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Antibakterielle Resistenz bei - edoc.ub.uni- · PDF fileTylosin Makrolid Tilmicosin Makrolid Lincomycin Lincosamid Tiamulin Pleuromutilin Valnemulin Pleuromutilin . LITERATURÜBERSICHT

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Aus dem Institut

fr Hygiene und Technologie der Lebensmittel tierischen Ursprungs

der tierrztlichen Fakultt

der Ludwig-Maximilians-Universitt Mnchen

Lehrstuhl: Univ.-Prof. Dr. Dr. h. c. A. Stolle

Antibakterielle Resistenz bei Yersinia enterocolitica Stmmen aus verschiedenen Quellen mittels

Agardiffusionstest und Bouillon-Mikrodilutionsverfahren

Inaugural-Dissertation

zur Erlangung der tiermedizinischen Doktorwrde

der Tierrztlichen Fakultt

der Ludwig-Maximilians-Universitt Mnchen

von

Cornelia Sabine Meyer

aus Montevideo

Mnchen 2007

Gedruckt mit Genehmigung der Tierrztlichen Fakultt

der Ludwig-Maximilians-Universitt Mnchen

Dekan: Univ.-Prof. Dr. E. P. Mrtlbauer

Referent: Univ.-Prof. Dr. Dr. h.c. Stolle

Koreferent: Univ.-Prof. Dr. Hoffmann

Tag der Promotion: 20. Juli 2007

ABKRZUNGSVERZEICHNIS

ABKRZUNGSVERZEICHNIS Amc Amoxicillin/Clavulansure Amp Ampicillin ATCC American Type Culture Collection Aufl. Auflage Azt Aztreonam BAP Blutagar-Platte BSAC British Society for Antimicrobial Chemotherapy BVL Bundesamt fr Verbraucherschutz und Lebensmittelsicherheit bzw. beziehungsweise ca. circa CAMHB Kationenadjustierte Mller-Hinton-Bouillon CA-SFM Comit de lAntibiogramme de la Societ Franaise de

Microbiologie Chl Chloramphenicol Cip Ciprofloxacin C. jejuni Campylobacter jejuni CLSI Clinical and Laboratory Standards Institute Col Colistin Ctx Cefotaxim DNA Desoxyribonukleinsure DSM Deutsche Sammlung von Mikroorganismen DSMZ Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen E. coli Escherichia coli E. faecium Enterococcus faecium Eryt Erythromycin Gen Gentamicin HHD Hemmhofdurchmesser Hrsg. Herausgeber I Intermedir KBE Kolonie bildende Einheit LMU Ludwig-Maximilians-Universitt g Mikrogramm l Mikroliter mg Milligramm MH-Agar Mller-Hinton-Agar MH-Bouillon Mller-Hinton-Bouillon MHK minimale Hemm(stoff)konzentration ml Milliliter MRL Maximum residue limit Msch Mensch MTP Mikrotiterplatte Na Nalidixinsure nm Nanometer PCR Polymerase-Ketten-Reaktion R Resistent RKI Robert-Koch-Institut S Sensibel

ABKRZUNGSVERZEICHNIS

S. aureus Staphylococcus aureus S. Enteritidis Salmonella Enteritidis S. Typhimurium Salmonella Typhimurium Schw Schwein Sm Streptomycin sog. sogenannte Su Sulfamethoxazol SVA Statens Veterinrmedicinska Anstalt Sxt Sulfamethoxazol/Trimethoprim T Trimethoprim Te Tetracyclin v.a. vor allem VRE Vancomycin-resistente Enterococci vs. versus z.B. zum Beispiel

INHALTSVERZEICHNIS

INHALTSVERZEICHNIS

1. Einleitung................................................................................................................ 1

2. Literaturbersicht.................................................................................................... 2

2.1 Definition antimikrobieller Wirkstoffe..................................................................... 2

2.2 Antimikrobielle Wirkstoffe in der Veterinrmedizin................................................ 3

2.2.1 Antimikrobielle Wirkstoffe fr die orale Verabreichung bei Lebensmittel

liefernden Tieren......................................................................................................... 5

