoprolol X X

Peake et al., 2009, Sojic

et al., 2012, Song et al.,

2008, Türk et al., 2011

C8H19O4P TnBP X X X Watts et al., 2008

C9H17N5O Terbutryn X X X Brix et al., 2009

Anhang 29


Ergebnisse von detektierten Transformationsprodukte n in Duisburg-Vierlinden

Tabelle 8-14: Zusammenfassung der detektierten Tran sformationsprodukte nach Ozonung in Duisburg-Vierli nden (auf den nächsten Seiten fortgeführt).


Ursprungssubstanz

NO

IB-D

U/2

-E

NO

D-D

U/2

-E

NO

D-D

U/3

-E

NO

I-D

U/3

-E

NO

D-D

U/4

-E

NO

I-D

U/4

-E

NO

D-D

U/5

-E

NO

I-D

U/5

-E

NO

D-D

U/6

-E

NO

I-D

U/6

-E

Literatur

C10H10O3 Ibuprofen X

Caviglioli et al., 2002,

Mendez-Arriaga 2010

C10H10O4 Ibuprofen X X

X

X X

Caviglioli et al., 2002

C10H12O2 Ibuprofen X

X

X

Mendez-Arriaga 2010

C10H13N3O5S Sulfamethoxazol X X

X

X Trovo et al., 2009

C10H14O Ibuprofen

X

Caviglioli et al., 2002

C10H8I2N2O4 Amidoztrizoesäure X

X

Jeong et al., 2010

C10H9O2N3 Sulfamethoxazol X

Abellan et al., 2008

C10H9O5N3S Sulfamethoxazol

X X X X X X X X X Abellan et al., 2008

C11 H10I2N2O5 Amidoztrizoesäure X X X

X

X

X Jeong et al., 2010

C12H16O Ibuprofen

X

X


Mendez-Arriaga 2010

C12H19NO3 Metoprolol

X

Benner et al., 2009, Peake

et al., 2009, Song et al.,

2008

C13H10ClNO Diclofenac X Aguera et al., 2005,

Anhang 30



Ursprungssubstanz

NO

IB-D

U/2

-E

NO

D-D

U/2

-E

NO

D-D

U/3

-E

NO

I-D

U/3

-E

NO

D-D

U/4

-E

NO

I-D

U/4

-E

NO

D-D

U/5

-E

NO

I-D

U/5

-E

NO

D-D

U/6

-E

NO

I-D

U/6

-E

Literatur

C13H11Cl2N Diclofenac X

Aguera et al., 2005, Calza

et al., 2006, Nietzschmann

et al., 2011, Perez-Estrada

et al., 2005

C13H11Cl2NO Diclofenac X X X X X X X X X X Perez-Estrada et al., 2005

C13H11FN2O3 Ciprofloxacin X X X X X X X X X X

An et al., 2010, Cardoza et

al., 2005, De Witte 2010,

Hu et al., 2011, Paul et al.,

2007, Paul et al., 2010,

Torniainen et al., 1997,

Turiel et al., 2005, Zhang et

al., 2005

C13H11O4N2F Levofloxacin X X X X X X X X X X De Witte 2010, Lam et al.,

2004

C13H12O6NF Levofloxacin

X

X

De Witte 2010


X X X X

De Witte 2010

C13H21NO3 Metoprolol X Sojic et al., 2012, Türk et

al., 2011

C13H8ClNO Diclofenac X X Aguera et al., 2005,

C13H9Cl2NO Diclofenac X X X X X Aguera et al., 2005, Perez-

Estrada et al., 2005

C13H9Cl2NO2 Diclofenac X X X X X X X Aguera et al., 2005, Perez-

Estrada et al., 2005

Anhang 31



Ursprungssubstanz

NO

IB-D

U/2

-E

NO

D-D

U/2

-E

NO

D-D

U/3

-E

NO

I-D

U/3

-E

NO

D-D

U/4

-E

NO

I-D

U/4

-E

NO

D-D

U/5

-E

NO

I-D

U/5

-E

NO

D-D

U/6

-E

NO

I-D

U/6

-E

Literatur

C13H9FN2O5 Ciprofloxacin X X X X X X X X Hu et al., 2011

C13H9N Carbamazepin X X X X

Chiron et al., 2006,

Gebhardt et al., 2007,

Kosjek et al., 2011,


Vogna et al., 2004

C13H9NO Carbamazepin X X

X

X X X

Chiron et al., 2006

C13H9NO Carbamazepin

X

Vogna et al., 2003

C14H11Cl2NO3 Diclofenac X X X X X X X X X X

Calza et al., 2006,


Nietzschmann et al., 2011,

Perez-Estrada et al., 2005,

Sein et al., 2008, Vogna et

al., 2004

C14H11FN2O4 Ciprofloxacin X X X X X X X X X Hu et al., 2011, Paul et al.,

2007, Paul et al., 2010

C14H11NO2 Diclofenac,

Carbamazepin X X X X X

Doll et al., 2005, Gebhardt

et al., 2007, McDowell et

al., 2005, Poiger et al.,

2001

C14H11NO3 Diclofenac X X X X X X X Aguera et al., 2005, Poiger

et al., 2001

C14H11NO4 Diclofenac X X X X X X X Aguera et al., 2005,

Anhang 32



Ursprungssubstanz

NO

IB-D

U/2

-E

NO

D-D

U/2

-E

NO

D-D

U/3

-E

NO

I-D

U/3

-E

NO

D-D

U/4

-E

NO

I-D

U/4

-E

NO

D-D

U/5

-E

NO

I-D

U/5

-E

NO

D-D

U/6

-E

NO

I-D

U/6

-E

Literatur

C14H12 Bisphenol A X Lee et al., 2004

C14H14I3N3O6 Iopromid

X

Perez 2006, Schulz et al.,

2008, Steeger-Hartmann

2002


X

X

De Witte 2010

C14H16O4N3F Ciprofloxacin X

X

De Witte 2010

C14H18O3 17a Ethinylestradiol

X

Huber et al., 2004


X X X X X X Calza et al., 2006,

Nietzschmann et al., 2011


X

X Perez-Estrada et al., 2005

C14H9Cl2NO3 Diclofenac X X X X X X

X X X

Calza et al., 2006, Perez-

Estrada et al., 2005, Sein

et al., 2008


X Perez-Estrada et al., 2005

C15H10N2O2 Carbamazepin X X X X X X X X X X Chiron et al., 2006

C15H10N2O3 Carbamazepin X X X X X X X

Chiron et al., 2006, Kosjek

et al., 2011, McDowell et

al., 2005, Vogna et al.,

2004

C15H11FN2O6 Ciprofloxacin X Hu et al., 2011

C15H12N2O2 Carbamazepin X X X X X X X X Chiron et al., 2006, Doll et

al., 2005

C15H12N2O3 Carbamazepin X X X X X X X X X X Doll et al., 2005

Anhang 33



Ursprungssubstanz

NO

IB-D

U/2

-E

NO

D-D

U/2

-E

NO

D-D

U/3

-E

NO

I-D

U/3

-E

NO

D-D

U/4

-E

NO

I-D

U/4

-E

NO

D-D

U/5

-E

NO

I-D

U/5

-E

NO

D-D

U/6

-E

NO

I-D

U/6

-E

Literatur


X X

X

Andreozzi et al., 2002

C15H13ClN2O2 Carbamazepin

X X X X

Chiron et al., 2006

C15H14N2O2 Carbamazepin X X X X X X X X X X Vogna et al., 2004


X

An et al., 2010, Calza et

al., 2008, De Witte 2010,

Hu et al., 2011, Paul et al.,

2007, Paul et al., 2010,

Torniainen et al., 1997,

Turiel et al., 2005, Zhang et

al., 2005

C15H16O5 Bisphenol A X X X X X X X X X X Deborde et al., 2008

C15H20O4N3F Levofloxacin

X

De Witte 2010


X

Benner et al., 2009, Türk et

al., 2011


Calza et al., 2008, De Witte

2010, Hu et al., 2011, Paul

et al., 2010, Zhang et al.,

2005

C16H16O5N3F Ciprofloxacin X De Witte 2010

C16H17O5N2F Ciprofloxacin X De Witte 2010

C16H18O4N3F Ciprofloxacin,

Levofloxacin X De Witte 2010

Anhang 34



Ursprungssubstanz

NO

IB-D

U/2

-E

NO

D-D

U/2

-E

NO

D-D

U/3

-E

NO

I-D

U/3

-E

NO

D-D

U/4

-E

NO

I-D

U/4

-E

NO

D-D

U/5

-E

NO

I-D

U/5

-E

NO

D-D

U/6

-E

NO

I-D

U/6

-E

Literatur

C16H21NO4 Propranolol X X X X X X X X X X Benner et al., 2009

C17H16O4N3F Ciprofloxacin X X

X

X De Witte 2010, Hu et al.,

2011

C17H16O5N3F Ciprofloxacin X X X X X X X X X X


2010, Hu et al., 2011, Paul

et al., 2007, Paul et al.,

2010, Zhang et al., 2005

C17H18FN3O5 Ciprofloxacin,

Levofloxacin X

X


2010, Lam et al., 2004,

Zhang et al., 2005


X X X

Hu et al., 2011

C17H20I3N3O8 Iomeprol

X

Jeong et al., 2010

C17H23I2N3O9 Iomeprol X

Jeong et al., 2010

C17H24O2 AHTN X X X X X X X X X Valdersnes et al., 2006

C18H18FN3O4 Ciprofloxacin X De Witte 2010

C18H22O3 Bisphenol A X X X X X X Irmak et al., 2005

C18H24O2 HHCB, Bisphenol A,

AHTN X X X X X X X X X X

Irmak et al., 2005,

Santiago-Morales et al.,

2012, Türk et al., 2011,

Valdersnes et al., 2006

C18H24O3 Bisphenol A X X X X Irmak et al., 2005

C18H26O3 AHTN X X X X X X X Valdersnes et al., 2006

C19H18O5 Bisphenol A X Deborde et al., 2008

Anhang 35



Ursprungssubstanz

NO

IB-D

U/2

-

E

NO

D-D

U/2

-

E

NO

D-D

U/3

-

E

NO

I-D

U/3

-E

NO

D-D

U/4

-

E

NO

I-D

U/4

-E

NO

D-D

U/5

-

E

NO

I-D

U/5

-E

NO

D-D

U/6

-

E

NO

I-D

U/6

-E

Literatur


X

X X X X

Huber et al., 2004, Vieira et

al., 2010


X

Vieira et al., 2010

C33H62N2O13 Roxythromycin X X X X X X X

X X Radjenovic et al., 2009

C40H74N2O16 Roxythromycin

X X X

X Radjenovic et al., 2009

C41 H76N2O16 Roxythromycin X X X X X X X X X Radjenovic et al., 2009

C4H4O4 Diclofenac, Bisphenol A X Gözmen et al., 2003,

Hofmann et al., 2007

C5H12N2O Ofloxacin X X Calza et al., 2008, Türk et

al., 2011

C6H15NO2 Metoprolol X X X X X X X

Peake et al., 2009, Sojic et

al., 2012, Song et al., 2008,

Türk et al., 2011

C6H5Cl2NO Diclofenac X Nietzschmann et al., 2011,

Perez-Estrada et al., 2005

C6H8N2O2S Sulfamethoxazol X Trovo et al., 2009, Yargeau

et al., 2008

C7H5N3O 5-MBT, 4-MBT X Müller et al., 2012

C7H7N3O2 4-MBT, 5-MBT X Müller et al., 2012

C7H7NO2 Carbamazepin X X X Andreozzia et al., 2002,

Vogna et al., 2004

C8H19O4P TnBP X X X X X X X X X X Watts et al., 2008

C8H6O2 Diclofenac X X X X X Nietzschmann et al., 2011

Anhang 36



Ursprungssubstanz

NO

IB-D

U/2

-E

NO

D-D

U/2

-E

NO

D-D

U/3

-E

NO

I-D

U/3

-E

NO

D-D

U/4

-E

NO

I-D

U/4

-E

NO

D-D

U/5

-E

NO

I-D

U/5

-E

NO

D-D

U/6

-E

NO

I-D

U/6

-E

Literatur

C8H8O2 Bisphenol A

X

Inoue et al., 2008, Ohko et

al., 2001

C9H17N5O Terbutryn X X X X X X X X X X Brix et al., 2009

Anhang 37


Ergebnisse von detektierten Transformationsprodukte n in Schwerte.

Tabelle 8-15: Zusammenfassung der detektierten Tran sformationsprodukte nach Ozonung in Schwerte (auf den nächsten Seiten fortge führt).


Ursprungssubstanz

NO

-S/1

-E

NO

-S/2

-E

NO

-S/3

-E

NO

-S/4

-E

Literatur

C10H10O4 Ibuprofen

X X X Caviglioli et al., 2002

C10H9O5N3S Sulfamethoxazol

X

Abellan et al., 2008

C11 H12O4 Bisphenol A X

Ohko et al.,2001

C12H19NO3 Metoprolol X

Benner et al., 2009,

Peake et al., 2009,

Song et al., 2008


X

Benner et al., 2009,

Sojic et al., 2012, Türk

et al., 2011

C13H11Cl2N Diclofenac

X

X


Calza et al., 2006,


2011, Perez-Estrada

et al., 2005


X X

An et al., 2010,


De Witte, 2010, Hu et

al., 2011, Paul et al.,

2007, Paul et al.,

2010, Torniainen et

al., 1997, Turiel et al.,

2005, Zhang et al.,

2005

C13H11O4N2F Levofloxacin X X X

De Witte, 2010, Lam

et al., 2004

C13H12O6NF Levofloxacin X

De Witte, 2010

C13H16O3 Ibuprofen

X


Mendez-Arriaga, 2010

Anhang 38



Ursprungssubstanz

NO

-S/1

-E

NO

-S/2

-E

NO

-S/3

-E

NO

-S/4

-E

Literatur


Hu et al., 2011

C14H11Cl2NO3 Diclofenac X X X X

Calza et al., 2006,



2011, Perez-Estrada

et al., 2005, Sein et

al., 2008, Vogna et al.,

2004


Hu et al., 2011, Paul

et al., 2007, Paul et

al., 2010

C14H11NO3 Diclofenac

X X


Poiger et al., 2001

C14H11NO4 Diclofenac X X X


C14H16O3N3F Levofloxacin

X De Witte, 2010


De Witte, 2010


X X Huber et al., 2004

C14H19NO2 Carbamazepin X X

X Chiron et al., 2006,

Doll et al., 2005


X X

Calza et al., 2006,


2005, Sein et al., 2008

C15H10N2O2 Carbamazepin X X X X Chiron et al., 2006


X

X Chiron et al., 2006,

Doll et al., 2005


X

Doll et al., 2005

C15H14N2O2 Carbamazepin X X X X Vogna et al., 2004

Anhang 39



Ursprungssubstanz

NO

-S/1

-E

NO

-S/2

-E

NO

-S/3

-E

NO

-S/4

-E

Literatur

C15H14O3 Bisphenol A X

X

Deborde et al., 2008

C15H16O5 Bisphenol A X

X

Deborde et al. 2008

C15H17N3O3 Ciprofloxacin X

X


Turiel et al., 2005

C15H25NO5 Metoprolol X X X X Benner et al., 2009,

Türk et al., 2011


X


Witte, 2010, Hu et al.,

2011, Paul et al.,

2010, Zhang et al.,

2005

C16H21NO4 Propranolol X X X

Benner et al., 2009

C17H16O5N3F Ciprofloxacin X X X X


Witte, 2010, Hu et al.,

2011, Paul et al.,

2007, Paul et al.,

2010, Zhang et al.,

2005


De Witte, 2010

C18H21N3O4 Ofloxacin

X X Türk et al., 2011


X X X Vieira et al., 2010

C18H24O2 HHCB, Bisphenol

A, AHTN X X X

Irmak et al., 2005,

Santiago-Morales et

al., 2012, Türk et al.,

2011, Valdersnes et

al., 2006

C18H26O3 AHTN X X

Valdersnes et al.,

2006

C33H62N2O13 Roxythromycin X X

Radjenovic et al.,

2009

Anhang 40



Ursprungssubstanz

NO

-S/1

-E

NO

-S/2

-E

NO

-S/3

-E

NO

-S/4

-E

Literatur

C40H74N2O16 Roxythromycin X X Radjenovic et al.,

2009

C41 H76N2O16 Roxythromycin

X

Radjenovic et al.,

2009

C5H12N2O Ofloxacin X

Calza et al., 2008,

Türk et al., 2011

C6H15NO2 Metoprolol X

Peake et al., 2009,

Sojic et al., 2012,

Song et al., 2008, Türk

et al., 2011

C8H19O4P TnBP X X X X Watts et al., 2008

C9H17N5O Terbutryn X X X X Brix et al., 2009

Anhang 41


8.4.4 Ergebnisse der Untersuchten Filtrate.

Die Nährstoffbestimmung wurde nach DIN ISO 15923-1 (2011) durchgeführt. Die

Messungen der Metalle erfolgte nach EN ISO 17294-2 (2004).

Tabelle 8-16: Messergebnisse der Untersuchungen der Filtrate DU-F/5 nach SPE (Tabelle wird auf der nächsten Seite fortgeführt).

Parameter Einheit VO-DU-

F/5

NOIB-

DU-F/5

NOD-

DU-F/5

NOI-

DU-F/5

Blank-

DU-F/5

Effektdaten

Grünalge*

Al [µg/L] 22 13 12 8,2 6,6

As [µg/L] 0,39 2,1 6,4 0,84 < 0,10 EC50: 690-30761; NOEC: 10000

B [µg/L] 160 140 140 140 24

Ba [µg/L] 12 4,4 4 3,5 < 2,0

Ca [mg/L] 530 540 460 490 0,78

Cr [µg/L] 0,99 1,3 1,5 0,78 1,1 EC50: 590

Cu [µg/L] 8,1 5,3 7,8 8 0,97 EC50: 14-710 NOEC: 41-56

Fe [mg/L] < 0,10 < 0,10 < 0,10 < 0,10 < 0,10

K [mg/L] 200 200 170 190 < 0,10

Li [µg/L] 7 7,2 7,3 7 < 2,0

Mg [mg/L] 54 55 46 50 < 0,10

Mn [µg/L] 13 43 20 41 0,56

Na [mg/L] 170 140 150 130 0,79

Ni [µg/L] 2,6 3,3 3 2,6 1 EC50: 350-5000

P [mg/L] 1,2 0,89 0,91 1,3 < 0,10

Pb [µg/L] 0,94 0,29 0,53 0,19 < 0,10 EC50: 285 (gesamt) EC50: 4-16 (freie Ionen) NOEC: 60

S [mg/L] 260 250 280 260 < 0,10

Sb [µg/L] 0,29 0,33 0,33 0,25 < 0,10

Se [µg/L] 5,1 2,3 0,93 0,96 0,51

Si [mg/L] 15 17 20 13 4,5

Sn [µg/L] 0,3 0,38 0,26 0,21 < 0,10

Anhang 42


Parameter Einheit VO-DU-

F/5

NOIB-

DU-F/5

NOD-

DU-F/5

NOI-

DU-F/5

Blank-

DU-F/5

Effektdaten

Grünalge*

Sr [mg/L] 0,69 0,69 0,69 0,67 < 0,10

V [µg/L] 0,91 0,79 0,88 0,88 < 0,10

Zn [µg/L] 26 25 19 23 4 EC50: 767-1800

Cl [mg/L] 160 160 150 160 < 0,25

NH4-N [mg/L] 3,3 0,31 5,5 0,85 < 0,04

NO2-N [mg/L] < 0,01 < 0,01 0,023 < 0,01 < 0,01

NO3-N [mg/L] < 0,10 < 0,10 6,3 < 0,10 < 0,10

SO4 [mg/L] 85 88 85 86 < 5,0

PO4-P [mg/L] 0,46 < 0,20 0,78 < 0,20 < 0,20

Leitfähig-

keit (25 °C)

[µS/cm] 952 908 959 898 15

pH 7,6 6,7 7,6 7,2 6,9

NTA [µg/L] < 1,0 < 1,0 < 1,0 < 1,0 < 1,0 EC50: >180.000 LOEC: 5.000(UBA)

EDTA [µg/L] 8,3 6,9 7,6 7,9 < 1 EC50: 3.000-60.000

DTPA [µg/L] < 1,0 < 1,0 < 1,0 < 1,0 < 1,0

Be,Sc,Ti,V,Co,Ga,Ge,Rb,Y,Zr,Nb,Mo,Ru,Rh,Pd,Ag,Cd,In,Te,Cs,La,Ce,Pr,Nd,Sm,Eu,Gd,Tb,Dy,Ho,Er,Tm,Yb,Lu,Hf,Ta,W,Re,Os,Ir,Pt, Au,Hg,Tl,Bi,Th,U < 5,0 µg/L *: Effektdaten laut ECOTOX-Datenbank der US-EPA (siehe http://cfpub.epa.gov/ecotox/; Stand: 10.03.2014) bzw. für EDTA siehe EDTA-Report (www.epa.gov/opprd001/inerts/edta.pdf) und für NTA siehe Handbook for Cleaning/Decontamination of Surfaces p.736 (google eBook) bzw. ETOX-Datenbank (siehe http://webetox.uba.de).

Anhang 43


8.5 Biologische Testsysteme (Experimentelles)

8.5.1 Zytotoxizität und Östrogenität

Material Zytotoxizität und Östrogenität

Tabelle 8-17: Verwendete Materialien.

Zellart Medienbestandteile für die

Zellkultur

Assay Medium

CHO-9 Zellen

(Zytotoxizität)

HAM’s F12 Zellkulturmedium

(Nutrient Mixture F-12)

+ 10 % Fetales Kälberserum (FCS)

+ 0,5 % Gentamycin

+ 0,5 % L-Glutamin

T47D-Zellen

(Östrogenität)

DMEM F12-Zellkulturmedium

(Dulbecco's Modified Eagle's

Medium)

+ Phenolrot

+ 7,5 % Fetales Kälberserum

(FCS)

+ 3 mL Gentamycin

+ 5 mL Non-essential amino acids

Assay Medium:

- DMEM ohne Phenolrot

- 25 mL stripped FCS

- 5 mL non-essential amino acids

I: Assay Medium und steriles

Wasser im Verhältnis 1:10

mischen

II: Assay Medium und DMSO im

Verhältnis 1:100 mischen

MTT: 5 mg MTT in 1 mL PBS

Lyselösung: 99,4 mL DMSO,

0,6 mL Essigsäure (100 %) und

10 g SDS

Arxula

adeninivorans(Östrogenität)

Hefeminimalmedium Hefeminimalmedium

Chemikalien:

• PBS: Phosphate buffered saline

• Trypsin + EDTA (0,05 %)

• DMSO: Dimethylsulfoxid

• Triton X

Material:

• Minisart Filter (0,2 µm)

Tests:

• Zytotoxizität:

Anhang 44


• PAN I: LDHe-XTT-NR-SRB Kit (Xenometrix, Ch)

• 96-Well-Platten, transparent

• Östrogenität:

• ER Calux® Kit (BioDetection Systems, NL)

• A-YES Assay Kit (new_diagnostics, Freising, Deutschland)

• 96-Well-Platten, transparent (Nur Nalge Nunc international, 167008)

• 96-Well-Platten, weiß (Greiner Bio One; Art.-Nr.: 655075)

• 96-Well-Platten, transparent

Geräte:

• Tecan GENios Microplate Reader

• Inkubator 37 °C und 5 % CO 2

Durchführung der Versuche Zytotoxizität und Östroge nität

Die Abwasserproben sowie die Extrakte wurden vor Versuchsbeginn gefiltert (0,2 µm

Zellulosenitratfilter, Sartorius), um mögliche bakterielle Kontaminationen auszuschließen.

(1) MultiTox-Test (LDHe/XTT/NR/SRB)

Der Test wird von der Firma Xenometrix (CH) bezogen und entsprechend der Vorschriften

durchgeführt.

Der MultiTox-Test muss an drei aufeinander folgenden Tagen durchgeführt werden.

Tag 1: Aussäen der Zellen in 96-Well-Platten mit jeweils 20.000 CHO-9 Zellen/200 µL

Medium je Well.

Tag 2: Exposition der CHO-9 Zellen gegen Abwasserproben für 24 h im Verhältnis 1:10 mit

Medium

Tag 3: Absorptionsmessungen

LDHe (extrazelluläre Lactatdehydrogenase): 50 µL Überstand abnehmen, in eine neue

96-Well-Platte überführen und LDHe Lösungen zugeben, Absorptionsmessung bei 340 nm,

kinetisch alle 5 min über einen Zeitraum von 25 min

XTT (2,3-Bis-(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilid - Natriumsalz):

Zugabe der XTT-Lösungen zur Originalplatte, Absorptionsmessung bei 480 nm

NR (Neutral Rot): Zugabe der NR Lösungen zur Originalplatte, Absorptionsmessung bei

540 nm

SRB (Sulforhodamin B): Zugabe der SRB Lösungen, Absorptionsmessung bei 540 nm

(2) MTT-Test

Auch der MTT-Test muss an drei aufeinander folgenden Tagen durchgeführt werden.

Anhang 45


Tag 1: Aussäen der Zellen mit je 10.000 T47D-Zellen/200 µL Medium je Well einer 96-Well

Platte

Tag 2: Exposition der Zellen gegenüber den Proben im Verhältnis 1:10 mit Medium für 24 h

Tag 3: Zugabe des Farbstoffes und Messung der Absorption bei 340 nm

(3) ER Calux-Test

Für die Durchführung des ER Calux-Test müssen vier aufeinander folgende Tage

veranschlagt werden:

Tag 1: Aussäen der Zellen in eine 96-Well-Platte mit jeweils 10.000 T47D-Zellen/100 µL

Assay Medium je Well

Tag 2: Mediumwechsel

Tag 3: Exposition der Zellen gegen eine Standardreihe 17ß-Ethinylestradiol und die

Wasserproben für 24 h. Dazu werden je Standard 1 µL der entsprechenden

17ß-Ethinylestradiol Konzentration (0,3 bis 30 pM/well) mit 1 mL Assay-Medium-I gemischt.

Das gleiche wird mit DMSO und dem Referenzwasser durchgeführt. Danach wird das alte

Medium abgenommen. In die Wells für die Standardreihe, das DMSO und die Referenzprobe

werden je 100 µL der zuvor mit Assay-Medium-I angesetzten Lösungen gegeben. Die Wells

für die Proben werden mit 90 µL Assay-Medium-II und 10 µL Probe befüllt.

Tag 4: Lumineszensmessung. Dazu wird das Expositionsmedium entfernt und 50 µL

Lyselösung zugegeben und die Platte für 15 min bei Raumtemperatur inkubiert. Direkt nach

dieser Inkubationszeit werden 30 µL des Überstandes in eine weiße 96-Well-Platte überführt

und 30 µL Glowmix zugegeben. Sofort danach wird die Lumineszenz mit Hilfe des Microplate

Readers gemessen. Die Auswertung der gemessenen Daten erfolgt dann mittels einer von

BioDetection-Systems bereitgestellten Microsoft ExcelTM Datei.

Die Versuche wurden jeweils im dreifachen Ansatz getestet. Dabei wurden die Proben bei

jeder Durchführung in drei Wells getestet, aus denen dann der Mittelwert sowie die

Standardabweichung berechnet wurden.

(4) A-YES Assay

Alle Proben für den A-YES Assay wurden sowohl unbehandelt als auch als Extrakte nach

SPE untersucht. Die SPE erfolgte unabhängig von der für die anderen Testsysteme. Die

Extraktion erfolgte mit einer StrataXL Festphase (500 mg/6 mL, Phenomenex,

Aschaffenburg, Deutschland) und einem Probenvolumen von 300 mL. Die Kartusche wurde

mit 10 mL Methanol und 10 mL Wasser konditioniert und die Probe aufgegeben. Die Elution

erfolgte mit 25 mL tert-Methylbuthyether. Das Lösemittel wurde bis zur Trockene abgedampft

und die Probe in 4 mL HPLC Wasser aufgenommen. Dies führte zu einem

Anreicherungsfaktor von 75.

Anhang 46


Der Assay wurde mit dem Kit der Firma new diagnostics (Freising, Deutschland)

durchgeführt. Tabelle 8-18 und Tabelle 8-19 beschreiben den Inhalt des Kits sowie die

zusätzlich verwendeten Geräte.

Tabelle 8-18: Inhalt des A-YES Assay Kits.

Inhalt Menge

Lyophilisierte Hefe 1 Vial

Ethanolische 17β-Estradiol-Stammlösung 1 x 2 mL

Steriler Medium Mix 1 x 25 mL

Substratpuffer 1 x 20 mL

Substrattablette 1 x 20 mg

Deep well plate (96 well) 2 x

Mikrotiter-Platten, 96-Well + Deckel 2 x

Luftdurchlässige Klebefolien 2 x

Gebrauchsanweisung 1 x

Tabelle 8-19: Sonstige für den A-YES Assay verwende te Geräte.

Geräte/Software Hersteller/Vertrieb Firmensitz

Inkubator-Heraeus-Hera cell Kendro Laboratory Products Hanau, Deutschland

Peltier-Kühlbrutschrank-IPP400 Memmert GmbH & Co. KG Schwabach, Deutschland

Plattenphotometer SPECORD 200 Analytik Jena Jena, Deutschland

Schüttler-Vibramax 100 Heidolph Instruments Schwabach, Deutschland

Zentrifuge-CS-15R Beckmann Coulter Krefeld, Deutschland

Zunächst wurden die Hefezellen zusammen mit der Probe und Medium in 96er

Deepwellplatten für 24 h bei 30°C und 750 rpm in ei nem Gesamtvolumen von 500 µL

inkubiert. Anschließend wurden die Zellen abzentrifugiert und 50 µL des Überstandes in eine

96er Mikrotiterplatten überführt. Hier wurden 50 µL des Substrates p-Nitrophenylphosphat

hinzugegeben und eine weitere Stunden bei 37°C inku biert. Die sezernierte Phytase setzte

in diesem weiteren Inkubationsschritt das Substrat zu p-Nitrophenolat um, welches

anschließend mit 100 µL Natronlauge eine gelbe Färbung verursachte. Diese Färbung wurde

anschließend mit dem Plattenphotometer bei einer Wellenlänge von 405 nm bestimmt. Dabei

wurden mit jedem Analysenkit zwei Kalibrationsreihen zusammen mit bis zu 40 Proben in

Doppelbestimmung untersucht.

Des Weiteren wurde das Wachstum der Hefezellen in den matrixbelasteten Realproben mit

dem Wachstum in der Reinstwasserkalibration verglichen um mögliche toxische Effekte der

Matrix zu bestimmen. Dazu wurden die zentrifugierten Hefezellen nach der Entnahme der

50 µL Überstand auf dem Schüttler resuspendiert und anschließend in einer

1:10 Verdünnung mit dem Plattenphotometer bei 620 nm die optische Dichte bestimmt.

Anhang 47


Anschließend wurde die optische Dichte der Probe mit der der Kalibrationskurve verglichen

um mögliche Effekte von Matrix auf das Zellenwachstum zu erkennen. Die Auswertung der

Messwerte erfolgte mit der zugehörigen Software BioVal (new_diagnostics GmbH,

Freising/D).

Anhang 48


8.5.2 Ames-Test und Comet Assay

Probenlagerung und Transport

Die Abwasserproben und die Extrakte wurden gekühlt (auf Eis) transportiert und die

Abwasserproben nach Ankunft steril filtriert (0,45 µm Zellulosenitratfilter, Sartorius). Die

filtrierten Proben wurden bis zur Verwendung in den Testsystemen bei -80 °C gelagert. Die

gewonnenen Extrakte wurden bis zur Verwendung bei -20 °C gelagert. Vor Versuchsbeginn

wurden die Extrakte um den Faktor 10 mit Aqua bidest. (doppelt destilliertes Wasser)

verdünnt. Es folgte eine finale Filtration (0,2 µm Zelluloseacetatfilter, Whatman) der

Rohwasserproben und der verdünnten Extrakte.

Material und Chemikalien

In Tabelle 8-20 sind die verwendeten Geräte und Materialien, in Tabelle 8-21 die

verwendeten Lösungen aufgeführt.

Tabelle 8-20: Verwendete Geräte und Materialien fü r den Ames-Test und Comet Assay.

Material/Gerät Firma

Salmonella typhimurium, TA98 und TA100, Top Agar

Biotin/Histidin, Minimal Glucose Agar Platten (30 ml) Trinova

Humane Hepatozyten

HepG2

Deutsche Sammlung von

Mikroorganismen und Zellkulturen

GmbH (DSMZ), Braunschweig

RPMI 1640, Kälberserum, Trypsin-EDTA PAA

Auswertesoftware, Comet-Assay IV Perceptive Instruments

Fluoreszenz-Mikroskop Olympus BZ 51

Scan®500 colony-counter & Software Interscience

Photometer Pelkin Elmer Lambda 35

CO2-Inkubator Binder

2-Nitrofluoren, 2-Aminoanthracen, Natriumazid,

Phosphat Buffer Saline, Ampicillin, NaNH4PO4,

Na2EDTA, Trizma Base, N-Laurylsarcosin, Triton X,

DMSO, Ethidiumbromid, H2O2

Sigma

Normal Melting Agarose Sea Kern LE, Low Melting

Agarose Sea Plaque BMA

Nährbouillon #2 Oxoid

Nähragar-Platten Merck

Agar, Glucose-Lösung, MgSO4 (7 H2O), K2HPO4, Biotin,

Histidin Applichem

Zitronensäure, NaCl, NaOH, HCl J.T. Baker

S9-Mix, 30 %, rat liver Aroclor, lyoph. Mutazyme

Anhang 49


Tabelle 8-21: Verwendete Lösungen für den Ames-Tes t und Comet Assay.

Lösungen Zusammensetzung

2-Aminoanthracen

Stammlösung 10 mg/mL in Aqua bidest.

2-Nitrofluoren Stammlösung 2 mg/mL in DMSO

Ampicillin 50 mg/mL in Aqua bidest.

Biotin/HistidinTop-Agar Agar 0,5 %, NaCl 0,5 %, Biotin-Histidin 0,5 mM 10 %, PBS

25 % in Aqua bidest.

Biotin-Histidin 0,5 mM in Aqua bidest.

Elektrophoresepuffer NaOH 10mol 60 mL, Na2EDTA 200mmol 10 mL, Aqua bidest.

1930 mL, pH 14

Ethidiumbromid 7,142 µg/mL in Aqua bidest.

Low Melting Agarose 0,7 % in Aqua bidest.

Lyselösung

NaCl 146,4 g, Na2EDTA 37,2 g, Trizma Base 1,2 g,

N-Laurylsarcosin 10,0 g, NaOH 10mol 40 mL, Aqua bidest.,

pH 10

Lysepuffer Triton X 1 %, DMSO 10 %, Lyselösung 89 %, pH 10

Nähragar Nähragar, 2 % in Aqua bidest.

Nährbouillon #2 Nährbouillon, 13 % in Aqua bidest.

Natriumazid Stammlösung 5 mg/mL in Aqua bidest.

Neutralisationspuffer Trizma Base 48,5 g, Salzsäure konz. 20 mL, Aqua bidest.

980 mL, pH 7,5

Normal Melting Agarose 0,5 % in Aqua bidest.

Trypsin-EDTA Trypsin 0,05 %-EDTA 0,02 % in Aqua bidest.

VBE- Minimal Agar Platten Agar 1,5 %, 50x VBE 2 %, 40 % Glucose-Lösung: 5 % in

Aqua bidest.

