Bausteine von Oligosacchariden, CIV. Synthese von verzweigten Tetrasaccharid- und Pentasaccharid-Strukturen von N-Glycoproteinen, methyliert an 4′-OH des Verzweigungsgliedes

H. Paulsen, R. Wilkens, F. Reck, I. Brockhausen 1303

Bausteine von Oligosacchariden, CIV"]

Synthese von verzweigten Tetrasaccharid- und Pentasaccharid-Strukturen von N-Glycoproteinen, methyliert an 4'-OH des Verzweigungsgliedes Hans Paulsen" ", Roland Wilkens", Folkert Reck und Inka Brockhausen b7c

Institut fur Organische Chemie der Universitat Hamburga, Martin-Luther-King-Platz 6, W-2000 Hamburg 13, BRD

The Research Institute, Hospital of Sick Children ', University Avenue, Toronto, Ontario, M5G 1x8, Canada

Department of Biochemistry, University of Torontoc, Toronto, Ontario, M5G 1x8, Canada

Eingegangen am 31. Juli 1992

Key Words: Carbohydrates / Oligosaccharides / Glycoproteins / Transferases / Enzymes / Saccharides / Trichloroacetimidates

Building Units of Oligosaccharides, CIVril. - Synthesis of Branched Tetrasaccharide and Pentasaccharide Structures of N-Glycoproteins Methylated at 4'-OH of the Branching Unit

The tetrasaccharide a-D-Manp-(l-3) [a-D-Manp-( 1+6)]-4-0- of GlcNAc transferases I and I1 in the biosynthesis of N-linked methyl-P-~-Manp-( 1+4)-~-GlcNAc (15) and the pentasacchar- oligosaccharides, respectively. In addition we developed an ide p-~-GlcpNAc-( 1+2)-a-~-Manp-( 1-3) [u-~-Manp-( 1-41-4- effective synthesis for the P-glycosidically linked building O-methyl-P-~-Manp-(1+4)-~-GlcNAc (23) were synthesized block P-~-Manp-(1+4)-a-~-GlcpNAc. The trichloroacetimi- by adding the respective functionalized building blocks. The date method was particularly successful for synthesizing these compounds are useful for studies of the substrate specificities glycosidic linkages.

Bei der Biosynthese der komplexen N-Glycoproteine wird innerhalb des sogenannten Trimming-Prozesses im Golgi unter Mitwirkung spezifischer N-Glucosaminyltransferasen (GlcNAc-T) I - VI die bereits an das Protein gebundene Core-Struktur weiter aufgebaut[']. Die GlcNAc-T's ubertra- gen aktiviertes UDP-GlcNAc und weisen eine hohe Spezi- fitat fur die entsprechenden Substrate auf[*x3]. Die GlcNAc- T I ist das erste Enzym, das den Aufbau der weiteren Ketten startet. Das Tetrasaccharid 1 ist ein sehr gutes Substrat fur die GlcNAc-T I[41. Diese katalysiert die Verlangerungs-Re- aktion der unteren Seitenkette, was zur Struktur 2 fuhrt. Die

a-D-Manp- (1-6) \ /

p - D - Manp- (1-4) - D- GlcNAc

1 u-D-Manp-(1-3)

a - D- Manp - (1 -6) \

\

/ p - D - Manp- (1-4) - D - GlcNAc

p - D - GlcpNAc - (1-2) - a - D- Manp - (1-3)' 2

p - D - GlcpNAc - (1-2) - a - D- Manp- (1-6) \ /

p-D-Manp-( l -+4)- D-GlcNAc

I

3 p - D - GlcpNAc - (1-2) - a - D- Manp - (1-3)

Struktur 2 ist wiederum ein Substrat fur GlcNAc-T 11. Mit Hilfe dieses Enzyms la& sich der zweite Arm verlangern, und man gelangt zur Struktur 3.

Im Gegensatz zu 1 ist die sogenannte bisected Struktur 4 kein Substrat fur GlcNAc-T I[41. Wie wir fanden, ist aber auch die 4-Desoxyverbindung 5 kein Substrat fur GlcNAc- T Sterische Wechselwirkungen, die durch den zusatz- lichen Saccharid-Rest in 4 hervorgerufen werden, sind somit nicht die Ursache fur die Inhibierung der Reaktion. Offenbar ist die 4'-OH-Gruppe des Verzweigungsgliedes P-D-Man un- bedingt notwendig. Dieses wird noch unterstrichen durch

a - D- Manp - (1-6) \ /

p - D - GlcpNAc - (1 -4) - p - D - Manp - (1 -4) - D - GlcNAc

I

a-D-Manp-(1-3) 4

a - D- Manp - (1 -6) \ /

Cdesoxy - fl - D - Manp - (1 -4) - D - GlcNAc

5 a - D- Manp - (1 -3)

a - D- Manp - (1 -6) \ \ p - D - Talp- (1-4) - D - GlcNAc /

6 a - D- Manp - (1 -3)'

Liebigs Ann. Chem. 1992, 1303-1313 0 VCH Verlagsgesellschaft mbH, D-6940 Weinheim, 1992 0170-2041/92/1212-1303 $ 3.50+.25/0

1304 H. Paulsen, R. Wilkens, F. Reck, I. Brockhausen

RO

All0

7 R - H

/- 8 R - M e

M e 0 fioD EzlO + B z l O q

HO Bzl 0

9

Bzlo% Bzl 0

10

1 Mol /

/ Ag-Trifl

11

, OR2

OR2 R20

M e 0 0

/

CI

2 Mol

Ag-Trifl

12 R’ ,. N,; R2 - BzI 13 R’ = N H A ~ ; ~2 = AC

CF3C0,H I Ac,O

- OAc

a - D - Manp - (146)

\ /

4-0-Me - p - D - Manp - (1-4) - D - GlcNAc

a-D-Manp-(1-3) 15

Verbindung 6[61, die ebenfalls kein Substrat fur GlcNAc-T I i ~ t [ ~ ’ ~ ] . In 6 steht die 4’-Gruppe im Gegensatz zu 1 in axialer Stellung. Dies zeigt, daR eine aquatoriale 4’-OH-Gruppe fur die Reaktion notwendig ist. Man konnte vermuten, daR die aquatoriale 4’-OH-Gruppe eine Wasserstoffbruckenbin- dung rnit dem Enzym im Komplex eingeht. Diese konnte durch 0-Methylierung unterbunden werden. Aus diesem Grunde haben wir das 1 entsprechende Tetrasaccharid 15 synthetisiert, dessen 4’-OH-Gruppe methyliert ist. Da das analoge Problem auch bei der GlcNAc-T I1 ebenfalls von Bedeutung und zu uberprufen ist, wurde auch das Penta- saccharid-Substrat 2 durch Methylierung der 4’-OH- Gruppe variiert.

Bei der Synthese kann auf das von uns bereits fruher beschriebene Disaccharid 7 zuruckgegriffen werden”], das die schwierig herzustellende 0-glycosidische Verknupfung der D-Mannose enthalt. Die Methylierung von 7 ergibt 8, von dem die Allylgruppen durch Isomerisierung mit einem Iridium-Katalysator zu Enolethern[*I und anschlieBende Hydrolyse rnit IodC9] zu 9 abgespalten werden. Damit steht ein geeigneter Glycosylakzeptor zur Verfugung. Als Donor wird das durch Benzylethergruppen aktivierte Chlorid verwendet.

Die Umsetzung von 9 mit einem UberschuR von 10 bei Gegenwart von Silbertriflat liefert mit 77% das gewunschte Tetrasaccharid 12. Setzt man bei der Reaktion von 9 rnit 10 etwa aquimolare Mengen ein, so ist als Hauptprodukt auch die monoglycosylierte Verbindung 11 zu erhalten, die fur einen weiteren Glycosylierungsschritt von Bedeutung ist. Zur Entblockierung wird 12 rnit Palladium/Kohle hydriert, wobei die Benzylethergruppe abgespalten und die Azido- gruppe reduziert wird. Die Nachacetylierung ergibt dann 13. Die Acetolyse rnit katalytischen Mengen Trifluoressigsaure fuhrt zur Offnung des 1+6-Anhydroringes in 13 und liefert 14. Hieraus sind die Acetylgruppen rnit Kaliumcarbonat in Methanol unter milden Bedingungen abspaltbar. Es bildet sich das Substrat 15, das durch Saulenchromatographie gereinigt werden muR.

Die bisherigen Versuche zeigen, daB 15 ebenfalls kein Sub- strat fur die GlcNAc-T I ist [51. Dieses spricht sehr dafur, daB das Enzym innerhalb des Komplexes durch eine Wasser- stoffbruckenbindung durch die 4’-OH-Gruppe der P-Man- Einheit gebunden wird. Eine sterische Wechselwirkung laRt sich jedoch nicht vollstandig ausschliel3en.

Das Substrat fur die GlcNAc-T I1 wird auf folgende Weise synthetisiert. Als Glycosyldonor fur den Akzeptor 9 wird das Imidat 16[”’ verwendet. Das Imidat hat gegenuber dem Chlorid 10 den Vorteil, dal3 es erheblich reaktiver ist und daher auch die leicht zu gewinnende Acetylverbindung 16 verwendet werden kann. Acetylsubstituenten verringern sonst stets die Reaktivitat am anomeren Zentrum. Die Um- setzung von 9 rnit 1.1 mol 16 in Gegenwart von Trimethyl- silyltriflat ergibt weitgehend regioselektiv das an der 6’-OH- Gruppe a-glycosidisch verknupfte Produkt 17. Fur einen zweiten Glycosylierungsschritt kann jetzt das von uns schon fruher verwendete Disaccharid-Imidat 18[121 verwendet werden. Die Kupplung von 17 rnit 18 gelingt rnit Bortrifluorid als Katalysator, wobei 19 in einer fur dieses difizile Problem

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guten Ausbeute von 35% isoliert werden kann. Hierbei ist zu bedenken, daI3 nach allen Erfahrungen die 3’-OH- Gruppe in 17 recht wenig reaktiv ist.

Ein vergleichbares Pentasaccharid 20 ist auch durch Kopplung des vorher dargestellten Trisaccharides 11 rnit

ACO 9 +

TMS-Trifl. O,&NH

ACO

0

17

CCI, I dem Donor 18 bei Gegenwart von Bortrifluorid darzustel- len.

Die Entblockierung von 19 und 20 gelingt in gleicher Weise. Durch Hydrierung mit Palladiumhydroxid werden jeweils die Benzylgruppen abgespalten und die Azidogruppe reduziert. Die Nachacetylierung ergibt dann aus beiden Ver- bindungen das gleiche Produkt 21. Die Acetolyse des 1,6- Anhydroringes rnit katalytischen Mengen Trifluoressigsaure liefert das acetylierte Pentasaccharid 22, das unter milden Bedingungen rnit Kaliumcarbonat in Methanol zum ge- wiinschten Produkt 23 vollstandig entblockiert werden kann.

Die bisherigen vorlaufigen enzymatischen Untersuchun- gen rnit GlcNAc-T I1 ergeben ein ungewohnliches Bild. Ver- bindung 2 ist ein sehr gutes, Verbindung 23 dagegen kein Substrat fur GlcNAc-T 11. Die 4-OH-Gruppe der 0-D-Man- Einheit spielt also auch hier eine wichtige Rolle. Uberra- schenderweise ist jedoch eine 2 entsprechende Verbindung, die wie 4 eine 4‘-Desoxygruppierung an der 0-D-Man-Ein- heit enthalt, ein Substrat fur die GlcNAcT-11. Offenbar ist hier die entsprechende OH-Gruppe fur die Reaktion nicht notwendig, so daB ein anderer Mechanismus vorliegt. Diese Untersuchungen bediirfen somit einer weiteren Uberprii-

Es sei ferner ausgefuhrt, daI3 wir einen weiteren recht oko- R’ fung.

-0

CF3C02H I Ac20 I .OAC

A C O S l . ,

i O A C 22 I

K&03 I CH30H 1 a - D- Manp - (1-6)

\ /

4-0-Me - p - D - Manp - (1 -4) - D - GlcNAc

p - D - GlcpNAc - (1-2) - a - D - Manp- (1 -4 ) ’

23

nomischen Weg ausgearbeitet haben, um zu einem p-D-man- nosidisch rnit N-Acetylglucosamin-verkniipften Disaccharid zu gelangen, der fur die Gewinnung von 0-D-Mannosyl-Ak- zeptoren allgemein geeignet ist. Dieser Weg enthalt eine Reihe auch anderweitig gut nutzbarer Bausteine. Die Basis- reaktion, bei der eine D-gluco-Einheit in eine D-manno-Ein- heit umgewandelt wird, geht auf Untersuchungen von David et al. [l3] zuriick.

Die leicht zugangliche 3-O-Allyl-~-glucopyranose 24[l4] 1aI3t sich rnit Benzaldehyd und anschlieBender Acetylierung in 25 uberfuhren. Nach Hydrolyse der Acetylgruppe am anomeren Zentrum zu 26 ist das Imidat 27 erhaltlich. Dieses 1aBt sich mit dem bekannten Akzeptor 28[l5] bei Gegenwart von Trimethylsilyltriflat rnit nahezu quantitativer Ausbeute zum Disaccharid 29 kuppeln. Nach Freisetzung der 2’-OH- Gruppe zu 30 kann hieraus das Trifluormethansulfonat 31 oder das Imidazolylsulfonat 32 hergestellt werden. Mit Te- trabutylammoniumnitrit in T H F ist sowohl mit 31 als auch mit 32 eine Inversion zur D-manno-Konfiguration moglich, und man erhalt das gewunschte P-glycosidisch verkniipfte Disaccharid.