2.2.2 Verbrauchsmengen antimikrobieller Wirkstoffe in der Veterinrmedizin............ 6

2.2.3 Besondere Risiken fr die Resistenzselektion................................................... 7

2.2.4 Postantibiotischer Effekt .................................................................................... 8

2.3 Geschichtliches zum Verbot der Leistungsfrderer .............................................. 9

2.4 Folgen des massiven Einsatzes antimikrobieller Wirkstoffe ............................... 11

2.5 Resistenz gegen antimikrobielle Wirkstoffe ........................................................ 13

2.5.1 Ursprung der Resistenz gegen antimikrobielle Wirkstoffe ............................... 13

2.5.2 Grundlagen der bakteriellen Resistenz............................................................ 14

2.5.3 Resistenzmechanismen................................................................................... 18

2.5.4 Kreuz- und Coresistenz ................................................................................... 21

2.5.5 Die Darmflora als Reservoir fr Resistenzgene............................................... 22

2.6 Rckstandsproblematik ...................................................................................... 22

2.7 Verbreitung bertragbarer Antibiotikaresistenzen............................................... 25

2.7.1 Bedeutung der Lebensmittel bei der Verbreitung bertragbarer antibakterieller

Resistenzen.............................................................................................................. 27

2.7.2 bertragung resistenter Lebensmittelinfektionserreger ................................... 28

2.8 Yersinia enterocolitica ........................................................................................ 31

2.8.1 Einteilung......................................................................................................... 32

2.8.2 Klinische Bedeutung: Yersiniose ..................................................................... 32

2.8.3 Therapie .......................................................................................................... 33

2.8.4 Epidemiologie .................................................................................................. 34

2.8.5 Empfindlichkeitstestung und bisher bekannte Resistenzen ............................. 36

2.9 In-vitro Empfindlichkeitsprfung bakterieller Infektionserreger ........................... 39

2.9.1 Methoden der in-vitro Empfindlichkeitsprfung................................................ 39

INHALTSVERZEICHNIS

2.9.2 Molekularbiologische Methoden zum Nachweis von Resistenzen gegen

antimikrobielle Wirkstoffe.......................................................................................... 46

3. Material und Methoden......................................................................................... 50

3.1 Material............................................................................................................... 50

3.1.1 Herkunft und Anzahl der Stmme.................................................................... 50

3.1.2 Qualittskontrollstmme .................................................................................. 51

3.1.3 Antimikrobielle Wirkstoffe fr die Agardiffusion................................................ 51

3.1.4 Layout der Mikrotiterplatte fr die Bouillon-Mikrodilution ................................. 52

3.2 Methode.............................................................................................................. 53

3.2.1 Methode zur Einstellung der Bakteriendichte auf 108 Bakterien/ml ................. 53

3.3 Ergebnisse der Einstelllung der Bakteriendichte auf 108 KBE/ml ....................... 56

3.3.1 Anzuchtbedingungen der Referenz- und der Bakterienstmme ...................... 57

3.3.2 Agardiffusionsmethode.................................................................................... 57

3.3.3 Bouillon-Mikrodilutionsmethode....................................................................... 60

4. Ergebnisse............................................................................................................ 63

4.1 Ergebnisse der Resistenzbestimmung im Agardiffusionstest ............................. 63

4.2 Vergleich der mittels Agardiffusionsmethode ermittelten Ergebnisse der Y.

enterocolitica-Stmme humaner und porciner Herkunft ........................................... 69

4.3 Ergebnisse der Empfindlichkeitsbestimmung mittels Bouillon-

Mikrodilutionsmethode.............................................................................................. 70

4.4 Vergleich der mittels Bouillon-Mikrodilutionsmethode ermittelten Ergebnisse der

Y. enterocolitica-Stmme humaner und porciner Herkunft ....................................... 73

4.5 Ergebnisse der Agardiffusion im Vergleich mit der Bouillon-Mikrodilution .......... 74

5. Diskussion ............................................................................................................ 79

6. Zusammenfassung ............................................................................................... 88

7. Summary .............................................................................................................. 90

8. Literaturverzeichnis .............................................................................................. 92

9. Tabellenverzeichnis............................................................................................ 106

10. Abbildungsverzeichnis ...................................................................................... 108

11. Anhang ............................................................................................................. 109

10. Danksagung ..................................................................................................... 119

11. Lebenslauf ........................................................