Vogel-Bonner Medium E,

(50X VBE)

MgSO4 (7 H2O) 1 %, Zitronensäure (1 H2O) 10 %, K2HPO4

50 %, NaNH4PO4 17,5 % in Aqua bidest.

Alle weiteren hier nicht aufgeführten bzw. nicht näher bezeichneten Chemikalien und Geräte

entsprachen dem üblichen Laborstandard.

Anhang 50


Salmonellen-Mutagenitätstest nach Ames (Ames-Test)

Die Ergebnisse der Ames-Tests entsprachen den Gültigkeitskriterien nach DIN 38415-4

(DIN 1999) mit einer Ausnahme (DU/1), wo der Gültigkeitsbereich der Negativkontrollen

leicht überschritten wurde. Laut Aussage des Herstellers lagen diese Abweichungen

innerhalb des Rahmens der Hersteller-internen Kontrollen. Die Ergebnisse werden daher

trotzdem berichtet und sind an entsprechender Stelle gekennzeichnet.

Der Ames-Test wurde mit zwei Salmonellen-Stämmen, Salmonella typhimurium TA98 und

TA100, durchgeführt. Beide Teststämme besitzen eine Mutation in einem Gen, dessen

Genprodukt zur Synthese der Aminosäure Histidin beiträgt. Durch diese Mutation können die

Stämme selbst kein Histidin synthetisieren (man spricht von Histidin-auxotrophen Stämmen).

Werden durch mutagene Testsubstanzen Rückmutationen in den Stämmen herbeigeführt,

die den Zellen die Fähigkeit verleiht, Histidin zu synthetisieren, können diese auf Histidin-

freiem Nährmedium selektioniert werden. Die Anzahl der Rückmutationen relativ zu den

Spontanmutationen lässt Rückschlüsse auf das mutagene Potenzial der Testsubstanzen

(Abwasserproben) zu. Aufgrund der unterschiedlichen Auswirkungen der Punktmutationen in

den Stämmen (TA100: Basenpaarsubstitution und TA98: Frameshift-Mutation) sind

Rückschlüsse auf die Art der mutagenen Wirkung der zu untersuchenden Probe möglich. Es

ist möglich, dass Chemikalien ein Toxizitätspotenzial erst zeigen, wenn sie durch

Leberenzyme metabolisiert wurden. Aus diesem Grund wurden die Experimente jeweils mit

und ohne Zugabe von Rattenleberenzymen durchgeführt (S9-Mix).

Alle Testansätze wurden als Dreifachbestimmungen durchgeführt. Die Versuche wurden

zunächst mit nach DIN hergestellten Minimal-Glucose-Agar-Platten und Top-Agar

durchgeführt. Wegen der großen Anzahl Proben wurden später die von der Firma Trinova

angebotenen Fertigplatten und der fertige Top-Agar verwendet. Versuche, die mit den selbst

hergestellten Materialien durchgeführt wurden, wurden mit den fertig gekauften Materialien

wiederholt.

Durchführung des Ames-Testes

Die Bakterien wurden je Versuch aus den lyophilisierten Pellets oder von einer Einzelkolonie

einer zur Stammhaltung verwendeten Masterplatte in einem 250 mL Erlenmeyerkolben mit

60 mL Nährbouillon (+ 30 µL Ampicillinlösung) über Nacht bei 37 °C und 150 rounds per

minute (rpm) im Schüttelwasserbad kultiviert. Die Extinktion der Übernachtkultur wurde bei

einer Wellenlänge von λ = 660 nm im Photometer gemessen. Um sicherzustellen, dass für

die Durchführung des Tests ausreichend Zellen zur Verfügung standen, wurde die

gemessene Extinktion der Übernachtkultur auf eine optische Dichte (OD) von 1,0 eingestellt

(~1 x 109 Zellen/mL). Für die Konzentrationsreihe wurden je 2 mL Biotin/Histidin-Top-Agar

mit 100 µL Salmonellen und 500 µL S9-Mix und je 25/50/100/200 oder 500 µL der Probe

zusammen pipettiert [Verdünnungsfaktoren Abwasser: 0,2; 0,08 0,04; 0,02; 0,01; Extrakte (in

Anhang 51


100-facher Anreicherung gegenüber dem Abwasser): 16, 8, 4, 2, 1]. Für jeden Stamm wurde

eine Negativkontrolle (100 µL Aqua bidest.) und eine Positivkontrolle (100 µL einer

100 µg/mL 2-Aminoanthracen-Stammlösung) mitgeführt. Ein zweiter Durchlauf erfolgte wie

oben beschrieben aber ohne S9-Mix. Für die Positivkontrollen wurden dabei 100 µL einer

50 µg/mL Natriumazid-Stammlösung (S. typhimurium TA100) bzw. 100 µL einer 50 µg/mL

2-Nitrofluoren-Stammlösung (S. typhimurium TA98) verwendet. Der Versuchsansatz wurde

auf Minimal Glucose Agar Platten gegeben und diese anschließend bei 37° C für 48 h

inkubiert. Die Anzahl der Bakterienkolonien wurde mittels Scan®500 colony-counter und

Scansoftware bestimmt.

Datenanalysen

Die Ergebnisse des Ames-Testes wurden gemäß DIN ausgewertet. Bei auffälligen

Ergebnissen wurden die Versuche wiederholt, um das erzielte Ergebnis zu bestätigen oder

abzulehnen. Die Versuche wurden auch wiederholt, wenn sie nicht den Gültigkeitskriterien

entsprachen. Zur Bestimmung des genotoxischen Potenzials wurde die sogenannte

Induktionsdifferenz herangezogen. Diese ist die Differenz zwischen der Anzahl der

Revertanten in der Negativ-Probe (Spontanmutationen) und den Testansätzen (Spontan-

und Rückmutationen). Ist die Differenz beim Teststamm TA98 größer als 20, bzw. beim

Teststamm TA100 grösser als 80 bei vorhandener Dosis-Wirkungsbeziehung wird der

Testansatz als potenziell mutagen eingestuft. Zusätzlich wurde die sogenannte

Mutationsrate herangezogen (Mahon, Green et al., 1989). Diese ist der Quotient aus der

Anzahl der Revertanten in den Testansätzen (Spontan- und Rückmutationen) und der

Negativkontrolle (Spontanmutationen). Bei einer Mutationsrate ≥ 2 und gleichzeitiger Dosis-

Wirkungsbeziehung der Verdünnungsstufen wurde der Testansatz als potenziell genotoxisch

eingestuft. Mutationsraten zwischen > 1,5 und < 2 sind nach Mahon et al., 1989

(Mahon, Green et al., 1989), als schwach mutagen einzustufen, sofern eine Dosis-abhängige

Wirkung besteht. Beide Größen werden, neben dem Mittelwert und der Standardabweichung

der Anzahl Revertanten in den Testansätzen und Kontrollen, im Anhang tabellarisch

aufgeführt. Im Ergebnisteil wird das jeweilige Ergebnis mit negativ (neg.) und positiv (pos.)

dargestellt. Die Mutationsraten wurden teilweise für grafische Darstellungen verwendet. Für

eine Gesamtbetrachtung der Ergebnisse des Ames-Testes von Zu- und Abläufen der

jeweiligen Kläranlagen wurden die Mittelwerte der Einzelergebnisse auf die Negativkontrolle

normiert und daraus ein Mittelwert über alle Proben einer Kläranlage gebildet.

Bakteriotoxische Wirkungen von Rohwasserproben und Extrakten im Ames-Test

Untersuchungen der Wachstumsraten der Bakterien in verschieden verdünnten

Wasserproben waren nicht Gegenstand des vorliegenden Projektes. Solche Untersuchungen

können Aufschlüsse auf mögliche bakteriotoxische Wirkungen geben. Hinweisend auf das

Anhang 52


mögliche Vorliegen bakteriotoxischer Wirkungen können Abfälle der Revertantenzahlen bei

höheren Verdünnungsstufen oder niedrigere Revertantenzahlen im Vergleich zur jeweiligen

Negativkontrolle sein.

Einzelzell-Gelelektrophorese (Comet Assay)

Bei diesem Testverfahren wurden humane Hepatozyten (Krebszelllinie - HepG2) verwendet

(Uhl, Helma et al., 2000; Knasmuller, Mersch-Sundermann et al., 2004). Die Zellen werden

nach der Behandlung mit den Proben auf Objektträgern immobilisiert (in Agarose

eingebettet) und unter alkalischen Bedingungen lysiert. Die so behandelten Zellen werden

dann einer Elektrophorese unterzogen. Die DNA der Zellkerne wandert dabei aufgrund ihrer

negativen Ladung, je nach Länge der DNA-Fragmente, unterschiedlich weit zur Kathode der

Elektrophoresekammer. Die DNA wird anschließend mittels Ethidiumbromid gefärbt, welches

bei Anregung durch Licht im UV-Bereich die DNA sichtbar macht. Anhand der Streckung der

DNA im elektrischen Feld sind Rückschlüsse auf die Schädigung der DNA möglich

(Abbildung 8-9).

Die Volumina der einzusetzenden Proben waren einerseits durch das maximal in der

Zellkultur mögliche Volumen und andererseits durch eine mögliche zytotoxische Wirkung

begrenzt. Der Methanolgehalt in den verdünnten Extrakten (Endkonzentration 0,1 %) erwies

sich in Vorversuchen als nicht zytotoxisch.

In den Comet Assay-Versuchen lag die Vitalität der Zellen nach der Inkubation mit den

Wasserproben bei ≥ 95 %. Die Positivkontrollen lagen bei uneingeschränkter Vitalität der

Zellen (≥ 95 %) mindestens 2-fach über den Negativkontrollen (bezogen auf den

geometrischen Mittelwert). Alle Versuche wurden als Triplikate durchgeführt.

Abbildung 8-9: Comet-Assay: Zellkern nach Elektroph orese, Ermittlung des Olive Tail Moments.

Zur Bestimmung des Grades der DNA-Schädigung wurde das Olive Tail Moment (OTM)

verwendet. Dieser berechnet sich aus der gemessenen Länge des Kometenschweifs und

dem Abstand der Intensitätsmittelpunkte von Kopf und Schweif [(Median Schweif – Median

Kopf) X Schweif-DNA % / 100, siehe Abbildung 8-9]. Somit fließen in das OTM sowohl die

Quelle: Cell Biolabs, Inc.

Anhang 53


Migrationslänge der DNA als auch die Häufigkeit der Schädigungen (Anzahl der Brüche) mit

ein (Olive and Banath 2006).

Durchführung des Comet Assay

HepG2-Zellen wurden in Kulturmedium bei 37 °C, 5 % CO2 und 90 % rel. Luftfeuchtigkeit im

CO2-Inkubator entsprechend der allgemeinen Vorschriften kultiviert. Für die Untersuchungen

wurden nur Zellen verwendet, die sich noch in der Wachstumsphase (Konfluenz 80-90 %)

und in der 6. Passage befanden. Die Zellen wurden in Kulturmedium mit 10 %

Abwasserprobe jeweils für 1 Stunde und 24 h inkubiert (Verdünnungsstufe Abwasser: 0,1;

Extrakt: 10). Anschließend wurden die Zellen mit Trypsin/EDTA vom Boden der

Kulturschalen gelöst, mit Kulturmedium gespült und mittels Zentrifugation sedimentiert. Für

die Positivkontrolle wurden die Zellen für 5 min mit 0,1 mmol H2O2/L inkubiert. Für die

Negativkontrolle wurde Aqua bidest. anstelle der Abwasserprobe eingesetzt. Anschließend

erfolgte die Fixierung der Zellen auf Objektträgern (OT) in Agarose und über Nacht die Lyse

in Lysepuffer. Die behandelten Zellen wurden 40 min in Elektrophoresepuffer äquilibriert

(unwinding der DNA) und dann für 45 min bei 4 °C, 300 mA und 25 V einer Elektrophorese

unterzogen. Nach der Trocknung der OT in 100 % Methanol wurde die DNA mit 300 µL

Ethidiumbromidlösung angefärbt und die Migration der DNA unter dem Fluoreszenz-

Mikroskop mittels Auswertungssoftware bei 200facher Vergrößerung ausgewertet. Die

Objektträger waren über eine Zuordnungscodierung verbunden. Die Zuordnung der

Messwerte zu den Proben erfolgte nach der mikroskopischen Auswertung ausschließlich

über diesen Code. Alle Parameter der Inkubation und Elektrophorese (Vitalität der Zellen

nach der Inkubation mit den Wasserproben, Temperatur vor/nach unwinding der DNA,

Temperatur nach Elektrophorese, Stromspannung und –stärke vor/nach der Elektrophorese,

Position der Objektträger in der Elektrophoresekammer) wurden dokumentiert und für die

Beurteilung der Ergebnisse herangezogen.

Datenanalysen

Die Lage- und Streuungsmaße des Olive Tail Moments (OTM) als Maß für eine DNA-

Schädigung werden tabellarisch (arithm. Mittelwert, Standardabweichung, geom. Mittelwert

und 95 %-Konfidenzintevall, p-Werte des MWU-Tests) und z. T. graphisch dargestellt (geom.

Mittelwerte und 95 %-Konfidenzintervalle). Bei auffälligen Ergebnissen wurden die Versuche

wiederholt, um die erzielten Ergebnisse zu bestätigen oder abzulehnen. Die Daten wurden

mit Hilfe des T- und Mann-Whitney U-Tests analysiert. Die Messwerte waren i. d. R. nicht

normal verteilt (Shapiro-Wilks W- und Kolmogorov-Smirnov-Test). Die Ergebnisse des Mann-

Whitney U-Testes wurden daher für die Bewertung zugrunde gelegt. Die Messwerte wurden

anhand signifikanter Unterschiede zwischen den Messwerten der Zu- und Abläufe bzw. der

Negativkontrolle oder der Blindproben (im Falle der Extrakte) bewertet. Signifikante

Änderungen gegenüber den jeweiligen Zuläufen sind in Form von Richtungspfeilen

Anhang 54


dargestellt. Die statistischen Analysen wurden mit dem Softwareprogramm „Statistica 10.0“

(StatSoft Inc.) erstellt.

Ergebnisse der Blindproben

Die für jede Extraktion hergestellten Blindproben zeigten sowohl im Ames-Test als auch im

Comet Assay z. T. Effekte an. Für die Auswertung des Comet Assay wurden die Extrakte

gegen die Blindproben anstelle der Negativkontrolle getestet, so dass die Ergebnisse der

Extrakte trotzdem bewertet werden konnten. Im Ames-Test wurden die Ergebnisse mit den

Extrakten bei positiver Blindprobe in Relation zur Blindprobe bewertet, obwohl eine

Normierung auf die Blindprobe laut DIN nicht vorgesehen ist.

Anhang 55


8.5.3 Ökotoxikologische In-vivo -Tests

In den im Folgenden vorgestellten In-vivo-Testverfahren wurden Abwässer direkt untersucht.

Darüber hinaus wurden im Algenhemmtest, der dafür zuvor miniaturisiert und optimiert

werden musste, auch Extrakte untersucht mit dem Ziel, Fraktionen von Proben mit positiven

Befunden im Algentest untersuchen zu können.

Die Abwasserproben wurden bis zur Verwendung bei 4 °C gelagert. Die Lagerzeit betrug in

der Regel nicht mehr als 4 d. Wenn eine längere Lagerung nötig war, wurden die Proben

direkt nach Erhalt bei -18 °C eingefroren.

Die Abwasserproben wurden vor dem Einsatz in den ökotoxikologischen Tests durch

Schütteln homogenisiert.

Der Einfluss des Abwassers auf die verschiedenen Testorganismen wurde in der Regel in

vier Verdünnungsstufen (G1, G2, G4, G8) untersucht. Hierbei wurde ein dem Test

entsprechendes Medium mit unterschiedlichen Anteilen des Abwassers verdünnt (siehe

Tabelle 8-12). Beim akuten Daphnientest und beim Lemnatest wurden in der zweiten

Projektphase nur die Verdünnungsstufen G1 und G2 untersucht.

Tabelle 8-22: Verdünnungsstufen (G) und Anteile von Abwasser [%] in den Biotests.

Verdünnungs-stufe

G

Anteil Abwasser [%]

Algentest Lemnatest Akuter Test

Daphnia

Reproduktionstest/ Populationstest

Daphnia Fischeitest

1 80 90 100 100 100

2 50 50 50 - 50

4 25 25 25 - 25

8 12,5 12,5 12,5 - 12,5

Durchführung der Versuche ökotoxikologische In-vivo -Tests

Alle Versuche wurden nach entsprechenden standardisierten Testvorschriften mit den

Abwasserproben verschiedener Behandlungsstufen (vor Ozonung, nach Ozonung, z. T.

nach biologischer Nachbehandlung) durchgeführt.

a. Algenhemmtest mit Desmodesmus subspicatus nach DIN EN ISO 8692 (2005)

Die Grünalge Desmodesmus subspicatus stammt aus der Sammlung von Algenkulturen der

Universität Göttingen.

Die Algenhemmtests wurden mit zwei verschiedenen Medien durchgeführt. Zum einem

wurde das Wachstumsmedium entsprechend der ISO-Norm verwendet, zum anderen wurde

Anhang 56


ein modifiziertes Medium nach Altenburger et al., (2010) in den Test eingesetzt. Dieses

Medium enthält deutlich mehr Phosphat als das ISO-Medium. Dies ist notwendig, da

nährstoffreichere Abwasserproben ansonsten zu einer Förderung des Algenwachstums im

Vergleich zum nährstoffärmeren ISO-Medium führen können. Diese nährstoffbedingte

Wachstumsförderung kann mögliche Wachstumshemmungen der Algen durch Chemikalien

überlagern.

Es wurden 4 Verdünnungsstufen mit jeweils 3 Replikaten (Tabelle 8-12) und einem Volumen

von 100 mL in 250 mL-Erlenmeyerkolben getestet. Als Kontrolle wurden 6 Mediumkontrollen

ohne Abwasser angesetzt. Als Inokulum wurden 104 Zellen/mL aus einer Vorkultur

angeimpft.

Die Messung der Algendichte erfolgte über Fluoreszenzmessung in einem

Multifunktionsreader (Tecan, infinite M200) für Multiwellplatten mit der Software

Tecan-i-Control. Dazu wurden aus jedem Ansatz jeweils 250 µL pro Kavität in eine schwarze

96-Well-Platte (Greiner bio-one) pipettiert. Die Messung wurde mit einer

Anregungswellenlänge von 440 nm und einer Emissionswellenlänge von 685 nm

durchgeführt.

Die Inkubation der Ansätze erfolgte in einem temperierbaren Lichtschrank (B. Braun, BS3)

bei 23 ± 2 °C mit kontinuierlicher Beleuchtung (SIL VANIA Standard FW/125 universal white

100 ± 10 µEm-2s-1). Die Ansätze wurden durch kontinuierliches Schütteln in Bewegung

gehalten. Die Fluoreszenz wurde alle 24 h gemessen (0 h – 72 h).

Als Endpunkt wurde die Wachstumsrate bestimmt und die prozentuale Hemmung im

Vergleich zur Kontrolle berechnet. Anschließend wurde ein statistischer Vergleich zwischen

den Behandlungsgruppen bzw. zwischen den Behandlungen und der Negativkontrolle mittels

Student t-Test durchgeführt. Waren die Voraussetzungen zur Anwendung des t-Tests

(Normalverteilung und Varianzhomogenität) nicht erfüllt, wurde ein nicht-parametrischer

Mann-Whitney-Test durchgeführt. Das zugrunde liegende Signifikanzniveau für eine

signifikante Abweichung lag bei 5 % (p< 0,05).

a.1. Miniaturisierter Algenhemmtest mit Desmodesmus subspicatus in Mikrotiterplatten

Aufgrund der Positivbefunde bei der Testung von Abwasserproben im herkömmlichen

Wachstumshemmtest mit der Grünalge Desmodesmus subspicatus, sollten im nächsten

Schritt die Extrakte und weitergehend die Fraktionen dieser Extrakte untersucht werden, um

die für die erhöhte Algentoxizität verantwortlichen Substanzen einzugrenzen und wenn

möglich zu identifizieren.

Anhang 57


Da der Algenwachstumshemmtest allerdings nach Standardvorschrift mit jeweils 100 mL

Probe durchgeführt wird, reichte das Extraktvolumen nicht aus, um diese im herkömmlichen

Testdesign zu untersuchen. Daher wurde zunächst die Methode auf einen miniaturisierten

Algentest in Mikrotiterplatten mit einem Testvolumen von 2 mL pro Probe umgestellt, wie sie

bereits von anderen Arbeitsgruppen entwickelt wurden (Eisenträger et al., 2003). Die

Methodik zum miniaturisierten Algentest im Labor des Forschungsinstituts gaiac wurde auf

Basis einer vorläufigen ISO-Vorschrift erarbeitet, die zurzeit im DIN AK 5.1 „Bioteste“ als

ISO-Norm für die Testung von Umweltproben, insbesondere Abwässer, entwickelt wird

(ISO/WD Algal test - Microplate).

Die Versuchsdurchführung des miniaturisierten Algentests erfolgte in 24-Well-Mikrotiter-

platten (TPP, Schweiz) mit einem Volumen von insgesamt 2 mL pro Well. Die Algendichte

wurde über die Fluoreszenzmessung in einem Multifunktionsreader (Tecan, infinite M200) für

Multiwellplatten mit der Software Tecan-i-Control gemessen. Die Messung wurde mit einer

Anregungswellenlänge von 440 nm und einer Emissionswellenlänge von 685 nm

durchgeführt. Es wurden verschiedene Geräteeinstellungen untersucht, um optimale

Einstellungen mit geringen Messunsicherheiten zu selektieren. Als optimale Einstellungen

erwiesen sich die in der Tabelle 8-13 aufgeführten Werte.

Tabelle 8-23: Einstellungen des Multifunktionsreade rs (Tecan, infinite M200) zur Messung der Fluoreszenz der Grünalge Desmodesmus subspicatus im miniaturisierten Algentest.

Parameter Einstellung

Schütteln (Orbiral) Dauer 30 s

Schütteln (Orbiral) Amplitude 3 mm

Modus Fluoreszenz Messung von oben

Anregungswellenlänge 440 nm

Emissionswellenlänge 685 nm

Anregungsbandbreite 9 nm

Emissionsbandbreite 20 nm

Verstärkung 135

Anzahl der Blitze 50

Integrationszeit 40 µs

Eine weitere Randbedingung, die bei diesem Test im Vorfeld untersucht wurde, war die

Inukolumdichte. Als Inokulum wurden zwei unterschiedliche Zelldichten von 5*103 und

104 Zellen/mL aus einer Vorkultur eingesetzt. Die höhere Inokulumdichte von 104 Zellen/mL

zeigte eine geringere Variabilität zwischen den Testansätzen und eine vergleichbare

Wachstumsrate, daher wurde für die Untersuchungen der Extrakte eine Inokulumdichte von

104 Zellen/mL gewählt.

Anhang 58


Die Mikrotiterplatten wurden in einem Inkubations-Schüttelschrank (B.Braun, BS3) für 72 h

inkubiert und kontinuierlich bei 450 rpm geschüttelt (Heidolph Titrimax 1000). Die Messung

der Fluoreszenz erfolgte zu Testbeginn (0 h) sowie nach 24, 48 und 72 h. Die Mikrotiter-

platten wurden während der Inkubationszeit mit einem Deckel abgedeckt sowie mit Parafilm

umschlossen, um Verdunstungseffekte zu minimieren, gleichzeitig aber einen ausreichenden

Gasaustausch zu gewährleisten. Aus den Fluoreszenzeinheiten wurde die Wachstumsrate

über 72 h berechnet. Im miniaturisierten Algentest wurden als Kontrollen eine Medium-

kontrolle (6 Replikate pro Platte), eine Positivkontrolle (Kaliumdichromat 1,5 mg/L;

3 Replikate auf einer Platte), eine Blindprobe als Prozesskontrolle (extrahierte,

unkontaminierte Wasserprobe, die genauso behandelt wurde wie die Rohwasserproben;

3 Replikate auf einer Platte) sowie eine Lösungsmittelkontrolle (0,2 % Methanol, 3 Replikate

auf einer Platte) mitgeführt.

b. Wachstumshemmtest mit Lemna minor nach DIN EN ISO 20079 (2006)

Der verwendete Stamm der Wasserlinse Lemna minor stamm aus dem Botanischen Institut

der Universität Jena. Als Nährmedium wurde das modifizierte Steinberg-Medium verwendet.

Es wurden 4 Verdünnungsstufen des Abwassers mit jeweils 3 Replikaten und einem

Volumen von 150 mL in 400 mL-Bechergläsern getestet. Als Kontrolle wurden

6 Mediumkontrollen ohne Abwasser angesetzt. Als Inokulum wurden zu Testbeginn jeweils

vier Pflanzen mit 3 Fronds eingesetzt. Als Frond bezeichnet man die individuelle blattanaloge

Struktur einer Wasserlinsenkolonie. Als Endpunkte im Wasserlinsentest werden die Anzahl

der Fronds (Gesamtanzahl aller Fronds, einschließlich derer, die von oben sichtbar unter

einem Mutterfrond hervorgeschoben ohne Vergrößerungshilfe sichtbar sind) und die Fläche

aller Fronds ermittelt.

Die Beobachtungsparameter Frondzahl und Frondfläche wurden mittels Bildverarbeitungs-

programm der Firma LemnaTec bzw. Medea automatisch quantifiziert. Die Messungen

erfolgten an Tag 0, Tag 3, Tag 5 und Tag 7. Als weiterer Beobachtungsparameter zur

Bestimmung der Biomasse wurde das Trockengewicht (24 h bei 60 °C) aller Ansätze nach

7 d bestimmt.

Die Inkubation erfolgte in einer temperierbaren Lichttruhe (24 ± 2 °C) mit kontinuierlicher

Beleuchtung (SILVANIA Standard FW/125 universal white: 90-95 µEm-2s-1).

Als Endpunkt wurde die Wachstumsrate der Beobachtungsparameter bestimmt und die

prozentuale Hemmung im Vergleich zur Kontrolle berechnet. Ein paarweiser Vergleich

zwischen den Behandlungsgruppen bzw. zwischen den Behandlungen und der

Negativkontrolle erfolgte mittels Student t-Test. Waren die Voraussetzungen zur Anwendung

des t-Tests (Normalverteilung und Varianzhomogenität) nicht erfüllt, wurde ein nicht-

Anhang 59


parametrischer Mann-Whitney-Test durchgeführt. Das zugrunde liegende Signifikanzniveau

für eine signifikante Abweichung lag bei 5 % (p < 0,05).

c. Akuter Test mit Daphnia magna nach DIN EN ISO 6341 (1996)

Als Testorganismus wurde Daphnia magna Straus Klon 5 verwendet. Es wurden vier bzw. in

der 2. Projektphase nur noch zwei Verdünnungsstufen des Abwassers mit jeweils

4 Replikaten und 4 Mediumkontrollen ohne Abwasser angesetzt. Pro Ansatz wurden 20 mL

in 50 mL-Bechergläser gefüllt. Der pH-Wert und der Sauerstoffgehalt wurden in jedem

Ansatz zu Testbeginn und am Ende gemessen. In jeden Ansatz wurden 5 Testorganismen

eingesetzt, die jünger als 24 h waren. Nach 24 und 48 h wurde die Schwimmfähigkeit der

Daphnien überprüft. Der Test wurde bei 20 ± 2 °C im Dunkeln durchgeführt.

Als Ergebnis wird die prozentuale Immobilität der Wasserflöhe für jede Verdünnungsstufe

angegeben niedrigste Verdünnungsstufe angegeben.

d. Populationstest mit Daphnia magna (nach Hammers-Wirtz & Ratte 2003)

Als Testorganismus wurde ebenfalls Daphnia magna Straus Klon 5 verwendet. Die

Startpopulation bestand aus 5 neugeborenen Daphnien (< 24 h) und 3 adulten Daphnien

(3 Wochen alt). Diese wurden in 500 mL des zu untersuchenden Abwassers

(Originalabwasser unverdünnt) bzw. des Kontrollmediums M4 (nach OECD 211) in

1 L-Testgefäße eingesetzt. Es wurden keine Verdünnungsstufen untersucht. Die Dauer des

Versuchs betrug 21 d.

Ein Wechsel des Mediums bzw. des Abwassers erfolgte alle 2-3 d jeweils montags,

mittwochs und freitags. Dazu wurden die Abwasserproben unmittelbar nach Lieferung

portionsweise tiefgefroren und jede Portion kurz vor dem Einsatz im Test aufgetaut und auf

20 °C temperiert. Bei jedem Wasserwechsel wurden Te mperatur, Sauerstoff und pH jeweils

im frischen und gealterten Medium gemessen.

Die Populationen wurden mit der Grünalge Desmodesmus subspicatus in einer

Nahrungskonzentration von 0,5 mg C pro Population und Tag gefüttert. An Wochenenden

erhielt die Population freitags die dreifache Menge. Montags, mittwochs und freitags wurden

die Populationen beim Umsetzten kontrolliert. Dabei wurden verschiedene Parameter

protokolliert: 1) die Anzahl lebender Tiere und toter Tiere aufgeschlüsselt nach

3 Größenklassen (Neonate/ Juvenile/ Adulte). Die Zuteilung zu den drei Größenklassen

erfolgte mit einem Siebsatz 2) die Anzahl von Aborten (abgestoßenen Eiern), und 3) die

Anzahl von Ephippien (Dauereiern).

Als Endpunkte wurden die Gesamtabundanz der Population nach 21 d sowie die kumulative

Anzahl gebildeter Ephippien (über 21 d) herangezogen und statistisch ausgewertet. Ein

Anhang 60


paarweiser Vergleich zwischen den Behandlungsgruppen bzw. zwischen den Behandlungen

und der Negativkontrolle erfolgte mittels Student t-Test. Waren die Voraussetzungen zur

Anwendung des t-Tests (Normalverteilung und Varianzhomogenität) nicht erfüllt, wurde ein

nicht-parametrischer Mann-Whitney-Test durchgeführt. Das zugrunde liegende

Signifikanzniveau für eine signifikante Abweichung lag bei 5 % (p < 0,05).

e. Fischeitest mit Danio rerio nach DIN EN ISO 15088 (2009)]

In diesem Test wurde die Embryonalentwicklung befruchteter Eier des Zebrabärblings (Danio

rerio) untersucht. In zwei unabhängigen Tests wurden jeweils 10 Eier in vier Verdünnungs-

stufen des Abwassers getestet. Zusätzlich zu einer Negativkontrolle mit Verdünnungswasser

wurde eine Positivkontrolle mit 3,4-Dichloranilin mitgeführt. Hierbei wurden pro Test 40 Eier

bzw. 20 Eier eingesetzt. Die Inkubation erfolgte über 48 h mit einem Testvolumen von 2 mL

in 24-Well-Mikrotiterplatten (TPP). Die Exposition der Eier wurde in einem

Inkubationsschrank bei 26 ± 2 °C und einer Hell/Dun kel Periode von 16:8 h durchgeführt.

Nach 48 h wurden verschiedene Endpunkte (Koagulation, Herzschlag, Ablösung des

Schwanzes) unter dem Mikroskop untersucht. Ein Embryo gilt als nicht überlebensfähig,

wenn er nach 48 h koaguliert ist oder der Schwanz nicht abgelöst ist oder der Herzschlag

nicht feststellbar ist.

Als Testergebnis wird die Mortalität der Fischembryonen nach 48 h für jede

Verdünnungsstufe angegeben.

Anhang 61


8.5.4 In-vivo -Tests im Durchfluss

Zur Beurteilung der Abwassertoxizität wurden drei verschiedene In-vivo-Tests vor Ort an der

Kläranlage Bad Sassendorf direkt mit dem Abwasser vor und nach Ozon im

Durchflusssystem durchgeführt. Hauptaugenmerk lag hierbei auf dem Vergleich der Toxizität

zwischen Abwasser aus der konventionellen Reinigung nach dem Belebtschlammverfahren

und Abwasser nach der zusätzlichen Ozonungsstufe im Anschluss an das Nachklärbecken.

Zur Validitätskontrolle der Expositionsbedingungen jedes Testsystems wurde außerdem eine

Kontrollgruppe auf gleiche Weise einem Standardkontrollwasser exponiert, das zweimal

wöchentlich neu angesetzt wurde (mittels Ionenaustauscherkartusche entionisiertes Wasser

wurde mit artifiziellem Meersalz (TropicMarin®) und Na2CO3 (Verhältnis 10:3) auf eine

Leitfähigkeit von 770 - 800 µS/cm aufgesalzen und der pH-Wert mittels NaOH/HCl auf 7,5

eingestellt). Für den Reproduktionstest mit der Zwergdeckelschnecke wurde bereits in der

1. Projektphase die Sensitivität gegenüber Östrogenen belegt (Erhöhung Gesamtembryonen

bei Ethinylestradiol-Exposition 25 ng/L). Wegen der erhöhten Probenzahl und dem sehr

begrenzten Raumangebot auf den Kläranlagen wurde auf weitere Testungen mit

Ethinylestradiol verzichtet. Aufgrund der unterschiedlichen Wassermatrix von Kontrolle und

Abwasser wird im Wesentlichen der Vergleich zwischen ozontem und nicht-ozontem

Abwasser für die toxikologische Bewertung herangezogen. Die Versuchsorganismen wurden

mit den Abwässern in einem kontinuierlichen Durchfluss exponiert, um auch schnell

abbaubare Oxidationsprodukte infolge der Ozonung in die Beurteilung mit einzubeziehen.

Die Expositionsgefäße wurden in einer mit Wasser gefüllten Temperierwanne konstant auf

die erforderlichen Temperaturen (siehe unten) temperiert [mittels Durchlaufkühlern von

Julabo (Seelbach, Deutschland) und Lauda (Lauda-Königshofen, Deutschland)]. Der

Durchfluss durch die Expositionsgefäße wurde mit 24 Kanal bzw. 40 Kanal-Pumpen von

Ismatec (Wertheim-Mondfeld, Deutschland; Modelle ICP bzw. MCP) gewährleistet. Hierbei

wurde die Pumpgeschwindigkeit so eingestellt, dass das Abwasser in den

Expositionsgefäßen 4 mal pro Tag ausgetauscht wurde. Jedes Testgefäß wurde außerdem

separat belüftet, wodurch gleichzeitig eine kontinuierliche Durchmischung des Testwassers

in den Testgefäßen erreicht wurde. Die Testwässer wurden über Teflonschläuche in die

Expositionsgefäße geleitet und gelangten über einen passiven Auslauf in die

Temperierwanne und von dort in den Abfluss. Der Abwassertransport bis zu den

Testgefäßen dauerte > 40 min, was einen vollständigen Abbau eventuell vorliegenden

Restozons gewährleistete. Expositionsbedingungen, Fütterung und Auswertung der

einzelnen Tests werden im Folgenden erläutert.