Zur weiteren Funktionalisierung wird 33 zu 34 benzyliert. Die Abspaltung des Benzyliden-Restes ergibt 35. Hieraus ist durch Umsetzung rnit Triphenylmethylchlorid die Trityl- verbindung 36 erhaltlich. Diese kann methyliert werden zu 37, und nach Abspaltung der Tritylgruppe erhalt man den Glycosylakzeptor 38. Eine Glycosidierung von 38 rnit dem Imidat 16 liefert das Trisaccharid 39. Nach Abspaltung der



Allylgruppe zu 40 steht gleichfalls ein geeigneter Akzeptor fur 18 zur Verfugung, urn zu einern entsprechenden Penta- saccharid zu kornmen.

AllO AllO HO

24

0 AllO

OR OBzl

OBzl

33 R - H 34 R-Bzl

I

,OR2 i OBzl AcNH I

" ' O - W AllO OBzl

35 R ' - R ~ - H 36 R' - H; R2 - Trityl 37 R1 - Me; R2 - Trityl 3[ R' -Me;R2-H

+ 16

OBzl A0 AcNH I

Dem Bundesministerium fur Forschung und Technologie und dem Medical Research Council of Canada sind wir fur die Forderung

der Untersuchungen zu Dank verpflichtet. Die NATO hat die Un- tersuchungen durch ein Reisestipendium zur Forderung der inter- nationalen Kooperation unterstutzt.

Experimenteller Teil Diinnschichtchromatographische Verfolgung der Reaktionen er-

folgte auf Kieselgel-Fertigfolie (Merck, 60 Fzs9). Detektiert wurde durch UV-Absorption und Anspruhen mit Ethanol/Schwefelsaure (10 : 1, v/v) und anschlieoender Warmebehandlung. - Saulen- chromatographische Trennung erfolgte an Kieselgel 60 (230 - 400 mesh). - Alle Losungsmittel wurden destilliert. Der verwendete Petrolether hatte den Siedebereich 60-70°C. - Drehwerte wurden rnit einem Perkin-Elmer-Polarimeter 241 in einer 1-dm-Kuvette bei 589 nm (Na-D-Linie) bestimmt. - NMR-Spektren wurden rnit den Spektrometern Bruker WH 270, AC-P 250, WM 400 oder AMX 400 aufgenommen. Als innerer Standard diente Tetramethylsilan. Die Kopplungskonstanten wurden nach erster Ordnung ausgewer- tet. Die gekoppelten 13C-NMR-Spektren wurden nach dem gated- decoupling-Verfahren aufgenommen. Die Zuordnung der Signale erfolgte, wenn notwendig, durch 'H,'H-COSY-Messungen. - Schmelzpunkte wurden rnit einem Schmelzpunktbestimmungsgerat Mettler FP 61 bestimmt.

0- (3,6-Di-0-allyl-2-0-benzyl-4-O-methyl-~-~-mannopyranosyl)- (1-4) -1,6-anhydro-2-azido-3-O-benzyl-2-desoxy-~-~-glucopyranose (8): Es werden 262 mg des Disaccharids 717] (0.43 mmol) in 8 ml N,N-Dimethylformamid gelost und mit 40 pl(0.64 mmol) Me- thyliodid versetzt. Man setzt 24 mg Natriumhydrid (1 mmol) spa- telspitzenweise zu, bis eine klare Losung vorliegt (DC: Toluol/Ace- ton, 5 : 1). Dann gibt man Methanol zu und ruhrt fur 1.5 h. Nach Entfernen des Losungsmittels i. Vak. wird in Dichlormethan aufgenommen und rnit Wasser gewaschen, mit MgS04 getrocknet, eingeengt und saulenchromatographisch iiber Kieselgel (Toluol/Essig- ester, 3: 1) gereinigt; Ausb. 234 mg (87%) Sirup, [a]g = -43.5 (c = 1.0, CHC11). - 'H-NMR (400 MHz, CDCl3): 6 = 3.25 (s, 1 H, 2-H), 3.36 (dd, Jy,c = 9.4 Hz, l H , 3'-H), 3.37 (ddd, J5.,6a. = 2.6, J 5 . , 6 ~ = 5.8 Hz, 1 H, 5'-H), 3.50 (dd, Jc,y = 9.4 Hz, 1 H, 4'-H), 3.58 (S, 3H, CH3), 3.72 (J6a,,6b. = 11.1 HZ, 1 H, 6a'-H), 3.72 (dd, J y . 6 ~ = 5.8 Hz, IH, 6b'-H), 3.78 (S, IH, 3-H), 3.78 (dd, J5,6b = 5.8, J6=,6b = 7.2 Hz, l H , 6b-H), 3.95 (d, 52.3 = 3.0 Hz, l H , 2'-H), 3.97 (s , l H , 4- H), 4.10-3.90 (m, 4H, Allyl-H), 4.16 (dd, J5,6a = 1.0 Hz, l H , 6a- H), 4.58 (d, J = 11.8 Hz, l H , CHzPh), 4.68 (s , l H , 1'-H), 4.69 (dd, J5,6b = 5.8 Hz, l H , 5-H), 4.69 (d, J = 11.8 Hz, l H , CH2Ph), 4.86 (d, J = 12.4 Hz, 1 H, CH,Ph), 4.97 (d, J = 12.4 Hz, 1 H, CHlPh), 5.32-5.09 (m, 4H, Allyl-H), 5.53 (s, l H , 1-H), 5.95-5.80 (m, 2H, Allyl-H), 7.50-7.20 (m, IOH, 2 Ph).

C33H41N309 (623.7) Ber. C 63.55 H 6.63 N 6.74 Gef. C 63.53 H 6.27 N 6.58

0- (2-O-Benzyl-4-O-methy[-P-o-mannopyranosyl) - ( I - 4 ) -16- anhydro-2-azido-3-O-benzyl-2-desoxy-~-~-glucopyranose (9): In eine Losung von 105 mg 8 (0.168 mmol) in 4 ml absol. Tetrahydrofuran gibt man eine Spatelspitze [Ir(COD)(PMePh2)2]PF6. Der Ansatz wird unter Wasserstoff (1 bar) geruhrt, bis eine farblose Losung vorliegt (3 min). Danach wird bei Raumtemp. unter Stickstoff (1 bar) geruhrt (DC: Toluol/Aceton, 5 : I, v/v). In den Ansatz gibt man 2 ml Wasser und 54 mg Quecksilber(I1)-oxid (0.25 mmol) und tropft unter starkem Ruhren eine Losung von 54 mg Quecksilber(I1)-chlorid (0.2 mmol) in 1 ml Aceton und 0.1 ml Wasser zu. Nach beendeter Abspaltung (DC: Toluol/Aceton, 3: 1, v/v) wird die Reaktion durch Zugabe von Phosphat-Puffer (pH = 7.0) abgebrochen, das Reak- tionsgemisch in Dichlormethan aufgenommen und mit 10proz. Ka- liumiodid-Losung gewaschen. Saulenchromatographische Reini- gung an Kieselgel (Toluol - Toluol/Aceton, 5 : 1 + 3 : 1, v/v) ergibt

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74 mg (0.136 mmol) (81%) Sirup; [a]g = -49.9 (c = 1.0, CHCl,), Schmp. = 122.5”C. - ‘H-NMR (400 MHz, CDC13): 6 = 2.10 (s, 1 H, 6’-OH), 2.42 (d, JY,OH = 10.2 Hz, 1 H, 3’-OH), 3.17 (ddd, J Y , ~ ~ =

4.4, J y . 6 ~ = 2.6, Jq,y = 9.4 HZ, l H , 5’-H), 3.32 ( s , l H , 2-H) 3.36 (dd, J3,,4. = 9.4 Hz, 1 H, 4’-H), 3.57 (s , 3H, CH3), 3.58 (ddd, Jy.3, = 3.6 HZ, IH, 3’-H), 3.72 (dd, J6.,,6b, = 11.9 Hz, 1 H, 6a’-H), 3.79 (dd, J5,6b = 6.0, J6=,6b = 7.2 HZ, IH, 6b-H), 3.80 (S, 1H, 3-H), 3.82 (dd, Jy ,6b . = 2.6 HZ, IH, 6b’-H), 3.90 ( s , l H , 4-H), 3.91 (dd, Jl, ,y = 0.5 Hz, l H , 2’-H), 4.16 (dd, J5,6a = 1.0 Hz, IH, 6a-H), 4.64 (s, 2H, CHZPh), 4.68 (dd, l H , 5-H), 4.72 (d, l H , 1’-H), 4.73 (d, J = 11.8 Hz, 1 H, CH,Ph), 5.09 (d, 1 H, CHZPh), 5.53 ( s , 1 H, I-H), 7.43-7.30 (m, IOH, 2 Ph).


0- (2-O-Acetyl-3,4,6-tri-O-benzyl-a-~-mannopyranosyl) - (I-+ 6)- 0- (2-O-benzyl-4-O-methyl-~-~-mannopyranosyl)-1,6-anhydro-2- azido-3-O-benzyl-2-desoxy-~-~-glucopyranose (11): In einem Braun- glaskolben werden 154 mg Silber-Triflat (0.6 mmol), 540 mg ge- pulvertes Molekularsieb (4 A) und 108 mg des Diols 53 (0.2 mmol) in Dichlormethan (3 ml) gelost. Bei -10°C tropft man lo[’’’ (306 mg, 0.6 mmol), in 3 ml Dichlormethan gelost, hinzu. Es wird 20 h geriihrt und auf 20°C gebracht (DC: Toluol/Aceton, 4: 1, v/v). Es wird rnit Dichlormethan verdiinnt, iiber Celite filtriert, mit Na- HC03-Losung und Wasser gewaschen mit MgS04 getrocknet und an Kieselgel (Toluol/Aceton, 5 : 1, v/v), vorgetrennt. Feintrennung rnit Toluol/Essigester (3 : 1 v/v) ergibt 103 mg (50%) Sirup; [a]g =

+ 10.0 (C = 1.0, CHCI,). - ‘H-NMR (400 MHz, CDCIJ: 6 = 2.04 (s , 3H, CH,CO), 2.32 (d, J3,,OH = 10.2 Hz, 1 H, OH), 3.09 (dd, J3,,4. = 9.4, J&,y = 9.4 Hz, 1 H, 4‘-H), 3.15 ( s , 1 H, 2-H), 3.31 (ddd, J S . , ~ ~ , = 1.6, J y . 6 ~ = 5.4 HZ, IH, 5’-H), 3.38 (dd, JSn,6b” = 3.8, J6am,6b“ = 9.6 Hz, 1 H, 6b-H), 3.46 (s, 3H,CH3), 3.65 (s, IH, 3-H),3.67(m,J5.,6=” = 2.0, J2.3 = 3.6 Hz, 2H, 6a”-H, 3’-H), 3.73 (dd, J5 ,6b = 6.0, J6=,6b = 7.2 Hz, l H , 6b-H), 3.77 (dd, J3-,4- = 9.4, J4”,5. = 9.6 Hz, l H , 4-H), 3.79 (d, Jy,y = 3.6 HZ, IH, 2’-H), 3.80 (dd, J6a,,6b. = 11.0 Hz, 1H, 6a’-H), 3.86 (m, J5..,6b* = 3.8, J 5 , , 6 b = 5.4 HZ, 2H, 5”-H, 6b-H), 3.89 (dd, J2-,,- = 3.2 HZ, l H , 3”-H), 3.92 (s, IH, 4-H), 4.09 (dd, J5,6a = 1.0 Hz, l H , 6a-H), 4.40, 4.41, 4.46, 4.50, 4.57, 4.59, 4.61, 4.64, (8 d, 8H, CHzPh), 4.70 (s , l H , 1’-H), 4.78 (dd, J5,6a = 1.0 Hz, l H , 5-H), 4.83 (d, J = 11.2 Hz, IH, CH,Ph), 4.96 (d, J1-,2- = 1.8 Hz, IH, 1”- H), 5.07 (d, J = 11.8 Hz, l H , CH2Ph), 5.37 (dd, l H , 2-H), 5.51 (s, 1 H, 1-H), 7.21 -7.40 (m, 25H, 5 Ph).

(1018.1) Ber. C 66.06 H 6.24 N 4.13 Gef. C 65.75 H 6.40 N 4.01

0- (2-0-Acetyl-3,4,6-tri-O-benzyl-a-o-mannopyranosyl)-(1-3)- 0-[ (2-0-acetyl-3,4,6-tri-O-benzyl-cc-~-mannopyranosyl) - (1+6)]- 0- (2-0-benzyl-4-0-methyl-P- D-mannopyranosyl) - (1-4) -1,6-anhydro-2-azido-3-O-benzyl-2-desoxy-~-~-glucopyranose (12): Das Diol 9 (55 mg, 0.1 mmol) wird rnit 77 mg Silber-Triflat (0.3 mmol) und 300 mg gepulvertem Molekularsieb (4 A) in 3 ml Dichlormethan gelost und bei -10°C rnit 153 mg Halogenose lor’’’ (0.3 mmol) versetzt. Nach 15stdg. Ruhren bei 20°C gibt man erneut 30 mg Silber-Triflat (0.1 mmol) und 100 mg 10 (0.2 mmol) zu (DC: Toluol/ Aceton, 4: 1, v/v). Nach 24stdg. Riihren wird rnit Dichlormethan verdiinnt, iiber Celite filtriert, rnit gesattigter NaHC03-Losung und Wasser gewaschen und rnit MgS04 getrocknet. Saulenchromato- graphische Trennung iiber Kieselgel (Toluol/Aceton, 5 : 1, v/v) ergibt 114.8 mg (77%) Sirup; [a]g = +19.5 (c = 1.0, CHC13). - ‘H-NMR (400 MHz, CDC13): 6 = 2.09 (s , 3H, CH,CO), 2.18 (s, 3H, CH,CO), 3.09 (s , I H, 2-H), 3.29 (ddd, Je,y = 9.4, J5.,cja. = 1.6, J 5 , , 6 ~ = 5.6 Hz, 1 H, 5’-H), 3.45 (s , 3H, CH3), 3.51 (dd, Jy,e = 9.6 Hz, 1 H, 4‘-H), 3.57 (dd, J5”’,6a”’ = 1.6, J6.-,6V = 8.8 Hz, 1 H, 6a”’-H), 3.61 (dd, J2,,3, = 2.8 Hz, I H, 3’-H), 3.67 ( s , 1 H, 3-H), 3.67 (dd, JS,6b =

5.8, J6a,6b = 7.0 HZ, 1H, 6b-H), 3.67 (dd, J5.,6a. = 1.6, J6a,,6b. = 12.0 HZ, 1 H, 6a’-H), 3.68 (dd, J&-,6b“ = 11.0, J5.,6b- = 3.8 HZ, 1 H, 6 b - H), 3.68 (dd, J 5 . . , 6 ~ = 2.8 Hz, l H , 6b”’-H), 3.73 (ddd, J4-,5* = 9.8, J5”,6a” = 1.6 Hz, 1 H, 5”-H), 3.75 (dd, 1 H, 6a”-H), 3.82 (ddd, J4n,.5.n = 9.4 Hz, l H , 5”’-H), 3.83 (s , l H , 4-H), 3.85 (d, l H , 2’-H), 3.86 (dd,

= 9.6 Hz, 1 H, 4”’-H), 3.87 (dd, Jy,y = 3.0 Hz, 1 H, 3”’-H), 3.88 (dd, J3e.4“ = 9.4 Hz, IH, 4”-H), 3.88 (dd, J 5 . , 6 ~ = 5.6 Hz, l H , 6b-H), 3.95 (dd, Jz- ,~” = 3.2 Hz, 1 H, 3”-H), 4.04 (dd, J s , ~ ~ = 0.8 Hz, l H , 6a-H), 4.36, 4.42, 4.47, 4.47, 4.54, 4.57, 4.57 (8 d, 8H, CH2Ph), 4.58 (dd, IH, 5-H), 4.59-4.60 (m, 3H, CH2Ph), 4.64 (s, l H , 1’-H), 4.68,4.74,4.81,4.86,4.96, (5 d, 5H, CHlPh), 4.97 (d, Ji“,y = 1.8 Hz, 1 H, 1”’-H), 5.14 (d, Jj-,2- = 1.6 Hz, l H , 1”-H), 5.39 (dd, IH, 2-H), 5.41 (dd, l H , 2-H), 5.46 (s, IH, I-H), 7.07-7.40 (m, 40H, 8 Ph).


0- (2.3,4,6-Tetra-O-acety~-a-~-mannopyranosyl)-(1-+3)-0- [ (2,3,4,6-tetra-0-acety~-ct-D-mannopyranosyl)-( 1-+6)]-0-(2-0- acetyl-4-O-methyl-P-~-mannopyranosyl)- (1+4) -2-acetamido-3-0- acetyl-l,6-anhydro-2-desoxy-~-~-glucopyranose (13): Es werden 76 mg 12 (0.05 mmol) in 10 ml Methanol gelost. Nach Zusatz von 50 mg Palladium/Kohle wird 3 d unter Wasserstoff (1 bar) bei 20°C geriihrt (DC: Dichlormethan/Methanol, 10 : 3, v/v). Nach beendeter Reaktion wird verdiinnt, filtriert und eingeengt. Den erhaltenen Sirup lost man in 6 ml Pyridin und gibt 3 ml Acetanhyrid hinzu. Es wird 24 h geruhrt (DC: Toluol/Aceton, 1 : 1, v/v). Nach Acety- lierung codestilliert man rnit Toluol und trennt an Kieselgel (To- luol/Aceton, 2: 1, v/v) saulenchromatographisch auf; Ausb. 50 mg (89%) Sirup, [a]g = +4.0 (c = 0.7, CHC13). - ’H-NMR (400 MHz, CDC13): 6 = 1.99, 2.01, 2.05, 2.06, 2.07, 2.08, 2.11, 2.12, 2.14, 2.17, 2.25 (11 S, 33H, CH3CO), 3.36 (ddd, Je,y = 9.6, J5,,6a, = 5.2, J5.,6b. = J5,,6b. = 2.0 Hz, IH, 5’-H), 3.52 (dd, Jy,e = 9.5, Je.5. = 9.6 Hz, l H , 4‘-H), 3.57 (s, 3H, CH3), 3.73 ( s , l H , 3-H), 3.78 (dd, J2.3, =

3.3, J3,,4. = 9.5 HZ, IH, 3’-H), 3.81 (dd, J 6 * . , 6 ~ = 11.7 Hz, IH, 6b’- H), 3.82 (S, IH, 4-H), 3.82 (m, J=,,6b = 5.8, J6a,6b = 7.5 HZ, IH, 6b- H), 3.90 (dd, l H , 6a’-H), 3.97 (ddd, Jv,5n, = 9.7, J5m,,6a9- = 4.4, J 5 . . , 6 ~ = 2.5 HZ, I H, 5”’-H), 4.03 (ddd, J4e.5“ = 9.8, J5“,6a” = 5.0, J5“,6b“ = 2.4 HZ, 1 H, 5”-H), 4.06 (dd, J5,6a = 0.8 HZ, 1 H, 6a-H), 4.13 (d, J2 ,NHAc = 9.4 HZ, IH, 2-H), 4.15 (m, J v , 6 y = 12.5 HZ, 2H, 6 b - H, 6b”’-H), 4.26 (dd, l H , 6a”’-H), 4.29 (dd, J6a”,6b” = 12.1 Hz, l H , 6a”-H), 4.58 (dd, J5,6b = 5.8 Hz, l H , 5-H), 4.66 (dd, J1m,,2. = 1.4, JT-,y = 2.8 Hz, l H , 2”’-H), 4.82 (s , l H , 1’-H), 4.95 (d, l H , 1”’-H), 5.11 (d, J1-p = 1.5 Hz, 1 H, 1”-H), 5.28 (dd, J2*,3“ = 3.0, J3-p- = 9.8 Hz, l H , 3”-H), 5.29 (s, IH, I-H), 5.29 (dd, IH, 3”’-H), 5.32 (dd, 5 3 m r . 4 “ ‘ = 9.7, Jem,y = 9.7 Hz, IH, 4”’-H), 5.34 (dd, IH, Y-H), 5.35 (dd, 1 H, 2”-H), 5.43 (d, 1 H, 2’-H), 6.18 (d, J = 9.4 Hz, 1 H, NHAc).

0- (2,3,4,6-Tetra-O-acetyl-a-~-mannopyranosyl)-( 1-3)-0- [ (2,3,4,6-tetra-o-acetyl-a-D-mannopyranosy/- (1-6)]-0- (2-0-acety~-4-O-methyl-P-o-mannopyranosyl)- (1-4) -2-acetamido-1,3,6-tri- O-acety~-2-desoxy-~-a/~-glucopyranose (14): Zu einer Losung von 13 (42 mg, 0.034 mmol) in 1 ml Essigsaureanhydrid wird bei 20” unter Riihren eine Losung von 0.13 ml Trifluoressigsaure in 1 ml Essigsaureanhydrid zugetropft. Nach 24stdg. Riihren ist die Re- aktion beendet (DC: Essigester/Aceton, 5 : 1, v/~) . Man nimmt mit Toluol auf und engt im Hochvak. bis zum Ausgangsvolumen ein. Das Codestillieren rnit Toluol wird mehrmals wiederholt, bevor bis zur Trockne eingeengt werden darf. Das Produkt wird saulenchromatographisch iiber Kieselgel (Essigester) gereinigt. Die Ano- meren konnten nicht aufgetrennt werden; Ausb. 35 mg (78%) Si- rup. - ’H-NMR (400 MHz, CDC13) P-Anomer: 6 = 3.50 (s, 3H, CH3), 4.23 (ddd, J2,3 = 10.1, J ~ , N H , ~ ~ = 9.6 Hz, l H , 2-H), 4.60 ( s , 1 H, 1’-H), 4.96 (d, J1:y = 0.9 Hz, 1 H, 1”’-H), 5.08 (d, J1“,2” = 1.6 Hz, lH, 1”-H), 5.14 (dd, J2,3 = 10.1, J3,4 = 9.2 Hz, l H , 3-H), 5.19

Liebigs Ann. Chem. 1992, 1303- 1313


(dd, J3-,4. = 10.1 Hz, IH, 3”-H), 5.23 (dd, Jy.3- = 3.4 Hz, l H , 2-H), 5.62 (d, Jl.2 = 8.5 Hz, IH, I-H), 6.05 (d, IH, NHAc).

0- (a-~-Mannopyranosyl)-(l- t3j-O-[cc-o-mannopyranosyl)- (1-6)]-0-(4-O-methyl-~-~-mannopyranosyl)- (1+4)-2-acetamido-2-desoxy-a/P-~-glucopyranose (15): Das Tetrasaccharid 14 (35 mg, 0.03 mmol) wird in 2 ml Methanol gelost und bei 0°C rnit 4 mg Kaliumcarbonat verriihrt. Nach 48 h wird die schwach ba- sische Losung rnit Dowex-50-WX8-Ionenaustauscher neutralisiert, eingeengt und uber Sephadex LH 20 rnit Methanol gereinigt. Eine weitere Reinigung erfolgte an einer HPLC-PAC-Saule (Propyl- amino-Cyano) rnit 0.7-ml/min-FlieDrate rnit Acetonitril/H,O (82: 18, v/v). Die Verbindung liegt in einem Anomerenverhaltnis von a:P wie 3:2 vor; Ausb. 18 mg (83%) Sirup, [a]g = +0.606 (c = 1.0, Methanol). - ‘H-NMR (500 MHz, D20) a-Anomer: 6 =

2.057 (3H, COCH,), 3.989 (dd, IH, 2 - H ) , 4.056 (dd, IH, 2-H), 4.244 (dd, 1 H, 2’-H), 4.808 (d, 1 H, 1’-H), 4.928 (d, J1 IH, 1”’-H), 5.089 (d, l H , 1”-H), 5.209 (d, J1,Z = 3.25, l H , I-H); P-Anomer: F = 2.054 (s, 3 H, COCH3), 4.706 (dd, 1 H, 1-H).

0- (2,3,4,6- Tetra-0-acetyl-a-D-mannopyranosy1)- (1-6)-0- (2- benz yl-4-O-methyl-/?-~-mannopyranosyl)- (1&+4)-1,6-anhydro-2- azido-3-O-benzyl-2-desoxy-~-~-glucopyranose (17): Der Akzeptor 9 (23 mg, 0.042 mmol) und das Imidat 16[“] (25 mg, 0.051 mmol) werden unter FeuchtigkeitsausschluD in 5 ml absol. Dichlormethan gelost und bei -20°C rnit 100 pl einer 2proz. Trimethylsilyl-trifluormethansulfonat/Dichlormethan-Losung (v/v) versetzt. Man la& wahrend 15 min unter Riihren auf 0°C kommen (DC: Petrol- ether/Essigester, 1 : 2, v/v). Der Ansatz wird mit Triethylamin neutralisiert, eingeengt, rnit Toluol codestilliert und saulenchromatographisch aufgetrennt (Toluol/Essigester, 2 : 1, v/v). Ausb.: 32 mg (0.036 mmol) (87%) Sirup, [a]g = - 10.2 (c = 0.6, CHC13). - ‘H- NMR (400 MHz, CDC13): F = 1.87, 1.97, 2.08, 2.12 (4 S, 12H, COCH3), 2.42 (d, J ~ , , o H = 9.4 Hz, IH, OH), 3.16 (dd, Jc,y = 9.6 Hz, 1 H, 4’-H), 3.21 (dd, JZ.3 = 0.9 Hz, 1 H, 2-H), 3.36 (ddd, Jy,6a, = 2.0, J5.,6b. = 7.0 Hz, lH, 5’-H), 3.55 (s, 3H, OCH3), 3.60(ddd, J3.,* =

8.8 Hz, l H , 3’-H), 3.74 (dd, J3,4 = 1.2 Hz, IH, 3-H), 3.79 (dd, J6a,,6b, = 11.2 HZ, IH, 6a’-H), 3.85 (dd, J6*,6b = 7.2 HZ, IH, 6a-H), 3.88 (dd, l H , 6b’-H), 3.98 (dd, Jy.3. = 3.6 Hz, IH, 2’-H), 3.98 (dd, J3.4 = 1.2, J4.5 < 0.5 Hz, 1 H, 4-H), 4.00 (ddd, J 4 e . y = 10.0, J5”,6a” =

2.4, J5.,6w = 5.4 Hz, IH, 5”-H), 4.11 (dd, J6a.,6b.. = 12.2 Hz, 1 H, 6a“- H), 4.20 (dd, 1 H, 6b”-H), 4.20 (dd, 1 H, 6b-H), 4.59, 4.67 (2 d, J =

11.6 Hz, 2H, CH,Ph), 4.67 (d, J = 11.8 Hz, 1 H, CHzPh), 4.76 (ddd, J5,ha = 6.4, J5,6b = 0.8 HZ, IH, 5-H), 4.78 (d, J1.,2. < 0.5 HZ, IH, 1’-H), 4.94 (d, J1-,2- = 1.2 Hz, 1 H, 1”-H), 5.06 (d, J = 11.8 Hz, 1 H, CH2Ph), 5.24-5.26 (m, 3H, 2-H, 3”-H, 4-H), 5.54 (d, Jl,2 < 0.5 Hz, IH, I-H), 7.18-7.41 (m, IOH, Ph).