Anhang 62


a. Toxizitätstest mit Lumbriculus variegatus

Der Toxizitätstest mit dem Glanzwurm Lumbriculus variegatus wurde gemäß der OECD-

Richtlinie 225 (OECD, 2007) durchgeführt. Jeweils 10 Tiere wurden in die Testgefäße

(Wasservolumen 350 mL, ca. 2 cm dicke Sandschicht als Sediment) eingesetzt, 28 d

gegenüber den Abwässern vor und nach Ozonung exponiert (20 °C, Tag / Nacht: 16 h / 8 h)

und dabei alle 2 d gefüttert (Fütterung mit Tetra-Min®-Suspension ad libitum). Hierbei

wurden 5 Replikate pro Abwasser eingesetzt. Nach Versuchsende wurden die beiden

Endpunkte Anzahl der Würmer und Biomasse bestimmt. Eine verringerte Reproduktionsrate

und Biomasse geben hierbei Hinweise auf eine gesteigerte Toxizität der Testwässer.

b. Reproduktionstest mit Potamopyrgus antipodarum

Der Reproduktionstest mit der Zwergdeckelschnecke Potamopyrgus antipodarum ist ein

sensitives Testsystem zur Bestimmung östrogener Aktivität und kann damit als

In-vivo-Erfolgskontrolle der Ozonung von Abwasser dienen, da hierbei eine starke Reduktion

der Östrogenität zu erwarten ist. Des Weiteren werden eventuell auftretende

reproduktionstoxische Wirkungen erfasst. Der Test mit der Zwergdeckelschnecke wurde in

Anlehnung an den Richtlinienvorschlag von (Duft M. et al., 2007) durchgeführt. Jeweils

40 Tiere pro Replikat (2 Replikate pro Abwasser bzw. Kontrollwasser) wurden 28 d

gegenüber den Testwässern exponiert (16 °C, Tag / N acht: 16 h / 8 h) und alle 2 d gefüttert

(TetraPhyll®-Suspension, ad libitum). Als Endpunkt wurde nach Versuchsende die Anzahl

der Embryonen in der Bruttasche bestimmt sowie die Mortalität der Schnecken

aufgenommen. Die Embryonenzahl wurde hierbei getrennt nach beschalten und

unbeschalten Embryonen aufgenommen, da die Anzahl unbeschalter Embryonen, aufgrund

des jüngeren Entwicklungsstadiums, als sensitiverer Endpunkt gilt. Eine gesteigerte

Embryonenzahl im Vergleich zu einem Referenzwasser ist hierbei Marker für eine erhöhte

östrogene Aktivität im Wasser. Sind die Embryonenzahlen der abwasserexponierten

Schnecken im Vergleich zur Kontrolle signifikant verringert, so kann dies ein Hinweis auf

reproduktionstoxische Wirkungen sein.

c. Toxizitätstest mit Dreissena polymorpha

Die Zebramuschel Dreissena polymorpha hat sich in vergangenen Experimenten als

sensitiver Testorganismus zur Detektion erhöhter Toxizität infolge der Ozonung erwiesen

(Stalter D. et al., 2010). Jeweils 5 Muscheln wurden pro Replikat eingesetzt (Größe der

Muscheln zwischen 2,2 – 3,0 cm; 4 Replikate pro Abwasser). Die Muscheln wurden 28 d mit

den Testwässern exponiert (16 °C, Tag / Nacht: 16 h / 8 h, Futter: Pro-Coral Phyton-

Suspension). Als Endpunkt wird die Mortalität angegeben.

Anhang 63


8.6 Ergebnistabellen und Abbildungen

8.6.1 Ergebnistabellen Zytotoxizität und Östrogenit ät

Tabelle 8-24: Ergebnisse des PAN I Tests für die Kl äranlage Bad Sassendorf (Versuchseinstellung BS/7).

LDHe XTT

Probe Mittelwert

Vitalität [%] p-Wert (Probe vs. Negativkontrolle)

p-Wert (Probe vs. Vorherige

Reinigungsstufe)* Effekt

Mittelwert Vitalität [%]

p-Wert (Probe vs. Negativkontrolle)



Negativkontrolle 5,3 ± 7,54 - - 100,0 ± 0,00 - - Positivkontrolle 100 ± 0,00 < 0,0001 - 21,2 ± 8,54 0,0039 -

Blindprobe 4,6 ± 6,51 - - 88,6 ± 10,95 - - VO-BS/7 1,5 ± 2,12 - - 91,6 ± 2,19 - - NO-BS/7 5,3 ± 7,50 - 0,2419 → 87,8 ± 1,27 - 0,5273 →

NOB-BS/7 5,6 ± 7,99 - 0,4226 → 85,0 ± 3,32 - 0,7402 → VO-BS-E/7 0,0 ± 0,00 - - 59,3 ± 5,83 0,0068 - NO-BS-E/7 2,6 ± 3,61 - 0,2517 → 83,7 ± 6,50 - 0,0011 ↓

NOB-BS-E/7 6,0 ± 8,49 - 0,2110 → 87,5 ± 14,62 - 0,5062 →

NR SRB

Probe Mittelwert

Vitalität [%]

p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)







Klassifizierung alle Endpunkte

Negativkontrolle 100,0 ± 0,00 - - 100,0 ± 0,00 - - nicht zytotoxisch Positivkontrolle 24,2 ± 14,66 0,0122 - 45,0 ± 11,78 0,0150 - stark zytotoxisch

Blindprobe 92,9 ± 7,44 - - 94,2 ± 7,82 - - nicht zytotoxisch VO-BS/7 101,8 ± 8,61 - - 99,0 ± 1,47 - - nicht zytotoxisch NO-BS/7 97,3 ± 5,51 - 0,2275 → 90,1 ± 9,58 - 0,2905 → nicht zytotoxisch

NOB-BS/7 97,2 ± 12,99 - 0,9729 → 94,9 ± 4,35 - 0,3968 → nicht zytotoxisch VO-BS-E/7 48,9 ± 10,50 0,0138 - 37,3 ± 2,77 0,0007 - stark zytotoxisch NO-BS-E/7 93,37 ± 10,12 - 0,0058 ↓ 87,6 ± 6,17 - 0,0061 ↓ nicht zytotoxisch

NOB-BS-E/7 88,3 ± 9,94 - 0,0106 → 85,1 ± 8,36 - 0,4530 → nicht zytotoxisch

Anhang 64



LDHe XTT

Probe Mittelwert










NOB-BS/8 3,8 ± 5,30 - 0,2222 → 97,8 ± 13,44 - 0,0229 ↓ VO-BS-E/8 0,0 ± 0,00 - - 60,9 ± 3,70 0,0030 - NO-BS-E/8 6,3 ± 8,84 - 0,2297 → 83,6 ± 2,47 - 0,0413 →

NOB-BS-E/8 2,2 ± 3,04 - 0,2280 → 89,9 ± 15,54 - 0,0555 →

NR SRB

Probe Mittelwert

Vitalität [%]

p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)









Blindprobe 100,2 ± 12,22 - - 98,8 ± 0,66 - - nicht zytotoxisch VO-BS/8 103,9 ± 14,43 - - 98,5 ± 3,53 - - nicht zytotoxisch NO-BS/8 94,8 ± 14,51 - 0,5804 → 97,7 ± 7,29 - 0,7676 → nicht zytotoxisch

NOB-BS/8 95,3 ± 10,61 - 0,9049 → 96,8 ± 7,63 - 0,8937 → nicht zytotoxisch VO-BS-E/8 49,1 ± 8,12 0,0084 - 42,1 ± 5,14 0,0026 - stark zytotoxisch NO-BS-E/8 91,8 ± 12,37 - 0,0472 ↓ 85,7 ± 4,69 - 0,0134 ↓ nicht zytotoxisch

NOB-BS-E/8 76,9 ± 13,44 0,0967 0,1383 → 89,9 ± 9,71 - 0,3275 → nicht zytotoxisch

Anhang 65



LDHe XTT

Probe Mittelwert










NOB-BS/9 2,9 ± 4,03 - 0,0293 ↓ 92,4 ± 6,09 - 0,4769 → VO-BS-E/9 8,6 ± 12,09 - - 71,4 ± 24,54 0,0141 - NO-BS-E/9 2,9 ± 5,08 - 0,6769 → 81,6 ± 1,48 - 0,0115 ↓

NOB-BS-E/9 1,5 ± 2,54 - 0,4226 → 81,1 ± 7,00 - 0,8331 →

NR SRB

Probe Mittelwert

Vitalität [%]

p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)









Blindprobe 101,8 ± 13,29 - - 103,1 ± 0,57 - - nicht zytotoxisch VO-BS/9 114,3 ± 0,92 - - 94,9 ± 3,93 - - nicht zytotoxisch NO-BS/9 90,2 ± 11,45 - - → 87,5 ± 1,07 - - → nicht zytotoxisch

NOB-BS/9 95,73 ± 8,82 - - → 97,7 ± 2,25 - - → nicht zytotoxisch VO-BS-E/9 68,9 ± 40,87 0,0217 - 66,8 ± 30,48 0,0202 - mäßig zytotoxisch NO-BS-E/9 101,75 ± 0,35 - - ↓ 98,0 ± 0,49 - 0,0167 ↓ nicht zytotoxisch

NOB-BS-E/9 95,8 ± 7,00 - - → 95,8 ± 6,29 - - → nicht zytotoxisch

Anhang 66


Tabelle 8-27: Ergebnisse des PAN I Tests für die Kl äranlage Duisburg-Vierlinden (Versuchseinstellung D U/2).

LDHe XTT

Probe Mittelwert


p-Wert (Probe vs. Vorherige Reinigungsstufe)*

Effekt Mittelwert


p-Wert (Probe vs. Vorherige Reinigungsstufe)*

Effekt

Negativkontrolle 0,0 ± 0,00 - - 100,0 ± 0,00 - - Positivkontrolle 100,0 ± 0,00 < 0,0001 - 24,5 ± 7,74 0,0039 -

Blindprobe 4,7 ± 6,24 - - 91,6 ± 1,13 - - VO-DU/2 - - - - - -

NOD-DU/2 4,5 ± 7,79 - - → 85,4 ± 5,08 - - → NOI-DU/2 8,6 ± 12,09 - - → 95,4 ± 6,77 - - →

NOIB-DU/2 9,1 ± 15,70 - - → 90,6 ± 5,30 - - → VO-DU-E/2 2,7 ± 2,75 - - 86,7 ± 1,48 - -

NOD-DU-E/2 6,9 ± 11,89 - - → 83,3 ± 10,47 - - → NOI-DU-E/2 - - - → - - - →

NOIB-DU-E/2 0,0 ± 0,00 - - → 87,1 ± 7,57 - - →

NR SRB

Probe Mittelwert







Reinigungsstufe)*


Effekt

Negativkontrolle 100,0 ± 0,00 - - 100,0 ± 0,00 - - nicht zytotoxisch Positivkontrolle 39,9 ± 15,50 0,0334 - 61,2 ± 10,60 0,0062 - mäßig zytotoxisch

Blindprobe 62,4 ± 19,52 0,0421 - 99,8 ± 7,70 - - nicht zytotoxisch VO-DU/2 - - - - - - -

NOD-DU/2 86,5 ± 4,01 - - 90,3 ± 10,83 - - nicht zytotoxisch NOI-DU/2 93,8 ± 14,76 - - → 102,9 ± 1,90 - - nicht zytotoxisch →

NOIB-DU/2 93,2 ± 5,94 - - → 94,8 ± 9,52 - - nicht zytotoxisch → VO-DU-E/2 88,8 ± 10,75 - - 78,3 ± 17,20 0,0065 - Nicht zytotoxisch

NOD-DU-E/2 99,2 ± 15,13 - - → 90,6 ± 10,25 - 0,0084 nicht zytotoxisch ↓ NOI-DU-E/2 - - - 99,9 ± 7,70 - - -

NOIB-DU-E/2 95,0 ± 15,20 - - 97,3 ± 9,76 - - nicht zytotoxisch

Anhang 67



LDHe XTT

Probe Mittelwert








Negativkontrolle 0,0 ± 0,00 - - 100,0 ± 0,00 - - Positivkontrolle 100,0 ± 0,00 < 0,0001 - 24,5 ± 7,74 < 0,0001 -

Blindprobe 2,7 ± 4,62 - - 85,4 ± 6,51 - - VO-DU/3 2,9 ± 4,03 - - 84,3 ± 6,01 - -

NOD-DU/3 11,7 ± 16,55 - - → 85,3 ± 9,58 - - → NOI-DU/3 9,8 ± 13,79 - - → 90,3 ± 6,35 - - →

NOIB-DU/3 5,1 ± 7,14 - - → 90,2 ± 6,40 - - → VO-DU-E/3 13,0 ± 22,57 - - 54,0 ± 4,53 0,0016 -

NOD-DU-E/3 6,6 ± 11,37 - - → 81,4 ± 4,17 - 0,0003 ↓ NOI-DU-E/3 4,5 ± 7,79 - - → 55,7 ± 0,00 < 0,0001 0,4332 →

NOIB-DU-E/3 13,9 ± 24,13 - - → 67,2 ± 15,20 0,0086 0,0145 ↓

NR SRB

Probe Mittelwert

Vitalität [%]

p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)






Reinigungsstufe)*


Effekt


Blindprobe 101,2 ± 4,74 - - 95,9 ± 2,69 - - nicht zytotoxisch VO-DU/3 66,2 ± 4,17 0,0026 - 105,8 ± 0,42 - - nicht zytotoxisch

NOD-DU/3 101,0 ± 5,59 - 0,0129 ↓ 102,6 ± 7,18 - - nicht zytotoxisch → NOI-DU/3 90,2 ± 6,35 - 0,0679 ↘ 104,8 ± 5,79 - - nicht zytotoxisch →

NOIB-DU/3 101,1 ± 14,85 - 0,1703 → 104,7 ± 8,44 - - nicht zytotoxisch → VO-DU-E/3 45,2 ± 17,47 0,0165 - 30,3 ± 21,64 0,0156 - stark zytotoxisch

NOD-DU-E/3 95,7 ± 1,77 - 0,0236 ↓ 93,2 ± 1,48 - 0,0167 nicht zytotoxisch ↓ NOI-DU-E/3 46,5 ± 18,24 0,0187 0,1686 → 51,0 ± 21,50 0,0300 0,3715 stark zytotoxisch →

NOIB-DU-E/3 97,9 ± 8,98 - 0,0441 ↓ 101,2 ± 2,83 - 0,0363 nicht zytotoxisch ↓

Anhang 68



LDHe XTT

Probe Mittelwert








Negativkontrolle 0,0 ± 0,00 - - 100,0 ± 0,00 - - Positivkontrolle 100,0 ± 0,00 < 0,0001 - 24,5 ± 7,74 -

Blindprobe 2,9 ± 0,01 - - 86,5 ± 4,53 - - VO-DU/4 10,6 ± 14,99 - - 88,4 ± 0,81 - -

NOD-DU/4 8,4 ± 11,88 - - → 93,0 ± 7,82 - - → NOI-DU4 7,7 ± 10,89 - - → 90,0 ± 11,10 - - →

NOIB-DU/4 11,8 ± 16,69 - - → 95,6 ± 3,59 - - → VO-DU-E/4 0,1 ± 0,14 - - 85,5 ± 4,02 - -

NOD-DU-E/4 6,7 ± 9,40 - - → 85,1 ± 5,78 - - → NOI-DU-E/4 2,0 ± 2,76 - - → 83,0 ± 5,26 - - →

NOIB-DU-E/4 9,2 ± 13,01 - - → 90,8 ± 10,04 - - →

NR SRB

Probe Mittelwert

Vitalität [%]

p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)




p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)


Reinigungsstufe)*


Effekt


Blindprobe 79,9 ± 10,18 0,0006 - 99,7 ± 11,66 - - nicht zytotoxisch VO-DU/4 95,2 ± 13,29 - - 107,1 13,57 - - nicht zytotoxisch

NOD-DU/4 87,8 ± 1,48 - - → 103,9 ± 14,03 - - nicht zytotoxisch → NOI-DU/4 102,5 ± 12,30 - - → 103,3 ± 14,41 - - nicht zytotoxisch →

NOIB-DU/4 93,7 ± 10,96 - - → 109,1 ± 5,12 - - nicht zytotoxisch → VO-DU-E/4 88,1 ± 10,54 - - 90,2 ± 12,45 - - nicht zytotoxisch

NOD-DU-E/4 96,6 ± 5,80 - - → 109,4 ± 6,94 - - nicht zytotoxisch → NOI-DU-E/4 93,6 ± 4,74 - - → 104,3 ± 4,69 - - nicht zytotoxisch →

NOIB-DU-E/4 99,5 ± 4,95 - - → 90,2 ± 12,45 - - nicht zytotoxisch →

Anhang 69



LDHe XTT

Probe Mittelwert









Blindprobe 7,7 ± 13,39 - - 84,1 ± 10,95 - - VO-DU/5 26,4 ± 9,50 0,0270 - 88,1 ± 4,3 - -

NOD-DU/5 25,1 ± 12,09 0,0368 0,6300 → 87,4 ± 9,83 - - → NOI-DU5 20,9 ± 3,11 0,0037 0,8060 → 88,7 ± 10,68 - - →

NOIB-DU/5 38,8 ± 17,47 0,0663 0,4566 → 88,2 ± 9,6 - - → VO-DU-E/5 29,0 ± 10,96 0,0237 - 57,3 ± 10,96 0,0107 -

NOD-DU-E/5 40,5 ± 24,61 0,0568 0,1706 ↗ 64,8 ± 0,1 < 0,0001 0,2156 ↘ NOI-DU-E/5 4,7 ± 8,14 - 0,1124 ↘ 77,3 ± 8,10 0,0400 0,1000 ↘

NOIB-DU-E/5 18,1 ± 18,05 - 0,1612 ↗ 88,2 ± 9,6 0,0004 0,1433 ↘

NR SRB

Probe Mittelwert

Vitalität [%]

p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)




p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)


Reinigungsstufe)*


Effekt


Blindprobe 102,8 ± 15,22 - - 106,4 ± 8,48 - - nicht zytotoxisch VO-DU/5 84,4 ± 5,85 - - 100,8 ± 7,92 - - nicht zytotoxisch

NOD-DU/5 93,0 ± 11,46 - - → 74,6 ± 19,3 0,0830 0,0295 mäßig zytotoxisch ↑ NOI-DU/5 95,1 ± 12,23 - - → 90,5 ± 48,93 - - nicht zytotoxisch →

NOIB-DU/5 76,0 ± 9,61 0,0496 0,2125 ↗ 89,7 ± 1,91 - - nicht zytotoxisch → VO-DU-E/5 98,2 ± 2,19 - - 94,4 ± 8,70 - - nicht zytotoxisch

NOD-DU-E/5 105,3 ± 1,84 - - → 112,7 ± 8,06 - - nicht zytotoxisch → NOI-DU-E/5 105,0 ± 1,84 - - → 109,3 ± 8,70 - - nicht zytotoxisch →

NOIB-DU-E/5 107,8 ± 2,55 - - → 107,8 ± 1,41 - - nicht zytotoxisch →

Anhang 70



LDHe XTT

Probe Mittelwert








Negativkontrolle 0,0 ± 0,00 - - 100,0 ± 0,00 - - Positivkontrolle 100,0 ± 0,00 - - 24,5 ± 7,74 0,0039 -

Blindprobe 13,8 - - 91,8 ± 8,49 - - VO-DU/6 9,5 ± 16,40 - - 84,4 ± 0,78 - -

NOD-DU/6 4,7 ± 8,14 - - → 91,0 ± 9,26 - - → NOI-DU6 9,6 ± 16,69 - - → 85,3 ± 2,05 - - →

NOIB-DU/6 0,0 ± 0,00 - - → 84,7 ± 1,98 - - → VO-DU-E/6 10,3 ± 17,90 - - 61,3 ± 11,60 0,0146 -

NOD-DU-E/6 37,6 - - → 76,9 - - ↘ NOI-DU-E/6 36,3 - - → 39,2 - - ↗

NOIB-DU-E/6 27,4 - - → 83,8 ± 12,16 - - ↘

NR SRB

Probe Mittelwert

Vitalität [%]

p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)




p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)


Reinigungsstufe)*


Effekt

Negativkontrolle 100,0 ± 0,00 - - 100,0 ± 0,00 - - Positivkontrolle 39,9 ± 15,50 0,0334 - 61,2 ± 10,60 0,0062 -

Blindprobe 86,0 ± 13,36 - - 74,1 ± 17,11 0,0655 - VO-DU/6 103,7 ± 17,54 - - 88,3 ± 0,00 - -

NOD-DU/6 85,8 ± 7,14 - - → 81,3 ± 0,14 - - → NOI-DU/6 88,6 ± 1,06 - - → 83,7 ± 1,91 - - →

NOIB-DU/6 85,7 ± 12,45 - - → 68,3 ± 1,63 0,0004 0,0002 ↑ VO-DU-E/6 64,6 ± 4,10 0,0022 - 81,3 ± 35,28 - -

NOD-DU-E/6 85,6 - - 100,5 - - NOI-DU-E/6 91,3 - - 93,7 - -

NOIB-DU-E/6 78,5 ± 6,36 0,0141 - 94,0 ± 11,03 - - →

Anhang 71


Tabelle 8-32: Ergebnisse des PAN I Tests für die Kl äranlage Schwerte (Versuchseinstellung S/1).

LDHe XTT

Probe Mittelwert









Blindprobe 5,8 - - 73,1 ± 9,19 - - PS-S/1 3,0 - - 97,3 ± 0,49 - - VO-S/1 1,5 ± 2,12 - - → 92,2 ± 8,91 - - → NO-S/1 2,8 ± 3,96 - - → 102,1 ± 8,63 - - →

PS-S-E/1 9,0 - - 105,9 ± 10,04 - - VO-S-E/1 10,4 - - → 59,0 ± 6,72 0,0044 0,0008 ↑ NO-S-E/1 14,2 - - → 67,0 ± 4,03 0,0025 0,0216 ↓

NR SRB

Probe Mittelwert

Vitalität [%]

p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)




p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)





Blindprobe 101,5 ± 6,43 - - 91,7 - - nicht zytotoxisch PS-S/1 88,7 ± 14,35 - - 94,0 - - nicht zytotoxisch VO-S/1 76,0 ± 0,57 0,0003 0,1540 ↗ 92,4 - - nicht zytotoxisch NO-S/1 87,4 ± 11,11 - 0,1936 ↘ 99,5 - - nicht zytotoxisch

PS-S-E/1 93,6 ± 14,28 - - 95,3 - - nicht zytotoxisch VO-S-E/1 77,3 ± 11,84 0,0802 0,1404 ↗ 73,1 kA kA mäßig zytotoxisch NO-S-E/1 98,3 ± 13,93 - 0,0016 ↓ 101,5 - kA schwach zytotoxisch

Anhang 72



LDHe XTT

Probe Mittelwert









Blindprobe 5,7 ± 7,99 - - 71,9 ± 8,20 0,0139 - PS-S/2 12,4 - - 84,1 ± 12,23 - - VO-S/2 2,8 - - → 72,9 ± 6,36 0,0091 0,2394 ↗ NO-S/2 17,8 - - → 90,2 ± 5,09 - 0,0151 ↓

PS-S-E/2 8,2 - - 68,9 ± 19,73 0,0618 - VO-S-E/2 8,7 - - → 62,4 ± 1,41 0,0002 0,5405 → NO-S-E/2 11,1 ± 4,53 - - → 70,1 ± 4,69 0,0081 0,1338 →

NR SRB

Probe Mittelwert

Vitalität [%]

p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)




p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)





Blindprobe 105,6 ± 0,49 - - 110,8 ± 2,05 - - nicht zytotoxisch PS-S/2 85,4 ± 2,97 - - 83,1 ± 2,45 - - nicht zytotoxisch VO-S/2 84,0 ± 9,26 - - → 72,8 ± 6,58 0,0127 0,0345 ↗ schwach zytotoxisch NO-S/2 76,5 ± 8,30 0,0398 0,0545 ↗ 65,8 ± 2,69 0,0010 0,3271 → schwach zytotoxisch

PS-S-E/2 63,2 ± 18,34 0,0741 - 60,4 ± 24,82 0,0596 - schwach zytotoxisch VO-S-E/2 89,1 ± 16,90 - 0,0823 ↘ 102,0 - kA ↘ schwach zytotoxisch NO-S-E/2 94,4 ± 14,45 - - → 99,2 ± 10,47 - - → schwach zytotoxisch

Anhang 73



LDHe XTT

Probe Mittelwert









Blindprobe 23,0 - - 94,7 ± 9,76 - - PS-S/3 5,4 ± 7,57 - - 65,7 ± 11,17 0,0172 - VO-S/3 0,0 - - 99,9 ± 2,76 - 0,0224 ↓ NO-S/3 20,3 - - 94,4 ± 13,51 - - →

PS-S-E/3 5,2 - - 92,8 ± 5,80 - - VO-S-E/3 32,9 - - 91,4 ± 3,75 - - → NO-S-E/3 23,9 - - 88,4 ± 18,69 - - →

NR SRB

Probe Mittelwert





p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)





Blindprobe 102,2 ± 2,83 - - 96,5 ± 15,49 - - nicht zytotoxisch PS-S/3 113,7 ± 6,93 - - 117,9 ± 1,06 - - nicht zytotoxisch VO-S/3 102,8 ± 2,26 - - → 106,1 - - → nicht zytotoxisch NO-S/3 109,2 ± 1,56 - - → 108,7 - - → nicht zytotoxisch

PS-S-E/3 79,3 ± 6,51 0,0314 - 74,4 ± 0,35 0,0009 - schwach

zytotoxisch VO-S-E/3 91,4 ± 3,75 - 0,0518 ↘ 96,7 - 0,0116 ↘ nicht zytotoxisch NO-S-E/3 103,0 ± 9,37 - - → 97,0 - - → nicht zytotoxisch

Anhang 74


Tabelle 8-35: Ergebnisse des PAN I Tests für die Kl äranlage Schwerte (Versuchseinstellung S/4)

LDHe XTT

Probe Mittelwert









Blindprobe 14,1 ± 10,18 - - 99,4 ± 12,28 - - VO-S/4 1,6 ± 2,26 - - 95,5 ± 5,47 - - NO-S/4 4,0 ± 5,66 - - 95,6 ± 6,66 - - → PAK-S/4 4,2 ± 5,94 - - 95,2 ± 7,75 - - → VO-S-E/4 21,3 - - 93,7 ± 0,85 - - NO-S-E/4 31,3 - - 99,5 ± 5,94 - - → PAK-S-E/4 10,0 - - 78,5 ± 3,37 0,0081 0,0082 ↑

NR SRB

Probe Mittelwert

Vitalität [%]

p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)




p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)




Negativkontrolle

100,0 ± 0,00 - - 100,0 ± 0,00 - - nicht zytotoxisch

Positivkontrolle

16,8 ± 2,62 0,0002 - 19,8 ± 4,23 0,0009 - stark zytotoxisch

Blindprobe 103,9 ± 3,42 - - 103,6 ± 14,28 - - nicht zytotoxisch VO-S/4 88,5 ± 14,85 - - 101,5 ± 21,85 - - nicht zytotoxisch NO-S/4 92,6 ± 18,80 - - → 93,4 ± 17,47 - - → nicht zytotoxisch PAK-S/4 96,5 ± 12,84 - - → 95,4 ± 17,61 - - → nicht zytotoxisch VO-S-E/4 101,4 ± 0,85 - - 97,8 - - nicht zytotoxisch NO-S-E/4 107,2 ± 8,20 - - → 124,4 - - → nicht zytotoxisch

PAK-S-E/4 62,8 ± 4,92 0,0058 0,0160 ↑ 60,0 kA kA ↗ schwach

zytotoxisch

Anhang 75


Tabelle 8-36: Ergebnisse des MTT-Test für die Klär anlage Bad Sassendorf.

Probe Mittelwert

Vitalität [%] Klassifizierung

p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)

p-Wert (Probe vs.

vorherige

Reinigungsstufe)*

Effekt

Negativkontrolle 100,0 ± 0,00 nicht zytotoxisch - -

Positivkontrolle 2,2 ± 2,93 stark zytotoxisch 0,0004 -

Blindprobe 95,7 ± 11,87 nicht zytotoxisch 0,8366 -

VO-BS/7 103,1 ± 13,56 nicht zytotoxisch 0,7253 -

NO-BS/7 98,9 ± 12,51 nicht zytotoxisch 0,8967 0,4182 →

NOB-BS/7 100,0 ± 2,67 nicht zytotoxisch 1,0000 0,8807 →

VO-BS-E/7 55,4 ± 17,59 stark zytotoxisch 0,0482 -

NO-BS-E/7 102,6 ± 7,35 nicht zytotoxisch 0,5970 0,0753 ↘

NOB-BS-E/7 49,5 ± 6,24 stark zytotoxisch 0,0050 0,0209 ↑

Blindprobe 77,1 ± 8,87 mäßig zytotoxisch 0,0463 -




VO-BS-E/8 68,1 ± 5,73 mäßig zytotoxisch 0,0054 -

NO-BS-E/8 103,1 ± 8,10 nicht zytotoxisch 0,7150 0,1045 ↘

NOB-BS-E/8 100,3 ± 8,10 nicht zytotoxisch 0,4469 0,5331 →

Blindprobe 85,0 ± 13,06 nicht zytotoxisch 0,1848 -




VO-BS-E/9 52,6 ± 2,06 stark zytotoxisch 0,0366 -

NO-BS-E/9 94,8 ± 5,09 nicht zytotoxisch 0,2202 0,0326 ↓

NOB-BS-E/9 106,4 ± 9,03 nicht zytotoxisch 0,1187 0,1187 →

Anhang 76


Tabelle 8-37: Ergebnisse des MTT-Test für die Verdü nnungen der zytotoxischen Proben der Kläranlage Bad Sassendorf.

Probe Verdünnung Mittelwert


Klassifizierung Eingesetzte Verdünnung

Effekt

Negativkontrolle 100 ± 0,00 - nicht zytotoxisch Positivkontrolle 5,8 ± 2,86 0,0001 stark zytotoxisch

VO-BS-E/1 1:20 36,9 ± 5,92 0,0024 stark zytotoxisch 1:40 91,4 ± 10,55 0,0550 nicht zytotoxisch x

1:80 107,1 ± 13,75

0,3873 nicht zytotoxisch

1:100 98,6 ± 14,88 0,9809 nicht zytotoxisch NOB-BS-E/1 1:20 39,2 ± 7,82 0,0051 stark zytotoxisch

1:40 42,2 ± 10,79 0,0041 stark zytotoxisch 1:80 60,9 ± 9,31 0,0021 mäßig zytotoxisch 1:100 66,4 ± 16,36 0,2149 mäßig zytotoxisch

VO-BS-E/2 1:20 43,5 ± 6,84 0,0020 stark zytotoxisch

1:40 101,3 ± 14,40

0,8254 nicht zytotoxisch x

1:80 78,6 ± 2,64 0,9604 mäßig zytotoxisch 1:100 91,2 ± 6,75 0,8088 nicht zytotoxisch

VO-BS-E/3 1:20 48,8 ± 8,86 0,0101 stark zytotoxisch 1:40 73,7 ± 11,38 0,0058 mäßig zytotoxisch 1:80 66,8 ± 10,96 0,0304 mäßig zytotoxisch 1:100 60,2 ± 9,68 0,0207 mäßig zytotoxisch

Anhang 77


Tabelle 8-38: Ergebnisse des MTT-Tests für die Klär anlage Duisburg Vierlinden (Tabelle wir auf der nächsten Seite fortgeführt).

Probe Mittelwert


p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle

)

p-Wert (Probe vs.

vorherige

Reinigungsstufe)*

Effekt


Positivkontrolle 4,5 ± 1,38 stark zytotoxisch < 0,0001 -

Blindprobe 84,7 ± 9,48 nicht zytotoxisch - -

VO-DU/2 - - - -

NOD-DU/2 101,9 ± 6,29 nicht zytotoxisch - -

NOI-DU/2 90,2 ± 11,17 nicht zytotoxisch - -

NOIB-DU/2 100,1 ± 1,70 nicht zytotoxisch - - →

VO-DU-E/2 84,2 ± 8,44 nicht zytotoxisch - -

NOD-DU-E/2 110,0 ± 4,88 nicht zytotoxisch - - →

NOI-DU-E/2 - - - -

NOIB-DU-E/2 108,1 ± 3,89 nicht zytotoxisch - -




VO-DU/3 94,9 ± 10,25 nicht zytotoxisch - -

NOD-DU/3 100,7 ± 15,49 nicht zytotoxisch - - →

NOI-DU/3 104,6 ± 8,84 nicht zytotoxisch - -



NOD-DU-E/3 97,8 ± 2,39 nicht zytotoxisch - - →

NOI-DU-E/3 94,4 ± 14,57 nicht zytotoxisch - - →

NOIB-DU-E/3 110,4 ± 12,12 nicht zytotoxisch - - →






NOI-DU/4 98,7 ± 11,57 nicht zytotoxisch - - →



Anhang 78


Probe Mittelwert


p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)

p-Wert (Probe vs.

vorherige

Reinigungsstufe)*

Effekt

NOD-DU-E/4 67,8 ± 16,05 mäßig zytotoxisch 0,0126 0,0425 ↑

NOI-DU-E/4 79,1 ± 11,67 mäßig zytotoxisch 0,0480 0,0002 ↑

NOIB-DU-E/4 73,4 ± 7,71 mäßig zytotoxisch 0,137 0,0719 →





NOD-DU/5 87,3 ± 1,13 nicht zytotoxisch - - ↓

NOI-DU/5 57,5 ± 14,51 stark zytotoxisch 0,0157 0,0219 ↑

NOIB-DU/5 85,0 ± 14,97 nicht zytotoxisch - 0,0249 ↓

VO-DU-E/5 66,4 ± 15,18 mäßig zytotoxisch 0,0619 -

NOD-DU-E/5 67,4 ± 4,38 mäßig zytotoxisch 0,2609 0,3090 →

NOI-DU-E/5 89,6 ± 13,32 nicht zytotoxisch - 0,0338 ↓

NOIB-DU-E/5 76,2 ± 9,82 mäßig zytotoxisch 0,0522 0,0330 ↑






NOI-DU/6 91,1 ± 9,76 nicht zytotoxisch - - →


VO-DU-E/6 43,9 ± 3,96 stark zytotoxisch 0,0008 -

NOD-DU-E/6 88,1 ± 17,11 nicht zytotoxisch - 0,0577 ↘

NOI-DU-E/6 63,8 ± 8,99 mäßig zytotoxisch 0,0200 0,0426 ↓

NOIB-DU-E/6 86,4 ± 8,11 nicht zytotoxisch - 0,0028 ↓

↓ Effekt signifikant verringert; ↑ Effekt signifikant erhöht; → keine signifikante Veränderung, ↘ Effekt verringert, aber nicht signifikant.

Anhang 79


Tabelle 8-39: Ergebnisse des MTT-Test für die Verdü nnungen der zytotoxischen Proben der Kläranlage Duisburg-Vierlinden.




Effekt

Negativkontrolle 100 ± 0,00 - nicht zytotoxisch Positivkontrolle 4,9 ± 1,70 < 0,0001 stark zytotoxisch Blindprobe/3 1:20 76,6 ± 8,53 0,0478 stark zytotoxisch

1:40 98,9 ± 12,41 0,6953 nicht zytotoxisch x 1:80 93,2 ± 8,80 0,0839 nicht zytotoxisch 1:100 67,6 ± 12,76 0,0140 nicht zytotoxisch

NOD-DU-E/4 1:20 95,2 ± 10,49 0,5137 nicht zytotoxisch x 1:40 107,3 ± 5,51 0,1485 nicht zytotoxisch 1:80 95,6 ± 4,41 0,2237 nicht zytotoxisch 1:100 90,1 ± 9,86 0,2230 nicht zytotoxisch

NOI-DU-E/4 1:20 94,4 ± 2,83 0,7561 nicht zytotoxisch x 1:40 98,9 ± 4,93 0,7302 nicht zytotoxisch 1:80 94,8 ± 7,55 0,3554 nicht zytotoxisch 1:100 91,1 ± 2,80 0,0312 nicht zytotoxisch

Blindprobe/4 1:20 91,4 ± 10,71 0,2987 nicht zytotoxisch x 1:40 95,1 ± 16,46 0,6554 nicht zytotoxisch 1:80 90,9 ± 7,43 0,1681 nicht zytotoxisch 1:100 85,5 ± 9,68 0,0312 nicht zytotoxisch

NOI-DU/4 1:20 118,4 ± 12,1 0,1190 nicht zytotoxisch x 1:40 105,8 ± 9,20 0,3847 nicht zytotoxisch

1:80 115,6 ± 16,70

0,2469 nicht zytotoxisch

1:100 91,0 ± 11,8 0,3173 nicht zytotoxisch VO-DU-E/5 1:20 96,3 ± 7,76 0,4957 nicht zytotoxisch x

1:40 127,4 ± 8,08 0,0279 nicht zytotoxisch 1:80 106,6 ± 6,62 0,3085 nicht zytotoxisch 1:100 81,9 ± 4,29 0,0107 nicht zytotoxisch

NOIB-DU-E/5 1:20 95,9 ± 8,85 0,5094 nicht zytotoxisch x 1:40 96,3 ± 11,30 0,6307 nicht zytotoxisch 1:80 91,7 ± 10,29 0,1681 nicht zytotoxisch 1:100 98,1 ± 8,38 0,7280 nicht zytotoxisch

NOD-DU-E/5 1:20 67,6 ± 7,64 0,0180 mäßig

zytotoxisch


VO-DU-E/6 1:20 103,3 ± 6,04 0,6437 nicht zytotoxisch x 1:40 97,5 ± 6,30 0,4963 nicht zytotoxisch 1:80 93,5 ± 10,75 0,7261 nicht zytotoxisch 1:100 94,6 ± 6,46 0,2849 nicht zytotoxisch

NOI-DU-E/6 1:20 73,1 ± 4,17 0,0040 mäßig

zytotoxisch


Anhang 80


Tabelle 8-40: Ergebnisse des MTT-Tests für die Klär anlage Schwerte.

Probe Mittelwert




Reinigungsstufe)*

Effekt

Negativkontrolle 100,0 ± 0,00 nicht zytotoxisch - - Positivkontrolle 6,6 ± 5,29 stark zytotoxisch 0,0033 -

Blindprobe 71,6 ± 18,90 mäßig zytotoxisch 0,0475 - PS-S/1 100,1 ± 8,84 nicht zytotoxisch - - VO-S/1 120,0 ± 6,88 nicht zytotoxisch - - → NO-S/1 82,0 ± 5,16 nicht zytotoxisch - - ↓

PS-S-E/1 63,2 ± 1,20 mäßig zytotoxisch 0,0219 - VO-S-E/1 81,8 ± 16,05 nicht zytotoxisch - 0,0834 ↗ NO-S-E/1 81,1 ± 1,70 nicht zytotoxisch - - →


PS-S/2 79,0 ± 4,24 mäßig zytotoxisch 0,0134 - VO-S/2 87,1 ± 4,76 nicht zytotoxisch - 0,0274 ↓ NO-S/2 88,5 ± 11,55 nicht zytotoxisch - - →

PS-S-E/2 55,6 ± 7,33 stark zytotoxisch 0,0090 - VO-S-E/2 69,7 ± 12,10 mäßig zytotoxisch 0,0491 0,1713 → NO-S-E/2 72,9 ± 3,40 mäßig zytotoxisch 0,0052 0,6305 →


PS-S/3 93,3 ± 5,00 nicht zytotoxisch - - VO-S/3 80,3 ± 8,90 nicht zytotoxisch - - NO-S/3 86,3 ± 9,44 nicht zytotoxisch - - →

PS-S-E/3 60,1 ± 14,72 mäßig zytotoxisch 0,0425 - VO-S-E/3 73,5 ± 2,57 mäßig zytotoxisch 0,0031 0,2592 ↘ NO-S-E/3 66,2 ± 9,58 mäßig zytotoxisch 0,0257 0,3603 ↗


VO-S/4 88,6 ± 6,51 nicht zytotoxisch - - NO-S/4 95,7 ± 12,61 nicht zytotoxisch - 0,9194 →

PAK-S/4 110,1 ± 12,70

nicht zytotoxisch - 0,1853 →

VO-S-E/4 65,5 ± 4,10 mäßig zytotoxisch 0,0047 - NO-S-E/4 51,7 ± 10,11 stark zytotoxisch 0,0448 0,4537 → PAK-S-E/4 64,3 ± 9,35 mäßig zytotoxisch 0,0222 0,7313 →

Anhang 81


Tabelle 8-41: Ergebnisse des MTT-Test für die Verdü nnungen der zytotoxischen Proben der Kläranlage Schwerte.




Effekt

Negativkontrolle 100 ± 0,00 - nicht zytotoxisch Positivkontrolle 6,2 ± 3,2 0,0002 stark zytotoxisch

PS-S-E/1 1:20 79,4 ± 13,06 0,1116 stark zytotoxisch 1:40 97,5 ± 3,82 0,2295 nicht zytotoxisch x 1:80 98,5 ± 12,05 0,8526 nicht zytotoxisch 1:100 92,5 ± 2,69 0,0207 nicht zytotoxisch

PS-S-E/2 1:20 68,6 ± 5,91 0,0116 mäßig zytotoxisch 1:40 79,0 ± 1,32 0,0013 mäßig zytotoxisch 1:80 98,5 ± 9,98 0,8190 nicht zytotoxisch x 1:100 79,1 ± 4,95 0,0182 mäßig zytotoxisch

VO-S-E/2 1:20 80,6 ± 8,25 0,0553 nicht zytotoxisch 1:40 86,0 ± 3,97 0,0256 nicht zytotoxisch x 1:80 90,2 ± 10,82 0,2394 nicht zytotoxisch 1:100 83,1 ± 13,37 0,1596 nicht zytotoxisch

NO-S-E/2 1:20 75,6 ± 10,02 0,0518 mäßig zytotoxisch 1:40 83,2 ± 3,04 0,0054 nicht zytotoxisch x 1:80 77,2 ± 9,60 0,0542 mäßig zytotoxisch 1:100 79,7 ± 6,30 0,0307 mäßig zytotoxisch

PS-S-E/3 1:20 83,5 ± 5,26 0,0321 nicht zytotoxisch 1:40 98,5 ± 11,34 0,8366 nicht zytotoxisch x 1:80 99,9 ± 13,82 0,9882 nicht zytotoxisch 1:100 98,1 ± 9,63 0,7690 nicht zytotoxisch

VO-S-E/3 1:20 75,8 ± 4,45 0,0056 mäßig zytotoxisch 1:40 82,1 ± 17,04 0,1229 nicht zytotoxisch 1:80 73,6 ± 10,32 0,0246 mäßig zytotoxisch 1:100 79,0 ± 10,47 0,0390 mäßig zytotoxisch

NO-S-E/3 1:20 69,8 ± 6,38 0,0146 mäßig zytotoxisch 1:40 62,5 ± 10,87 0,0269 mäßig zytotoxisch 1:80 75,9 ± 15,05 0,0262 mäßig zytotoxisch 1:100 90,8 ± 10,11 0,2544 nicht zytotoxisch x

PAK-S-E/4 1:20 59,1 ± 14,23 0,0381 mäßig zytotoxisch 1:40 76,8 ± 7,42 0,0570 mäßig zytotoxisch 1:80 88,3 ± 4,53 0,0237 nicht zytotoxisch x 1:100 83,8 ± 8,49 0,0812 nicht zytotoxisch

VO-S-E/4 1:20 72,2 ± 2,42 0,0026 mäßig zytotoxisch 1:40 73,5 ± 5,73 0,0076 mäßig zytotoxisch 1:80 76,5 ± 11,31 0,0691 mäßig zytotoxisch 1:100 75,9 ± 16,45 0,1252 mäßig zytotoxisch

NO-S-E/4 1:20 63,4 ± 7,65 0,0142 mäßig zytotoxisch 1:40 67,2 ± 10,18 0,0645 mäßig zytotoxisch 1:80 65,8 ± 10,75 0,0161 mäßig zytotoxisch 1:100 64,6 ± 7,57 0,0228 mäßig zytotoxisch

Anhang 82


Tabelle 8-42: Ergebnisse des ER Calux ® für die Kläranlage Bad Sassendorf.

Probe EEQ

[ng/L]

p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)


Reinigungsstufe)*

Eingesetzte Verdünnung

Effekt

Negativkontrolle < LOD - - 1:10 Blindprobe < LOD - - 1:10 VO-BS/7 < LOD - - 1:10 NO-BS/7 < LOD - - 1:10 →

NOB-BS/7 < LOD - - 1:10 → VO-BS-E/7 0,5 ± 0,79 0,4226 1:40

NO-BS-E/7 1,09 ± 0,38

0,0234 0,4045 1:10

↗

NOB-BS-E/7 toxisch - - - -

Blindprobe < LOD - - 1:10 VO-BS/8 < LOD - - 1:10 → NO-BS/8 < LOD - - 1:10 →

NOB-BS/8 < LOD - - 1:10 → VO-BS-E/8 0,3 ± 0,47 0,4226 - 1:40 NO-BS-E/8 < LOD - 0,4226 1:10 ↘

NOB-BS-E/8 9,9 ± 3,55 0,0408 0,0408 1:10 ↑

Blindprobe < LOD - - 1:10 VO-BS/9 < LOD - - 1:10 NO-BS/9 < LOD - - 1:10 →

NOB-BS/9 < LOD - - 1:10 → VO-BS-E/9 toxisch - - - - NO-BS-E/9 1,2 ± 1,10 0,2029 - 1:10

NOB-BS-E/9 5,8 ± 1,73 0,0285 0,0099 1:40 ↑

Anhang 83


Tabelle 8-43: Ergebnisse des ER Calux ® für die Kläranlage Duisburg-Vierlinden.

Probe EEQ

[ng/L]

p-Wert (Probe vs.

Negativkontrolle)


Reinigungsstufe)*


Effekt

Negativkontrolle < LOD - - 1:10 Blindprobe < LOD - - 1:40 VO-DU/2 < LOD - - -

NOD-DU/2 < LOD - - 1:10 → NOI-DU/2 < LOD - - 1:10 →

NOIB-DU/2 < LOD - - 1:10 → VO-DU-E/2 0,5 ± 0,47 0,2142 - 1:10

NOD-DU-E/2 < LOD - 0,2142 1:10 ↘ NOI-DU-E/2 - - - -

NOIB-DU-E/2 < LOD - 1:10

Blindprobe < LOD - - 1:40 VO-DU/3 < LOD - - 1:10


NOIB-DU/3 < LOD - - 1:10 → VO-DU-E/3 0,5 ± 0,47 0,1835 - 1:10

NOD-DU-E/3 < LOD - 0,1835 1:10 ↓ NOI-DU-E/3 0,7 ± 0,42 0,0881 0,1835 1:10 ↗

NOIB-DU-E/3 0,3 ± 0,27 0,2079 0,1074 1:10 ↘



NOIB-DU/4 < LOD - - 1:10 → VO-DU-E/4 7,1 ± 1,15 0,0042 - 1:10

NOD-DU-E/4 < LOD - 0,0042 1:10 ↓ NOI-DU-E/4 < LOD - 0,0042 1:10 ↓

NOIB-DU-E/4 0,7 ± 0,96 0,2254 0,2254 1:10 ↗



NOIB-DU/5 < LOD - - 1:10 → VO-DU-E/5 27,8 ± 18,34 0,0138 - 1:20

NOD-DU-E/5 < LOD - 0,0138 1:10 ↓ NOI-DU-E/5 < LOD - 0,0138 1:10 ↓

NOIB-DU-E/5 < LOD - - 1:10 →



NOIB-DU/6 < LOD - - 1:10 → VO-DU-E/6 15,2 ± 20,02 0,2026 - 1:20

NOD-DU-E/6 < LOD - 0,2026 1:40 ↘ NOI-DU-E/6 < LOD - 0,2026 1:10 ↘

NOIB-DU-E/6 < LOD - - 1:20 →

Anhang 84


Tabelle 8-44: Ergebnisse des A-YES Assay für die Kl äranlage Duisburg-Vierlinden.

Probenbezeichnung A-YES [ng EEQ/L]* Messunsicherheit [%] Effekt

VO-DU/2 < 13 n/a

NOIB-DU/2 n.d. n.d.

NOD-DU/2 < 13 n/a →

NOI-DU/2 < 13 n/a →

VO-DU-E/2 0,27 14,8

NOIB-DU-E/2 n.d. n.d.

NOD-DU-E/2 < 0,17 n/a ↓

NOI-DU-E/2 < 0,17 n/a ↓

VO-DU/3 < 13 n/a →

NOIB-DU/3 < 13 n/a →

NOD-DU/3 < 13 n/a →

NOI-DU/3 < 13 n/a →

VO-DU-E/3 0,24 17,5

NOIB-DU-E/3 0,23 19,7 ↘

NOD-DU-E/3 < 0,17 nn ↓

NOI-DU-E/3 0,40 15,5 ↗

VO-DU/4 < 3 n/a


NOD-DU/4 < 3 n/a →

NOI-DU/4 < 3 n/a →

VO-DU-E/4 0,10 5,2

NOIB-DU-E/4 0,07 7,4 ↘

NOD-DU-E/4 < 0,04 nn ↓

NOI-DU-E/4 0,05 15,8 ↘

VO-DU/5 < 3 n/a


NOD-DU/5 < 3 n/a →

NOI-DU/5 < 3 n/a →

VO-DU-E/5 0,10 7,5

NOIB-DU-E/5 0,06 11,6 ↘

NOD-DU-E/5 0,08 8,9 ↘

NOI-DU-E/5 0,07 9,8 ↘

VO-DU/6 < 3 n/a


NOD-DU/6 < 3 n/a →

NOI-DU/6 < 3 n/a →

VO-DU-E/6 0,13 6,4

NOIB-DU-E/6 0,06 11,8 ↘

NOD-DU-E/6 0,04 < x < 0,05 nn ↘

NOI-DU-E/6 0,06 12,1 →

Anhang 85


Tabelle 8-45: Ergebnisse des ER Calux ® für die Kläranlage Schwerte.

Probe EEQ

[ng/L] p-Wert (Probe vs. Negativkontrolle)


Reinigungsstufe)*


Effekt

Negativkontrolle < LOD - - 1:10 Blindprobe < LOD - - 1:20

PS-S/1 < LOD - - 1:10 VO-S/1 < LOD - - 1:10 → NO-S/1 < LOD - - 1:10 →

PS-S-E/1 13,4 ± 7,62 0,0933 1:80 VO-S-E/1 < LOD 0,4226 0,0933 1:10 ↘ NO-S-E/1 1,5 ± 0,42 0,0244 0,0244 1:10 ↑

Blindprobe < LOD - - 1:10


PS-S-E/2 8,3 ± 4,10 0.0719 - 1:80 VO-S-E/2 16,4 ± 9,97 0,1037 0,1448 1:40 ↗ NO-S-E/2 2,2 ± 0,82 0,1335 0,0975 1:10 ↘



PS-S-E/3 42,1 ± 25,85 0,1062 - 1:40 VO-S-E/3 23,4 ± 10,23 0,0581 0,3652 1:10 ↘ NO-S-E/3 1,6 ± 0,27 0,0078 0,0682 1:80 ↘


VO-S/4 < LOD - - 1:10 NO-S/4 < LOD - - 1:10 PAK-S/4 < LOD - - 1:10 VO-S-E/4 19,7 ± 7,89 0,0253 - 1:20 NO-S-E/4 21,1 ± 7,89 0,0227 0,0006 1:20 ↑ PAK-S-E/4 1,4 ± 0,38 0,0111 0,0236 1:80 ↓

Anhang 86


Die Berechnung des Change Index für die Ergebnisse des PAN I Tests erfolgte mit der bereits beschriebe nen Formel. Die Bewertung

wurde nach folgendem Schema vorgenommen:

LDHe XTT, NR, SRB Change Index Bewertung Change Index Bewertung

< 0,75 Verringerung des Effekts < 0,75 Erhöhung des Effekts 0,75 – 1,25 keine Veränderung 0,75 – 1,25 keine Veränderung

> 1,25 Erhöhung des Effekts > 1,25 Verringerung des Effekts

Tabelle 8-46: Change Index (CI) für die Ergebnisse des PAN I Tests der Kläranlage Bad Sassendorf.

LDHe XTT NR SRB

Probe CI bezogen

auf VO

CI bezogen auf vorherige

Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe VO-BS/7 - - - - - - - - NO-BS/7 3,53 - 0,96 - 0,96 - 0,91 -

NOB-BS/7 3,77 1,07 0,93 0,97 0,95 1,00 0,96 1,05 VO-BS-E/7 - - - - - - - - NO-BS-E/7 kA - 1,41 - 1,91 - 2,35 -

NOB-BS-E/7 kA 2,35 1,48 1,05 1,81 0,95 2,28 0,97

VO-BS/8 - - - - - - - - NO-BS/8 1,91 - 1,00 - 0,91 - 0,99 -

NOB-BS/8 0,55 0,29 1,06 1,06 0,92 1,01 0,98 0,99 VO-BS-E/8 - - - - - - - - NO-BS-E/8 kA - 1,37 - 1,87 - 2,03 -

NOB-BS-E/8 kA 0,34 1,48 1,08 1,57 0,84 2,14 1,05

VO-BS/9 - - - - - - - - NO-BS/9 39,68 - 0,94 - 0,79 - 0,92 -

NOB-BS/9 8,64 0,22 0,98 1,05 0,84 1,06 1,03 1,12 VO-BS-E/9 - - - - - - - - NO-BS-E/9 0,45 - 1,93 - 3,00 - 3,37 -

NOB-BS-E/9 0,22 0,50 1,92 0,99 2,83 0,94 3,15 0,93

Anhang 87


Tabelle 8-47: Change Index (CI) für die Gesamtergeb nisse des PAN I Tests der Kläranlage Bad Sassendorf .

LDHe XTT NR SRB

Probe CI bezogen

auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe VO-BS - - - - - - - - NO-BS 3,62 - 0,97 - 0,88 - 0,94 -

NOB-BS 1,41 0,39 0,99 1,03 0,90 1,02 0,99 1,05 VO-BS-E - - - - - - - - NO-BS-E 1,79 - 1,53 - 2,18 - 2,50 -

NOB-BS-E 0,82 0,46 1,59 1,04 1,98 0,91 2,46 2,46

Anhang 88


Tabelle 8-48: Change Index (CI) für die Ergebnisse des PAN I Tests der Kläranlage Duisburg-Vierlinden (Tabelle wir auf der nächsten Seite fortgeführt).

LDHe XTT NR SRB

Probe CI bezogen

auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe VO-DU/2 keine Probe - keine Probe - keine Probe - keine Probe -

NOIB-DU/2 kA - kA - kA - kA - NOI-DU/2 kA 0,94 kA 1,05 kA 1,01 kA 1,09 NOD-DU/2 kA - kA - kA - kA - VO-DU-E/2 - - - - - - - -

NOIB-DU-E/2 0,00 - 1,00 - 1,07 - 1,24 - NOI-DU-E/2 keine Probe kA keine Probe kA keine Probe kA keine Probe kA NOD-DU-E/2 2,58 - 0,96 - 1,12 - 1,16 -

VO-DU/3 - - - - - - - - NOIB-DU/3 1,77 - 1,07 - 1,53 - 0,99 - NOI-DU/3 3,72 1,93 1,07 1,00 1,36 0,89 0,99 1,00 NOD-DU/3 4,11 - 1,01 - 1,53 - 0,97 - VO-DU-E/3 - - - - - - - -

NOIB-DU-E/3 1,07 - 1,25 - 2,17 - 3,34 - NOI-DU-E/3 0,35 0,32 1,03 0,83 1,03 0,48 1,68 0,50 NOD-DU-E/3 0,50 - 1,51 - 2,12 - 3,04 -




Anhang 89


LDHe XTT NR SRB

Probe CI bezogen

auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe NOIB-DU-E/5 0,62 - 1,17 - 1,10 - 1,14 - NOI-DU-E/5 0,16 0,26 1,35 1,16 1,07 0,97 1,16 1,01 NOD-DU-E/5 1,40 - 1,13 - 1,07 - 1,19 -

VO-DU/6 - - - - - - - - NOIB-DU/6 0,00 - 1,00 - 0,83 - 0,77 - NOI-DU/6 1,02 kA 1,01 1,01 0,85 1,03 0,95 1,23 NOD-DU/6 0,50 - 1,08 - 0,83 - 0,92 - VO-DU-E/6 - - - - - - - -


Tabelle 8-49: Change Index (CI) für die Gesamtergeb nisse des PAN I Tests der Duisburg-Vierlinden.

LDHe XTT NR SRB

Probe CI bezogen

auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe VO-DU - - - - - - - -

NOIB-DU 0,96 - 1,04 - 1,03 - 0,93 - NOI-DU 1,04 1,08 1,04 1,00 1,08 1,05 1,02 1,10 NOD-DU 1,00 - 1,04 - 1,05 - 0,95 - VO-DU-E - - - - - - - -

NOIB-DU-E 1,25 - 1,15 - 1,24 - 1,36 - NOI-DU-E 0,85 0,68 0,93 0,81 1,09 0,88 1,18 0,87 NOD-DU-E 1,78 - 1,14 - 1,25 - 1,34 -

Anhang 90


Tabelle 8-50: Change Index (CI) für die Ergebnisse des PAN I Tests der Kläranlage Schwerte.

LDHe XTT NR SRB

Probe CI bezogen

auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe PS-S/1 - - - - - - - VO-S/1 0,50 - 0,95 - 0,86 - 0,98 - NO-S/1 0,93 1,87 1,05 1,11 0,99 1,15 1,06 1,08

PS-S-E/1 - - - - - - VO-S-E/1 1,16 - 0,56 - 0,83 - 0,77 - NO-S-E/1 1,37 1,37 0,63 1,14 1,05 1,27 1,06 1,39

PS-S/2 - - - - - - VO-S/2 0,23 - 0,87 0,98 - 0,88 - NO-S/2 1,44 6,36 1,07 1,24 0,90 0,91 0,79 0,90

PS-S-E/2 - - - - - - VO-S-E/2 1,06 - 0,91 1,41 - 1,69 - NO-S-E/2 1,35 1,28 1,02 1,12 1,49 1,06 0,97 0,97

PS-S/3 - - - - - - VO-S/3 0,00 - 1,52 - 0,90 - 0,90 - NO-S/3 3,79 kA 1,44 0,94 0,96 1,06 0,92 1,02

PS-S-E/3 - - - - - - VO-S-E/3 6,33 - 0,98 - 1,15 - 1,30 - NO-S-E/3 4,60 0,73 0,97 0,97 1,30 1,13 1,00 1,00

VO-S/4 - - - - - - - NO-S/4 2,50 - 1,00 - 1,05 - 0,92 - PAK-S/4 2,63 1,05 1,00 1,00 1,09 1,04 0,94 1,02 VO-S-E/4 - - - - - - - NO-S-E/4 1,47 - 1,06 - 1,06 - 1,27 - PAK-S-E/4 0,47 0,32 0,84 0,79 0,62 0,59 0,61 0,48

Anhang 91


Tabelle 8-51: Change Index (CI) für die Gesamtergeb nisse des PAN I Tests der Kläranlage Schwerte.

LDHe XTT NR SRB

Probe CI bezogen

auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe PS-S/1 - - - - - - - - VO-S/1 0,21 - 1,09 - 0,92 - 0,95 - NO-S/1 1,62 7,61 1,16 1,06 0,95 1,04 0,93 0,99

PS-S-E/1 - - - - - - - - VO-S-E/1 2,45 - 0,86 - 1,14 - 1,21 - NO-S-E/1 2,70 1,10 1,06 1,06 1,28 1,12 1,38 1,14

Anhang 92


Tabelle 8-52: Change Index (CI) für die Ergebnisse des MTT-Tests der Kläranlage Bad Sassendorf.

Probe CI bezogen

auf VO


Reinigungsstufe VO-BS/7 - - NO-BS/7 0,96 -

NOB-BS/7 0,97 1,01 VO-BS-E/7 - - NO-BS-E/7 1,85 -

NOB-BS-E/7 0,89 0,48

VO-BS/8 - - NO-BS/8 0,90 -


NOB-BS-E/8 1,47 0,97

VO-BS/9 - - NO-BS/9 1,10 -


NOB-BS-E/9 2,02 1,12

Tabelle 8-53: Change Index (CI) für die Gesamtergeb nisse des MTT-Tests der Kläranlage Bad Sassendorf.

Probe Anzahl

einbezogener Proben

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe VO-BS 3 - - NO-BS 3 0,98 -

NOB-BS 3 1,02 1,04 VO-BS-E 3 - - NO-BS-E 3 1,71 -

NOB-BS-E 3 1,45 0,85

Anhang 93


Tabelle 8-54: Change Index (CI) für die Ergebnisse des MTT-Tests der Kläranlage Duisburg-Vierlinden.

Probe CI bezogen

auf VO


Reinigungsstufe VO-DU/2 keine Probe -

NOIB-DU/2 kA - NOI-DU/2 kA 0,90 NOD-DU/2 kA - VO-DU-E/2 - -

NOIB-DU-E/2 1,28 - NOI-DU-E/2 keine Probe kA NOD-DU-E/2 1,31 -

VO-DU/3 - - NOIB-DU/3 1,41 - NOI-DU/3 1,10 0,78 NOD-DU/3 1,06 - VO-DU-E/3 - -

NOIB-DU-E/3 1,11 - NOI-DU-E/3 0,95 0,86 NOD-DU-E/3 0,99 -







Anhang 94


Tabelle 8-55: Change Index (CI) für die Gesamtergeb nisse des MTT-Tests der Kläranlage Duisburg-Vierlinden.

Probe Anzahl

einbezogener Proben

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe VO-DU 4 - -

NOIB-DU 5 0,99 - NOI-DU 5 0,97 0,98 NOD-DU 5 0,88 - VO-DU-E 5 - -

NOIB-DU-E 5 1,15 - NOI-DU-E 5 1,09 0,95 NOD-DU-E 4 1,04 -

Anhang 95


Tabelle 8-56: Change Index (CI) für die Ergebnisse des MTT-Tests der Kläranlage Schwerte.

Probe CI bezogen

auf PS


Reinigungsstufe PS-S/1 - - VO-S/1 - 1,20 NO-S/1 0,82 0,68

PS-S-E/1 VO-S-E/1 1,29 NO-S-E/1 1,28 0,99

PS-S/2 - - VO-S/2 - 1,10 NO-S/2 1,12 1,02

PS-S-E/2 - - VO-S-E/2 - 1,25 NO-S-E/2 1,31 1,05

PS-S/3 - - VO-S/3 - 0,86 NO-S/3 0,93 1,07

PS-S-E/3 - - VO-S-E/3 - 1,22 NO-S-E/3 1,10 0,90

VO-S/4 - - NO-S/4 0,87 1,08 PAK-S/4 - 1,15 VO-S-E/4 - - NO-S-E/4 0,80 0,79 PAK-S-E/4 1,25

Tabelle 8-57: Change Index (CI) für die Ergebnisse des MTT-Tests der Kläranlage Schwerte.

Probe Anzahl

einbezogener Proben

CI bezogen auf PS


Reinigungsstufe PS-S 3 - - VO-S 4 1,04 - NO-S 4 0,97 0,94

PS-S-E 3 - - VO-S-E 4 1,22 - NO-S-E 4 1,14 0,94

Anhang 96


Die Berechnung des Change Index für die Ergebnisse des ER Calux® erfolgte mit der bereits

beschriebenen Formel. Bei Werten < LOD wurde der LOD als Grundlage für die Berechnung

genommen. Die Bewertung wurde nach folgendem Schema vorgenommen:

CI < 0,75 Verringerung des Effekts

CI 0,75 – 1,25 keine Veränderung

CI > 1,25 Erhöhung des Effekts

Tabelle 8-58: Change Index (CI) für die Ergebnisse des ER Calux ® der Kläranlage Bad Sassendorf; LOD = 0,15 ng/L(kA = keine Angaben) .

Probe CI bezogen

auf VO


Reinigungsstufe VO-BS/7 - - NO-BS/7 1,00 -


NOB-BS-E/7 toxisch kA

VO-BS/8 - - NO-BS/8 1,00 -


NOB-BS-E/8 36,33 65,94

VO-BS/9 - - NO-BS/9 1,00 -

NOB-BS/9 1,00 1,00 VO-BS-E/9 toxisch kA NO-BS-E/9 kA -

NOB-BS-E/9 kA 4,92

Tabelle 8-59: Change Index (CI) für die Gesamtergeb nisse des ER Calux ® der Kläranlage Bad Sassendorf; LOD = 0,15 ng/L.

Probe Anzahl

einbezogene Proben

CI bezogen auf VO


Reinigungsstufe VO-BS 3 - - NO-BS 3 1,00 -

NOB-BS 3 1,00 1,00 VO-BS-E 2 - - NO-BS-E 3 2,22 -

NOB-BS-E 2 21,63 9,74

Anhang 97


Tabelle 8-60: Change Index (CI) für die Ergebnisse des ER Calux ® der Kläranlage Duisburg-Vierlinden; LOD = 0,2 ng/L (kA = keine Ang aben).

Probe CI bezogen

auf VO


Reinigungsstufe VO-DU/2 keine Probe -

NOIB-DU/2 kA - NOI-DU/2 kA 1,00 NOD-DU/2 kA - VO-DU-E/2 - -

NOIB-DU-E/2 0,16 - NOI-DU-E/2 keine Probe kA NOD-DU-E/2 0,16 -









Anhang 98


Tabelle 8-61: Change Index (CI) für die Ergebnisse des A-YES Assay der Kläranlage Duisburg-Vierlinden.

Probe CI bezogen

auf VO


Reinigungsstufe VO-DU/2 - -

NOIB-DU/2 keine Probe - NOI-DU/2 1,0 1,00 NOD-DU/2 1,0 - VO-DU-E/2 - -

NOIB-DU-E/2 keine Probe - NOI-DU-E/2 0,63 kA NOD-DU-E/2 0,63 -

VO-DU/3 - -

NOIB-DU/3 1,00 - NOI-DU/3 1,00 1,00 NOD-DU/3 1,00 - VO-DU-E/3 - -


VO-DU/4 - -



VO-DU/5 - -



VO-DU/6 - -



Anhang 99


Tabelle 8-62: Change Index (CI) für die Gesamtergeb nisse des ER Calux ® der Kläranlage Duisburg-Vierlinden; LOD = 0,2 ng/L.

Probe Anzahl

einbezogene Proben

CI bezogen auf VO





Tabelle 8-63: Change Index (CI) für die Gesamtergeb nisse des A-YES Assay der Kläranlage Duisburg-Vierlinden.

Probe Anzahl

einbezogene Proben

CI bezogen auf VO





Anhang 100


Tabelle 8-64: Change Index (CI) für die Ergebnisse des ER Calux ® der Kläranlage Schwerte; LOD = 0,2 ng/L.

Probe CI bezogen

auf PS


Reinigungsstufe PS-S/1 - - VO-S/1 1,00 - NO-S/1 1,00 1,00

PS-S-E/1 - - VO-S-E/1 0,01 - NO-S-E/1 0,11 7,50

PS-S/2 - - VO-S/2 1,00 - NO-S/2 1,00 1,00

PS-S-E/2 - - VO-S-E/2 1,98 - NO-S-E/2 0,27 0,13

PS-S/3 - - VO-S/3 1,00 - NO-S/3 1,00 1,00

PS-S-E/3 - - VO-S-E/3 toxisch - NO-S-E/3 0,04 kA

Probe CI bezogen

auf VO


Reinigungsstufe VO-S/4 - - NO-S/4 1,00 - PAK-S/4 1,00 1,00 VO-S-E/4 - - NO-S-E/4 toxisch kA PAK-S-E/4 toxisch kA

Tabelle 8-65: Change Index (CI) für die Ergebnisse des ER Calux ® der Kläranlage Schwerte; LOD = 0,2 ng/L.

Probe CI bezogen

auf PS


Reinigungsstufe PS-S/1 - - VO-S/1 0,03 - NO-S/1 0,04 1,49

PS-S-E/1 - - VO-S-E/1 0,39 - NO-S-E/1 0,08 0,21

Anhang 101


8.6.2 Ergebnistabellen Ames-Test

Im Folgenden werden die Ergebnisse des Salmonellen-Mutagenitätstests der Proben aus

den Klärwerken Bad Sassendorf, Duisburg-Vierlinden und Schwerte aufgeführt. Die Tabellen

beinhalten die arithmetischen Mittelwerte aus je drei 3 Versuchsansätzen (N = 3).

Abweichungen (N = 2) gab es bei den Proben BS-E/7-blank (TA 98 – S9), BS-E/8-blank

(TA 98 – S9), BS-E/9-blank (TA 98/TA 100 je – S9), VO-DU-E/6 (TA 98 ± S9) sowie bei den

Kontrollen des Stammes TA 100 (+ S9) der Proben VO-S/1, NO-S/1, VO-S/2 und NO-S/2.