C4,HS1N3018 (873.9) Ber. C 56.35 H 5.88 N 4.81 Gef. C 56.01 H 6.90 N 4.60

0- (2- Acetamido-3,4,6-tri-O-acetyl-2-desoxy-~-~-glucopyranosyl) - (1--t2)-0- (3,4,6-tri-O-acetyl-a-D-mannopyranosyl)- (1-3)-0- [ (2,3,4,6-tetra-O-acetyl-a-D-mannopyranosy~)- (1+6)]-0- (2-0- benzyl-4-O-methyl-P-~-mannopyranosyl) - (1-4)-1,6-anhydro-2- azido-3-O-benzy~-2-desoxy-~-D-g~ucopyranose (19): Der Akzeptor 17 (20 mg, 23 pmol) und das Imidat 18 (31 mg, 40 pmol) werden unter FeuchtigkeitsausschluD in 10 ml absol. Dichlormethan gelost und zusammen mit Molekularsieb (4 A) 10 min geriihrt. Dazu werden 1.2 ml einer 0.05 M Diethylether-Bortrifluorid-Losung in Dichlor- methan getropft (DC: Toluol/Aceton, 2:1, v/v). Es wird rnit Tri- ethylamin neutralisiert, eingeengt und saulenchromatographisch aufgetrennt; Ausb. 12 mg (8 pmol) (35%) Sirup, [a1200 = + K O (c = 1.0, CHCI,). Es werden 5 mg 17 (5.7 pmol) zuriickgewonnen, das erneut eingesetzt werden kann. - ‘H-NMR (400 MHz, CDC13): F = 1.86, 1.93, 1.96, 2.01, 2.01, 2.03, 2.03, 2.05, 2.05, 2.07, 2.11 (I ls , 33H, COCH3), 3.21 (dd, J2 .3 = 1.6 Hz, l H , 2-H), 3.43 (ddd, Js,,~~, =

1.6, J5.,6b. = 7.2 HZ, 1H, 5’-H), 3.48 (ddd, Jp-, 3- = 10.6, J2””,NH = 7.8 Hz, IH, 2 - H ) , 3.50 (dd, J4.,5. = 9.2 Hz, IH, 4’-H), 3.54 (s, 3H, OCH3), 3.65 (dd, J3,,p = 9.2 Hz, 1 H, 3’-H), 3.69 (ddd, Jy* ,6a - = 2.2, J5*”,6b- = 5.2 HZ, 1H, 5””-H), 3.71 (ddd, J5”,6a- = 2.4, J y , 6 b - =

5.6 Hz, IH, 5”-H), 3.71 (dd, J2.3 = 1.6 Hz, J3.4 = 2.8 Hz, I H , 3-H), 3.79 (dd, J6a.,6b. = 10.8 Hz, l H , 6a’-H), 3.84 (dd, J&”,6b” = 12.4 Hz, 1 H, 6a”-H), 3.86 (dd, J6a,6b = 7.2 Hz, 1 H, 6a-H), 3.90 (dd, 1 H, 6b’- H), 3.96 (dd, Jz,y = 2.8 Hz, l H , 2’-H), 3.98 (dd, J3.4 = 2.8, J4,5 < 0.5 Hz, lH, 4-H), 4.00 (ddd, J p , y = 10.0, Jy,Ga-,, = 2.4, J y , 6 y =

5.2 Hz, 1 H, 5”’-H), 4.01 (dd, J6a...,6b.” = 12.2 Hz, 1 H, 6a””-H), 4.05 (dd, IH, 6b-H), 4.13 (dd, J6a,z,,6b”. = 12.2 Hz, IH, 6a”’-H), 4.19 (dd, IH, 6b-H), 4.21 (dd, l H , 6b-H), 4.26 (dd, l H , 6b”-H), 4.27 (dd, J1-,Z- = 2.0 Hz, Jy,3” = 3.4 Hz, IH, 2”-H), 4.57 (d, J = 11.8 Hz, l H , CHZPh), 4.67 (d, J = 11.8 Hz, l H , CHZPh), 4.75 (ddd, J4.5 < 0.5 Hz, J5,rja = 6.2, J5,6b = 0.8 Hz, l H , 5-H), 4.76 (d, J = 12.4 Hz, l H , CHzPh), 4.89 (d, Ji.,? < 0.5 Hz, l H , 1’-H), 4.95 (d, J1r,,,y =

1.0 Hz, IH, 1”’-H), 4.99 (dd, J4-,,.,5- = 9.8 Hz, IH, 4 - H ) , 5.00 (d, J1-,2- = 2.0 Hz, l H , 1”-H), 5.01 (d, Ji--,y- = 8.4 Hz, l H , 1””-H), 5.02 (d, J = 3.4 Hz, J3n.4- = 10.2 Hz, 1 H 3”-H), 5.20(dd, J 4 - , y = 10.0 Hz, 1H,4-H), 5.24-5.28

12.4 Hz, IH, CHZPh), 5.07 (dd, Jy,y =

(m, 3H, 2”’-H, 3”‘-H, 4-H) , 5.51 (d, Jl,z < 0.5 Hz, l H , 1-H), 5.57

7.22-7.42 (m, IOH, Ph). (dd, J3””.,4-* = 9.4 Hz, 1 H, 3””-H), 5.60 (d, JZ*”,NH = 7.8 Hz, 1 H, NH),

0- (2-Acetamido-3,4,6-tri-O-acetyl-2-desoxy-~-~-glucopyranosyl) - (1-2) -0- (3,4,6-tri-0-acetyl-a-~-mannopyranosy/)- (1-3) -0- [ (2-0-acety~-3,4,6-tri-O-benzy/-u-~-mannopyranosy1)-(1--t6)]-0- (2-0-benzyl-4-O-methyl-P-~-mannopyranosyl)- (I+l)-l,b-anhydro-2-azido-3-O-benzyl-2-desoxy-~-~-glucopyranose (20): Der Ak- zeptor 11 (20 mg, 19.6 pmol) und das Imidat 18 (18 mg, 23.6 pmol) werden unter FeuchtigkeitsausschluD in 3 ml absol. Dichlormethan gelost und zusammen rnit Molekularsieb (4 A) 10 min geruhrt. Es werden 0.9 ml einer 0.05 M Diethylether-Bortrifluorid-Losung in Dichlormethan bei Raumtemp. zugetropft (DC: Petrolether/Essig- ester, 1 :4, v/v). Der Ansatz wird mit Triethylamin neutralisiert, eingeengt und saulenchromatographisch an Kieselgel (Toluol/Essig- ester, 1:1, v/v) aufgetrennt; Ausb. 7 mg (4.3 pmol) (22%) Sirup, [a]g = +19.3 (c = 0.6, CHC13). Es werden 12 mg 11 (11.8 mmol) zuriickgewonnen, das erneut eingesetzt werden kann. - ‘H-NMR

(8s, 24H, COCH3), 3.16 (dd, Jz ,3 < 0.5 Hz, l H , 2-H), 3.34 (mc, l H ,

7.6 Hz, l H , 2””-H), 3.53-3.58 (m, 2H, 3’-H, 4-H), 3.67 (dd, J3,4 < 0.5 Hz, lH, 3-H), 3.69 (dd, J6=,6b = 7.2 Hz, IH, 6a-H), 3.70 (ddd,

2.4, J5”,6b” = 5.6 Hz, 1 H, 5”-H), 3.76-3.94 (m, 7H, 2’-H, 6a’-H, 6b’- H, 3”‘-H, 4”‘-H, 5”’-H, 6a”’-H), 3.78 (dd, Jy,6b’” = 1.4 Hz, J 6 a ” , , 6 y = 11.8 Hz, IH, 6b”‘-H), 3.86 (dd, J6a,,,6b.. = 12.0 Hz, l H , 6a”-H), 3.92 (dd, J4,5 < 0.5 Hz, 1 H, 4-H), 4.00 (dd, J6a-.,6b... = 12.6 Hz, 1 H, 6a””-

(400 MHz, CDCI3): 6 = 1.92, 2.01, 2.01, 2.03, 2.03, 2.04, 2.04, 2.06

5’-H), 3.47 (s , 3H, OCH,), 3.48 (ddd, J p , 3 - = 10.4 Hz, J2“,,,NH =

J5-.,6a-- = 2.0 HZ, Jy- ,6b - - = 5.4 Hz, 1 H, 5””-H), 3.75 (ddd, J5e,6a., =

H), 4.06 (dd, l H , 6b”-H), 4.09 (dd, IH, 6b-H), 4.27 (dd, l H , 6 b - H), 4.28 (dd, J2“,3” = 3.4 Hz, IH, 2-H), 4.38 (d, J = 11.0 Hz, l H , CHzPh), 4.43 (d, J = 11.6 Hz, l H , CH2Ph), 4.46(d, J = 10.8 Hz, IH, CH,Ph), 4.49 (d, J = 12.0 Hz, l H , CH,Ph), 4.58 (d, J =

11.6 Hz, CHzPh), 4.59 (d, J = 11.0 Hz, l H , CH,Ph), 4.61 (d, J =

12.0 HZ, I H, CHlPh), 4.69 (ddd, J s , ~ ~ = 5.4 Hz, J5 ,6b < 0.5 Hz, l H , 5-H), 4.72 (d, Ji,,z < 0.5 Hz, l H , 1’-H), 4.75 (d, J = 12.4 Hz, l H , CH,Ph), 4.83 (d, J = 10.8 Hz, 1 H, CHzPh), 4.97 (d, J1”,y = 1.6 Hz, l H , 1”-H), 4.98 (d, JI = 1.6 Hz, 1 H, l”’-H), 4.99 (dd, J4..,,5- = 10.0 Hz, 1 H, 4””-H), 5.01 (d, J1 = 8.0 Hz, I H , 1””-H), 5.05 (d, J = 12.4 Hz, l H , CH,Ph), 5.10 (dd, J3n.4- = 10. 5.20 (dd, J 4 - , y = 9.8 Hz, l H , 4”-H), 5.40 (dd, ,

J y , y = 2.8 Hz, IH, 2”’-H), 5.46 (d, J 1 , Z < 0.5 Hz, I H , 1-H), 5.54 (d, J2“-,NH = 7.6 Hz, 1 H, NH), 5.57 (dd, J3-,,4- = 9.2 Hz, 1 H, 3””- H), 7.10-7.46 (m, 25H, Ph).



0- (2 - Acetamido-3,4,6-tri-O-acetyl-2-desoxy-~-~-glucopyrano- s y l ) - (1 -2 ) -0 - (3.4,6-tri-O-acetyl-a-D-mannopyranosyl)- (1-3)-0- [ (2,3,4,6-tetra-0-acety~-a-~-mannopyranosy~) - ( 1 - 6 ) ] - 0 - ( 2 - 0 - acetyl-4- 0 - m e t h yl- P- D-mannopyranosyl) - (1+4) -2-acetamido-3-0- acetyl-i,6-anhydro-2-desoxy-~-~-glucopyranos~ (21): a) Das Penta- saccharid 19 (10 mg, 6.7 pmol) wird in 2.5 ml absol. Methanol und 0.25 ml absol. Dioxan gelost und mit 10 mg Palladiumhydroxid (0.07 mmol) sowie zwei Tropfen Essigsaureanhydrid versetzt. Unter Wasserstoff wird 5 h bei Raumtemp. und Normaldruck geriihrt (DC: Petrolether/Aceton, 1 : 2, v/v). Zur Aufarbeitung wird filtriert, eingeengt und rnit Toluol codestilliert. Das R6hprodukt wird rnit 1 ml Pyridin und 0.5 ml Essigsaureanhydrid nachacetyliert (DC: s. 0.). Saulenchromatographische Trennung an Kieselgel (Petrol- ether/Aceton, 1 : 1 + 1 : 1.5, v/v) ergeben 6.7 mg (4.7 pmol) (70%) Sirup.