Aufgrund von nicht ausreichendem Extraktvolumen mussten die Wiederholungen der Probe

VO-DU-E/4 im reduzierten Umfang durchgeführt werden (1. Wiederholung nur Stamm TA 98,

2. Wiederholung mit N = 2 bzw. für Stamm TA 98, VF 16 mit N = 1).

Bedeutung der Abkürzungen:

• VF = Verdünnungsfaktor

• ± S9 = mit/ohne Zugabe von Rattenleberenzym (S9-Mix)

• AM = arithmetischer Mittelwert

• SA = Standardabweichung

ID = Induktionsdifferenz

• MR = Mutationsrate

• NK = Negativkontrolle

• PK = Positivkontrolle

• n.u. = nicht untersucht

Anhang 102


Bad Sassendorf

Tabelle 8-66: Untersuchung der Abwasserprobe (Zulau f Ozonung) der Kläranlage Bad Sassendorf (Versuchse instellung VO-BS/7).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 7,38 0,00 1,00 32,03 8,25 0,00 1,00 136,80 13,14 0,00 1,00 122,08 5,95 0,00 1,00 0,01 29,44 10,58 -3,46 0,89 35,93 9,57 3,90 1,12 138,96 28,92 2,16 1,02 126,58 15,55 4,50 1,04 0,02 25,54 4,56 -7,36 0,78 38,10 16,34 6,06 1,19 142,86 1,30 6,06 1,04 106,33 8,86 -15,75 0,87 0,04 38,10 7,94 5,19 1,16 38,10 11,05 6,06 1,19 163,64 14,64 26,84 1,20 125,74 10,77 3,66 1,03 0,08 32,47 2,60 -0,43 0,99 39,83 6,41 7,79 1,24 141,13 14,77 4,33 1,03 111,39 17,03 -10,69 0,91 0,20 32,90 6,41 0,00 1,00 34,63 7,50 2,60 1,08 103,90 28,66 -32,90 0,76 109,28 3,19 -12,80 0,90 PK 550,65 25,08 517,75 16,74 1754,55 92,32 1722,51 54,77 576,19 40,54 439,39 4,21 1506,93 273,93 1384,85 12,34

Tabelle 8-67: Untersuchung der Abwasserprobe (Abla uf Ozonung) der Kläranlage Bad Sassendorf (Versuchs einstellung NO-BS/7).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 23,38 6,49 0,0 1,00 22,51 7,94 0,0 1,00 180,95 1,98 0,0 1,00 122,08 5,95 0,00 1,00 0,01 23,38 1,30 0,0 1,00 16,88 2,60 -5,6 0,75 183,12 32,47 2,2 1,01 107,79 11,10 -14,29 0,88 0,02 26,41 10,09 3,0 1,13 22,08 9,09 -0,4 0,98 209,09 12,86 28,1 1,16 108,66 1,50 -13,42 0,89 0,04 24,24 6,14 0,9 1,04 25,54 7,50 3,0 1,13 182,68 20,18 1,7 1,01 137,23 12,07 15,15 1,12 0,08 20,78 5,19 -2,6 0,89 25,11 9,75 2,6 1,12 194,81 26,26 13,9 1,08 122,08 38,46 0,00 1,00 0,20 20,78 9,09 -2,6 0,89 22,08 4,68 -0,4 0,98 171,00 22,88 -10,0 0,94 100,00 3,44 -22,08 0,82 PK 705,63 77,84 682,3 30,19 1695,24 198,04 1672,7 75,31 819,05 94,91 638,1 4,53 1506,93 273,93 1384,85 12,34

Anhang 103


Tabelle 8-68: Untersuchung des Extraktes (Zulauf Oz onung) der Kläranlage Bad Sassendorf (Versuchseinst ellung VO-BS/7).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 25,97 4,68 0,00 1,00 32,03 8,25 0,00 1,00 137,66 5,66 0,00 1,00 110,82 10,09 0,00 1,00 1 32,90 3,27 6,93 1,27 25,11 1,50 -6,93 0,78 165,80 5,86 28,14 1,20 108,66 21,43 -2,16 0,98 2 37,66 4,68 11,69 1,45 30,52 4,59 -1,52 0,95 136,80 9,12 -0,87 0,99 109,52 9,40 -1,30 0,99 4 38,10 7,61 12,12 1,47 36,80 8,65 4,76 1,15 139,83 29,62 2,16 1,02 103,90 13,50 -6,93 0,94 8 34,20 4,56 8,23 1,32 22,08 1,30 -9,96 0,69 164,07 26,63 26,41 1,19 90,04 2,70 -20,78 0,81 16 31,60 8,25 5,63 1,22 31,17 3,90 -0,87 0,97 167,53 49,02 29,87 1,22 102,60 9,00 -8,23 0,93 PK 435,93 100,20 409,96 16,78 1754,55 92,32 1722,51 54,77 1057,14 76,18 919,48 7,68 1659,74 152,36 1548,92 14,98

Tabelle 8-69: Untersuchung des Extraktes (Ablauf O zonung) der Kläranlage Bad Sassendorf (Versuchseins tellung NO-BS-E/7).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 25,97 4,68 0,00 1,00 32,03 8,25 0,00 1,00 137,66 5,66 0,00 1,00 110,82 10,09 0,00 1,00

1 29,00 2,70 3,03 1,12 34,20 3,27 2,16 1,07 157,14 17,18 19,48 1,14 110,82 22,58 0,00 1,00

2 33,33 7,83 7,36 1,28 25,97 4,50 -6,06 0,81 149,35 15,31 11,69 1,08 96,54 13,64 -14,29 0,87

4 33,77 8,52 7,79 1,30 29,44 9,21 -2,60 0,92 128,14 19,15 -9,52 0,93 97,84 11,78 -12,99 0,88

8 30,74 4,17 4,76 1,18 24,24 4,92 -7,79 0,76 131,17 14,29 -6,49 0,95 98,27 17,25 -12,55 0,89

16 29,87 9,80 3,90 1,15 27,27 3,44 -4,76 0,85 142,42 35,24 4,76 1,03 103,46 19,67 -7,36 0,93

PK 435,93 100,20 409,96 16,78 1754,55 92,32 1722,51 54,77 1057,14 76,18 919,48 7,68 1659,74 152,36 1548,92 14,98

Anhang 104


Tabelle 8-70: Untersuchung der Blindprobe der Klära nlage Bad Sassendorf (Versuchseinstellung BS-E/7-bl ank).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 25,97 4,68 0,00 1,00 32,03 8,25 0,00 1,00 137,66 5,66 0,00 1,00 110,82 10,09 0,00 1,00

1 35,71 13,77 9,74 1,38 30,74 7,15 -1,30 0,96 149,35 7,35 11,69 1,08 105,63 6,66 -5,19 0,95 2 35,71 0,92 9,74 1,38 31,17 5,95 -0,87 0,97 188,96 22,96 51,30 1,37 96,54 13,01 -14,29 0,87 4 34,42 17,45 8,44 1,33 29,44 1,98 -2,60 0,92 177,92 3,67 40,26 1,29 96,10 15,96 -14,72 0,87

8 25,97 1,84 0,00 1,00 29,00 6,14 -3,03 0,91 177,27 6,43 39,61 1,29 106,06 21,51 -4,76 0,96 16 31,82 2,75 5,84 1,23 36,36 3,44 4,33 1,14 156,49 26,63 18,83 1,14 82,68 12,48 -28,14 0,75 PK 435,93 100,20 409,96 16,78 1754,55 92,32 1722,51 54,77 1057,14 76,18 919,48 7,68 1659,74 152,36 1548,92 14,98

Tabelle 8-71: Untersuchung der Abwasserprobe (Zula uf Ozonung) der Kläranlage Bad Sassendorf (Versuchs einstellung VO-BS/8).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 34,63 5,86 0,00 1,00 19,83 7,31 0,00 1,00 162,87 21,79 0,00 1,00 86,50 19,34 0,00 1,00 0,01 25,97 3,44 -8,66 0,75 26,58 5,06 6,75 1,34 143,88 28,23 -18,99 0,88 97,47 3,35 10,97 1,13 0,02 25,11 1,98 -9,52 0,73 28,69 6,97 8,86 1,45 178,90 36,83 16,03 1,10 81,01 32,91 -5,49 0,94 0,04 25,54 3,00 -9,09 0,74 29,54 9,16 9,70 1,49 200,42 37,85 37,55 1,23 90,72 7,42 4,22 1,05 0,08 32,03 8,65 -2,60 0,93 24,05 4,56 4,22 1,21 225,32 51,62 62,45 1,38 92,83 3,87 6,33 1,07 0,20 26,41 1,50 -8,23 0,76 24,89 2,92 5,06 1,26 152,32 16,52 -10,55 0,94 72,15 15,40 -14,35 0,83 PK 645,89 113,24 611,26 18,65 1019,62 203,18 999,79 51,41 579,32 54,45 416,46 3,56 1508,86 102,04 1422,36 17,44

Anhang 105



VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 34,63 5,86 0,0 1,00 19,48 7,23 0,0 1,00 85,71 8,11 0,0 1,00 81,82 24,05 0,00 1,00 0,01 25,97 4,50 -8,7 0,75 28,14 14,36 8,7 1,44 116,02 27,38 30,3 1,35 71,86 12,61 -9,96 0,88 0,02 24,24 12,34 -10,4 0,70 18,61 8,25 -0,9 0,96 84,85 22,13 -0,9 0,99 64,50 12,27 -17,32 0,79 0,04 23,81 11,78 -10,8 0,69 16,88 3,90 -2,6 0,87 67,97 5,86 -17,7 0,79 68,83 10,63 -12,99 0,84 0,08 29,44 3,97 -5,2 0,85 16,88 2,25 -2,6 0,87 95,67 9,57 10,0 1,12 75,32 11,90 -6,49 0,92 0,20 22,94 5,25 -11,7 0,66 14,29 10,14 -5,2 0,73 79,22 2,60 -6,5 0,92 67,10 1,98 -14,72 0,82 PK 645,89 113,24 611,3 18,65 975,32 128,56 955,8 50,07 587,01 44,08 501,3 6,85 700,00 60,36 618,18 8,56

Tabelle 8-73: Untersuchung der Abwasserprobe (Ablau f Schönungsteich) der Kläranlage Bad Sassendorf (Ve rsuchseinstellung NOB-BS/8).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 23,38 6,49 0,00 1,00 22,51 7,94 0,00 1,00 180,95 1,98 0,00 1,00 122,08 5,95 0,00 1,00 0,01 27,27 2,60 3,90 1,17 21,65 6,66 -0,87 0,96 190,91 14,98 9,96 1,06 127,27 7,90 5,19 1,04 0,02 31,17 2,60 7,79 1,33 26,41 2,70 3,90 1,17 185,71 29,27 4,76 1,03 122,08 9,09 0,00 1,00 0,04 19,91 7,38 -3,46 0,85 19,48 2,25 -3,03 0,87 194,37 24,38 13,42 1,07 124,68 9,80 2,60 1,02 0,08 23,38 3,44 0,00 1,00 22,94 11,78 0,43 1,02 137,66 8,11 -43,29 0,76 116,45 17,44 -5,63 0,95 0,20 22,08 2,25 -1,30 0,94 27,27 7,23 4,76 1,21 141,13 17,73 -39,83 0,78 109,96 10,58 -12,12 0,90 PK 705,63 77,84 682,25 30,19 1695,24 198,04 1672,73 75,31 819,05 94,91 638,10 4,53 1506,93 273,93 1384,85 12,34

Anhang 106


Tabelle 8-74: Untersuchung des Extraktes (Zulauf O zonung) der Kläranlage Bad Sassendorf (Versuchseins tellung VO-BS-E/8).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 25,97 4,68 0,00 1,00 32,03 8,25 0,00 1,00 137,66 5,66 0,00 1,00 110,82 10,09 0,00 1,00 1 31,60 10,42 5,63 1,22 32,03 6,14 0,00 1,00 161,04 14,05 23,38 1,17 131,60 17,29 20,78 1,19 2 32,90 3,00 6,93 1,27 32,47 6,75 0,43 1,01 183,12 8,52 45,45 1,33 115,15 9,12 4,33 1,04 4 32,03 3,97 6,06 1,23 32,03 0,75 0,00 1,00 178,35 24,96 40,69 1,30 118,61 15,05 7,79 1,07 8 35,93 1,98 9,96 1,38 33,33 1,98 1,30 1,04 170,13 20,41 32,47 1,24 137,66 19,39 26,84 1,24 16 33,33 9,75 7,36 1,28 31,60 1,98 -0,43 0,99 187,01 19,13 49,35 1,36 121,65 13,76 10,82 1,10 PK 435,93 100,20 409,96 16,78 1754,55 92,32 1722,51 54,77 1057,14 76,18 919,48 7,68 1659,74 152,36 1548,92 14,98


VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 25,97 4,68 0,00 1,00 32,03 8,25 0,00 1,00 137,66 5,66 0,00 1,00 110,82 10,09 0,00 1,00 1 32,90 5,41 6,93 1,27 36,36 12,39 4,33 1,14 176,62 16,88 38,96 1,28 102,16 8,35 -8,66 0,92 2 24,03 0,92 -1,95 0,93 33,33 7,61 1,30 1,04 151,08 13,33 13,42 1,10 109,09 13,74 -1,73 0,98 4 32,47 3,90 6,49 1,25 29,87 7,23 -2,16 0,93 148,48 36,86 10,82 1,08 103,90 10,14 -6,93 0,94 8 26,84 5,25 0,87 1,03 23,81 5,41 -8,23 0,74 160,17 17,25 22,51 1,16 112,12 5,41 1,30 1,01 16 39,83 4,56 13,85 1,53 34,20 8,45 2,16 1,07 168,40 9,12 30,74 1,22 106,06 12,07 -4,76 0,96 PK 435,93 100,20 409,96 16,78 1754,55 92,32 1722,51 54,77 1057,14 76,18 919,48 7,68 1659,74 152,36 1548,92 14,98

Anhang 107


Tabelle 8-76: Untersuchung des Extraktes (Ablauf S chönungsteich) der Kläranlage Bad Sassendorf (Versu chseinstellung NOB-BS-E/8).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 25,97 4,68 0,00 1,00 32,03 8,25 0,00 1,00 137,66 5,66 0,00 1,00 110,82 10,09 0,00 1,00 1 32,47 7,90 6,49 1,25 28,57 2,25 -3,46 0,89 202,60 11,54 64,94 1,47 93,07 18,47 -17,75 0,84 2 31,17 4,68 5,19 1,20 28,14 9,919 -3,90 0,88 189,61 16,98 51,95 1,38 101,73 20,30 -9,09 0,92 4 35,93 7,15 9,96 1,38 28,57 1,2987 -3,46 0,89 195,24 16,44 57,58 1,42 105,19 10,31 -5,63 0,95 8 38,10 6,14 12,12 1,47 29,44 3,9676 -2,60 0,92 185,71 39,11 48,05 1,35 107,79 16,58 -3,03 0,97 16 31,60 6,14 5,63 1,22 32,03 3,2683 0,00 1,00 184,42 25,082 46,75 1,34 105,63 19,88 -5,19 0,95 PK 435,93 100,20 409,96 16,78 1754,55 92,32 1722,51 54,77 1057,14 76,18 919,48 7,68 1659,74 152,36 1548,92 14,98

Tabelle 8-77: Untersuchung der Blindprobe der Klär anlage Bad Sassendorf (Versuchseinstellung BS-E/8-b lank).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 25,97 4,68 0,00 1,00 32,03 8,25 0,00 1,00 137,66 5,66 0,00 1,00 110,82 10,09 0,00 1,00 1 35,06 9,18 9,09 1,35 29,00 5,8562 -3,03 0,91 134,42 4,59 -3,25 0,98 101,30 7,79 -9,52 0,91 2 36,36 16,53 10,39 1,40 30,30 4,1747 -1,73 0,95 166,88 11,94 29,22 1,21 108,23 1,98 -2,60 0,98 4 33,12 2,75 7,14 1,28 29,87 5,6609 -2,16 0,93 183,77 0,92 46,10 1,33 96,10 15,96 -14,72 0,87 8 37,66 9,18 11,69 1,45 28,14 1,9838 -3,90 0,88 172,08 2,75 34,42 1,25 106,06 22,80 -4,76 0,96 16 22,73 6,43 -3,25 0,88 25,54 6,5367 -6,49 0,80 152,60 24,79 14,94 1,11 100,00 9,80 -10,82 0,90 PK 435,93 100,20 409,96 16,78 1754,55 92,32 1722,51 54,77 1057,14 76,18 919,48 7,68 1659,74 152,36 1548,92 14,98

Anhang 108


Tabelle 8-78: Untersuchung der Abwasserprobe (Zulau f Ozonung) der Kläranlage Bad Sassendorf (Versuchse instellung VO-BS/9).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 22,50 2,17 0,00 1,00 21,67 5,91 0,00 1,00 85,42 23,53 0,00 1,00 122,08 5,95 0,00 1,00 0,01 12,50 2,50 -10,00 0,56 25,42 6,29 3,75 1,17 80,00 6,50 -5,42 0,94 124,47 15,31 2,39 1,02 0,02 14,17 4,39 -8,33 0,63 27,08 6,41 5,42 1,25 95,42 14,91 10,00 1,12 127,85 14,60 5,77 1,05 0,04 13,33 2,89 -9,17 0,59 18,33 1,91 -3,33 0,85 86,67 3,82 1,25 1,01 101,69 14,62 -20,39 0,83 0,08 14,17 4,02 -8,33 0,63 16,25 5,45 -5,42 0,75 86,25 11,92 0,83 1,01 111,39 4,38 -10,69 0,91 0,20 13,33 1,44 -9,17 0,59 16,67 3,82 -5,00 0,77 87,92 16,88 2,50 1,03 97,89 5,27 -24,19 0,80 PK 146,67 50,13 124,17 6,52 1157,92 84,15 1136,25 53,44 560,42 59,49 475,00 6,56 1506,93 273,93 1384,85 12,34


VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 22,50 2,17 0,0 1,00 21,67 5,91 0,0 1,00 85,42 23,53 0,0 1,00 122,08 5,95 0,00 1,00 0,01 15,42 1,91 -7,1 0,69 21,67 10,48 0,0 1,00 90,00 13,92 4,6 1,05 134,18 12,47 12,10 1,10 0,02 18,75 3,31 -3,8 0,83 22,92 7,64 1,3 1,06 95,00 15,16 9,6 1,11 119,41 12,93 -2,67 0,98 0,04 14,58 4,02 -7,9 0,65 16,67 3,82 -5,0 0,77 72,08 16,60 -13,3 0,84 113,50 19,38 -8,58 0,93 0,08 21,67 7,32 -0,8 0,96 18,75 1,25 -2,9 0,87 77,92 2,60 -7,5 0,91 108,86 5,80 -13,22 0,89 0,20 17,08 3,61 -5,4 0,76 22,50 5,73 0,8 1,04 79,17 10,10 -6,3 0,93 109,70 8,14 -12,37 0,90 PK 146,67 50,13 124,2 6,52 1157,92 84,15 1136,3 53,44 560,42 59,49 475,0 6,56 1506,93 273,93 1384,85 12,34

Anhang 109


Tabelle 8-80: Untersuchung des Extraktes (Zulauf O zonung) der Kläranlage Bad Sassendorf (Versuchseins tellung VO-BS-E/9).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 7,38 0,00 1,00 32,47 3,90 0,00 1,00 129,00 20,99 0,00 1,00 99,57 13,01 0,00 1,00 1 28,57 0,00 -4,33 0,87 35,93 6,14 3,46 1,11 204,33 36,42 75,32 1,58 124,24 26,28 24,68 1,25 2 31,60 7,94 -1,30 0,96 30,74 6,14 -1,73 0,95 213,85 20,13 84,85 1,66 123,38 28,72 23,81 1,24 4 32,47 5,19 -0,43 0,99 26,84 2,70 -5,63 0,83 206,49 8,11 77,49 1,60 119,91 19,49 20,35 1,20 8 30,30 5,86 -2,60 0,92 24,24 3,97 -8,23 0,75 210,39 12,99 81,39 1,63 120,78 14,75 21,21 1,21 16 35,93 10,42 3,03 1,09 24,24 3,27 -8,23 0,75 226,84 20,63 97,84 1,76 125,97 6,49 26,41 1,27 PK 550,65 25,08 517,75 16,74 1712,12 130,29 1679,65 52,73 1124,68 116,90 995,67 8,72 1412,99 129,95 1313,42 14,19


VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 7,38 0,00 1,00 32,47 3,90 0,00 1,00 129,00 20,99 0,00 1,00 99,57 13,01 0,00 1,00 1 24,68 3,44 -8,23 0,75 25,54 6,54 -6,93 0,79 181,82 18,00 52,81 1,41 134,20 18,20 34,63 1,35 2 32,47 3,90 -0,43 0,99 29,44 1,98 -3,03 0,91 194,81 12,86 65,80 1,51 118,61 13,64 19,05 1,19 4 28,57 2,25 -4,33 0,87 28,57 4,68 -3,90 0,88 193,07 17,92 64,07 1,50 109,52 12,34 9,96 1,10 8 30,74 8,35 -2,16 0,93 33,77 12,39 1,30 1,04 203,90 44,67 74,89 1,58 100,00 13,68 0,43 1,00 16 30,74 6,14 -2,16 0,93 25,54 5,25 -6,93 0,79 201,73 2,70 72,73 1,56 107,79 2,60 8,23 1,08 PK 550,65 25,08 517,75 16,74 1712,12 130,29 1679,65 52,73 1124,68 116,90 995,67 8,72 1412,99 129,95 1313,42 14,19

Anhang 110


Tabelle 8-82: Untersuchung der Blindprobe der Klär anlage Bad Sassendorf (Versuchseinstellung NO-BS-E/ 9).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 12,61 0,00 1,00 38,96 5,66 0,00 1,00 107,79 9,37 0,00 1,00 87,88 18,83 0,00 1,00 1 34,42 2,75 1,52 1,05 31,60 6,14 -7,36 0,81 104,55 0,92 -3,25 0,97 94,81 13,56 6,93 1,08 2 29,22 6,43 -3,68 0,89 32,47 2,25 -6,49 0,83 102,60 9,18 -5,19 0,95 92,64 20,30 4,76 1,05 4 32,47 7,35 -0,43 0,99 30,74 3,75 -8,23 0,79 106,49 18,37 -1,30 0,99 97,40 5,19 9,52 1,11 8 33,77 11,02 0,87 1,03 33,33 10,50 -5,63 0,86 111,04 6,43 3,25 1,03 81,39 9,92 -6,49 0,93 16 33,77 5,51 0,87 1,03 27,27 3,90 -11,69 0,70 99,35 4,59 -8,44 0,92 87,01 12,39 -0,87 0,99 PK 484,85 86,93 451,95 14,74 1881,82 116,06 1842,86 48,30 1049,78 182,72 941,99 9,74 1706,06 118,75 1618,18 19,41

Duisburg-Vierlinden

Tabelle 8-83: Untersuchung der Abwasserprobe (Zula uf Ozonung) der Kläranlage Duisburg-Vierlinden (Ver suchseinstellung VO-DU/1).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 17,3 2,73 0 1,00 23,27 7,8 0 1,00 247,62 9,86 0 1,00 177,81 29,65 0 1,00 0,01 16,71 2,07 -0,59 0,97 23,27 5,37 0 1,00 315,04 43,88 67,42 1,27 146,78 8,2 -31,03 0,83 0,02 13,72 4,5 -3,58 0,79 25,66 2,73 2,39 1,10 281,03 45,04 33,41 1,13 168,26 29,47 -9,55 0,95 0,04 18,5 8,46 1,2 1,07 26,85 4,74 3,58 1,15 236,28 34,29 -11,34 0,95 156,33 2,07 -21,48 0,88 0,08 15,51 4,5 -1,79 0,90 22,08 4,5 -1,19 0,95 266,71 58,69 19,09 1,08 158,42 12,7 -19,39 0,89 0,20 17,3 2,07 0 1,00 28,04 7,23 4,77 1,20 204,06 35,44 -43,56 0,82 167,66 26,81 -10,15 0,94 PK 555,5 174,65 538,2 32,11 1011,35 156,63 988,08 43,46 714,81 73,46 467,19 2,89 1386,65 279,51 1208,84 7,80

Anhang 111


Tabelle 8-84: Untersuchung der Abwasserprobe (Abla uf Diffusor Straße2) der Kläranlage Duisburg-Vierli nden (Versuchseinstellung NOD-DU/1).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 17,3 2,73 0 1,00 23,27 7,8 0 1,00 247,62 9,86 0 1,00 177,81 29,65 0,00 1,00 0,01 16,11 0 -1,19 0,93 37,59 9,47 14,32 1,62 340,7 25,34 93,08 1,38 162,29 28,32 0,91 0,91 0,02 22,67 2,73 5,37 1,31 35,8 9,47 12,53 1,54 230,31 19,64 -17,31 0,93 140,52 1,79 0,79 0,79 0,04 11,93 4,5 -5,37 0,69 24,46 5,17 1,19 1,05 238,07 33,15 -9,55 0,96 147,38 5,75 0,83 0,83 0,08 24,46 15,43 7,16 1,41 29,83 6,78 6,56 1,28 233,3 32,14 -14,32 0,94 151,26 15,29 0,85 0,85 0,20 22,08 8,07 4,78 1,28 31,03 1,03 7,76 1,33 224,65 13,92 -22,97 0,91 170,05 17,26 0,96 0,96 PK 555,5 174,65 538,2 32,11 1011,4 156,63 988,08 43,46 714,81 73,46 467,19 2,89 1386,7 279,51 7,80 7,80

Tabelle 8-85: Untersuchung der Abwasserprobe (Ablau f Injektor Straße1) der Kläranlage Duisburg-Vierlin den (Versuchseinstellung NOI-DU/1).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 17,3 2,73 0 1,00 23,27 7,8 0 1,00 247,62 9,86 0 1,00 177,81 29,65 0 1,00 0,01 14,92 3,73 -2,38 0,86 22,67 8,83 -0,6 0,97 209,43 29,9 -38,19 0,85 175,42 7,8 -2,39 0,99 0,02 14,92 4,13 -2,38 0,86 22,08 8,07 -1,19 0,95 279,24 63,61 31,62 1,13 170,05 14,36 -7,76 0,96 0,04 16,71 2,07 -0,59 0,97 29,83 1,03 6,56 1,28 278,64 38,9 31,02 1,13 176,61 30,02 -1,2 0,99 0,08 16,11 4,74 -1,19 0,93 25,06 4,74 1,79 1,08 309,07 39,6 61,45 1,25 158,42 11,18 -19,39 0,89 0,20 14,92 8,27 -2,38 0,86 26,85 9,3 3,58 1,15 233,6 64,55 -14,02 0,94 172,44 11,92 -5,37 0,97 PK 555,5 174,65 538,2 32,11 1011 156,63 987,73 43,45 714,8 73,46 467,18 2,89 1386,5 279,5 1208,7 7,80

Anhang 112



VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 23,38 6,49 0,00 1,00 22,51 7,94 0,00 1,00 110,26 8,97 0,00 1,00 114,10 5,88 0,00 1,00 0,01 25,74 9,33 2,36 1,10 24,05 3,35 1,54 1,07 108,97 7,69 -1,28 0,99 81,20 17,96 -32,91 0,71 0,02 21,52 1,27 -1,86 0,92 21,10 4,45 -1,41 0,94 124,79 7,83 14,53 1,13 79,91 12,97 -34,19 0,70 0,04 26,58 8,30 3,21 1,14 23,21 7,42 0,70 1,03 108,12 25,68 -2,14 0,98 74,36 13,01 -39,74 0,65 0,08 26,58 4,38 3,21 1,14 19,83 10,54 -2,68 0,88 104,70 9,27 -5,56 0,95 78,63 12,58 -35,47 0,69 0,20 22,36 3,19 -1,01 0,96 21,94 4,07 -0,57 0,97 120,51 1,28 10,26 1,09 64,10 9,68 -50,00 0,56 PK 705,63 77,84 682,25 30,19 1695,24 198,04 1672,73 75,31 599,15 83,01 488,89 5,43 1721,37 152,67 1607,26 15,09

Tabelle 8-87: Untersuchung der Abwasserprobe (Abla uf Diffusor Straße2) der Kläranlage Duisburg-Vierli nden (Versuchseinstellung NOD-DU/2).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 23,38 6,49 0,00 1,00 22,51 7,94 0,00 1,00 137,66 5,66 0,00 1,00 114,10 5,88 0,00 1,00 0,01 17,30 3,19 -6,08 0,74 25,74 6,37 3,23 1,14 139,83 4,56 2,16 1,02 115,38 15,12 1,28 1,01 0,02 25,32 7,70 1,94 1,08 30,80 0,73 8,29 1,37 133,33 26,69 -4,33 0,97 94,02 6,32 -20,09 0,82 0,04 18,57 6,37 -4,81 0,79 29,11 1,79 6,60 1,29 135,93 11,78 -1,73 0,99 105,13 19,74 -8,97 0,92 0,08 28,27 5,98 4,89 1,21 19,41 4,79 -3,10 0,86 147,19 16,24 9,52 1,07 73,93 5,78 -40,17 0,65 0,20 26,16 4,07 2,78 1,12 21,52 5,06 -0,99 0,96 153,68 15,49 16,02 1,12 78,63 6,32 -35,47 0,69 PK 705,63 77,84 682,25 30,19 1695,24 198,04 1672,73 75,31 1057,14 76,18 919,48 7,68 1721,37 152,67 1607,26 15,09

Anhang 113


Tabelle 8-88: Untersuchung des Extraktes (Zulauf Oz onung) der Kläranlage Duisburg-Vierlinden (Versuchs einstellung VO-DU-E/2).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 12,61 0,00 1,00 38,96 5,66 0,00 1,00 107,79 9,37 0,00 1,00 87,88 18,83 0,00 1,00 1 35,06 11,54 2,16 1,07 34,20 3,27 -4,76 0,88 112,12 3,97 4,33 1,04 96,10 11,10 8,23 1,09 2 42,86 5,19 9,96 1,30 32,47 8,52 -6,49 0,83 98,27 21,15 -9,52 0,91 99,13 17,73 11,26 1,13 4 39,39 4,17 6,49 1,20 26,84 1,50 -12,12 0,69 97,84 15,16 -9,96 0,91 116,45 13,07 28,57 1,33 8 38,10 5,86 5,19 1,16 32,47 7,23 -6,49 0,83 102,60 11,25 -5,19 0,95 95,24 12,27 7,36 1,08 16 32,47 5,66 -0,43 0,99 32,90 3,97 -6,06 0,84 113,85 31,31 6,06 1,06 99,13 4,92 11,26 1,13 PK 484,85 86,93 451,95 14,74 1881,82 116,06 1842,86 48,30 1049,78 182,72 941,99 9,74 1706,06 118,75 1618,18 19,41

Tabelle 8-89: Untersuchung des Extraktes (Ablauf D iffusor Straße2) der Kläranlage Duisburg-Vierlinden (Versuchseinstellung NOD-DU-E/2).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 12,61 0,00 1,00 38,96 5,66 0,00 1,00 107,79 9,37 0,00 1,00 87,88 18,83 0,00 1,00 1 40,69 7,50 7,79 1,24 33,77 5,19 -5,19 0,87 94,81 6,75 -12,99 0,88 102,60 7,90 14,72 1,17 2 40,69 7,61 7,79 1,24 35,93 6,14 -3,03 0,92 103,46 17,63 -4,33 0,96 98,70 4,50 10,82 1,12 4 33,33 15,05 0,43 1,01 26,84 7,83 -12,12 0,69 89,18 13,27 -18,61 0,83 93,94 1,98 6,06 1,07 8 27,71 6,66 -5,19 0,84 33,33 4,92 -5,63 0,86 93,94 13,89 -13,85 0,87 96,54 18,65 8,66 1,10 16 26,84 4,17 -6,06 0,82 32,03 9,12 -6,93 0,82 91,77 11,20 -16,02 0,85 92,21 13,18 4,33 1,05 PK 484,85 86,93 451,95 14,74 1881,82 116,06 1842,86 48,30 1049,78 182,72 941,99 9,74 1706,06 118,75 1618,18 19,41

Anhang 114


Tabelle 8-90: Untersuchung der Blindprobe der Klär anlage Duisburg-Vierlinden (Versuchseinstellung DU- E/2-blank).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 28,57 5,95 0,00 1,00 32,47 4,50 0,00 1,00 91,77 8,45 0,00 1,00 109,52 9,40 0,00 1,00 1 31,17 4,68 2,60 1,09 31,60 3,00 -0,87 0,97 102,60 3,90 10,82 1,12 86,15 20,13 -23,38 0,79 2 28,57 5,95 0,00 1,00 29,87 13,68 -2,60 0,92 101,73 19,88 9,96 1,11 87,45 15,16 -22,08 0,80 4 25,54 5,25 -3,03 0,89 24,68 3,90 -7,79 0,76 90,91 3,44 -0,87 0,99 90,91 9,00 -18,61 0,83 8 34,63 5,25 6,06 1,21 26,41 4,92 -6,06 0,81 100,87 20,99 9,09 1,10 80,52 9,09 -29,00 0,74 16 21,65 7,15 -6,93 0,76 24,68 1,30 -7,79 0,76 80,52 9,09 -11,26 0,88 70,56 9,40 -38,96 0,64 PK 592,64 118,29 564,07 20,74 2044,16 53,99 2011,69 62,96 1187,01 211,28 1095,24 12,93 2056,71 181,23 1947,19 18,78

Tabelle 8-91: Untersuchung der Abwasserprobe (Zulau f Ozonung) der Kläranlage Duisburg-Vierlinden (Vers uchseinstellung VO-DU/4).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 34,63 5,86 0,00 1,00 26,84 2,70 0,00 1,00 84,19 9,27 0,00 1,00 122,08 5,95 0,00 1,00 0,01 18,61 1,98 -16,02 0,54 23,38 13,50 -3,46 0,87 65,81 11,20 -18,38 0,78 143,04 12,47 20,96 1,17 0,02 25,11 5,25 -9,52 0,73 25,11 6,41 -1,73 0,94 63,00 9,47 -21,19 0,75 124,05 9,13 1,97 1,02 0,04 28,14 7,83 -6,49 0,81 33,77 3,44 6,93 1,26 55,13 6,66 -29,06 0,65 114,35 6,37 -7,73 0,94 0,08 26,41 6,14 -8,23 0,76 26,41 10,81 -0,43 0,98 60,26 5,88 -23,93 0,72 108,44 22,30 -13,64 0,89 0,20 22,08 5,66 -12,55 0,64 23,38 3,90 -3,46 0,87 67,52 1,48 -16,67 0,80 112,66 14,27 -9,42 0,92 PK 645,89 113,24 611,26 18,65 1787,45 77,40 1760,61 66,60 455,13 57,28 370,94 5,41 1506,93 273,93 1384,85 12,34

Anhang 115


Tabelle 8-92: Untersuchung der Abwasserprobe (Abla uf Injektor Straße1) der Kläranlage Duisburg-Vierli nden (Versuchseinstellung NOI-DU/4).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 34,63 5,86 0,00 1,00 26,84 2,70 0,00 1,00 84,19 9,27 0,00 1,00 122,08 5,95 0,00 1,00 0,01 23,81 3,75 -10,82 0,69 29,87 2,25 3,03 1,11 88,46 2,22 4,27 1,05 129,11 12,08 7,04 1,06 0,02 25,97 8,52 -8,66 0,75 26,41 4,17 -0,43 0,98 82,48 22,11 -1,71 0,98 104,22 11,76 -17,86 0,85 0,04 31,60 9,75 -3,03 0,91 21,65 2,70 -5,19 0,81 56,84 7,29 -27,35 0,68 108,02 7,63 -14,06 0,88 0,08 22,08 7,23 -12,55 0,64 27,27 8,11 0,43 1,02 62,39 16,73 -21,79 0,74 107,17 7,20 -14,90 0,88 0,20 25,97 5,19 -8,66 0,75 20,35 1,98 -6,49 0,76 46,58 18,24 -37,61 0,55 99,58 12,16 -22,50 0,82 PK 645,89 113,24 611,26 18,65 1787,45 77,40 1760,61 66,60 455,13 57,28 370,94 5,41 1506,93 273,93 1384,85 12,34

Tabelle 8-93: Untersuchung der Abwasserprobe (Abla uf Injektor Straße1 und biol. Nachbehandlung) der K läranlage Duisburg-Vierlinden (Versuchseinstellung NOIB-DU/4).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 34,63 5,86 0,00 1,00 26,84 2,70 0,00 1,00 84,19 9,27 0,00 1,00 122,08 5,95 0,00 1,00 0,01 31,60 3,97 -3,03 0,91 21,21 5,25 -5,63 0,79 72,22 7,06 -11,97 0,86 103,38 11,76 -18,70 0,85 0,02 20,35 1,98 -14,29 0,59 25,11 13,27 -1,73 0,94 48,29 9,10 -35,90 0,57 102,53 23,65 -19,55 0,84 0,04 26,41 9,12 -8,23 0,76 26,84 3,27 0,00 1,00 59,83 18,90 -24,36 0,71 102,53 15,81 -19,55 0,84 0,08 27,71 7,15 -6,93 0,80 34,63 11,78 7,79 1,29 74,36 18,18 -9,83 0,88 86,92 12,16 -35,16 0,71 0,20 30,30 5,86 -4,33 0,88 33,77 5,19 6,93 1,26 76,50 21,16 -7,69 0,91 119,83 8,89 -2,25 0,98 PK 645,89 113,24 611,26 18,65 1787,45 77,40 1760,61 66,60 455,13 57,28 370,94 5,41 1506,93 273,93 1384,85 12,34

Anhang 116


Tabelle 8-94: 1. Untersuchung des Extraktes (Zulau f Ozonung) der Kläranlage Duisburg-Vierlinden (Vers uchseinstellung VO-DU-E/4).

VF

TA 98 TA 100

- S9 + S9 - S9 + S9 AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR

NK 57,14 9,00 0,00 1,00 50,65 10,14 0,00 1,00 129,00 20,99 0,00 1,00 99,57 13,01 0,00 1,00 1 57,14 6,87 0,00 1,00 57,58 8,65 6,93 1,14 204,33 29,62 75,32 1,58 112,99 17,03 13,42 1,13 2 48,48 14,01 -8,66 0,85 54,55 4,68 3,90 1,08 208,23 11,05 79,22 1,61 114,29 30,62 14,72 1,15 4 64,94 6,75 7,79 1,14 54,55 5,95 3,90 1,08 187,45 20,71 58,44 1,45 111,26 20,99 11,69 1,12 8 59,31 7,15 2,16 1,04 49,35 9,37 -1,30 0,97 223,81 19,49 94,81 1,73 97,40 16,27 -2,16 0,98 16 57,14 9,37 0,00 1,00 46,32 20,83 -4,33 0,91 194,37 7,83 65,37 1,51 110,82 7,15 11,26 1,11 PK 516,02 29,62 458,87 9,03 1662,77 66,34 1612,12 32,83 1124,68 116,90 995,67 8,72 1412,99 129,95 1313,42 14,19


VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 7,38 0,00 1,00 32,47 3,90 0,00 1,00 n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. 1 135,93 16,03 103,03 4,13 130,74 4,17 98,27 4,03 n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. 2 178,35 5,25 145,45 5,42 216,45 29,62 183,98 6,67 n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. 4 375,32 2,25 342,42 11,41 381,39 25,63 348,92 11,75 n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. 8 640,26 14,98 607,36 19,46 616,45 82,97 583,98 18,99 n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. 16 1143,29 86,64 1110,39 34,75 1107,36 5,25 1074,89 34,11 n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. PK 550,65 25,08 517,75 16,74 1712,12 130,29 1679,65 52,73 n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u.

Anhang 117



VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 33,33 3,00 0,00 1,00 43,29 8,35 0,00 1,00 81,82 13,68 0,00 1,00 89,18 17,92 0,00 1,00 1 31,82 4,59 -1,52 0,95 31,82 6,43 -11,47 0,74 121,43 22,96 39,61 1,48 70,78 19,28 -18,40 0,79 2 29,22 4,59 -4,11 0,88 34,42 6,43 -8,87 0,80 81,82 14,69 0,00 1,00 66,23 1,84 -22,94 0,74 4 22,08 11,02 -11,26 0,66 29,22 10,10 -14,07 0,68 85,06 19,28 3,25 1,04 64,94 18,37 -24,24 0,73 8 37,66 1,84 4,33 1,13 24,03 2,75 -19,26 0,56 66,88 10,10 -14,94 0,82 81,17 0,92 -8,01 0,91 16 29,87 0,00 -3,46 0,90 29,87 0,00 -13,42 0,69 n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. n.u. PK 664,07 125,67 630,74 19,92 1619,91 20,13 1576,62 37,42 998,27 151,06 916,45 12,20 967,10 67,91 877,92 10,84

Tabelle 8-97: Untersuchung des Extraktes (Ablauf I njektor Straße1) der Kläranlage Duisburg-Vierlinden (Versuchseinstellung NOI-DU-E/4).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 7,38 0,00 1,00 32,47 3,90 0,00 1,00 129,00 20,99 0,00 1,00 99,57 13,01 0,00 1,00 1 25,97 3,44 -6,93 0,79 35,06 5,95 2,60 1,08 210,39 22,83 81,39 1,63 134,63 9,83 35,06 1,35 2 29,00 4,56 -3,90 0,88 33,33 3,27 0,87 1,03 204,76 12,34 75,76 1,59 126,84 9,75 27,27 1,27 4 32,90 5,25 0,00 1,00 29,00 5,41 -3,46 0,89 220,35 18,20 91,34 1,71 105,19 13,56 5,63 1,06 8 27,71 7,15 -5,19 0,84 26,41 1,50 -6,06 0,81 207,79 38,44 78,79 1,61 138,10 9,75 38,53 1,39 16 35,93 9,12 3,03 1,09 30,74 5,25 -1,73 0,95 244,59 28,34 115,58 1,90 157,58 14,01 58,01 1,58 PK 550,65 25,08 517,75 16,74 1712,12 130,29 1679,65 52,73 1124,68 116,90 995,67 8,72 1412,99 129,95 1313,42 14,19

Anhang 118


Tabelle 8-98: Untersuchung des Extraktes (Ablauf I njektor Straße1 und biol. Nachbehandlung) der Klära nlage Duisburg-Vierlinden (Versuchseinstellung NOIB-DU-E/4).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 7,38 0,00 1,00 32,47 3,90 0,00 1,00 129,00 20,99 0,00 1,00 99,57 13,01 0,00 1,00 1 31,60 1,98 -1,30 0,96 29,87 1,30 -2,60 0,92 220,78 43,98 91,77 1,71 132,90 31,87 33,33 1,33 2 31,60 8,25 -1,30 0,96 30,74 3,27 -1,73 0,95 231,60 9,75 102,60 1,80 110,39 6,49 10,82 1,11 4 32,03 8,35 -0,87 0,97 31,17 3,44 -1,30 0,96 218,18 9,09 89,18 1,69 129,44 7,15 29,87 1,30 8 24,68 7,90 -8,23 0,75 29,44 10,09 -3,03 0,91 218,61 37,29 89,61 1,69 122,08 8,11 22,51 1,23 16 26,41 3,00 -6,49 0,80 35,50 1,98 3,03 1,09 196,97 12,48 67,97 1,53 108,66 1,98 9,09 1,09 PK 550,65 25,08 517,75 16,74 1712,12 130,29 1679,65 52,73 1124,68 116,90 995,67 8,72 1412,99 129,95 1313,42 14,19


VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 28,57 5,95 0,00 1,00 32,47 4,50 0,00 1,00 91,77 8,45 0,00 1,00 109,52 9,40 0,00 1,00 1 28,57 9,37 0,00 1,00 32,90 6,66 0,43 1,01 112,12 8,45 20,35 1,22 105,63 1,98 -3,90 0,96 2 28,57 10,39 0,00 1,00 27,27 7,23 -5,19 0,84 94,81 5,95 3,03 1,03 101,30 9,09 -8,23 0,92 4 24,24 7,50 -4,33 0,85 27,27 2,25 -5,19 0,84 96,54 15,22 4,76 1,05 102,16 25,39 -7,36 0,93 8 29,87 5,19 1,30 1,05 32,03 9,40 -0,43 0,99 85,28 13,89 -6,49 0,93 91,34 6,00 -18,18 0,83 16 30,30 0,75 1,73 1,06 30,30 8,65 -2,16 0,93 97,84 31,93 6,06 1,07 98,27 13,33 -11,26 0,90 PK 592,64 118,29 564,07 20,74 2044,16 53,99 2011,69 62,96 1187,01 211,28 1095,24 12,93 2056,71 181,23 1947,19 18,78

Anhang 119


Tabelle 8-100: Untersuchung der Abwasserprobe (Zul auf Ozonung) der Kläranlage Duisburg-Vierlinden (Ve rsuchseinstellung VO-DU/5).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 23,38 6,49 0,00 1,00 22,51 7,94 0,00 1,00 180,95 1,98 0,00 1,00 122,08 5,95 0,00 1,00 0,01 25,97 5,95 2,60 1,11 22,08 3,44 -0,43 0,98 197,84 43,64 16,88 1,09 116,02 26,69 -6,06 0,95 0,02 25,54 3,75 2,16 1,09 24,24 5,25 1,73 1,08 185,28 21,15 4,33 1,02 129,44 13,27 7,36 1,06 0,04 25,54 7,38 2,16 1,09 22,08 10,14 -0,43 0,98 184,42 5,95 3,46 1,02 109,96 16,24 -12,12 0,90 0,08 23,38 1,30 0,00 1,00 23,38 3,90 0,87 1,04 164,50 13,07 -16,45 0,91 115,58 9,37 -6,49 0,95 0,20 18,18 2,25 -5,19 0,78 24,24 5,86 1,73 1,08 179,22 6,75 -1,73 0,99 112,55 9,12 -9,52 0,92 PK 705,63 77,84 682,25 30,19 1695,24 198,04 1672,73 75,31 819,05 94,91 638,10 4,53 1506,93 273,93 1384,85 12,34

Tabelle 8-101: Untersuchung der Abwasserprobe (Abl auf Injektor Straße1) der Kläranlage Duisburg-Vierl inden (Versuchseinstellung NOI-DU/5).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 23,38 6,49 0,00 1,00 22,51 7,94 0,00 1,00 180,95 1,98 0,00 1,00 122,08 5,95 0,00 1,00 0,01 27,85 5,52 4,47 1,19 25,32 9,13 2,81 1,12 198,73 11,25 17,78 1,10 135,02 15,00 12,94 1,11 0,02 21,52 3,35 -1,86 0,92 24,47 3,65 1,96 1,09 169,20 9,58 -11,75 0,94 125,32 12,66 3,24 1,03 0,04 19,83 6,50 -3,55 0,85 18,14 3,65 -4,37 0,81 150,63 35,65 -30,32 0,83 123,63 10,62 1,55 1,01 0,08 20,25 6,58 -3,12 0,87 21,10 1,46 -1,41 0,94 141,77 5,52 -39,18 0,78 100,42 3,87 -21,66 0,82 0,20 18,57 5,12 -4,81 0,79 25,32 0,00 2,81 1,12 145,57 15,40 -35,38 0,80 103,80 18,73 -18,28 0,85 PK 705,63 77,84 682,25 30,19 1695,24 198,04 1672,73 75,31 819,05 94,91 638,10 4,53 1506,93 273,93 1384,85 12,34

Anhang 120


Tabelle 8-102: Untersuchung des Extraktes (Zulauf Ozonung) der Kläranlage Duisburg-Vierlinden (Versuc hseinstellung VO-DU-E/5).

VF

TA 98 TA 100


NK 32,90 7,38 0,00 1,00 32,47 3,90 0,00 1,00 129,00 20,99 0,00 1,00 99,57 13,01 0,00 1,00 1 32,03 3,97 -0,87 0,97 31,17 4,68 -1,30 0,96 217,32 7,15 88,31 1,68 104,33 5,86 4,76 1,05 2 34,63 7,50 1,73 1,05 26,84 2,70 -5,63 0,83 187,88 10,50 58,87 1,46 99,13 25,63 -0,43 1,00 4 34,20 2,70 1,30 1,04 31,17 5,66 -1,30 0,96 164,07 42,07 35,06 1,27 96,97 9,12 -2,60 0,97 8 29,00 2,70 -3,90 0,88 30,30 4,17 -2,16 0,93 179,65 14,48 50,65 1,39 107,79 10,63 8,23 1,08 16 32,03 5,25 -0,87 0,97 32,47 5,66 0,00 1,00 217,32 23,39 88,31 1,68 115,15 7,38 15,58 1,16 PK 550,65 25,08 517,75 16,74 1712,12 130,29 1679,65 52,73 1124,68 116,90 995,67 8,72 1412,99 129,95 1313,42 14,19

Tabelle 8-103: Untersuchung des Extraktes (Ablauf Injektor Straße1) der Kläranlage Duisburg-Vierlinde n (Versuchseinstellung NOI-DU-E/5).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 7,38 0,00 1,00 32,47 3,90 0,00 1,00 129,00 20,99 0,00 1,00 99,57 13,01 0,00 1,00 1 29,87 7,90 -3,03 0,91 37,66 1,30 5,19 1,16 205,19 23,70 76,19 1,59 124,24 14,36 24,68 1,25 2 32,47 4,50 -0,43 0,99 25,11 6,14 -7,36 0,77 210,82 9,75 81,82 1,63 103,03 3,97 3,46 1,03 4 35,93 6,14 3,03 1,09 29,87 9,80 -2,60 0,92 190,91 24,26 61,90 1,48 116,02 14,25 16,45 1,17 8 30,30 10,81 -2,60 0,92 33,77 2,25 1,30 1,04 174,89 14,60 45,89 1,36 87,88 8,45 -11,69 0,88 16 27,71 2,70 -5,19 0,84 29,00 6,66 -3,46 0,89 213,42 16,34 84,42 1,65 115,58 19,39 16,02 1,16 PK 550,65 25,08 517,75 16,74 1712,12 130,29 1679,65 52,73 1124,68 116,90 995,67 8,72 1412,99 129,95 1313,42 14,19

Anhang 121


Tabelle 8-104: Untersuchung der Blindprobe der Klä ranlage Duisburg-Vierlinden (Versuchseinstellung DU -E/5-blank).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 28,57 5,95 0,00 1,00 32,47 4,50 0,00 1,00 91,77 8,45 0,00 1,00 109,52 9,40 0,00 1,00 1 28,57 9,37 0,00 1,00 32,90 6,66 0,43 1,01 112,12 8,45 20,35 1,22 105,63 1,98 -3,90 0,96 2 28,57 10,39 0,00 1,00 27,27 7,23 -5,19 0,84 94,81 5,95 3,03 1,03 101,30 9,09 -8,23 0,92 4 24,24 7,50 -4,33 0,85 27,27 2,25 -5,19 0,84 96,54 15,22 4,76 1,05 102,16 25,39 -7,36 0,93 8 29,87 5,19 1,30 1,05 32,03 9,40 -0,43 0,99 85,28 13,89 -6,49 0,93 91,34 6,00 -18,18 0,83 16 30,30 0,75 1,73 1,06 30,30 8,65 -2,16 0,93 97,84 31,93 6,06 1,07 98,27 13,33 -11,26 0,90 PK 592,64 118,29 564,07 20,74 2044,16 53,99 2011,69 62,96 1187,01 211,28 1095,24 12,93 2056,71 181,23 1947,19 18,78


VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 23,38 6,49 0,00 1,00 22,51 7,94 0,00 1,00 180,95 1,98 0,00 1,00 122,08 5,95 0,00 1,00 0,01 27,71 3,97 4,33 1,19 29,44 3,27 6,93 1,31 166,23 18,18 -14,72 0,92 120,35 13,76 -1,73 0,99 0,02 24,24 7,15 0,87 1,04 29,44 1,98 6,93 1,31 171,43 21,61 -9,52 0,95 118,61 2,70 -3,46 0,97 0,04 25,54 3,00 2,16 1,09 26,84 3,27 4,33 1,19 158,87 15,38 -22,08 0,88 131,17 13,50 9,09 1,07 0,08 25,11 1,50 1,73 1,07 22,94 6,14 0,43 1,02 138,96 24,88 -41,99 0,77 119,48 6,49 -2,60 0,98 0,20 21,21 0,75 -2,16 0,91 25,11 2,70 2,60 1,12 148,48 13,27 -32,47 0,82 114,29 21,38 -7,79 0,94 PK 705,63 77,84 682,25 30,19 1695,24 198,04 1672,73 75,31 819,05 94,91 638,10 4,53 1506,93 273,93 1384,85 12,34

Anhang 122


Tabelle 8-106: Untersuchung der Abwasserprobe (Abl auf Injektor Straße1) der Kläranlage Duisburg-Vierl inden (Versuchseinstellung NOI-DU/6).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 23,38 6,49 0,00 1,00 22,51 7,94 0,00 1,00 180,95 1,98 0,00 1,00 122,08 5,95 0,00 1,00 0,01 28,14 7,15 4,76 1,20 23,81 8,65 1,30 1,06 174,89 31,93 -6,06 0,97 145,02 16,70 22,94 1,19 0,02 27,27 7,23 3,90 1,17 25,11 4,92 2,60 1,12 178,35 6,66 -2,60 0,99 127,27 22,76 5,19 1,04 0,04 24,68 2,60 1,30 1,06 26,84 4,56 4,33 1,19 178,35 25,98 -2,60 0,99 124,24 17,68 2,16 1,02 0,08 21,65 1,50 -1,73 0,93 25,11 6,66 2,60 1,12 162,77 18,56 -18,18 0,90 111,69 10,31 -10,39 0,91 0,20 22,51 0,75 -0,87 0,96 21,21 5,41 -1,30 0,94 161,90 25,13 -19,05 0,89 133,33 18,20 11,26 1,09 PK 705,63 77,84 682,25 30,19 1695,24 198,04 1672,73 75,31 819,05 94,91 638,10 4,53 1506,93 273,93 1384,85 12,34

Tabelle 8-107: Untersuchung des Extraktes (Zulauf Ozonung) der Kläranlage Duisburg-Vierlinden (Versuc hseinstellung VO-DU-E/6).

VF

TA 98 TA 100


NK 32,90 7,38 0,00 1,00 32,47 3,90 0,00 1,00 129,00 20,99 0,00 1,00 99,57 13,01 0,00 1,00 1 35,71 11,94 2,81 1,09 28,57 3,67 -3,90 0,88 222,08 11,90 93,07 1,72 114,72 3,75 15,15 1,15 2 28,57 1,84 -4,33 0,87 25,32 0,92 -7,14 0,78 190,04 9,83 61,04 1,47 106,49 22,49 6,93 1,07 4 27,92 4,59 -4,98 0,85 26,62 6,43 -5,84 0,82 199,13 26,75 70,13 1,54 97,40 28,19 -2,16 0,98 8 29,87 9,18 -3,03 0,91 29,22 2,75 -3,25 0,90 181,39 28,58 52,38 1,41 99,13 8,65 -0,43 1,00 16 37,66 3,67 4,76 1,14 29,87 9,18 -2,60 0,92 211,26 14,77 82,25 1,64 115,15 5,25 15,58 1,16 PK 550,65 25,08 517,75 16,74 1712,12 130,29 1679,65 52,73 1124,68 116,90 995,67 8,72 1412,99 129,95 1313,42 14,19

Anhang 123


Tabelle 8-108: Untersuchung des Extraktes (Ablauf I njektor Straße1) der Kläranlage Duisburg-Vierlinden (Versuchseinstellung NOI-DU-E/6).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 7,38 0,00 1,00 32,47 3,90 0,00 1,00 129,00 20,99 0,00 1,00 99,57 13,01 0,00 1,00 1 32,47 8,11 -0,43 0,99 33,77 6,87 1,30 1,04 210,39 22,83 81,39 1,63 134,63 9,83 35,06 1,35 2 24,68 9,09 -8,23 0,75 32,03 3,27 -0,43 0,99 204,76 12,34 75,76 1,59 126,84 9,75 27,27 1,27 4 29,87 9,00 -3,03 0,91 29,44 3,27 -3,03 0,91 220,35 18,20 91,34 1,71 105,19 13,56 5,63 1,06 8 31,17 8,52 -1,73 0,95 30,30 1,98 -2,16 0,93 207,79 38,44 78,79 1,61 138,10 9,75 38,53 1,39 16 32,03 6,66 -0,87 0,97 29,87 3,44 -2,60 0,92 244,59 28,34 115,58 1,90 157,58 14,01 58,01 1,58 PK 550,65 25,08 517,75 16,74 1712,12 130,29 1679,65 52,73 1124,68 116,90 995,67 8,72 1412,99 129,95 1313,42 14,19


VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 7,38 0,00 1,00 32,47 3,90 0,00 1,00 129,00 20,99 0,00 1,00 99,57 13,01 0,00 1,00 1 31,60 2,70 -1,30 0,96 32,90 8,45 0,43 1,01 211,26 6,66 82,25 1,64 119,48 11,10 19,91 1,20 2 25,97 6,75 -6,93 0,79 29,00 12,07 -3,46 0,89 206,06 12,07 77,06 1,60 115,58 11,10 16,02 1,16 4 29,44 1,98 -3,46 0,89 26,41 0,75 -6,06 0,81 181,39 26,24 52,38 1,41 98,70 18,00 -0,87 0,99 8 27,27 4,68 -5,63 0,83 29,44 6,00 -3,03 0,91 151,52 6,41 22,51 1,17 99,57 5,41 0,00 1,00 16 31,60 3,00 -1,30 0,96 26,41 2,70 -6,06 0,81 200,43 10,09 71,43 1,55 91,34 14,60 -8,23 0,92 PK 550,65 25,08 517,75 16,74 1712,12 130,29 1679,65 52,73 1124,68 116,90 995,67 8,72 1412,99 129,95 1313,42 14,19

Anhang 124


Schwerte

Tabelle 8-110: Untersuchung der Abwasserprobe (Abla uf NK 2) der Kläranlage Schwerte (Versuchseinstellu ng VO-S/1).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 34,63 5,86 0,00 1,00 26,84 2,70 0,00 1,00 137,66 5,66 0,00 1,00 138,96 80,32 0,00 1,00 0,01 18,18 1,30 -16,45 0,53 26,41 1,98 -0,43 0,98 150,22 11,78 12,55 1,09 141,13 16,95 2,16 1,02 0,02 21,65 1,98 -12,99 0,63 27,27 5,95 0,43 1,02 138,10 14,01 0,43 1,00 138,10 24,86 -0,87 0,99 0,04 25,11 6,14 -9,52 0,73 29,87 2,60 3,03 1,11 129,44 23,10 -8,23 0,94 108,23 8,84 -30,74 0,78 0,08 25,97 1,30 -8,66 0,75 30,30 3,27 3,46 1,13 129,87 14,98 -7,79 0,94 142,86 18,86 3,90 1,03 0,20 20,78 1,30 -13,85 0,60 25,97 2,60 -0,87 0,97 141,56 26,52 3,90 1,03 136,36 6,87 -2,60 0,98 PK 645,89 113,24 611,26 18,65 1787,45 77,40 1760,61 66,60 1057,14 76,18 919,48 7,68 1529,22 882,91 1390,26 11,00

Tabelle 8-111: Untersuchung der Abwasserprobe (Abla uf Ozon) der Kläranlage Schwerte (Versuchseinstellu ng NO-S/1).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 34,63 5,86 0,00 1,00 26,84 2,70 0,00 1,00 137,66 5,66 0,00 1,00 138,96 80,32 0,00 1,00 0,01 26,84 8,84 -7,79 0,78 27,71 10,09 0,87 1,03 148,05 27,94 10,39 1,08 140,26 10,14 1,30 1,01 0,02 32,90 4,17 -1,73 0,95 22,51 3,27 -4,33 0,84 125,97 10,31 -11,69 0,92 133,77 18,86 -5,19 0,96 0,04 29,00 7,50 -5,63 0,84 29,87 4,68 3,03 1,11 121,21 26,63 -16,45 0,88 124,68 14,46 -14,29 0,90 0,08 25,97 4,68 -8,66 0,75 26,41 7,50 -0,43 0,98 122,51 10,50 -15,15 0,89 123,38 20,90 -15,58 0,89 0,20 25,54 1,98 -9,09 0,74 27,71 7,38 0,87 1,03 148,05 8,11 10,39 1,08 104,76 9,40 -34,20 0,75 PK 645,89 113,24 611,26 18,65 1787,45 77,40 1760,61 66,60 1057,14 76,18 919,48 7,68 1529,22 882,91 1390,26 11,00

Anhang 125


Tabelle 8-112: Untersuchung des Extraktes (Ablauf N K 2) der Kläranlage Schwerte (Versuchseinstellung V O-S-E/1).

VF

TA 98 TA 100


NK 28,57 5,95 0,00 1,00 32,47 4,50 0,00 1,00 91,77 8,45 0,00 1,00 109,52 9,40 0,00 1,00 1 32,90 2,70 4,33 1,15 26,84 4,92 -5,63 0,83 92,21 19,22 0,43 1,00 83,12 4,50 -26,41 0,76 2 16,02 1,50 -12,55 0,56 29,44 5,25 -3,03 0,91 93,94 27,38 2,16 1,02 91,34 6,54 -18,18 0,83 4 29,87 2,25 1,30 1,05 24,68 7,90 -7,79 0,76 106,06 6,14 14,29 1,16 90,04 5,25 -19,48 0,82 8 27,71 9,83 -0,87 0,97 24,24 4,56 -8,23 0,75 93,07 9,21 1,30 1,01 77,49 8,65 -32,03 0,71 16 32,03 1,98 3,46 1,12 30,74 2,70 -1,73 0,95 95,24 9,40 3,46 1,04 85,28 30,02 -24,24 0,78 PK 592,64 118,29 564,07 20,74 2044,16 53,99 2011,69 62,96 1187,01 211,28 1095,24 12,93 2056,71 181,23 1947,19 18,78

Tabelle 8-113: Untersuchung des Extraktes (Ablauf Ozon) der Kläranlage Schwerte (Versuchseinstellung NO-S-E/1).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 28,57 5,95 0,00 1,00 32,47 4,50 0,00 1,00 91,77 8,45 0,00 1,00 109,52 9,40 0,00 1,00 1 27,71 3,97 -0,87 0,97 32,47 8,11 0,00 1,00 85,28 2,70 -6,49 0,93 92,21 19,48 -17,32 0,84 2 36,36 5,66 7,79 1,27 36,36 6,87 3,90 1,12 83,98 9,57 -7,79 0,92 95,24 15,49 -14,29 0,87 4 26,84 3,00 -1,73 0,94 34,20 8,65 1,73 1,05 91,77 16,24 0,00 1,00 97,84 8,84 -11,69 0,89 8 29,00 4,17 0,43 1,02 28,14 9,75 -4,33 0,87 84,42 3,44 -7,36 0,92 98,70 20,29 -10,82 0,90 16 28,57 8,11 0,00 1,00 29,00 6,14 -3,46 0,89 78,79 16,95 -12,99 0,86 88,74 7,15 -20,78 0,81 PK 592,64 118,29 564,07 20,74 2044,16 53,99 2011,69 62,96 1187,01 211,28 1095,24 12,93 2056,71 181,23 1947,19 18,78

Anhang 126


Tabelle 8-114: Untersuchung der Blindprobe der Klär anlage Schwerte (Versuchseinstellung S-E/1-blank).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 28,57 5,95 0,00 1,00 32,47 4,50 0,00 1,00 91,77 8,45 0,00 1,00 109,52 9,40 0,00 1,00 1 28,57 9,80 0,00 1,00 32,47 4,68 0,00 1,00 98,27 10,50 6,49 1,07 94,81 7,79 -14,72 0,87 2 25,11 5,41 -3,46 0,88 24,68 3,44 -7,79 0,76 88,31 16,88 -3,46 0,96 87,01 9,09 -22,51 0,79 4 22,94 5,25 -5,63 0,80 31,17 5,95 -1,30 0,96 86,58 11,64 -5,19 0,94 83,98 9,21 -25,54 0,77 8 21,21 2,70 -7,36 0,74 32,90 7,94 0,43 1,01 100,00 27,64 8,23 1,09 100,87 11,78 -8,66 0,92 16 26,41 1,98 -2,16 0,92 26,84 7,38 -5,63 0,83 102,16 2,70 10,39 1,11 86,58 13,76 -22,94 0,79 PK 592,64 118,29 564,07 20,74 2044,16 53,99 2011,69 62,96 1187,01 211,28 1095,24 12,93 2056,71 181,23 1947,19 18,78

Tabelle 8-115: Untersuchung der Abwasserprobe (Abla uf NK 2) der Kläranlage Schwerte (Versuchseinstellu ng VO-S/2).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 34,63 5,86 0,00 1,00 26,84 2,70 0,00 1,00 137,66 5,66 0,00 1,00 138,96 80,32 0,00 1,00 0,01 29,00 6,14 -5,63 0,84 25,11 5,41 -1,73 0,94 136,36 15,31 -1,30 0,99 151,08 23,39 12,12 1,09 0,02 32,03 3,97 -2,60 0,93 25,54 4,92 -1,30 0,95 126,84 9,83 -10,82 0,92 134,63 5,25 -4,33 0,97 0,04 22,51 1,50 -12,12 0,65 27,71 4,56 0,87 1,03 130,74 16,44 -6,93 0,95 141,56 6,49 2,60 1,02 0,08 21,43 4,59 -13,20 0,62 23,81 2,70 -3,03 0,89 126,84 6,41 -10,82 0,92 129,44 23,57 -9,52 0,93 0,20 27,71 1,98 -6,93 0,80 21,21 8,45 -5,63 0,79 153,25 21,26 15,58 1,11 122,51 8,35 -16,45 0,88 PK 645,89 113,24 611,26 18,65 1787,45 77,40 1760,61 66,60 1057,14 76,18 919,48 7,68 1529,22 882,91 1390,26 11,00

Anhang 127


Tabelle 8-116: Untersuchung der Abwasserprobe (Abl auf Ozon) der Kläranlage Schwerte (Versuchseinstell ung NO-S/2).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 34,63 5,86 0,00 1,00 26,84 2,70 0,00 1,00 137,66 5,66 0,00 1,00 138,96 80,32 0,00 1,00 0,01 23,81 7,15 -10,82 0,69 34,20 8,45 7,36 1,27 137,66 3,90 0,00 1,00 157,58 5,25 18,61 1,13 0,02 21,21 3,97 -13,42 0,61 29,44 7,38 2,60 1,10 131,60 13,07 -6,06 0,96 149,78 32,08 10,82 1,08 0,04 25,11 4,17 -9,52 0,73 21,65 3,75 -5,19 0,81 128,57 12,39 -9,09 0,93 133,33 7,15 -5,63 0,96 0,08 25,97 2,25 -8,66 0,75 27,27 1,30 0,43 1,02 129,44 25,46 -8,23 0,94 124,24 8,65 -14,72 0,89 0,20 24,24 3,00 -10,39 0,70 26,41 6,66 -0,43 0,98 135,50 27,92 -2,16 0,98 122,08 16,88 -16,88 0,88 PK 645,89 113,24 611,26 18,65 1787,45 77,40 1760,61 66,60 1057,14 76,18 919,48 7,68 1529,22 882,91 1390,26 11,00

Tabelle 8-117: Untersuchung des Extraktes (Ablauf N K 2) der Kläranlage Schwerte (Versuchseinstellung V O-S-E/2).

VF

TA 98 TA 100


NK 32,90 12,61 0,00 1,00 38,96 5,66 0,00 1,00 107,79 9,37 0,00 1,00 87,88 18,83 0,00 1,00 1 35,50 6,14 2,60 1,08 35,93 7,61 -3,03 0,92 103,90 14,64 -3,90 0,96 102,16 19,49 14,29 1,16 2 31,60 2,70 -1,30 0,96 32,90 1,98 -6,06 0,84 100,00 9,37 -7,79 0,93 128,14 5,86 40,26 1,46 4 30,74 2,70 -2,16 0,93 25,54 4,17 -13,42 0,66 112,12 11,64 4,33 1,04 98,27 18,24 10,39 1,12 8 38,53 9,21 5,63 1,17 32,03 9,21 -6,93 0,82 106,93 16,55 -0,87 0,99 93,07 16,75 5,19 1,06 16 35,06 7,90 2,16 1,07 32,03 1,98 -6,93 0,82 108,66 21,11 0,87 1,01 100,87 21,11 12,99 1,15 PK 484,85 86,93 451,95 14,74 1881,82 116,06 1842,86 48,30 1049,78 182,72 941,99 9,74 1706,06 118,75 1618,18 19,41

Anhang 128


Tabelle 8-118: Untersuchung des Extraktes (Ablauf O zon) der Kläranlage Schwerte (Versuchseinstellung N O-S-E/2).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 12,61 0,00 1,00 38,96 5,66 0,00 1,00 107,79 9,37 0,00 1,00 87,88 18,83 0,00 1,00 1 44,16 12,52 11,26 1,34 32,90 1,98 -6,06 0,84 95,67 8,35 -12,12 0,89 101,30 8,11 13,42 1,15 2 29,44 4,56 -3,46 0,89 32,03 5,86 -6,93 0,82 102,60 9,80 -5,19 0,95 104,76 13,01 16,88 1,19 4 33,33 3,00 0,43 1,01 34,20 9,57 -4,76 0,88 93,07 11,05 -14,72 0,86 90,91 9,80 3,03 1,03 8 35,50 7,15 2,60 1,08 29,00 10,58 -9,96 0,74 97,40 4,50 -10,39 0,90 80,52 8,11 -7,36 0,92 16 33,77 4,50 0,87 1,03 30,30 1,98 -8,66 0,78 85,28 20,87 -22,51 0,79 96,97 4,17 9,09 1,10 PK 484,85 86,93 451,95 14,74 1881,82 116,06 1842,86 48,30 1049,78 182,72 941,99 9,74 1706,06 118,75 1618,18 19,41

Tabelle 8-119: Untersuchung der Blindprobe der Klär anlage Schwerte (Versuchseinstellung S-E/2-blank).

VF

TA 98 TA 100 - S9 + S9 - S9 + S9

AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR AM SA ID MR NK 32,90 12,61 0,00 1,00 38,96 5,66 0,00 1,00 107,79 9,37 0,00 1,00 87,88 18,83 0,00 1,00 1 38,53 7,94 5,63 1,17 38,53 14,36 -0,43 0,99 110,82 17,92 3,03 1,03 105,63 27,98 17,75 1,20 2 35,50 6,41 2,60 1,08 33,77 2,25 -5,19 0,87 95,67 9,83 -12,12 0,89 109,96 38,05 22,08 1,25 4 37,23 8,45 4,33 1,13 38,53 3,00 -0,43 0,99 111,26 16,75 3,46 1,03 107,79 8,11 19,91 1,23 8 33,33 10,89 0,43 1,01 35,06 11,32 -3,90 0,90 103,90 11,69 -3,90 0,96 107,36 28,61 19,48 1,22 16 33,33 3,00 0,43 1,01 35,06 15,75 -3,90 0,90 99,13 13,89 -8,66 0,92 88,74 20,38 0,87 1,01 PK 484,85 86,93 451,95 14,74 1881,82 116,06 1842,86 48,30 1049,78 182,72 941,99 9,74 1706,06 118,75 1618,18 19,41

Anhang 129


8.6.3 Ergebnistabellen Comet Assay

Bad Sassendorf

Tabelle 8-120: Ergebnisse des Comet Assay (Olive Ta il Moment) für die Kläranalage Bad Sassendorf, 7. Probenahme.

Bad Sassendorf, 7. Probenahme O3

[zspez]

OTM 95%-KI des GM p-Wert* Änderung gegenüber

Zulauf AM ±SA GM uG oG vs. NK /Blank

vs. Zulauf

Abwasser

Zulauf Ozonung, 1 h VO-BS/7

0,7

11,6 17,3 2,36 1,56 3,58 0,030

Ablauf Ozonung, 1 h NO-BS/7 8,91 14,7 1,91 1,22 2,98 0,759 n.t.

Zulauf Ozonung, 24 h VO-BS/7 5,19 11,1 0,47 0,25 0,89 0,041

Ablauf Ozonung, 24 h NO-BS/7 7,37 17,4 0,96 0,58 1,61 0,063 n.t.

Neg. Kontrolle VO NK1 9,30 17,9 1,01 0,57 1,80

Neg. Kontrolle NO NK2 6,93 11,5 2,01 1,41 2,85

Pos. Kontrolle PK 20,6 19,0 9,29 6,91 12,5

Extrakt

Zulauf Ozonung, 1 h VO-BS-E/7

0,7

4,77 6,45 1,19 0,73 1,94 0,805

Ablauf Ozonung, 1 h NO-BS-E/7 12,1 22,9 1,44 0,82 2,51 0,420 0,253 �

Zulauf Ozonung, 24 h VO-BS-E/7 5,36 10,5 0,78 0,46 1,33 0,052

Ablauf Ozonung, 24 h NO-BS-E/7 7,72 14,6 1,38 0,89 2,15 0,492 0,200 �

Neg. Kontrolle Extrakte NK1 6,93 11,5 2,01 1,41 2,85

Blank 1 h Blank 1 h 7,48 13,0 1,18 0,68 2,05 0,291

Blank 24 h Blank 24 h 7,60 14,1 1,62 1,06 2,48 0,358

Neg.Kontrolle Blanks NK2 6,84 9,42 1,58 0,96 2,61 0,805

Pos. Kontrolle PK 31,7 27,6 16,3 12,8 20,8

Anzahl gemessener Zellkerne pro Probe = 153, OTM = Olive Tail Moment, NK = Negativkontrolle, AM = arithm. Mittelwert, SA = Standardabweichung, GM = geom. Mittelwert, 95%-KI = Konfidenzintervall des geom. MW; uG = untere Grenz, oG = obereGrenze; * = Mann Whitney U-Test; ��= signifikante Zu-/Abnahme (p≤0,05), � = keine signifikante Veränderung, � � = TrendZu- oder Abnahme (p≤0,1); n.t. = not tested: Test gegen VO nicht möglich.