b) Das Pentasaccharid 20 (7 mg, 4.3 pmol) wird in 2.0 ml absol. Methanol und 0.2 ml absol. Dioxan gelost und rnit 7 mg Palla- diumhydroxid (0.05 mmol) sowie 2 Tropfen Essigsaureanhydrid versetzt. Nach vierstiindigem Riihren unter Wasserstoff (1 bar) ist die Reaktion beendet (DC: Toluol/Ethanol, 1 : 1, v/v). Filtrieren, Einengen und Codestillieren rnit Toluol fiihrt zu einem Rohpro- dukt, das rnit 1 ml Pyridin und 0.5 ml Essigsaureanhydrid nachacetyliert wird (DC: Petrolether/Aceton, 1 :2, v/v). Saulenchro- matographische Trennung an Kieselgel (Petrolether/Aceton, 1 : 1 +1 : 1.5, v/v) fiihrt zu 3 mg (2.1 pnol) (50%) Sirup. - ‘H-NMR (400 MHz, CDC13): 6 = 1.95, 1.99, 2.01, 2.02, 2.04, 2.05, 2.06, 2.07, 2.08, 2.10, 2.12, 2.14, 2.17, 2.22 ( 1 4 ~ , 42H, COCH3), 3.38 (ddd, J Y , ~ ~ . = 3.0, J 5 . , 6 ~ = 4.6 Hz, 1 H, 5’-H), 3.43 (ddd, J2--,3,- = 10.2, JZ--,NH = 7.6 Hz, l H , 2””-H), 3.53 (dd, Je.5. = 9.2 Hz, l H , 4’-H), 3.58 (s, 3H, OCH,), 3.70 (ddd, Jy.”,6a..n = 2.0, J5”,,,6b”,, = 5.2 Hz, l H ,

l H , 3’-H), 3.82 (dd, J6a.,6b. = 12.0 Hz, 1 H, 6a’-H), 3.82 (dd, J6a,6b =

7.8 Hz, 1H, 6a-H), 3.86 (ddd, J5..,6a- = 2.0, JS..,6b. = 5.0 Hz, 1H, 5”- H), 3.91 (dd, 1 H, 6b’-H), 4.01 (dd, J6a-,,,6b”” = 12.2 Hz, 1 H, 6a””-H),

5””-H), 3.72 (dd, J4,5 < 0.5 Hz, 1H, 4-H), 3.78 (dd, Jy,w = 9.8 Hz,

4.03 (ddd, J v , y = 10.0, J Y , ~ ~ , , , = 2.6, J5..,6y = 6.0 Hz, l H , 5”’-H), 4.06 (ddd, J2.3 < 0.5 Hz, J2 ,NH = 9.4 Hz, l H , 2-H), 4.07 (dd, J6*.,6b“ = 12.4 Hz, l H , 6a”-H), 4.12 (dd, lH, 6b-H), 4.15 (dd,

= 12.4 Hz, l H , 6a”’-H), 4.21 (dd, l H , 6b-H), 4.23 (dd, J2-,3- = 3.4 Hz, 1 H, 2-H), 4.27 (dd, 1 H, 6b”’-H), 4.28 (dd, 1 H, 6b””- H), 4.59 (ddd, J 5 b a = 6.6, J5 ,6b < 0.5 Hz, IH, 5-H), 4.64 (dd, J3.4 < 0.5 Hz, 1 H, 3-H), 4.82 (d, Jj.,? < 0.5 Hz, 1 H, 1’-H), 4.96 (d, J1-,2- = 1.0 Hz, 1 H, 1”’-H), 4.99 (dd, J 4 = 10.2 Hz, 1 H, 4”-H), 5.00 (d, Jj-,2- = 2.0 Hz, 1 H, 1”-H), 5.0 d, J y . 4 ” = 10.2 Hz, 1 H, 3”-H), 5.09 (d, J1--,2-- = 8.2 Hz, l H , 1””-H), 5.28 (dd, J 4 , 5 - = 9.8 Hz, l H , 4-H), 5.30-5.34 (m, 3H, 2”’-H, 3”’-H, 4”’-H), 5.34 (d, Jl,z < 0.5 Hz, l H , 1-H), 5.42 (dd, J2,,3, = 2.4 Hz, l H , 2’-H), 5.59 (dd, J3* 9.4 Hz, l H , 3””-H), 5.63 (d, J p * , N H = 7.6 Hz, lH, NH””), 6.14 (d, J~,NH = 9.4 HZ, IH, NH).

0- (2 - Acetamido-3,4,6-tri-O-acetyl-2-desoxy-~-~-glucopyrano- s y l ) - (1-2) -0- (3,4,6-tri-0-acety~-a-~-mannopyranosyl) - (1+3) -0- [ (2,3,4,6-tetra-0-acetyh-D-mannopyranosy/) - (1-6)]-0-(2-0- acetyl-4-O-methyl-P-~-mannopyranosyl) - (1+4)-2-acetamido-1,3,6- tri-O-acetyl-2-desoxy-~/~-D-g~ucopyranose (22): Die Anhydrover- bindung 21 (9.7 mg, 6.9 pmol) wird in 1 ml Essigsaureanhydridl Trifluoressigsaure (1 5: 1, v/v) aufgenommen und 44 h bei Raumtemp. stehengelassen (DC: Toluol/Aceton, 1 : 1.5, v/v). Zur Aufarbeitung wird rnit Toluol codestilliert und saulenchromatographisch an Kie- selgel (Toluol/Ethanol, 8:1, v / ~ ) gereinigt; Ausb. 4 mg (2.6 pmol) (38%) Sirup. - ‘H-NMR (400 MHz, CDCl,) a-Anomer: 6 = 3.40 (m. 1 H, 2””-H), 3.54 (s, 3H, OCH3), 3.68 (ddd, J5..,6a-” = 2.4,

12.0 Hz, 1 H, 6a””-H), 4.20 (m, 1 H, 2”-H), 4.27 (dd, 1 H, 6b””-H), J5-*,6b- = 4.8 HZ, 1 H, 5””-H), 3.77 (m, 1 H, 5-H), 4.00 (dd, J6a-,,6b-“ =

4.35 (dd, J2.3 = 9.8 Hz, l H , 2-H), 4.60 (d, Jj.,r < 0.5 Hz, l H , 1’- H), 4.98 (dd, J4e-,5-” = 9.8 Hz, l H , 4 - H ) , 4.90-5.03 (m, 3H, 1”-H, 1”’-H, 1””-H), 5.23 (dd, J2 ,3 = 9.8 Hz, l H , 3-H), 5.28-5.40 (m, 4H, 2’-H, 2”’-H, 3”-H, 4-H), 5.56 (dd, J2-,.,3- = 10.4 Hz, J3*”,4-0 = 9.4 Hz, l H , 3””-H), 5.62 (d, J2 ,NH = 8.4 Hz, l H , NH), 5.68 (d, J2-,NH = 7.8 Hz, l H , NH””), 6.09 (d, Jl.2 = 3.6 Hz, l H , 1-H).

0- (2-Acetamido-2-desoxy-~-~-glucopyranosyl) - (1-2) -0- (a-D- mannopyranosy1)- (1+3)-0-[ (a-D-mannopyranosy1)- (1-6)l-O- (4- 0-methyl-P-D-mannopyranosyl) - (1-4) -2-acetamido-2-desox y- a/P-D-glUCOpyranOSe (23): Die peracetylierte Verbindung 22 (4 mg, 2.6 pmol) wird in 1 ml absol. Methanol gelost, rnit 1 mg Kalium- carbonat (7.2 pmol) versetzt und 28 h bei 0°C geriihrt. Nach beendeter Reaktion ( D C Chloroform/Methanol/Wasser, 5 :4: 1, v/v/v) neutralisiert man rnit Dowex 50-WX8 (H+-Form), filtriert und engt ein. Saulenchromatographische Trennung an Sephadex G-10 (H20) fiihrt zu 2.4 mg (2.5 pmol) (96%) Sirup. - ‘H-NMR (400 MHz, D20) a-Anomer: 6 = 3.35 (s, 3H, OCH3), 4.17 (dd, J1”,p < 0.5 Hz, J2”,3- = 2.8 Hz, 1 H, 2-H), 4.24 (mc, 1H, 2’-H), 4.55 (d, Jj-*,2-- = 8.4 Hz, 1””-H), 4.75 (d, J1,,2. < 0.5 Hz, 1 H, 1’-H), 4.94 (d, Jl,,,,2-, = 1.8 Hz, 1 H, 1”’-H), 5.10 (d, J1-,p < 0.5, 1.5, 1”-H), 5.21 (d, J1,2 = 3.0 Hz, l H , 1-H). - ‘H-NMR (400 MHz, CD30D) a-Anomer: 6 = 3.50 (s, 3 H, OCH,), 4.04 (dd, J1“,2” = 1.4 Hz, J2*,3,, = 3.0 Hz, l H , 2”-H), 4.16 (dd, Jl,,? < 0.5 Hz, J2-,3- = 2.8 Hz, IH, 2’-H), 4.47 (d, J1-“,2-- = 8.2 Hz, 1 H, 1””-H), 4.61 (d, J1,,2, < 0.5 Hz, l H , 1’-H), 4.84 (d, Jl 0.5 Hz, l H , 1”’-H), 5.07 (d, J1-,2- = 1.4 Hz, 1H, 1”-H), 5.09 (d, J1 .2 = 2.8 Hz, 1-H).

<

1,2-Di-O-acetyl-3-O-allyl-4,6-O-benzylid~n-a/~-~-glucopyranose (25): Frisch destillierter Benzaldehyd (10 ml) wird bei Raumtemp. rnit 3.42 g (25.1 mmol) wasserfreiem Zinkchlorid versetzt und 10 min mit Ultraschall behandelt. Man gibt 5.53 g (25.1 mmol) 3-0- Allylglu~ose[‘~~ zu und behandelt weiter rnit Ultraschall (DC: To- luol/Methanol, 5: 1, v/v). Zur Aufarbeitung wird in Ethylacetat aufgenommen, rnit Wasser gewaschen und mit MgS04 getrocknet. Die Nachacetylierung erfolgt rnit Pyridin/Essigsaureanhydrid fur ca. 12 h. Saulenchromatographische Reinigung an Kieselgel (Petrol- ether/Aceton, 5 : 1, v/v) liefert 8.89 g (22.9 mmol) (91%) des Ano- merengemisches im Anomerenverhaltnis a/@ wie 2: 1. Durch Kri- stallisation aus Essigester/Petrolether konnen 2.38 g des reinen p- Anomers als farblose Nadeln erhalten werden; Schmp. 11 1.5 “C, [a]g = - 8.9 ( C = 1.0, CHCl3). - ‘H-NMR (400 MHz, CDCl3) a- Anomer: 6 = 2.17, 2.07 (2 s, 6H, COCH,), 3.72 (dd, J4,5 = 9.5 Hz, IH, 4-H), 3.74 (dd, J&,6b = 10.3 Hz, l H , 6a-H), 3.92 (dd, J3,4 = 9.5

(dd, 1 H, 6b-H), 4.34-4.40 (m, 2H, Allyl-H), 5.04 (dd, J2 ,3 = 9.5 Hz, 1H,2-H), 5.13-5.30(m,2H,Allyl-H), 5.60(s, 1H,CHPh),5.85(mC, l H , Allyl-H), 6.26 (d, J1,2 = 3.9 Hz, l H , 1-H), 7.32-7.55 (m, 5H, Ph). - ‘H-NMR (250 MHz, CDC13) 0-Anomer: 6 = 2.13,2.15 (2 s,

5-H), 3.67-3.82 (m, 3H, 3-H, 4-H, 6a-H), 4.08-4.18 (m, 1H, Allyl-

(m, l H , Allyl-H), 5.10 (dd, J2 ,3 = 9.2 Hz, l H , 2-H), 5.06-5.26 (m,

5.83 (mc, l H , Allyl-H), 7.50-7.53 (m, 5H, Ph).

Hz, 1 H, 3-H), 3.95 (ddd, J s , ~ ~ = 10.4, J5 ,6b = 4.7 Hz, 1 H, 5-H), 4.31

6H, COCH3), 3.57 (ddd, J4.5 = 9.4, J5,6a = 9.4, J5 ,6b = 5.0 Hz, 1H,

H), 4.38 (dd, J5,6b = 5.0 HZ, J6a,6b = 10.4 HZ, 1 H, 6b-H), 4.31 -4.42

2H, Allyl-H), 5.55 (s, 1 H, CHPh), 5.72 (d, Jl.2 = 8.2 Hz, 1 H, 1-H),

CZOH2408 (392.4)

2-O-Acetyl-3-O-allyl-4,6-O-benzyliden-a/~-~-glucose (26): a) Das Acetat 25 (260 mg, 0.66 mmol) wird in 5 ml absol. Tetrahydrofuran gelost, rnit 0.05 ml Piperidin versetzt und bei Raumtemp. 16 h geriihrt (DC: Toluol/Essigester, 5: l , v/v). Der Ansatz wird eingeengt und rnit Toluol codestilliert. Reinigung durch Saulenchromatogra- phie an Kieselgel (DC-Laufmittel) ergibt 130 mg (0.37 mmol) (56%) des Anomerengemisches rnit dem Anomerenverhaltnis a/p wie 4: 1. Kristallisation aus Essigester/Petrolether; Schmp. 145.8 “C.

Ber. C 61.22 H 6.16 Gef. C 61.34 H 6.26



b) Das Acetat 25 (502 mg, 1.28 mmol) lost man in 10 ml absol. Tetrahydrofuran, versetzt rnit 0.19 ml(3.2 mmol) Aminoethanol und riihrt 7 h bei Raumtemp. (DC: Toluol/Essigester, 5: 1, v/v). Nach Kieselgelfiltration rnit dem DC-Laufmittel erhalt man 327 mg (0.93 mmol) (73%) des Anomerengemisches als Sirup. - ‘H-NMR (250 MHz, CDC1,) cr-Anomer: 6 = 2.18 (s, 3H, COCH,), 2.85 (dd, JI,OH = 3.8 Hz, J2,OH = 1.0 Hz, 1 H, OH), 3.65 (dd, 54.5 = 9.6 Hz, 1 H, 4-H), 3.75 (dd, J6a,6b = 10.2 HZ, I H, 6a-H), 3.98 (dd, J3.4 = 9.2 Hz, IH, 3-H), 4.10 (ddd, J5,6a = 10.2, J5,6b = 4.8 Hz, l H , 5-H), 4.18 (mc, 1 H, Allyl-H), 4.28 (dd, 1 H, 6b-H), 4.36 (mc, 1 H, Allyl-H), 4.87 (ddd, J2,3 = 9.6 Hz, JZ,OH = 1.0 Hz, IH, 2-H), 5.10-5.32 (m, 2H,

l H , CHPh), 5.91 (mc, IH, Allyl-H), 7.35-7.53 (m, 5H, Ph). Allyl-H), 5.43 (dd, J~,oH = 3.8 Hz, J1.2 = 3.8 Hz, l H , 1-H), 5.56 (s ,

Cl8HzZO7 (350.4) Ber. C 61.70 H 6.33 Gef. C 61.51 H 6.12

2-0 - Acetyl-3-0-a/lyl-4,6-O-benzyliden-a-~-glucopyranosyl-tri- chloracetimidat (27): 264 mg (0.75 mmol) der Verbindung 26 werden in 30 ml absol. Dichlormethan gelost und unter Stickstoff (1 bar) mit 3 rnl Trichloracetonitril versetzt. Bei 0°C setzt man 3.5 ml einer 0.1 M 1,5-Diazabicyclo[5.4.O]undec-5-en-Losung in Dichlormethan zu und riihrt anschlieljend bei 0°C (DC: Toluol/Essigester, 5: 1, v/v). Zur Aufarbeitung wird der Ansatz auf eine Kieselgelsaule ge- geben und chromatographisch (DC-Laufmittel) gereinigt. Aus- waage: 307 mg (0.62 mmol) (83%) Sirup, der weiter umgesetzt wird. - ‘H-NMR (250 MHz, CDCI,): 6 = 2.06 (s, 3H, COCH3), 3.75 (dd, J3.4 = 9.6 Hz, 1 H, 3-H), 3.76 (ddd, J s , ~ ~ = 9.6 Hz, Js,6b = 4.8 HZ, 1 H, 5-H), 4.03 (dd, J s , ~ ~ = 9.6 Hz, J6a,6b = 10.2 Hz, 1 H, 6a- H), 4.05 (dd, J4,5 = 9.6 Hz, 1 H, 4-H), 4.21 (mc, 1 H, Allyl-H), 4.34 (dd, 1 H, 6b-H), 4.40 (mc, 1 H, Allyl-H), 5.05 (dd, J2,3 = 9.6 Hz, 1 H, 2-H), 5.13-5.32(m,2H,Allyl-H), 5.60(s, lH,CHPh), 5.90(mC, IH, Allyl-H), 6.50 (d, J1,z = 3.8 Hz, IH, I-H), 7.33-7.54 (m, 5H, Ph), 8.62 (s, 1 H, NH).

Benzyl-0- (2-O-acetyl-3-O-allyl-4,6-O-benzyliden-~-~-glucopyra- nosy1)- (1~4)-2-acetamido-3,6-di-O-benzyl-2-desoxy-a-~-glucopyranosid (29): a) In 5 ml absol. Dichlormethan werden 150 mg des Imidats 27 (0.3 mmol) und 137 mg des Akzeptors 28 (0.28 mmol) unter Stickstoff (1 bar) vorgelegt. Bei -20°C gibt man 0.3 ml einer Diethylether-Bortrifluorid-Losung in Dichlormethan zu und riihrt anschlieljend bei Raumtemp. (DC: Toluol/Essigester 1 : 1, v/v). Der Ansatz wird mit Triethylamin neutralisiert, eingeengt und mehrfach mit Toluol codestilliert. Nach Saulenchromatographie an Kieselgel (Dichlormethan/Aceton, 20: 1, v/v) werden 152 mg (0.185 mmol) (66%) Sirup erhalten; [crlg = f59.7 (c = 1.0, CHC13). Es werden 42 mg (0.086 mmol) an 28 zuriickgewonnen.

b) Zu einer Losung von 739 mg 28 (1.50 mmol) und 890 mg Imidat 27 (1.80 mmol) in 30 ml absol. Dichlormethan gibt man unter Stick- stoff (1 bar) bei Raumtemp. 1.5 ml einer 2proz. Trimethylsilyl-trifluormethansulfonat-Losung in Dichlormethan (v/v) und riihrt (DC: s.o.). Nach der Aufarbeitung wie oben erhalt man 1.2 g (1.45 mmol) (97%) Sirup. - ‘H-NMR (400 MHz, CDC13): 6 = 1.89, 2.01

H), 3.40 (dd, J ~ ~ . , 6 b . = 10.4 Hz, IH, 6a’-H), 3.43 (dd, .I3.,& = 9.6 Hz, 1 H, 3’-H), 3.55 (dd, J6a,6b = 11.0 Hz, 1 H, 6a-H), 3.55 (dd, J3,4 =

(2 S, 6H, COCHJ, 3.15 (ddd, J S , , ~ ~ . = 9.6, J y . 6 ~ = 4.8 Hz, IH, 5’-

8.8 Hz, IH, 3-H), 3.58 (dd, J4,,5, = 9.6 Hz, l H , 4’-H), 3.64 (ddd, J5,6a = 1.6, J5,6b = 3.0 HZ, IH, 5-H), 3.75 (dd, l H , 6b-H), 4.01 (dd, J4,5 = 9.6 Hz, 1 H, 4-H), 4.06 (mc, 1 H, Alllyl-H), 4.20 (ddd, J2,, =

10.4, J2 ,NH = 9.4 Hz, 1 H, 2-H), 4.33 (mc, I H, Allyl-H), 4.45 (d, J = 12.0 Hz, 1 H, CHZPh), 4.45 (d, J = 11.8 Hz, 1 H, CHzPh), 4.52 (d, Jl,,r = 8.0 Hz, lH, 1’-H), 4.54, 4.65 (d, J = 11.8 Hz, l H , CH,Ph), 4.77, 4.84 (3 d, J = 12.0 Hz, 3H, CHZPh), 4.92 (dd, 52,). = 9.6 Hz, 1 H, 2’-H), 4.92 (d, J1.2 = 3.6 Hz, 1 H, I-H), 5.22 (d, JNH,Z = 9.6 Hz,

l H , NH), 5.12-5.25 (m, 2H, Allyl-H), 5.41 (s, l H , CHPh), 5.81 (mc, 1 H, Allyl-H), 7.22-7.46 (m, 20H, Ph).

C4,HS3NOl2 (823.9) Ber. C 68.51 H 6.48 N 1.70 Gef. C 68.42 H 6.59 N 1.79

Benzyl-0- (3-0-allyl-4,6-0-benzyliden-~-~-glucopyranosyl) - (1-4) -2-acetamido-3,6-di-O-benzyl-2-desoxy-a-~-glucopyranosid (30): Das Acetat 29 (155 mg, 0.19 mmol) wird in 5 ml absol. Me- thanol und 1 ml absol. Dioxan gelost und mit einer 0.1 N Natrium- methanolat-Losung bis zur alkalischen Reaktion (pH = 8) versetzt. Nach 16std. Riihren bei Raumtemp. neutralisiert man mit Ionen- tauscher (IR 120, H+-Form) und chromatographiert an Kieselgel (Dichlormethan/Aceton, 2: 1, v/v). Man erhalt 145 mg (0.186 mmol) (98%) Sirup; [ c L ] ~ = +76.9 (c = 1.0, CHCI,). - ‘H-NMR (400 MHz, CDCl3): 6 = 1.79 (s, 3H, COCHJ, 3.01 (d, Jy,OH = 1.8 Hz, 1H, OH), 3.14 (ddd, Jq,y = 9.6, Jy,6a, = 9.6, J5.,6w = 4.8 Hz, lH, 5’-H), 3.37-3.52 (m, 4H, 2’-H, 3’-H, 4’-H, 6a’-H), 3.64 (dd, J6a,6b = 11.2 Hz, 1 H, 6a-H), 3.70 (dd, J3,4 = 9.0 Hz, 1 H, 3-H), 3.85 (ddd, J5,6a = 1.6, J5,6b = 3.2 HZ, 1 H, 5-H), 4.00 (dd, 1 H, 6b-H), 4.08 (dd, J6a,,6b. = 10.4 Hz, IH, 6b’-H), 4.10 (dd, J4.5 = 10.2 Hz, l H , 4-H), 4.19-4.26 (m, IH, Allyl-H), 4.27 (ddd, J2 ,NH = 9.2, J2.3 = 10.4 Hz, l H , 2-H), 4.38-4.42 (m, IH, Allyl-H), 4.44 (d, J = 11.6 Hz, IH, CHzPh), 4.56 (d, J = 12.0 Hz, 1 H, CHzPh), 4.58 (d, Jl,,z, = 6.8 Hz, l H , 1’-H), 4.59, 4.66, 4.71, 4.83 (4 d, 4H, CHzPh), 4.91 (d, Ji,z = 32.6 Hz, 1 H, 1-H), 5.18-5.32 (m, 2H, Allyl-H), 5.30 (d, J2,NH = 9.2 Hz, 1 H, NH), 5.42 (s, 1 H, CHPh), 5.93 (mc, 1 H, Allyl-H), 7.21 - 7.48 (m, 20H, Ph).

C45H51NOll (781.9) Ber. C 69.13 H 6.57 N 1.79 Gef. C 69.27 H 6.61 N 1.62

Benzyl-0- (3-O-allyl-4,6-O-benzyliden-2-O-triJluormethylsu~onyl- p- D-glUCOpyi-anOSyl) - (1-4) -2-acetamido-3,6-di-O-benzyl-2-desoxy- a-D-ghcopyranosid (31): In eine Losung von 0.1 ml absol. Pyridin (1.2 mmol) in 5 ml absol. Dichlormethan gibt man unter Stickstoff (1 bar) 0.1 ml (0.6 mmol) Trifluormethansulfonsaureanhydrid und riihrt bei Raumtemp., bis sich der gebildete Niederschlag wieder aufgelost hat. In diesen Ansatz wird bei 0°C eine Losung von 168 mg (0.215 mmol) 30 in 2 ml absol. Dichlormethan getropft und anschlieljend bei Raumtemp. geriihrt (DC: Dichlormethan/Aceton, 5 : 1, v/v). Es wird in Dichlormethan aufgenommen, auf Eis gegossen und mit einer KHS04-Losung und Wasser gewaschen. Saulen- chromatographische Reinigung an Kieselgel ergibt 142 mg (0.155 mmol) (72%) Sirup. - ‘H-NMR (400 MHz, CDCl,): 6 = 1.81 (s,

3.36 (dd, J6a.,6b. = 10.8 Hz, 1 H, 6a’-H), 3.41 (dd, J2.,3. = 9.0, J3.,4 =

3H, COCH,), 3.04 (ddd, J5,,6a, = 9.6, J 5 , , 6 ~ = 4.8 Hz, l H , 5’-H),

8.6 Hz, IH, 3’-H), 3.49 (dd, J4.,5. = 9.6 Hz, l H , 4-H), 3.54 (dd, J s , ~ ~ = 1.6 HZ, J6a,6b = 11.4 HZ, I H, 6a-H), 3.58 (dd, J3.4 = 9.2 Hz, 1 H, 3-H), 3.75 (ddd, J s , ~ ~ = 1.6, J5,6b = 2.2 Hz, 1 H, 5-H), 3.81 (dd, IH, 6b-H), 4.12-4.18 (m, IH, Allyl-H), 4.16 (dd, J4,5 = 10.0 Hz, 1H, 4-H), 4.19 (dd, J6a,6b = 10.8 Hz, l H , 6a-H), 4.22 (ddd, J2.3 = 10.8 Hz, JZ,NH = 9.2 Hz, IH, 2-H), 4.33-4.39 (m, 1 H, Allyl-H), 4.36 (d, J = 12.0 Hz, l H , CHlPh), 4.40-4.44 (m, 2H, 1’-H, 2’-H), 4.48, 4.52, 4.66, 4.77, 4.81 (5 d, J = 12.0 Hz, 5H, CH2Ph), 4.92 (d, J1,2 = 3.6 HZ, I H , 1-H), 5.23 (J2,NH = 9.2 Hz, IH, NH), 5.18-5.29 (m, 2H, Allyl-H), 5.41 (s, 1 H, CHPh), 5.92 (mc, 1 H, Allyl-H), 7.24-7.48 (m, 20H, Ph).