Anhang 130




[zspez]

OTM 95%-KI des

GM p-Wert* Änderung gegenüber


vs. Zulauf

Abwasser

Zulauf Ozonung 1 h VO-BS/8

0,7

4,36 9,21 0,69 0,39 1,23 0,010

Ablauf Ozonung 1 h NO-BS/8 2,57 3,30 0,43 0,25 0,76 <0,001 0,038 �

Ablauf Schönungsteich 1 h

NOB-BS/8 3,47 4,38 0,51 0,27 0,96 0,524 n.t.

Zulauf Ozonung 24 h VO-BS/8 4,16 8,61 0,45 0,25 0,82 <0,001

Ablauf Ozonung 24 h NO-BS/8 4,32 8,88 0,52 0,28 0,97 0,002 0,335 �

Ablauf Schönungsteich 24 h NOB-BS/8 3,38 3,88 0,55 0,31 0,99 0,564 n.t.

Negativkontrolle VO/NO NK1 6,93 11,5 2,01 1,41 2,85

Negativkontrolle NOB NK2 4,03 7,95 0,71 0,40 1,23

Positivkontrolle PK 30,6 32,3 12,4 8,81 17,5

Extrakt

Zulauf Ozonung 1 h VO-BS-E/8

0,7

8,74 15,33 0,94 0,52 1,68 0,022

Ablauf Ozonung 1 h NO-BS-E/8 5,38 8,90 0,85 0,51 1,44 0,075 0,523 �


NOB-BS-E/8 6,82 8,15 1,94 1,21 3,11 <0,001# 0,002 �

Zulauf Ozonung 24 h VO-BS-E/8 4,30 9,12 0,28 0,13 0,58 0,001


Ablauf biol. Nach-behandlung 24 h

NOB-BS-E/8 6,60 7,88 3,08 2,26 4,19 <0,001# <0,001 �

Blindwert 1 h Blank 1 h 3,83 7,37 0,40 0,20 0,76 <0,001

Blindwert 24 h Blank 24 h 6,73 12,2 1,34 0,82 2,19 0,320

Negativkontrolle VO/NO NK1 6,84 9,42 1,58 0,96 2,61

Negativkontrolle NOB NK2 4,48 4,61 1,25 0,77 2,01


Extrakt (Wiederholung)


0,7

5,42 5,73 2,80 2,21 3,55 0,001#

Ablauf Ozonung 1 h NO-BS-E/8 6,28 8,63 3,04 2,36 3,90 <0,001# 0,540 �


NOB-BS-E/8 8,54 12,5 3,71 2,87 4,78 <0,001# 0,104 �

Zulauf Ozonung 24 h VO-BS-E/8 4,83 4,32 1,94 1,29 2,91 0,003#

Ablauf Ozonung 24 h NO-BS-E/8 6,15 5,50 3,17 2,46 4,08 <0,001# 0,043 �


NOB-BS-E/8 5,13 7,40 1,45 0,89 2,36 0,025# 0,009 �

Negativkontrolle NK 3,95 5,50 0,73 0,43 1,26


Anzahl gemessener Zellkerne pro Probe = 153, OTM = Olive Tail Moment, NK = Negativkontrolle, AM = arithm. Mittelwert, SA = Standardabweichung, GM = geom. Mittelwert, 95%-KI = Konfidenzintervall des geom. MW; uG = untere Grenz, oG = obereGrenze; * = Mann Whitney U-Test; ��= signifikante Zu-/Abnahme (p≤0,05), � = keine signifikante Veränderung, � � = Trendfür Zu- oder Abnahme (p≤0,1), # = getestet gegen NK; n.t. = not tested: Test gegen NO nicht möglich.

Anhang 131




[zspez]

OTM 95%-KI des



vs. Zulauf

Abwasser


0,9

6,07 13,4 1,46 0,99 2,15 0,984


Zulauf Ozonung 24 h VO-BS/9 3,94 6,14 0,70 0,42 1,18 0,197




Extrakt


0,9

5,29 8,12 0,98 0,58 1,66 0,447


Zulauf Ozonung 24 h VO-BS-E/9 4,76 8,26 0,45 0,23 0,87 0,872






Anzahl gemessener Zellkerne pro Probe = 153, OTM = Olive Tail Moment, NK = Negativkontrolle, AM = arithm. Mittelwert, SA = Standardabweichung, GM = geom. Mittelwert, 95%-KI = Konfidenzintervall des geom. MW; uG = untere Grenze, oG = obereGrenze; * = Mann Whitney U-Test; ��= signifikante Zu-/Abnahme (p≤0,05), � = keine signifikante Veränderung, � � = Trendfür Zu- oder Abnahme (p≤0,1).

Anhang 132


Tabelle 8-123: Ergebnisse des Comet Assay (Olive Ta il Moment) für die Kläranalage Bad Sassendorf, 9. Probenahme, Wiederholungsversuch .

Bad Sassendorf, 9. Probenahme (Wiederholung)

O3

[zspez]

OTM 95%-KI des



vs. Zu-lauf

Abwasser


0,9

8,46 11,1 1,93 1,15 3,24 <0,001


Zulauf Ozonung 24 h VO-BS/9 7,45 9,8 2,49 1,66 3,74 <0,001

Ablauf Ozonung 24 h NO-BS/9 12,2 16,4 3,13 1,98 4,93 <0,001 0,085 �



Extrakt


0,9

7,92 14,1 1,09 0,63 1,89 <0,001#

Ablauf Ozonung 1 h NO-BS-E/9 9,02 16,5 1,29 0,75 2,20 0,067# 0,904 �

Zulauf Ozonung 24 h VO-BS-E/9 7,58 12,5 1,25 0,72 2,14 <0,001#

Ablauf Ozonung 24 h NO-BS-E/9 7,84 12,6 2,35 1,73 3,19 0,012# 0,544 �



Nachuntersuchung Schönungsteich

Abwasser

Ablauf Ozonung 1 h NO-BS/9

0,9

6,00 8,35 1,45 0,92 2,28 0,053

Ablauf biol. Nachbehandlung 1 h

NOB-BS/9 3,94 5,35 0,98 0,60 1,58 0,782 0,110 �

Ablauf Ozonung 24 h NO-BS/9 6,62 8,71 1,92 1,20 3,09 <0,001


NOB-BS/9 4,87 6,78 1,36 0,86 2,17 0,114 0,047 �



Extrakt

Ablauf Ozonung 1 h NO-BS-E/9

0,9

3,45 5,01 0,34 0,17 0,68 0,120#


NOB-BS-E/9 5,14 9,29 1,41 0,95 2,09 0,460# 0,025 �

Ablauf Ozonung 24 h NO-BS-E/9 3,25 3,65 0,77 0,47 1,28 0,503#


NOB-BS-E/9 4,95 7,06 1,23 0,79 1,90 0,531# 0,224 �



Anzahl gemessener Zellkerne pro Probe = 153, OTM = Olive Tail Moment, NK = Negativkontrolle, AM = arithm. Mittelwert, SA = Standardabweichung, GM = geom. Mittelwert, 95%-KI = Konfidenzintervall des geom. MW; uG = untere Grenz, oG = obere Grenze; * = Mann Whitney U-Test; ��= signifikante Zu-/Abnahme (p≤0,05), � = keine signifikante Veränderung, � � = Trend für Zu- oder Abnahme (p≤0,1), # = getestet gegen NK.

Anhang 133


Duisburg-Vierlinden

Tabelle 8-124: Ergebnisse des Comet Assay (Olive Ta il Moment) für die Kläranlage Duisburg-Vierlinden, 1. Probenahme.

OTM

95%-KI des GM p-Wert*

Ände -rung

gegen-über

Zulauf

Duisburg-Vierlinden, 1. Probenahme

O3

[zspez] AM ±SA GM uG oG vs. NK / Blank

vs. Zulauf

Abwasser

Zulauf Ozonung 1 h VO-DU/1

1,03 1,09 0,37 0,25 0,56 0,118

Ablauf Diffusor 1 h NOD-DU/1 1,02 1,29 0,18 0,10 0,32 0,007 0,189 �


NOIB-DU/1 1,21 1,26 0,40 0,26 0,62 0,646 0,451## �

Zulauf Ozonung 24 h VO-DU/1 1,04 1,21 0,20 0,11 0,36 0,040



NOIB-DU/1 1,09 1,26 0,34 0,22 0,53 0,111 0,509## �

Neg. Kontrolle NK 1,28 1,32 0,50 0,34 0,72

Pos. Kontrolle PK 7,44 6,67 4,90 4,19 5,73

Extrakt

Zulauf Ozonung 1 h VO-DU-E/1

0,73 1,10 0,01 0,00 0,02 <0,001#

Ablauf Diffusor 1 h NOD-DU-E/1 2,43 15,38 0,62 0,45 0,86 0,560# <0,001 �


NOIB-DU-E/1 1,16 1,31 0,59 0,45 0,76 0,091# <0,001## �

Zulauf Ozonung 24 h VO-DU-E/1 1,03 1,08 0,53 0,41 0,68 0,010#

Ablauf Diffusor 24 h NOD-DU-E/1 0,61 0,84 0,01 0,00 0,02 <0,001# <0,001 �


NOIB-DU-E/1 1,25 1,18 0,54 0,37 0,77 0,497# 0,087## �

Neg. Kontrolle NK 1,30 1,18 0,74 0,58 0,95

Pos. Kontrolle PK 10,6 9,53 7,00 5,98 8,18

Anzahl gemessener Zellkerne pro Probe = 153, OTM = Olive Tail Moment, NK = Negativkontrolle, AM = arithm. Mittelwert, SA = Standardabweichung, GM = geom. Mittelwert, 95%-KI = Konfidenzintervall des geom. MW; uG = untere Grenz, oG = obere Grenze; * = Mann Whitney U-Test; ��= signifikante Zu-/Abnahme (p≤0,05), � = keine signifikante Veränderung, � � = Trend für Zu- oder Abnahme (p≤0,1), # = getestet gegen NK, ## = getestet gegen VO.

Anhang 134



OTM

95%-KI des GM p-Wert* Änderung

gegenüber Zulauf

Duisburg -Vierlinden, 2. Probenahme

O3


vs. Zu -lauf

Abwasser


0,5

4,84 8,00 0,58 0,33 1,04 0,866



NOIB-DU/2 5,61 15,1 0,23 0,11 0,50 0,160 0,704## �




NOIB-DU/2 6,38 13,7 0,74 0,40 1,35 0,339 0,006## �

Neg. Kontrolle NK 3,62 4,59 0,51 0,27 0,95

Pos. Kontrolle PK 34,4 29,6 13,3 8,61 20,5

Extrakt


0,5

18,5 24,1 3,86 2,34 6,37 0,901

Ablauf Diffusor 1 h NOD-DU-E/2 14,7 19,8 4,03 2,55 6,37 0,701 0,704 �


NOIB-DU-E/2 19,3 24,0 7,73 5,89 10,1 0,221 0,215## �

Zulauf Ozonung 24 h VO-DU-E/2 14,3 16,9 5,18 3,63 7,40 0,720



NOIB-DU-E/2 10,5 15,6 3,70 2,76 4,95 0,006 0,006## �



Neg. Kontrolle NK 11,2 20,5 2,99 2,09 4,27

Pos. Kontrolle PK 77,2 45,0 48,3 35,6 65,4

Anzahl gemessener Zellkerne pro Probe = 153, OTM = Olive Tail Moment, NK = Negativkontrolle, AM = arithm. Mittelwert, SA = Standardabweichung, GM = geom. Mittelwert, 95%-KI = Konfidenzintervall des geom. MW; uG = untere Grenz, oG = obere Grenze; * = Mann Whitney U-Test; ��= signifikante Zu-/Abnahme (p≤0,05), � = keine signifikante Veränderung, � � = Trend für Zu- oder Abnahme (p≤0,1), ## = getestet gegen VO.

Anhang 135



OTM


gegenüb. Zulauf


O3


vs. Zu -lauf

Abwasser


0,5

18,1 26,1 3,24 1,99 5,26 0,000



NOIB-DU/3 11,5 25,5 1,17 0,65 2,11 0,012 0,003## �

Zulauf Ozonung 24 h VO-DU/3 13,0 23,7 2,50 1,62 3,86 <0,001

Ablauf Diffusor 24 h NOD-DU/3 9,86 21,0 1,56 0,88 2,78 <0,001 0,444 �


NOIB-DU/3 9,01 20,6 1,50 0,93 2,43 0,015 0,048## �

Neg. Kontrolle NK 3,62 4,6 0,51 0,27 0,95

Pos. Kontrolle PK 45,2 43,3 20,6 15,1 28,1

Extrakt


0,5

21,0 32,7 4,26 2,78 6,52 0,626



NOIB-DU-E/3 20,9 23,0 7,28 5,09 10,4 0,002 0,024## �


Ablauf Diffusor 24 h NOD-DU-E/3 7,82 15,9 1,18 0,71 1,96 <0,001 0,494 �


NOIB-DU-E/3 17,7 29,8 3,05 1,89 4,91 0,476 0,007## �



Neg. Kontrolle NK 17,3 24,5 2,99 2,09 4,27

Pos. Kontrolle PK 84,0 41,2 34,2 28,1 41,5

Anzahl gemessener Zellkerne pro Probe = 153, OTM = Olive Tail Moment, NK = Negativkontrolle, AM = arithm. Mittelwert, SA = Standardabweichung, GM = geom. Mittelwert, 95%-KI = Konfidenzintervall des geom. MW; uG = untere Grenz, oG = obere Grenze; * = Mann Whitney U-Test; ��= signifikante Zu-/Abnahme (p≤0,05), � = keine signifikante Veränderung, � � = Trend für Zu- oder Abnahme (p≤0,1), ## = getestet gegen VO.

Anhang 136



OTM


gegenüb. Zulauf


O3


vs. Zu -lauf

Abwasser


0,7

3,03 3,70 0,58 0,35 0,98 0,230


Ablauf Injektor 1 h NOI-DU/4 4,29 8,82 0,46 0,24 0,89 0,349 0,691 �


NOIB-DU/4 4,58 8,51 0,94 0,66 1,35 0,817 0,702 �





NOIB-DU/4 4,13 6,79 1,01 0,61 1,67 0,742 0,276 �



Extrakt


0,7

2,75 4,25 0,37 0,20 0,68 0,695


Ablauf Injektor 1 h NOI-DU-E/4 3,62 4,97 0,73 0,41 1,30 0,032 0,011 �


NOIB-DU-E/4 3,40 3,98 1,05 0,70 1,57 0,051 0,710 �



Ablauf Injektor 24 h NOI-DU-E/4 2,16 2,78 1,10 0,72 1,69 <0,001 <0,017 �


NOIB-DU-E/4 3,43 3,49 0,90 0,57 1,43 0,469 <0,001 �





Anzahl gemessener Zellkerne pro Probe = 153, OTM = Olive Tail Moment, NK = Negativkontrolle, AM = arithm. Mittelwert, SA = Standardabweichung, GM = geom. Mittelwert, 95%-KI = Konfidenzintervall des geom. MW; uG = untere Grenz, oG = obere Grenze; * = Mann Whitney U-Test; ��= signifikante Zu-/Abnahme (p≤0,05), � = keine signifikante Veränderung, � � = Trend für Zu- oder Abnahme (p≤0,1).

Anhang 137



OTM


gegenüb. Zulauf


O3


vs. Zu -lauf

Abwasser


0,7

2,35 3,82 0,10 0,05 0,24 0,100

Ablauf Diffusor 1 h NOD-DU/5 8,26 13,1 1,64 1,01 2,66 <0,001 <0,001 �

Ablauf Injektor 1 h NOI-DU/5 7,10 9,63 2,76 2,00 3,81 <0,001 <0,001 �


NOIB-DU/5 4,18 7,52 0,80 0,47 1,35 0,029 <0,001 �


Ablauf Diffusor 24 h NOD-DU/5 5,80 11,26 1,36 0,85 2,16 <0,001 0,660 �

Ablauf Injektor 24 h NOI-DU/5 5,50 7,78 1,38 0,86 2,23 <0,001 0,859 �


NOIB-DU/5 4,53 7,65 1,06 0,68 1,65 0,019 0,075 ↘



Extrakt


0,7

2,10 5,35 0,06 0,02 0,13 <0,001

Ablauf Diffusor 1 h NOD-DU-E/5 5,46 9,23 0,86 0,50 1,47 0,021# n.t.


NOIB-DU-E/5 4,02 6,74 0,68 0,39 1,17 0,200 <0,001## �


Ablauf Diffusor 24 h NOD-DU-E/5 3,76 4,87 0,58 0,31 1,08 0,075# n.t.


NOIB-DU-E/5 3,95 6,74 0,58 0,31 1,08 0,088 0,884## �





Anzahl gemessener Zellkerne pro Probe = 153, OTM = Olive Tail Moment, NK = Negativkontrolle, AM = arithm. Mittelwert, SA = Standardabweichung, GM = geom. Mittelwert, 95%-KI = Konfidenzintervall des geom. MW; uG = untere Grenz, oG = obere Grenze; * = Mann Whitney U-Test; ��= signifikante Zu-/Abnahme (p≤0,05), � = keine signifikante Veränderung, � � = Trend für Zu- oder Abnahme (p≤0,1), # = getestet gegen NK, ## = getestet gegen VO; n.t. = not tested, Test gegen VO nicht möglich.

Anhang 138


Tabelle 8-129: Ergebnisse des Comet Assay (Olive Ta il Moment) für die Kläranlage Duisburg-Vierlinden, 5. Probenahme, Wiederholungsve rsuch.

OTM


gegen-über

Zulauf

Duisburg -Vierlinden, 5. Probenahme (Wiederholungsversuch)

O3


vs. Zu-lauf

Abwasser


0,7

3,54 4,84 0,46 0,24 0,87 0,249



NOIB-DU/5 3,19 3,79 0,57 0,33 0,99 0,206 <0,001 �




NOIB-DU/5 3,38 4,45 0,47 0,24 0,89 0,315 <0,001 �



Extrakt


0,7

10,5 19,5 1,63 1,04 2,56 0,062#

Ablauf Injektor 1 h NOI-DU-E/5 3,58 4,21 0,85 0,53 1,37 0,728# 0,034 �


NOIB-DU-E/5 14,5 19,2 3,93 2,56 6,03 <0,001# <0,001 �

Zulauf Ozonung 24 h VO-DU-E/5 9,22 11,53 3,01 2,04 4,45 <0,001#

Ablauf Injektor 24 h NOI-DU-E/5 4,20 6,63 1,01 0,64 1,61 0,775# <0,001 �


NOIB-DU-E/5 3,71 5,47 0,56 0,29 1,08 0,614# 0,466 �



Anzahl gemessener Zellkerne pro Probe = 153, OTM = Olive Tail Moment, NK = Negativkontrolle, AM = arithm. Mittelwert, SA = Standardabweichung, GM = geom. Mittelwert, 95%-KI = Konfidenzintervall des geom. MW; uG = untere Grenz, oG = obere Grenze; * = Mann Whitney U-Test; ��= signifikante Zu-/Abnahme (p≤0,05), � = keine signifikante Veränderung, � � = Trend für Zu- oder Abnahme (p≤0,1), # = getestet gegen NK.

Anhang 139



OTM


Änderung gegen-

über Zulauf


O3


vs. Zu -lauf

Abwasser


0,9

5,29 7,53 1,08 0,63 1,85 <0,001




NOIB-DU/6 9,23 11,3 2,83 1,88 4,24 <0,001 <0,001 �


Ablauf Diffusor 24 h NOD-DU/6 2,89 6,18 0,26 0,13 0,51 0,394 <0,001 �

Ablauf Injektor 24 h NOI-DU/6 5,22 9,10 0,67 0,36 1,26 0,021 <0,001 �


NOIB-DU/6 5,26 9,98 0,79 0,46 1,34 0,067 0,710 �



Abwasser (Wiederholung)


0,9

4,70 8,82 0,86 0,51 1,45 0,767



NOIB-DU/6 5,30 6,29 1,14 0,65 2,01 0,015 0,106 �




NOIB-DU/6 4,41 5,07 0,96 0,56 1,66 0,185 0,367 �



Extrakt


0,9

7,25 11,0 1,76 1,13 2,73 0,002#



NOIB-DU-E/6 5,21 6,14 1,53 0,98 2,38 0,011# 0,050 �

Zulauf Ozonung 24 h VO-DU-E/6 3,44 4,59 0,55 0,30 1,00 0,277#



NOIB-DU-E/6 4,65 6,05 1,01 0,58 1,77 0,116# 0,781 �





Anzahl gemessener Zellkerne pro Probe = 153, OTM = Olive Tail Moment, NK = Negativkontrolle, AM = arithm. Mittelwert, SA = Standardabweichung, GM = geom. Mittelwert, 95%-KI = Konfidenzintervall des geom. MW; uG = untere Grenz, oG = obere Grenze; * = Mann Whitney U-Test; ��= signifikante Zu-/Abnahme (p≤0,05), � = keine signifikante Veränderung, � � = Trend für Zu- oder Abnahme (p≤0,1) # = getestet gegen NK.

Anhang 140


Tabelle 8-131: Ergebnisse des Comet Assay (Olive Ta il Moment) für die Kläranalage Schwerte, 1. und 2. Probenahme.

OTM


gegen-über NO Schwerte, 1. Probenahme

O3


vs. Zu -lauf

Abwasser

Zulauf Ozonung 1 h VO-S/1

0,9

4,48 5,17 0,81 0,45 1,45 0,570 0,044 �

Ablauf Ozonung 1 h NO-S/1 5,48 6,39 2,40 1,74 3,32 0,126

Zulauf Ozonung 24 h VO-S/1 5,48 6,77 1,89 1,24 2,88 0,080 0,065 �


Neg. Kontrolle NK 4,48 4,61 1,25 0,77 2,01

Pos. Kontrolle PK 35,1 18,6 28,0 24,5 32,0

Extrakt

Zulauf Ozonung 1 h VO-S-E/1

0,9

5,80 6,69 1,53 0,91 2,59 0,222 0,370 �

Ablauf Ozonung 1 h NO-S-E/1 5,94 7,96 2,02 1,43 2,85 0,051

Zulauf Ozonung 24 h VO-S-E/1 6,42 6,76 2,34 1,57 3,49 0,018 0,277 �




Neg. Kontrolle NK 4,48 4,61 1,25 0,77 2,01

Pos. Kontrolle PK 25,1 20,5 14,5 11,3 18,6

Schwerte, 2. Probenahme

Abwasser


0,9

3,82 4,43 0,93 0,55 1,56 0,204 0,239 �


Zulauf Ozonung 24 h VO-S/2 3,34 4,86 0,76 0,48 1,21 0,013 <0,001 �


Neg. Kontrolle NK 4,48 4,61 1,25 0,77 2,01

Pos. Kontrolle PK 29,0 18,4 23,5 21,1 26,3

Extrakt

Zulauf Ozonung 1 h VO-S-E/2

0,9

4,05 9,29 0,66 0,41 1,09 0,633 0,202 �


Zulauf Ozonung 24 h VO-S-E/2 4,34 7,36 0,45 0,23 0,88 0,977 0,173 �




Neg. Kontrolle NK 2,77 3,70 0,35 0,19 0,66

Pos. Kontrolle PK 35,1 23,1 26,3 22,5 30,6


Anhang 141


Tabelle 8-132: Ergebnisse des Comet Assay (Olive Ta il Moment) für Kläranalage Schwerte, 4. Probenahme.

OTM


Änderung gegen-über

Zulauf Schwerte, 4. Probenahme

O3

[zspez] AM ±SA GM uG oG vs. NK vs. Zu -

lauf

Abwasser


0,9

4,38 5,11 1,10 0,69 1,76 0,348 0,042 �


Ablauf PAK 1 h PAK-S/4 3,66 7,51 0,76 0,47 1,25 0,437 0,747 �

Zulauf Ozonung 24 h VO-S/4 3,29 3,59 0,71 0,43 1,17 0,493 0,168 �


Ablauf PAK 24 h PAK-S/4 4,26 5,19 0,81 0,45 1,46 0,464 0,932 �

Neg. Kontrolle NK 3,43 3,57 0,99 0,63 1,54

Pos. Kontrolle PK 45,1 30,6 34,4 30,2 39,1


Anhang 142


8.6.4 Ergebnistabellen der ökotoxikologischen In-vivo Tests

Tabelle 8-133: Untersuchung der Abwasserproben aus Bad Sassendorf (Probe-nahme 1-5 aus 1. Projektphase im Algenhemmtest in d en Verdünnungsstufen (G1-G8). Angabe der Wachstumsrate [1/Tag].

Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11 1,59 1,46 1,29 1,31 1,23 1,59 1,44 1,22 1,10 0,932 1,55 1,54 1,33 1,29 1,13 1,55 1,43 1,23 1,16 1,023 1,57 1,54 1,37 1,22 1,18 1,57 1,41 1,22 1,10 1,044 1,54 1,545 1,56 1,566 1,71 1,71Mittelwert 1,59 1,51 1,33 1,27 1,18 1,59 1,43 1,23 1,12 1,00Standard-abweichung 0,06 0,05 0,04 0,04 0,05 0,06 0,02 0,01 0,03 0,06Variations-koeffizient [%] 3,8 3,3 2,8 3,5 4,2 3,8 1,3 0,5 2,8 6,0


Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11 1,36 1,15 1,18 0,91 0,81 1,36 0,65 0,42 0,44 0,332 1,51 1,05 0,94 1,03 0,67 1,51 0,86 0,29 0,21 0,453 1,41 1,12 0,92 1,01 0,92 1,41 0,69 0,57 -0,09 0,184 1,39 1,395 1,38 1,386 1,37 1,37Mittelwert 1,40 1,10 1,01 0,98 0,80 1,40 0,74 0,43 0,19 0,32Standard-abweichung 0,06 0,05 0,14 0,06 0,12 0,06 0,11 0,14 0,27 0,14Variations-koeffizient [%] 4,1 4,5 14,2 6,2 15,3 4,1 15,0 32,7 141,5 42,8

Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11,57 1,37 1,05 0,91 0,72 1,57 1,01 0,90 0,53 0,311,31 0,69 1,13 0,96 0,84 1,31 1,14 0,87 0,43 0,381,59 1,35 1,09 0,87 0,82 1,59 1,20 0,97 0,36 0,321,40 1,401,49 1,491,62 1,62

Mittelwert 1,50 1,14 1,09 0,92 0,80 1,50 1,12 0,91 0,44 0,34Standard-abweichung 0,12 0,38 0,04 0,04 0,07 0,12 0,10 0,05 0,08 0,03Variations-koeffizient [%] 8,0 33,8 3,8 4,7 8,4 8,0 9,0 5,5 18,9 9,9

Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11,13 0,88 0,67 0,49 1,24 1,12 1,10 1,25

1,45 1,04 0,83 0,61 0,47 1,45 0,98 1,01 1,27 1,151,34 1,11 0,80 0,64 0,49 1,34 1,20 1,05 0,74 1,181,37 1,371,25 1,251,36 1,36

Mittelwert 1,35 1,09 0,84 0,64 0,48 1,35 1,14 1,06 1,04 1,19Standard-abweichung 0,07 0,05 0,04 0,03 0,01 0,07 0,14 0,05 0,27 0,05Variations-koeffizient [%] 5,3 4,1 4,7 5,0 2,4 5,3 12,5 4,9 26,2 4,5

Replikat VO-BS5 NO-BS5



Replikat


VO-BS1 NO-BS1

Anhang 143


Tabelle 8-134: Untersuchung der Abwasserproben aus Bad Sassendorf (Probenahme 7-9 aus 2. Projektphase) im Algenhemmtest in den Verdünnungsstufen (G1-G8). Angabe der Wachstums rate [1/Tag].

Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11,24 1,31 1,27 0,89 0,92 1,24 1,12 1,05 0,58 0,72 1,19 1,13 1,05 0,53 0,681,18 1,44 1,27 0,78 0,88 1,19 1,26 0,92 0,81 0,74 1,04 1,21 0,91 0,45 0,601,11 1,40 1,26 0,93 0,93 1,14 1,19 0,95 0,78 0,70 1,03 1,07 1,03 0,54 0,671,24 1,12 1,091,15 1,10 0,991,27 1,20 1,09

Mittelwert 1,20 1,38 1,27 0,87 0,91 1,16 1,19 0,97 0,72 0,72 1,07 1,14 1,00 0,51 0,65Standard-abweichung 0,06 0,07 0,01 0,08 0,03 0,05 0,07 0,07 0,13 0,02 0,07 0,07 0,08 0,05 0,04Variations-koeffizient [%] 5,1 5,0 0,5 9,4 3,4 4,6 6,1 6,8 17,4 2,5 6,4 6,2 7,6 10,1 6,5





NO-BS7



NO-BS8

Replikat VO-BS9 NO-BS9 NO-BS9

Anhang 144


Tabelle 8-135: Untersuchung der Abwasserproben aus Duisburg-Vierlinden (Probenahme 1-3) im Algenhemmte st in den Verdünnungsstufen (G1-G8). Angabe der Wachstumsrate [1/Tag].

Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11 1,48 1,52 1,44 1,17 1,13 1,37 1,54 1,58 1,07 1,07 1,37 1,53 1,58 1,31 1,072 1,46 1,52 1,49 1,17 1,10 1,40 1,53 1,55 1,08 1,03 1,37 1,53 1,57 1,29 1,023 1,47 1,52 1,55 1,22 1,10 1,42 1,55 1,51 1,15 0,99 1,40 1,55 1,55 1,39 0,774 1,49 1,34 1,335 1,42 1,33 1,296 1,34 1,31 1,32Mittelwert 1,44 1,52 1,50 1,19 1,11 1,36 1,54 1,54 1,10 1,03 1,35 1,53 1,56 1,33 0,95Standard-abweichung 0,06 0,00 0,06 0,03 0,01 0,04 0,01 0,03 0,04 0,04 0,04 0,01 0,02 0,05 0,16Variations-koeffizient [%] 3,9 0,1 3,8 2,5 1,1 3,1 0,5 2,2 4,0 4,0 3,1 0,8 1,0 3,9 17,2

Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11 1,31 1,50 1,39 1,18 1,07 1,25 1,43 1,29 1,06 0,94 1,31 1,40 1,33 1,12 0,992 1,31 1,51 1,37 1,17 1,03 1,28 1,41 1,29 1,04 0,92 1,32 1,40 1,33 1,10 0,963 1,29 1,49 1,42 1,15 1,10 1,32 1,44 1,32 1,03 0,98 1,32 1,38 1,35 1,15 1,024 1,34 1,31 1,345 1,34 1,30 1,356 1,37 1,34 1,36Mittelwert 1,33 1,50 1,39 1,16 1,07 1,30 1,43 1,30 1,05 0,94 1,34 1,39 1,34 1,13 0,99Standard-abweichung 0,03 0,01 0,03 0,02 0,03 0,03 0,01 0,02 0,02 0,03 0,02 0,01 0,01 0,02 0,03Variations-koeffizient [%] 2,2 0,6 1,8 1,4 3,1 2,4 1,0 1,2 1,6 3,4 1,3 0,7 0,8 2,1 2,8

Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11 1,56 1,58 1,61 1,15 1,31 1,66 1,61 1,48 1,01 1,16 1,60 1,52 1,46 1,06 1,21 1,60 1,62 1,43 0,93 1,102 1,57 1,54 1,61 1,13 1,29 1,65 1,58 1,45 0,95 1,12 1,58 1,53 1,41 1,03 1,16 1,58 1,51 1,41 0,98 1,103 1,56 1,60 1,57 1,23 1,28 1,64 1,62 1,42 1,05 1,09 1,61 1,58 1,42 1,11 1,14 1,63 1,60 1,39 1,01 1,094 1,58 1,67 1,57 1,615 1,56 1,66 1,55 1,626 1,53 1,59 1,54 1,59Mittelwert 1,56 1,57 1,60 1,17 1,30 1,65 1,60 1,45 1,00 1,12 1,57 1,54 1,43 1,07 1,17 1,61 1,58 1,41 0,97 1,10Standard-abweichung 0,02 0,03 0,03 0,05 0,01 0,03 0,02 0,03 0,05 0,04 0,03 0,03 0,03 0,04 0,03 0,02 0,06 0,02 0,04 0,01Variations-koeffizient [%] 1,1 1,8 1,7 4,3 1,1 1,8 1,4 1,9 5,2 3,1 1,9 2,0 1,9 4,0 2,9 1,3 3,6 1,5 3,7 0,6

NOD-DU/1

NOD-DU/2

NOD-DU/3Replikat VO-DU3 NOI-DU/3

Replikat

Replikat VO-DU2 NOI-DU/2

VO-DU1 NOI-DU/1 NOIB-DU/1

NOIB-DU/2

NOIB-DU/3

Anhang 145


Tabelle 8-136: Untersuchung der Abwasserproben aus Duisburg-Vierlinden (Probenahme 4-6) im Algenhemmte st in den Verdün-nungsstufen (G1-G8). Angabe der Wachstumsrate [1/Ta g].




NOD-DU/5

Replikat VO-DU6 NOI-DU/6 NOIB-DU/6 NOD-DU/6

Replikat VO-DU5 NOI-DU/5 NOIB-DU/5

NOD-DU/4Replikat VO-DU4 NOI-DU/4 NOIB-DU/4

Anhang 146


Tabelle 8-137: Untersuchung der Abwasserproben aus Schwerte (Probenahme 1-4) im Algenhemmtest in den Verdünnungsstufen (G1-G8). Angabe der Wachstumsrate [1/Tag].

Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11 1,30 1,41 1,32 0,97 1,01 1,35 1,51 1,46 1,36 1,19 1,34 1,46 1,45 1,26 0,832 1,29 1,41 1,34 0,95 1,00 1,34 1,49 1,43 1,36 1,12 1,31 1,48 1,45 1,26 0,853 1,29 1,42 1,33 0,99 0,97 1,32 1,49 1,44 1,39 1,10 1,33 1,46 1,46 1,31 0,864 1,33 1,32 1,375 1,32 1,32 1,366 1,35 1,35 1,41Mittelwert 1,31 1,41 1,33 0,97 0,99 1,34 1,50 1,45 1,37 1,13 1,35 1,46 1,45 1,28 0,84Standard-abweichung 0,02 0,01 0,01 0,02 0,02 0,01 0,01 0,02 0,02 0,05 0,04 0,01 0,01 0,03 0,01

Variations-koeffizient [%] 1,9 0,6 0,8 2,3 2,0 1,1 0,7 1,1 1,3 4,4 2,7 0,7 0,5 2,3 1,6

Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11 1,27 1,29 1,28 0,83 0,71 1,21 1,34 1,18 0,89 0,80 1,17 1,38 1,29 1,09 0,772 1,23 1,29 1,26 0,84 0,71 1,22 1,33 1,16 0,90 0,79 1,15 1,37 1,27 1,21 0,763 1,19 1,35 1,25 0,86 0,70 1,23 1,36 1,14 0,99 0,77 1,15 1,41 1,29 1,18 0,774 1,15 1,20 1,175 1,15 1,18 1,196 1,21 1,21 1,22Mittelwert 1,20 1,31 1,26 0,84 0,71 1,21 1,34 1,16 0,93 0,79 1,18 1,39 1,28 1,16 0,77Standard-abweichung 0,05 0,04 0,02 0,01 0,01 0,01 0,02 0,02 0,05 0,01 0,03 0,02 0,01 0,06 0,01Variations-koeffizient [%] 3,8 2,8 1,4 1,3 0,9 1,2 1,3 1,6 5,7 1,6 2,1 1,6 1,0 5,3 0,7

Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11 1,25 1,30 1,38 1,23 0,85 1,26 1,29 1,27 1,03 0,65 1,20 1,31 1,38 1,28 0,842 1,20 1,32 1,38 1,24 0,86 1,24 1,27 1,31 1,13 0,64 1,19 1,31 1,38 1,27 0,723 1,23 1,33 1,42 1,25 0,88 1,24 1,31 1,31 1,09 0,64 1,15 1,34 1,39 1,28 0,714 1,22 1,25 1,215 1,22 1,26 1,226 1,23 1,25 1,23Mittelwert 1,23 1,32 1,39 1,24 0,87 1,25 1,29 1,30 1,08 0,64 1,20 1,32 1,38 1,28 0,76Standard-abweichung 0,02 0,01 0,02 0,01 0,01 0,01 0,02 0,02 0,05 0,01 0,03 0,01 0,00 0,01 0,07Variations-koeffizient [%] 1,5 1,1 1,5 0,8 1,5 0,7 1,6 1,6 4,6 1,4 2,4 1,1 0,3 0,4 9,9

Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11 1,41 1,40 1,26 0,83 0,78 1,30 1,32 1,31 1,11 0,81 1,37 1,39 1,32 0,78 0,622 1,33 1,41 1,22 0,84 0,74 1,29 1,32 1,30 1,08 0,81 1,33 1,41 1,28 0,80 0,563 1,29 1,45 1,25 0,86 0,76 1,22 1,33 1,29 1,12 0,82 1,30 1,42 1,28 0,80 0,554 1,36 1,28 1,355 1,33 1,26 1,346 1,38 1,32 1,38Mittelwert 1,35 1,42 1,25 0,84 0,76 1,28 1,32 1,30 1,10 0,81 1,35 1,41 1,29 0,79 0,58Standard-abweichung 0,04 0,02 0,02 0,01 0,02 0,03 0,01 0,01 0,02 0,01 0,03 0,02 0,02 0,01 0,04

Variations-koeffizient [%] 3,0 1,7 1,6 1,5 3,1 2,7 0,5 1,0 1,7 0,6 2,2 1,1 1,7 1,4 6,5

Replikat VO-S/3 NO-S/3


Replikat


VO-S/1 NO-S/1

PAK-S/4

PS-S/1

PS-S/2

PS-S/3

Anhang 147


Tabelle 8-138: Untersuchung der Abwasserproben aus Bad Sassendorf (Probenahme 1-5) im Lemnatest in den Verdünnungsstu fen (G1-G8) – Endpunkt Frondzahl. Angabe der Wachstumsrate [1/Tag ].


Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11 0,35 0,34 0,33 0,31 0,32 0,36 0,34 0,35 0,32 0,322 0,36 0,33 0,34 0,30 0,30 0,36 0,36 0,34 0,32 0,313 0,35 0,34 0,34 0,31 0,30 0,35 0,35 0,34 0,31 0,324 0,32 0,335 0,34 0,346 0,38 0,38Mittelwert 0,35 0,34 0,34 0,31 0,31 0,35 0,35 0,34 0,32 0,31Standard-abweichung 0,02 0,01 0,01 0,00 0,01 0,02 0,01 0,01 0,00 0,01

Variations-koeffizient [%] 4,9 2,2 1,9 1,1 3,1 4,7 3,0 2,0 0,9 2,3




NO-BS1


Replikat VO-BS1




Anhang 148


Tabelle 8-139: Untersuchung der Abwasserproben aus Bad Sassendorf (Probenahme 1-5) im Lemnatest in den Verdünnungsstu fen (G1-G8) – Endpunkt Frondfläche. Angabe der Wachstumsrate [1/T ag].


Kontrolle G8 G4 G2 G1 Kontrolle G8 G4 G2 G11 0,36 0,37 0,36 0,29 0,30 0,36 0,37 0,37 0,31 0,292 0,36 0,36 0,35 0,28 0,29 0,37 0,37 0,35 0,31 0,303 0,36 0,37 0,35 0,29 0,29 0,37 0,36 0,35 0,32 0,314 0,35 0,355 0,36 0,376 0,42 0,37Mittelwert 0,37 0,37 0,35 0,29 0,29 0,36 0,37 0,36 0,31 0,30Standard-abweichung 0,03 0,00 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01

Variations-koeffizient [%] 6,8 0,6 1,8 2,0 2,2 2,3 1,8 3,1 2,2 3,1









Anhang 149


Tabelle 8-140: Untersuchung der Abwasserproben aus Bad Sassendorf (Probe-nahme 8 und 9) im Lemnatest in den Verdünnungsstufe n (G1-G2) – Endpunkt Frondzahl. Angabe der Wachstumsrate [1/Tag ].

Tabelle 8-141: Untersuchung der Abwasserproben aus Bad Sassendorf (Probe-nahme 8 und 9) im Lemnatest in den Verdünnungsstufe n (G1-G2) – Endpunkt Frondfläche. Angabe der Wachstumsrate [1/T ag].

Kontrolle G2 G1 Kontrolle G2 G1 Kontrolle G2 G11 0,24 0,21 0,19 0,24 0,23 0,21 0,24 0,23 0,192 0,23 0,22 0,19 0,23 0,21 0,23 0,23 0,23 0,193 0,25 0,19 0,23 0,25 0,23 0,23 0,25 0,20 0,184 0,23 0,23 0,235 0,25 0,25 0,256 0,21 0,21 0,21Mittelwert 0,23 0,21 0,20 0,23 0,22 0,22 0,23 0,22 0,19Standard-abweichung 0,02 0,02 0,02 0,02 0,01 0,01 0,02 0,02 0,00Variations-koeffizient [%] 6,6 8,3 10,4 6,6 4,8 5,4 6,6 8,0 2,6


NO-BS8 NOB-BS8Replikat VO-BS8

Replikat VO-BS9 NO-BS9 NOB-BS9





Anhang 150


Tabelle 8-142: Untersuchung der Abwasserproben aus Duisburg-Vierlinden (Probe-nahme 3 und 5) im Lemnatest in den Verdünnungsstufe n (G1-G2) – Endpunkt Frondzahl. Angabe der Wachstumsrate [1/Tag ].

Tabelle 8-143: Untersuchung der Abwasserproben aus Duisburg-Vierlinden (Probe-nahme 3 und 5) im Lemnatest in den Verdünnungsstufe n (G1-G2) – Endpunkt Frondfläche. Angabe der Wachstumsrate [1/T ag].

Kontrolle G2 G1 Kontrolle G2 G1 Kontrolle G2 G1 Kontrolle G2 G11 0,24 0,23 0,22 0,24 0,20 0,22 0,24 0,22 0,21 0,24 0,21 0,192 0,23 0,20 0,18 0,23 0,23 0,19 0,23 0,22 0,20 0,23 0,20 0,213 0,25 0,19 0,23 0,25 0,20 0,23 0,25 0,23 0,20 0,25 0,23 0,204 0,23 0,23 0,23 0,235 0,25 0,25 0,25 0,256 0,21 0,21 0,21 0,21Mittelwert 0,23 0,21 0,21 0,23 0,21 0,21 0,23 0,22 0,20 0,23 0,21 0,20Standard-abweichung 0,02 0,02 0,03 0,02 0,02 0,02 0,02 0,00 0,01 0,02 0,02 0,01

Variations-koeffizient [%] 6,6 10,5 12,3 6,6 9,4 8,2 6,6 1,7 3,0 6,6 8,4 3,9



NOD-DU/5Replikat VO-DU/5 NOI-DU/5 NOIB-DU/5

Replikat VO-DU/3 NOI-DU/3 NOIB-DU/3 NOD-DU/3





NOIB-DU/5 NOD-DU/5Replikat VO-DU/5 NOI-DU/5

NOIB-DU/3 NOD-DU/3Replikat VO-DU/3 NOI-DU/3

Anhang 151


Tabelle 8-144: Untersuchung der Abwasserproben aus Schwerte (Probenahme 2, 3 und 4) im Lemnatest in den Verdünnungsstufen (G1-G2 ) – Endpunkt Frondzahl. Angabe der Wachstumsrate [1/Tag].

Kontrolle G2 G1 Kontrolle G2 G1 Kontrolle G2 G1 Kontrolle G2 G11 0,27 0,26 0,19 0,27 0,25 0,25 0,27 0,22 0,282 0,25 0,23 0,22 0,25 0,25 0,23 0,25 0,22 0,223 0,26 0,28 0,27 0,26 0,23 0,24 0,26 0,24 0,254 0,25 0,25 0,255 0,21 0,21 0,216 0,24 0,24 0,24Mittelwert 0,25 0,26 0,23 0,25 0,24 0,24 0,25 0,22 0,25Standard-abweichung 0,02 0,03 0,05 0,02 0,01 0,01 0,02 0,01 0,03Variations-koeffizient [%] 7,7 10,1 19,9 7,7 4,6 5,2 7,7 4,7 11,8



Replikat VO-S/4 NO-S/4 PS-S/4 PAK-S/4

Replikat VO-S/3 NO-S/3 PS-S/3 PAK-S/3

PAK-S/2Replikat VO-S/2 NO-S/2 PS-S/2

Anhang 152


Tabelle 8-145: Untersuchung der Abwasserproben aus Schwerte (Probenahme 2, 3 und 4) im Lemnatest in den Verdünnungsstufen (G1-G2 ) – Endpunkt Frondfläche. Angabe der Wachstumsrate [1/Tag].




PAK-S/4

PAK-S/3

Replikat VO-S/4 NO-S/4 PS-S/4

PAK-S/2



Anhang 153


Tabelle 8-146: Untersuchung der Abwasserproben aus Bad Sassendorf (Probenahme 1 bis 9) im akuten Daphnientest in den Verdünnungsstufen (G1-G8). Angabe der Immobilität [ %] nach 48 h.

Probe Replikat Negativ-kontrolle

VO-BS (G1)

NO-BS (G1)

NOB-BS (G1)

VO-BS (G2)

NO-BS (G2)

NOB-BS (G2)

VO-BS (G4)

NO-BS (G4)

NOB-BS (G4)

VO-BS (G8)

NO-BS (G8)

NOB-BS (G8)

1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 01 2 0 0 0 0 0 0 0 0 01 3 0 0 0 0 0 0 0 0 01 4 0 0 0 0 0 0 0 0 02 1 0 0 0 0 0 0 0 0 02 2 0 0 0 0 0 0 0 0 02 3 0 0 0 0 0 0 0 0 02 4 0 0 0 0 0 0 0 0 03 1 0 0 0 0 0 0 0 0 03 2 0 0 0 0 0 0 0 0 03 3 0 0 0 0 0 0 0 0 03 4 0 0 0 0 0 0 0 0 04 1 0 0 0 0 0 0 0 0 04 2 0 0 0 0 0 0 0 0 04 3 0 0 0 0 0 0 0 0 04 4 0 0 0 0 0 0 0 0 05 1 0 0 0 0 0 0 0 0 05 2 0 0 0 0 0 0 0 0 05 3 0 0 0 0 0 0 0 0 05 4 0 0 0 0 0 0 0 0 07 1 0 0 0 0 0 0 07 2 0 0 0 0 0 0 07 3 0 20 0 0 0 0 07 4 0 0 0 0 0 0 08 1 0 0 0 0 0 0 08 2 0 0 0 0 0 0 08 3 0 0 0 0 0 0 08 4 20 0 0 0 0 0 09 1 0 0 0 0 0 0 09 2 0 0 0 0 0 0 09 3 0 0 0 0 0 0 09 4 0 0 0 0 0 0 0

Anhang 154


Tabelle 8-147: Untersuchung der Abwasserproben aus Duisburg-Vierlinden (Probe-nahme 2 bis 6) im akuten Daphnientest in den Verdün nungsstufen (G1-G2). Angabe der Immobilität [%] nach 48 h.

Tabelle 8-148: Untersuchung der Abwasserproben aus Schwerte (Probenahme 1 bis 4) im akuten Daphnientest in den Verdünnungsstufen (G1-G2). Angabe der Immobilität [%] nach 48 h.


VO-DU (G1)

NOI-DU (G1)

NOIB-DU (G1)

NOD-DU (G1)

VO-DU (G2)

NOI-DU (G2)

NOIB-DU (G2)

NOD-DU (G2)

2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 02 2 0 0 0 0 0 0 0 0 02 3 0 0 0 0 0 0 0 0 02 4 20 0 0 0 0 0 0 0 03 1 0 0 0 0 0 0 0 0 03 2 0 0 0 0 0 0 0 0 03 3 0 0 0 0 0 0 0 0 03 4 0 0 0 0 0 0 0 0 04 1 0 0 0 0 0 0 0 0 04 2 0 0 0 0 0 0 0 0 04 3 0 0 0 0 0 0 0 0 04 4 0 0 0 0 0 0 0 0 05 1 0 0 0 0 0 0 0 0 05 2 0 0 0 0 0 0 0 0 05 3 0 0 0 0 0 0 0 0 05 4 0 0 0 0 0 0 0 0 06 1 0 0 0 0 0 0 0 0 06 2 0 0 20 0 0 0 0 0 06 3 0 0 0 0 0 0 0 0 06 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0


VO-S (G1)

NO-S (G1)

PS-S (G1)

PAK-S (G1)

VO-S (G2)

NO-S (G2)

PS-S (G2)

PAK-S (G2)

1 1 0 0 0 0 0 0 01 2 0 0 0 0 0 0 01 3 0 0 0 0 0 0 01 4 0 0 0 0 0 0 02 1 0 0 0 0 0 0 02 2 0 0 0 0 0 0 02 3 0 0 0 0 0 0 02 4 0 0 0 0 0 0 03 1 0 0 0 0 0 0 03 2 0 0 0 0 0 0 03 3 0 0 0 0 0 0 03 4 0 0 0 0 0 0 04 1 0 0 0 0 0 0 04 2 0 0 0 0 0 0 04 3 0 0 0 0 0 0 04 4 0 0 0 0 0 0 0

Anhang 155


Tabelle 8-149: Untersuchung der Abwasserproben aus Bad Sassendorf (Probe-nahme 7 bis 9) im Populationstest mit Daphnia magna in den Originalabwasserproben (G1). Gesamtabundanz nach 21 d.

Tabelle 8-150: Untersuchung der Abwasserproben aus Bad Sassendorf (Probe-nahme 7 bis 9) im Populationstest mit Daphnia magna in den Originalabwasserproben (G1). Kumulative Anzahl an E phippien nach 21 d.


VO-BS (G1)

NO-BS (G1)

NOB-BS (G1)

7 1 306 330 320 3577 2 295 354 282 3277 3 297 369 331 3108 1 200 279 286 2518 2 130 226 221 2018 3 249 246 222 1459 1 305 302 247 2049 2 230 238 207 2289 3 173 223 236 180


VO-BS (G1)

NO-BS (G1)

NOB-BS (G1)

7 1 0 0 0 07 2 0 0 0 07 3 0 0 0 08 1 0 0 0 08 2 0 0 0 08 3 0 0 0 09 1 2 0 0 09 2 0 0 0 09 3 1 0 0 0

Anhang 156


Tabelle 8-151: Untersuchung der Abwasserproben aus Duisburg-Vierlinden (Probe-nahme 2 bis 6) im Populationstest mit Daphnia magna in den Originalabwasserproben (G1). Gesamtabundanz nach 21 d (n. a.: Replikat nicht auswertbar).

Tabelle 8-152: Untersuchung der Abwasserproben aus Duisburg-Vierlinden (Probe-nahme 2 bis 6) im Populationstest mit Daphnia magna in den Originalabwasserproben (G1). Kumulative Anzahl an E phippien nach 21 d (n. a.: Replikat nicht auswertbar).


VO-DU (G1)

NOI-DU (G1)

NOIB-DU (G1)

NOD-DU (G1)

2 1 108 152 168 1302 2 148 149 128 1422 3 118 140 147 1723 1 173 177 184 179 1923 2 167 185 200 150 2183 3 165 n.a. 201 207 2064 1 196 n.a. 130 116 1454 2 162 116 103 148 1024 3 179 156 160 195 1475 1 305 185 173 162 1635 2 230 147 199 175 1805 3 173 218 212 178 2126 1 139 173 162 222 1796 2 185 192 167 241 1846 3 141 251 142 200 147


VO-DU (G1)

NOI-DU (G1)

NOIB-DU (G1)

NOD-DU (G1)

2 1 0 3 0 12 2 0 0 0 02 3 0 1 0 03 1 0 0 0 0 03 2 0 0 0 0 03 3 0 n.a. 0 0 04 1 0 n.a. 0 0 04 2 1 0 0 0 04 3 1 1 0 2 05 1 2 2 2 2 35 2 0 8 0 1 15 3 1 7 0 1 06 1 0 1 0 1 06 2 3 7 0 0 06 3 1 6 0 0 0

Anhang 157


Tabelle 8-153: Untersuchung der Abwasserproben aus Schwerte (Probenahme 1 bis 4) im Populationstest mit Daphnia magna in den Orig inalabwasser-proben (G1). Gesamtabundanz nach 21 d.

Tabelle 8-154: Untersuchung der Abwasserproben aus Schwerte (Probenahme 1 bis 4) im Populationstest mit Daphnia magna in den Originalabwasser-proben (G1). Kumulative Anzahl an Ephippien nach 21 d.

Tabelle 8-155: Untersuchung der Abwasserproben aus Bad Sassendorf (Probenahme 1 bis 9) im Fischeitest in den Verdünnu ngsstufen (G1-G8). Angabe der Mortalität [%].


VO-S (G1)

NO-S (G1)

PS-S (G1)

PAK-S (G1)

1 1 190 245 186 2001 2 119 199 118 1351 3 178 221 146 1922 1 204 228 175 2102 2 183 221 196 2482 3 174 205 168 2393 1 89 198 158 1953 2 142 172 186 1843 3 189 149 132 1764 1 165 103 111 1314 2 148 122 117 1364 3 122 126 117 209


VO-S (G1)

NO-S (G1)

PS-S (G1)

PAK-S (G1)

1 1 0 0 0 151 2 0 0 0 21 3 0 0 0 12 1 0 0 0 02 2 1 0 1 02 3 0 2 0 143 1 0 0 0 03 2 0 0 0 03 3 0 0 0 14 1 0 0 0 04 2 0 0 0 14 3 0 0 0 0


Positiv-kontrolle

VO-BS (G1)

NO-BS (G1)

NOB-BS (G1)

VO-BS (G2)

NO-BS (G2)

NOB-BS (G2)

VO-BS (G4)

NO-BS (G4)

NOB-BS (G4)

VO-BS (G8)

NO-BS (G8)

NOB-BS (G8)

1 1 0 5 0 10 10 0 10 0 10 01 2 5 80 10 10 10 20 0 20 0 102 1 5 80 10 0 10 10 20 20 0 102 2 5 65 0 10 0 0 20 10 10 03 1 0 95 0 0 0 10 0 0 0 103 2 0 95 10 0 50 30 50 50 0 504 1 0 95 30 20 30 10 30 0 0 04 2 0 40 0 0 10 0 0 10 10 05 1 2,5 55 0 10 0 10 0 20 0 105 2 0 70 0 0 0 0 0 0 10 07 1 2,5 90 0 0 10 0 0 0 10 0 0 0 0 07 2 0 55 10 0 10 0 0 0 0 0 0 0 0 08 1 2,5 80 0 0 10 0 10 0 0 0 0 10 0 08 2 2,5 65 0 10 0 0 0 0 0 0 0 0 0 09 1 2,5 55 10 0 10 0 0 0 0 0 0 0 10 09 2 0 55 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Anhang 158


Tabelle 8-156: Untersuchung der Abwasserproben aus Duisburg-Vierlinden (Probenahme 2 bis 6) im Fischeitest in den Verdünnu ngsstufen (G1-G8). Angabe der Mortalität [%].

Tabelle 8-157: Untersuchung der Abwasserproben aus Schwerte (Probenahme 1 bis 4) im Fischeitest in den Verdünnungsstufen (G1-G8). Angabe der Mortalität [%].


Positiv-kontrolle

VO-DU (G1)

NOI-DU (G1)

NOIB-DU (G1)

NOD-DU (G1)

VO-DU (G2)

NOI-DU (G2)

NOIB-DU (G2)

NOD-DU (G2)

2 1 2,5 80 0 0 10 0 0 02 2 2,5 80 10 20 0 10 0 03 1 0 75 10 0 20 0 0 0 0 03 2 5 100 0 0 0 0 0 10 10 04 1 5 90 20 40 30 20 30 20 50 404 2 2,5 75 0 0 0 0 0 0 0 05 1 0 70 0 0 0 0 0 0 0 06 1 2,5 95 10 0 10 0 0 10 10 206 2 0 100 0 0 0 0 10 0 10 10


Positiv-kontrolle

VO-DU (G4)

NOI-DU (G4)

NOIB-DU (G4)

NOD-DU (G4)

VO-DU (G8)

NOI-DU (G8)

NOIB-DU (G8)

NOD-DU (G8)

2 1 2,5 80 0 10 0 0 0 202 2 2,5 80 0 20 0 10 30 03 1 0 75 10 10 10 20 0 10 20 103 2 5 100 0 0 0 0 0 0 0 04 1 5 90 20 10 30 40 20 40 20 104 2 2,5 75 0 0 0 0 0 0 0 05 1 0 70 0 10 0 0 0 0 0 06 1 2,5 95 20 0 10 10 20 0 30 106 2 0 100 20 0 0 10 0 0 0 0


Positiv-kontrolle

VO-S (G1)

NO-S (G1)

PS-S (G1)

PAK-S (G1)

VO-S (G2)

NO-S (G2) PS-S (G2)

PAK-S (G2)

1 1 2,5 95 0 10 0 0 10 101 2 0 100 0 0 10 0 0 02 1 2,5 80 0 0 0 0 0 03 1 2,5 80 0 0 0 10 0 04 1 2,5 80 0 0 0 0 0 0


Positiv-kontrolle

VO-S (G4)

NO-S (G4)

PS-S (G4)

PAK-S (G4)

VO-S (G8)

NO-S (G8) PS-S (G8)

PAK-S (G8)

1 1 2,5 95 0 10 0 0 0 01 2 0 100 0 0 0 0 0 02 1 2,5 80 0 0 10 10 0 03 1 2,5 80 0 10 0 0 0 04 1 2,5 80 0 0 0 0 0 0

Anhang 159


8.6.5 In-vivo -Tests im Durchfluss

Bad Sassendorf

Toxizitätstest mit Lumbriculus variegatus

Ozonkonzentration zspez. = 0,5

Abbildung 8-10: Toxizitätstest mit Lumbriculus variegatus . Individuenzahl (A) und Biomasse pro Replikat (B), Biomasse pro Individuum (C) nach 28 tägiger Exposition. (K) Kontrolle, (VO) Zulauf Ozon ung, (NO) Ablauf Ozonung, (BS) Bad Sassendorf;( z spez. . = 0,5). (��) – p<0,05; n=5.


Abbildung 8-11: Toxizitätstest mit Lumbriculus variegatus . Individuenzahl (A) und Biomasse pro Replikat (B), Biomasse pro Individuum (C) nach 28 tägiger Exposition. K – Kontrolle, VO – Zulauf Ozon ung, NO – Ablauf Ozonung, NOB – Ablauf Schönungsteich, BS – Bad Sass endorf; (z spez.

. = 0,7). (��) – p<0,05; n=5.

K

VO-BS

NO-BS/0

,5

0

20

40

60

80�

Indi

vidu

en

K

VO-BS

NO-BS/0

,5

0

20

40

60

80�

Bio

mas

se [

mg]

K

VO-BS

NO-BS/0

,5

0.0

0.5

1.0

1.5

Bio

ma

sse/

Indi

vidu

um [

mg]

A B C

K

VO-BS

NO-BS/0

,7

NOB-BS/0,

7

0

10

20

30

40

50

��

Ind

ivid

ue

n

K

VO-BS

NO-BS/0

,7

NOB-BS/0,

7

0

10

20

30

40

50

� �

� �

Bio

mas

se [

mg]

K

VO-BS

NO-BS/0

,7

NOB-BS/0,

7

0.0

0.5

1.0

1.5

�

� �

�

Bio

ma

sse

/Ind

ivid

uum

[m

g]

A B C

Anhang 160


Duisburg-Vierlinden



Abbildung 8-12: Toxizitätstest mit Lumbriculus variegatus . Individuenzahl (A) und Biomasse pro Replikat (B), Biomasse pro Individuum (C) nach 28 tägiger Exposition. K – Kontrolle, VO – Zulauf Ozon ung, NOI – Ablauf Injektor, NOD – Ablauf Diffusor, DU – Duisburg; (z spez. . = 0,5). (��) – p<0,05; n=5 .

Ozonkonzentration zspez. 0,5

Abbildung 8-13: Toxizitätstest mit Lumbriculus variegatus . Individuenzahl (A) und Biomasse pro Replikat (B), Biomasse pro Individuum (C) nach 28 tägiger Exposition. K – Kontrolle, VO – Zulauf Ozon ung, NOI – Ablauf Injektor, NOIB – Ablauf Injektor + biol. Nachbehand lung, NOD – Ablauf Diffusor, DU – Duisburg; (z spez. . = 0,5). (��) – p<0,05; n=5.

K

VO-DU

NOI-DU/0

,5

NOIB-D

U/0,5

NOD-DU/0

,5

0

10

20

30

40

50

�

Indi

vidu

en

K

VO-DU

NOI-DU/0

,5

NOIB-D

U/0,5

NOD-DU/0

,5

0

10

20

30

40

50 �

Bio

mas

se [

mg]

K

VO-DU

NOI-DU/0

,5

NOIB-D

U/0,5

NOD-DU/0

,5

0.0

0.5

1.0

1.5

�

Bio

ma

sse

/Ind

ivid

uum

[m

g]

A B C

K

VO-DU

NOIB-D

U/0,9

NOD-DU/0

,9

0

20

40

60

80� �

�

Ind

ivid

uen

K

VO-DU

NOIB-D

U/0,9

NOD-DU/0

,9

0

20

40

60

80

100

Bio

mas

se [

mg]

K

VO-DU

NOIB-D

U/0,9

NOD-DU/0

,9

0.0

0.5

1.0

1.5

2.0

Bio

ma

sse/

Indi

vidu

um [

mg]

A B C

Anhang 161



Abbildung 8-14: Toxizitätstest mit Lumbriculus variegatus . Individuenzahl (A) und Biomasse pro Replikat (B), Biomasse pro Individuum (C) nach 28 tägiger Exposition. K – Kontrolle, VO – Zulauf Ozon ung, NOI – Ablauf Injektor, NOIB – Ablauf Injektor + biol. Nachbehand lung, NOD – Ablauf Diffusor, DU – Duisburg; (z spez. = 0,7). (��)– p<0,05; n=5.

K

VO-DU

NOI-DU/0

,7

NOIB-D

U/0,7

NOD-DU/0

,7

0

10

20

30

40

50

�

Indi

vidu

en

K

VO-DU

NOI-DU/0

,7

NOIB-D

U/0,7

NOD-DU/0

,7

0

10

20

30

40

50

Bio

mas

se [

mg]

K

VO-DU

NOI-DU/0

,7

NOIB-D

U/0,7

NOD-DU/0

,7

0.0

0.5

1.0

1.5

Bio

ma

sse

/Ind

ivid

uum

[m

g]

A B C

Anhang 162


Schwerte


Ozonkonzentration zspez. . = 0,9

Abbildung 8-15: Toxizitätstest mit Lumbriculus variegatus . Individuenzahl (A), Biomasse pro Replikat (B) und Biomasse pro Individu um (C) nach 28 tägiger Exposition. K – Kontrolle, VO – Ablauf NK 2 , NO – Ablauf Ozonung, PS – Ablauf Parallelstraße 1, S – Schwerte ; (zspez.= 0,9). (��) – p<0,05; n=5

KVO-S

NO-S/0

,9PS-S

0

10

20

30

40

50

Indi

vidu

en

KVO-S

NO-S/0

,9PS-S

0

10

20

30

40

50

Bio

mas

se [

mg]

KVO-S

NO-S/0

,9PS-S

0.0

0.5

1.0

1.5

Bio

ma

sse/

Indi

vidu

um [

mg]

A B C

Anhang 163


Reproduktionstest mit Potamopyrgus antipodarum

Sensitivität gegenüber Östrogenen

Abbildung 8-16: Reproduktionstest mit Potamopyrgus antipodarum . Anzahl Gesamtembryonen nach 28 tägiger Exposition. K – Kon trolle, E2 – Ethinylestradiol (25 ng/L).

K E2

0

5

10

15

�

Em

bryo

nen,

ge

sam

t

Anhang 164


Bad Sassendorf


Abbildung 8-17: Reproduktionstest mit Potamopyrgus antipodarum . Anzahl unbeschalter Embryonen (A), Anzahl der beschalten E mbryonen (B) und Gesamtembryonen (C) pro Schnecke nach 28 tägige r Exposition. K – Kontrolle, VO – Zulauf Ozonung, NO – Ablauf Ozo nung, BS – Bad Sassendorf; (z spez. . = 0,5). (��) – p<0,05; n=40.

Ozonkonzentration zspez. 0,7

Abbildung 8-18: Reproduktionstest mit Potamopyrgus antipodarum . Anzahl unbeschalter Embryonen (A), Anzahl der beschalten E mbryonen (B) und Gesamtembryonen (C) pro Schnecke nach 28 tägige r Exposition. K – Kontrolle, VO – Zulauf Ozonung, NO – Ablauf Ozo nung, NOB – Ablauf Schönungsteich, BS – Bad Sassendorf; (z spez. . = 0,7). (��) – p<0,05; n=40

K

VO-BS/0

,5

NO-BS/0

,5

0

2

4

6

8

Em

bryo

nen,

unb

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halt

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K

VO-BS/0

,5

NO-BS/0

,5

0

2

4

6

8

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bryo

nen,

be

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lt

K

VO-BS/0

,5

NO-BS/0

,5

0

5

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15

20

Em

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nen,

ge

sam

t

A B C

K

VO-BS

NO-BS/0

,7

NOB-BS/0

,7

0

5

10

15

20

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Em

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K

VO-BS

NO-BS/0

,7

NOB-BS/0

,7

0

5

10

15

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nen,

be

scha

lt

K

VO-BS

NO-BS/0

,7

NOB-BS/0

,7

0

5

10

15

20

25

30

35�

�

�

Em

bryo

nen,

ge

sam

t

A B C

Anhang 165


Duisburg-Vierlinden


Abbildung 8-19: Reproduktionstest mit Potamopyrgus antipodarum . Anzahl unbeschalter Embryonen (A), Anzahl der beschalten E mbryonen (B) und Gesamtembryonen (C) pro Schnecke nach 28 tägige r Exposition. K – Kontrolle, VO – Zulauf Ozonung, NOI – Ablauf In jektor, NOD – Ablauf Diffusor, DU – Duisburg; (z spez. . = 0,5). (��) – p<0,05; n=40.

Abbildung 8-20: Reproduktionstest mit Potamopyrgus antipodarum . Anzahl unbeschalter Embryonen (A), Anzahl der beschalten E mbryonen (B) und Gesamtembryonen (C) pro Schnecke nach 28 tägige r Exposition. K – Kontrolle, VO – Zulauf Ozonung, NOI – Ablauf In jektor, NOIB – Ablauf Injektor + biol. Nachbehandlung, NOD – Ablau f Diffusor, DU – Duisburg; (z spez. . = 0,5). (��) – p<0,05; n=40.

K

VO-DU

NOI-DU/0

,5

NOIB-D

U/0,5

NOD-DU/0

,5

0

5

10

15

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K

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NOI-DU/0

,5

NOIB-D

U/0,5

NOD-DU/0

,5

0

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10

15

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K

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NOI-DU/0

,5

NOIB-D

U/0,5

NOD-DU/0

,5

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A B C

K

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NOIB-D

U/0,9

NOD-DU/0

,9

0

10

20

30�

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Em

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nen,

unb

esc

halt

K

VO-DU

NOIB-D

U/0,9

NOD-DU/0

,9

0

5

10

15

20

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yone

n, b

esc

halt

K

VO-DU

NOIB-D

U/0,9

NOD-DU/0

,9

0

10

20

30

40

50�

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Em

bryo

nen,

ge

sam

t

A B C

Anhang 166


Schwerte


Abbildung 8-21: Reproduktionstest mit Potamopyrgus antipodarum . Gesamtembryonen: Relative Abweichung zur Kontrolle nach 28-tägiger Exposition. Unbeschalte Embryonen (A), besc halte Embryonen (B) und Gesamtembryonen (C) pro Schnecke. VO – Ablauf NK 2, NO – Ablauf Ozonung, PS – Ablauf Parallelstra ße 1, S – Schwerte; (z spez. . = 0,9). (��) – p<0,05; n=40

VO-S

NO-S/0

,9PS-S

0

50

100

150

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Em

bryo

nen,

unb

esc

halt,

∆∆ ∆∆ K

[%]

VO-S

NO-S/0

,9PS-S

0

5

10

15

20

25

Em

bryo

nen,

be

scha

lt,∆∆ ∆∆

K [%

]

VO-S

NO-S/0

,9PS-S

0

20

40

60

80

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� �

Em

bryo

nen,

∆∆ ∆∆ K

[%]

A B C

Anhang 167


Abbildung 8-22: Toxizitätstest mit Dreissena polymorpha . Mortalität nach 28-tägiger Exposition. K – Kontrolle, VO – Zulauf Ozonung, NO – Ablauf Ozonung, NOB – Ablauf Schönungsteich, NOI – Ablauf Injektor, NOIB – Ablauf Injektor + biol. Nachbehandlung, NOD – Abl auf Diffusor, PS – Ablauf Parallelstraße; (z spez. = 0,5; 0,7; 0,9). (��) – p<0,05; n=4

K

VO-BS

NO-BS/0

,7

NOB-BS/0

,7

0

20

40

60

80

100

Mor

talit

ät [

%]

Bad Sassendorf z spez. 0,7A

K

VO-DU

NOI-DU/0

,5

NOIB-D

U/0,5

NOD-DU/0

,5

0

20

40

60

80

100

Mor

talit

ät [

%]

Duisburg-Vierl. z spez. 0,5B

K

VO-DU

NOI-DU/0

,7

NOIB-D

U/0,7

NOD-DU/0

,7

0

20

40

60

80

100

Mor

talit

ät [

%]

Duisburg-Vierl. z spez. 0,7C

KVO-S

NO-S/0

,9PS-S

0

20

40

60

80

100

Mor

talit

ät [

%]

Schwerte z spez. 0,9D

Documents

Anhang zum Schlussbericht des Forschungsvorhaben ... · Makrolid-Antibiotika Keine Keine (Schlüsener et al., 2005) Chromabond HR-P Halogenessigsäuren Chlorung Keine (Loos et al.,