C46H50F3NO13S (914.0) Ber. C 60.45 H 5.51 N 1.53 S 3.51 Gef. C 60.56 H 5.68 N 1.46 S 3.46

Benzyl-0- (3-0-allyl-4,6-0-benzyliden-2-O-imidazolylsu~onyl-~- D-glucopyranosy1)- (i--t4)-2-acetamido-3,6-di-O-benzyl-2-desoxy-a- D-ghcopyranosid (32): In eine Losung von 497 mg (0.64 mmol) 30 in 5 ml absol. Tetrahydrofuran gibt man portionsweise 30 mg (0.95 mmol) einer 8Oproz. Suspension von NaH in Paraffin und riihrt 15 min. AnschlieRend werden 170 mg (1 mmol) Sulfonyldiimidazol

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hinzugegeben, und es wird bei Raumtemp. geriihrt (DC: Petrol- ether/Essigester, 1 :4, v/v). Zur Aufarbeitung wird in Ether aufgenommen, auf Eis gegossen und mit Wasser gewaschen. Saulen- chromatographie an Kieselgel (Toluol/Essigester, 2: 1, v/v) liefert 283 mg (0.31 mmol) (48%) Sirup; [crlg = +54.0 (c = 1.0, CHC3), 211 mg (0.27 mmol) 30 werden zuruckgewonnen. - ‘H-NMR (400

JS.,6b. = 5.0 Hz, 1 H, 5’-H), 3.35 (dd, J6a.,6b. = 10.6 Hz, 1 H, 6a’-H),

H), 3.48 (dd, J 6 ~ 6 b = 11.2 Hz, l H , 6a-H), 3.54 (dd, J3,4 = 9.2 Hz,

(dd, 1 H, 6b-H), 3.99-4.05 (m. 1 H, Allyl-H), 4.06 (dd, J4,5 = 9.8 Hz, IH, 4-H), 4.18-4.25 (m, l H , Allyl-H), 4.17 (dd, l H , 6b’-H), 4.22

12.0 Hz, IH, CH2Ph), 4.39-4.44 (m, Jz,s = 7.6 Hz, 2H, 1’-H, 2‘- H), 4.47, 4.53, 4.71, 4.76 (4d, 4H, CHZPh), 4.78 (d, J = 12.0 Hz, l H , CH2Ph), 4.89 (d, J1,2 = 3.8 Hz, l H , I-H), 5.16-5.26 (m, 2H,

(mc, 1 H, Allyl-H), 6.96 (s, 1 H, Ims-Ph), 7.20-7.45 (m, 21 H, Ph), 7.92 (s, 1 H, Ims-Ph).

C48H35N3013S (912.0) Ber. C 63.21 H 5.86 N 4.61 Gef. C 63.01 H 5.95 N 4.50

MHz, CDCI,): 6 = 1.80 (s, 3H, COCH,), 3.01 (ddd, J5.,6a, = 9.8,

3.38 (dd, J3.,q = 8.8 Hz, 1 H, 3’-H), 3.47 (dd, Jp,y = 9.4 Hz, 1 H, 4‘-

l H , 3-H), 3.55 (ddd, J5,6a = 1.4 Hz, J5,6b = 2.4 Hz, l H , 5-H), 3.60

(ddd, J2.3 = 10.4 HZ, J ~ , N H = 9.2 Hz, IH, 2-H), 4.35 (d, J =

Allyl-H), 5.34 (d, J 2 , N H =9.2 Hz, 1 H, NH), 5.40 (s, 1 H, CHPh), 5.71

Benzyl-0- (3-0-allyl-4,6-0-benzyliden-~-~-mannopyrunosyl) - (1-4) -2-acetumido-3,6-di-O-benzyl-2-desoxy-a-~-glucopyranosid (33): a) Das Imidazolid 32 (55 mg, 0.06 mmol) wird in 2 ml absol. Dimethylsulfoxid gelost, rnit 485 mg Tetrabutylammoniumnitrit (1.68 mmol) versetzt und bei Raumtemp. geriihrt (DC: Petrolether/ Essigester, 1 :4, v/v). Die Aufarbeitung erfolgt durch Hydrolyse mit Eis und Extraktion rnit Ether. Saulenchromatographische Tren- nung an Kieselgel (s.o.) fiihrt zu 22 mg (0.028 mmol) (47%) Sirup.

b) Das Triflat 31 (142 mg, 0.155 mmol) wird in 5 ml absol. Tetra- hydrofuran gelost, rnit 447 mg (1.55 mmol) Tetrabutylammonium- nitrit versetzt und bei Raumtemp. geriihrt (DC: Dichlormethan/ Aceton, 5: 1, v/v). Zur Aufarbeitung wird eingeengt, in Dichlorme- than aufgenommen und rnit Wasser gewaschen. Saulenchromato- graphische Trennung ergibt 55 mg (0.07 mmol) (45%) Sirup;

= + 74.0 (C = 0.25, CHC13). - ‘H-NMR (400 MHz, CDCI,): 6 = 1.82 (s, 3H, COCH3), 2.47 (d, JT,OH = 1.5 Hz, IH, OH), 3.10 (ddd, J5,,6a, = 4.8 Hz, l H , 5’-H), 3.35 (dd, J3,,4. = 9.8, J5.,6b. = 9.5 Hz, 1 H, 3’-H), 3.55 (dd, J68.,6b. = 10.3 Hz, l H , 6a’-H), 3.60 (dd, J6a,6b = 11.0 HZ, IH, 6a-H), 3.74 (dd, J3 ,4 = 8.9 Hz, IH, 3-H), 3.80 (dd, l H , 6b-H), 3.84 (dd, J5,6= = 1.9, J5,6b = 3.2 Hz, l H , 5-H), 3.92 (dd, J&,y = 9.4 Hz, 1 H, 4‘-H), 3.94 (ddd, Jy.3. = 3.3 Hz, JZ.,OH = 1.5 Hz, l H , 2’-H), 4.06 (dd, 54.5 = 9.8 Hz, l H , 4-H), 4.10 (dd, l H , 6b’-H), 4.06-4.13 (m, 1 H, Allyl-H), 4.18-4.24 (m, l H , Allyl-H), 4.28 (ddd, J2.3 = 10.6 Hz, J 2 , N H = 9.1 Hz, IH, 2-H), 4.46 (d, J =

11.8 Hz, 1 H, CHZPh), 4.48 (d, J = 12.0 Hz, 1 H, CH,Ph), 4.61 (d, J = 11.6 Hz, IH, CHZPh), 4.64 (d, J1.,T = 1.0 Hz, l H , 1’-H), 4.68 (d, J = 11.8 Hz, l H , CHZPh), 4.72 (d, J = 12.0 Hz, l H , CHZPh), 4.88 (d, J = 11.6 Hz, l H , CHZPh), 4.93 (d, J1.2 = 3.6 Hz, l H , 1- H), 5.15-5.31 (m, 2H, Allyl-H), 5.33 (d, J2,NH = 9.1 Hz, IH, NH), 5.48 (s, 1 H, CHPh), 5.88 (mc, 1 H, Allyl-H), 7.22-7.46 (m, 20H, Ph).


Benzyl-0- (3-O-allyl-2-O-benzyl-4,6-O-benzyliden-~-~-mannopyranosyl) - (1-4) -2-acetamido-3,6-di-O-benzyl-2-desoxy-a-~-glucopyranosid (34): Verbindung 33 (226 mg, 0.289 mmol) wird in 10 ml absol. Dimethylformamid gelost, rnit 8 mg Natriumhydrid (0.33 mmol) versetzt und 30 min geriihrt. Nach beendeter Gasentwick- lung erfolgt die Zugabe von 1.5 ml Benzylbromid. Es wird 16 h bei Raumtemp. geruhrt (DC: Toluol/Essigester, 1 : 1, v/v). Die Reaktion wird durch Zugabe von Methanol abgebrochen, der Ansatz in Di-

chlormethan aufgenommen und mit Wasser gewaschen. Die organische Phase wird rnit MgS04 getrocknet, filtriert, eingeengt und saulenchromatographisch an Kieselgel (Dichlormethan/Aceton, 25:1, v/v) aufgetrennt; Ausb. 224 mg (0.28 mmol) (97%) Sirup, [u]% = +46.5 (C = 1.0, CHC13). - ‘H-NMR (400 MHz, CDCI3): 6 = 1.81 (s, 3H, COCH3), 3.10(ddd,Jq,y = 9.6 H z , J ~ , ~ ~ , = 9.6 Hz, JS.,6b. = 4.8 Hz, l H , 5’-H), 3.31 (dd, J2.p = 3.0 Hz, Jy,C = 9.8 Hz, 1 H, 3’-H), 3.49-3.55 (m, 3H, 6a-H, 6b-H, 6a’-H), 3.61 (dd, J3,4 = 8.8 Hz, l H , 3-H), 3.62-3.71 (m, 2H, 2’-H, 5-H),4.00-4.05 (m, 3H,

6b’-H), 4.18 (mc, l H , Allyl-H), 4.21 (ddd, Jz ,3 = 10.4 Hz, 2,NH = Allyl-H, 4-H, 4’-H), 4.08 (dd, J5.,6b. = 4.8 Hz, Jsa,,6b. = 10.4 HZ, 1 H,

9.2 Hz, l H , 2-H), 4.41 (d, J = 12.0 Hz, l H , CH,Ph), 4.47 (d, J = 12.0 Hz, l H , CHZPh), 4.49 (d, Ji,,r < 0.5 Hz, IH, 1’-H), 4.55, 4.68, 4.69, 4.80, 4.88 (5d, 5H, CHZPh), 4.95 (d, J1.2 = 3.8 Hz, l H , 1-H), 4.95 (d, J = 12.0 Hz, l H , CH2Ph), 5.15 (mc, 1 H, AllyI-H), 5.25 (d,

CHPh), 5.88 (mc, 1 H, Allyl-H), 7.08-7.43 (m, 25H, Ph). - ”C- J~,NH = 9.2 Hz, 1 H, NH), 5.24-5.32 (m, 1 H, AllyI-H), 5.48 (s, 1 H,

NMR (100 MHz, CDC13): 6 = 97.6 (d, JI.C,j.H = 175.9 Hz, l C , C- I), 102.2 (d, J~..C,J,.H = 157.9 Hz, lC , C-1’).


Benzyl-0- (3-0-a~~y~-2-O-benzy~-P-~-mannopyranosyl)- (1-4)-2- acetamido-3,6-di-O-benzyl-2-desoxy-a-~-glucopyrunosid (35): Ver- bindung 34 (40 mg, 0.046 mmol) wird in 5 ml 8Oproz. Essigsaure aufgenommen und 16 h bei Raumtemp. geriihrt (DC: Petrolether/ Essigester, 1 : 1, v/v). Nach beendeter Reaktion wird eingeengt, mit Toluol codestilliert und saulenchromatographisch an Kieselgel (Pe- trolether/Aceton, 2: l , v/v) gereinigt; Ausb. 29 mg (0.037 mmol) (81%) Sirup, [u]g = +36.1 (c = 1.0, CHCI,). - ‘H-NMR (400 MHz, CDCl3): 6 = 1.79 (s, 3H, COCHj), 3.00 (dd, J3,,4. = 9.4 Hz, IH, 3’-H), 3.13 (ddd, J5.,6a, = 6.2, J y . 6 ~ = 3.0 Hz, 1H, 5’-H), 3.45 (dd, Jsa.,6b. = 11.8 HZ, 1H, 6a’-H), 3.60 (dd, J6a,6b = 11.0 HZ, 1H, 6a-H), 3.64 (dd, J3,4 = 8.8 Hz, IH, 3-H), 3.64 (dd, IH, 6b-H), 3.68 (d, J z , , ~ = 2.8 Hz, l H , 2’-H), 3.73 (dd, l H , 6b’-H), 3.77 (dd, J4.,5. =

9.4 Hz, 1 H, 4’-H), 3.80 (ddd, J5,6a = 2.0, J5,6b = 3.6 Hz, 1 H, 5-H), 3.77-3.83 (m, IH, Allyl-H), 3.88-3.95 (m, l H , Allyl-H), 3.99 (dd, J4,5 = 9.6 Hz, IH, 4-H), 4.21 (ddd, Jz.3 = 10.2 Hz, &,NH = 9.2 HZ, 1 H, 2-H), 4.45 (d, J1,,2, < 0.5 Hz, 1 H, 1’-H), 4.45, 4.49, 4.55, 4.69, 4.71 (5d, J = 12.0 Hz, 5H, CH2Ph), 4.75-4.88 (m, 2H, CH,Ph), 4.94 (d, J1,z = 3.8 Hz, 1 H, 1-H), 4.97 (d, J = 11.8 Hz, 1 H, CH,Ph), 5.15-5.26 (m, 2H, Allyl-H), 5.30(d, J ~ , N H = 9.2 Hz, IH, NH), 5.85 (mc, IH, Allyl-H), 7.12-7.39 (m, 20H, Ph).


Benzyl-0- (3-O-allyl-2-O-benzyl-6-O-triphenylmethyl-~-~-mannopyranosyl) - (1-4) -2-acetamido-3,6-di-O-benzyl-2-desoxy-a-~-glucopyranosid (36): Verbindung 35 (42 mg, 0.054 mmol) wird in 5 ml absol. Pyridin gelost, rnit 159 mg Tritylchlorid (0.57 mmol) und einer Spatelspitze 4-(Dimethylamino)pyridin versetzt und 16 h bei 60°C geriihrt (DC: Petrolether/Aceton, 1 : 1, v/v). Es wird mit Was- ser hydrolysiert, eingeengt und mit Toluol codestilliert. Saulen- chromatographische Reinigung an Kieselgel (Toluol/Essigester, 5: 1, v/v) liefert 45 mg (0.044 mmol) (82%) Sirup; [u]g = + 30.8 (C = 1.0, CHC13). - ‘H-NMR (400 MHz, CDC13): 6 = 1.78 (s, 3H, COCH,), 2.68 (d, J*,oH = 1.6 Hz, 1 H, OH), 3.05 (dd, J3,,4. = 9.4 Hz, 1 H, 3’-H), 3.17 (ddd, J5.,6a, = 4.4, J 5 . , 6 ~ = 4.4 Hz, 1 H, 5’-H), 3.34-3.36 (m, 2H, 6a’-H, 6b-H), 3.55 (dd, J6a,6b = 10.8, IH, 6a- H), 3.63 (dd, J3.4 = 8.7 Hz, 1 H, 3-H), 3.64 (dd, 1 H, 6b-H), 3.70 (dd, Jy,3. = 2.8 Hz, l H , 2’-H), 3.74(ddd, J5,6a = 2.0, J5,6b = 3.0 Hz, l H , 5.H), 3.92-3.96 (m, 2H, AIlyI-H), 4.01 (dd, J414,5 = 10.0 Hz, l H , 4- H), 4.04 (ddd, Jq,? = 9.4, Jq,OH = 1.6 Hz, l H , 4‘-H), 4.16 (ddd, J2 ,3 = 10.8 HZ, J ~ , N H = 8.8 HZ, IH, 2-H), 4.44(d, J = 12.0 Hz, l H ,

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CHZPh), 4.47 (d, J = 12.2 Hz, 1 H, CH2Ph), 4.49 (d, Jl,,z. < 0.5 Hz, 1 H, l’H), 4.54 (d, J = 12.5 Hz, 1 H, CHzPh), 4.65 (d, J = 12.0 Hz, 1 H, CHZPh), 4.66 (d, J = 12.0 Hz, 1 H, CHzPh), 4.80-4.84 (m, 3H, CHZPh), 4.95 (d, J1 ,2 = 3.6 Hz, 1 H, I-H), 5.09 (d, J 2 , N H = 8.8 Hz, 1 H, NH), 5.18-5.28 (m, 2H, Allyl-H), 5.90 (mc, 1 H, Allyl-H),

Diethylester-Bortrifluorid-Losung in Dichlormethan versetzt und anschlieDend bei Raumtemp. geriihrt (DC: Petrolether/Essigester, 1 :2, v/v). Der Ansatz wird rnit Triethylamin neutralisiert, eingeengt und rnit Toluol codestilliert. Saulenchromatographische Reinigung (Toluol/Essigester, 1:1, v/v) fiihrt zu 15 mg (13.3 pmol) (76%) Sirup;

7.03-7.26 (m, 35H, Ph). [a]$ = +51.5 (C = 1.0, CHCI,). - ‘H-NMR (400 MHz, CDCl,):

Benzyl-0- (3-O-allyl-2-O-benzyl-4-O-methyl-6-O-triphenylme- th yl-P-~-mannopyranosy1)-( 1+4)-2-acetamido-3,6-di-O-benzyl-2- desOXy-a-D-glUCOpyranosid (37): Verbindung 36 (45 mg, 0.044 mmol) wird in 2 ml absol. Tetrahydrofuran gelost, mit 3 mg Natriumhy- drid (80proz. in Paraffin) (0.1 mmol) versetzt und 15 min geriihrt. Es wird 0.1 1 ml einer 1 N Methyliodid-Losung in Tetrahydrofuran zugegeben (DC: Toluol/Essigester, 2: 1, v/v). Der Ansatz wird mit Methanol hydrolysiert, eingeengt und saulenchromatographisch an Kieselgel (Toluol/Essigester, 5: 1, v/v) aufgetrennt; Ausb. 31 mg (0.03 mmol) (68%) Sirup, [u]g = f37.9 (c = 1.0, CHCl,). - ‘H- NMR (400 MHz, CDC13): 6 = 1.89 (s, 3H, COCH,), 2.99-3.05 (m, 3 H, 3’-H, 4-H, 5’-H), 3.1 5 (s, 3 H, OCH,), 3.40 (dd, J5.,6a. < 0.5 Hz, J&..f,b. = 9.0 Hz, IH, 6a’-H), 3.51 (dd, J6a,6b = 11.4 Hz, 1H, 6a-H), 3.60 (dd, J3,4 = 9.0 Hz, IH, 3-H), 3.61 (dd, l H , 6b-H), 3.65 (dd, Jz,3, = 2.8 Hz, 1 H, 2’-H), 3.71 (dd, J5,,6b. < 0.5 Hz, 1 H, 6b’-H), 3.74 (ddd, J5,,ja = 2.0 Hz, J5,,5b = 2.8 Hz, IH, 5-H), 3.88-3.91 (m, 2H, Allyl-H), 4.05 (dd, J4,j = 9.8 Hz, 1 H, 4-H), 4.14 (ddd, J2,3 = 10.4 Hz, J 2 , N H = 8.4 Hz, IH, 2-H), 4.36 (d, J = 12.0 Hz, IH, CHlPh), 4.37 (d, J = 12.2 Hz, 1 H, CHlPh), 4.44 (d, Jl,,2, < 0.5 Hz, l H , 1’-H), 4.57 (d, J = 12.2 Hz, IH, CH,Ph), 4.58 (d, J = 12.0 Hz, IH, CH,Ph), 4.59 (d, J = 12.5 Hz, IH, CHZPh), 4.81 (d, J = 12.0 Hz, IH, CH,Ph), 4.87 (d, J = 12.0 Hz, 1 H, CHZPh), 4.88 (d, J = 12.5 Hz, 1 H, CHzPh), 4.91 (d, J1.2 = 3.6 Hz, IH, I-H), 4.97 (d, J z , N H = 8.4 Hz, 1 H, NH), 5.04-5.22 (m, 2H, Allyl-H), 5.89 (mc, 1 H, Allyl-H), 6.93-7.51 (m, 35H, Ph).


Benzyl-0- (3-O-allyl-2-O-benzyl-4-O-methyl-~-~-mannopyrano- s y l ) - (144) -3-acetamido-3,6-di-O-benzyl-2-desoxy-a-~-glucopyrunosid (38): Der Tritylether 37 (26 mg, 0.025 mmol) wird in 2 ml 80proz. Essigsaure aufgenommen und 3 h bei Raumtemp. geriihrt (DC: Petrolether/Aceton, 1 : 1, v/v). Nach beendeter Reaktion wird eingeengt und mit Toluol codestilliert. Saulenchromatographische Reinigung (Petrolether/Aceton, 2: 1, v/v) ergibt 14 mg (0.018 mmol) (70%) Sirup; [a]$ = +42.2 (c = 1.0, CHCI,). - ‘H-NMR (400 MHz, CDC13): 6 = 1.80 (s, 3H, COCH3), 3.02 (ddd, J5.,6a. = 5.6, Jj, ,6b, = 2.8 Hz, 1 H, 5’-H), 3.10 (dd, J3.,4. = 9.4 Hz, 1 H, 3’-H), 3.42 (dd, J4.,5. = 9.4 Hz, 1 H, 4-H), 3.43 (dd, J6a.,6b. = 12.0 Hz, 1 H, 6a’- H), 3.49 (s, 1 H, OCH,), 3.56 (dd, J6a,6b = 10.8 Hz, 1 H, 6a-H), 3.60 (dd, 1 H, 6b-H), 3.64 (dd, J3,4 = 8.8 Hz, 1 H, 3-H), 3.65 (dd, JT,3, = 3.0 Hz, 1 H, 2’-H), 3.66 (dd, 1 H, 6b’-H), 3.77 (ddd, Jj,6a = 1.2, J5,6b =

3.6 Hz, IH, 5-H), 3.93-3.98 (m, 2H, Allyl-H), 3.95 (dd, J4,5 =

9.6 Hz, 1 H, 4-H), 4.21 (ddd, J2,3 = 10.4 Hz, J 2 , N H = 9.0 Hz, 1 H, 2- H), 4.40 (d, J,,,2, < 0.5 Hz, IH, 1’-H), 4.44 (d, J = 12.2 Hz, IH, CH,Ph), 4.48 (d, J = 11.8 Hz, IH, CHZPh), 4.55 (d, J = 11.8 Hz, l H , CH,Ph), 4.66 (d, J = 12.2 Hz, 1 H, CH,Ph), 4.70 (d, J = 11.8 Hz, IH, CHZPh), 4.77 (d, J = 12.0 Hz, lH, CHzPh), 4.86 (d, J = 12.0 Hz, IH, CHZPh), 4.96 (d, J1,Z = 3.6 Hz, IH, I-H), 4.97 (d, J = 11.8 Hz, IH, CH2Ph), 5.14-5.18 (m, l H , Allyl-H), 5.26(d,

Allyl-H), 7.19 - 7.40 (m, 20 H, Ph). J~,NH z= 9.0 HZ, IH,NH), 5.24-5.31 (m, lH,Allyl-H), 5.91 (mc, IH,

Benzy/-O-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-a-~-mannopyranosyl)-( 146)- 0-(3-0-allyl-2-O-benzyl-4-O-methyl-~-~-mannopyranosyl)-( 144)- 2-acetnmido-3,6-di-O-benzyl-2-desoxy-a-~-glucopyrunosi~ (39): Der Akzeptor 38 (14 mg, 17.5 pmol) wird unter FeuchtigkeitsausschluD in 3 ml absol. Dichlormethan gelost, bei 0°C mit 0.53 ml einer 0.1 N

6 = 1.78, 2.01, 2.06, 2.08, 2.09 ( 5 ~ , 15H, COCH3), 3.10 (dd, J3.,4. =

9.2 Hz, 1 H, 3’-H), 3.22 (ddd, = 2.4, J5,,6b. = 5.6 Hz, IH, 5’- H), 3.37 (dd, = 9.8 Hz, IH, 4-H), 3.51 (s, 3H, OCH,), 3.56 (dd, J6a,6b = 10.8 Hz, IH, 6a-H), 3.64 (dd, IH, 6b-H), 3.67 (dd, J6a.,6b. = 10.8 Hz, 1 H, 6a’-H), 3.68 (dd, J3,4 = 8.8 Hz, 1 H, 3-H), 3.73

2.2, J5$b = 3.6 Hz, IH, 5-H), 3.90 (mc, 2H, Allyl-H), 3.99 (dd, J 6 a - , 6 ~ = 12.2 Hz, IH, 6a”-H), 4.00 (dd, J4,5 = 10.0 Hz, l H , 4-H),

(dd, J2 ,3 , = 2.6 Hz, 1 H, 2‘-H), 3.76 (d, 1 H, 6b’-H), 3.77 (ddd, J5,6a =

4.04 (ddd, J y , 6 a = 2.4 Hz, J5-,6b,, = 4.0 Hz, 1 H, 5”-H), 4.10 (ddd, J2 ,3 = 8.4 HZ, 1 H, 2-H), 4.19 (dd, IH, 6b”-H), 10.4 HZ, J~,NH =

4.43-4.47 (m, 2H, CH2Ph), 4.43 (d, J1,,* < 0.5 Hz, ZH, 1’-H), 4.65-4.70(m,J = 12.4 Hz, 3H,CHzPh),4.76(d,J = 12.0 Hz, IH, CHzPh), 4.84 (d, J = 12.0 Hz, l H , CHzPh), 4.89 (d, J = 12.4 Hz, 1 H, CH,Ph), 4.92 (d, J1-,y = 1.6 Hz, l H , 1”-H), 4.94 (d, J1.2 = 3.6 Hz, IH, I-H), 5.16 (mc, l H , Allyl-H), 5.24 (dd, J2-,y = 3.4 Hz, IH, 2”-H), 5.27 (mc, l H , Allyl-H), 5.29 (dd, J4.,5. = 9.4 Hz, IH,

l H , 3”-H), 5.88 (mc, l H , AllyI-H), 7.18-7.41 (m, 20H, Ph). 4”-H), 5.31 (d, J 2 , N H = 8.4 Hz, IH, NH), 5.35 (dd, J3,,,4. = 10.0 Hz,

Benzyl-0- (2,3,4,6-tetra-O-acetyl-a-~-mannopyranosyl)-(l~6)- 0- (2-O-benzyl-4-O-methyl-P-~-mannopyranosyl)- (1+4)-2-acet- arnido-3,6-di-O-benzyl-2-desoxy-~-~-glucopyranosid (40): Das Tri- saccharid 39 (13 mg, 12 pmol) wird in 3 ml absol. Tetrahydrofuran gelost und rnit einer Spatelspitze [Ir(COD)(PMePh,),]PF, versetzt. Der Ansatz wird unter Wasserstoff ( 1 bar) geriihrt, bis eine farblose Losung vorliegt (1 min). Danach wird unter Stickstoff (1 bar) bei Raumtemp. geriihrt (DC: Petrolether/Essigester, 1 :4, v/v). In den Ansatz gibt man 1 ml Wasser und 3.75 mg (17.3 Fmol) Quecksilber(I1)-oxid und tropft unter starkem Riihren eine Losung von 3.80 mg (14.0 pmol) Quecksilber(I1)-chlorid in 0.5 ml Aceton und 0.05 ml Aceton und 0.05 ml Wasser zu. Nach beendeter Ab- spaltung wird die Reaktion durch Zugabe von Phosphat-Puffer (pH = 7.0) abgebrochen, der Ansatz in Dichlormethan aufgenommen und mit 10proz. Kaliumiodid-Losung gewaschen. Saulen- chromatographie an Kieselgel (Petrolether/Aceton, 2: 1, v/v) fiihrt zu 10 mg (9.2 pmol) (80%) Sirup; [ a ] g = +68.2 (c = 0.45, CHCl3). - ‘H-NMR (400 MHz, CDC1,): 6 = 1.75, 1.92, 2.04, 2.05,

3.15-3.20 (m, 2H, 4’-H, 5’-H), 3.35 (ddd, J3.,& = 8.4 Hz, J3.,0H = 10.0 Hz, 1 H, 3’-H), 3.51 (s, 3H, OCH,), 3.55 (dd, JZ,,3. = 3.6 Hz, 1 H, 2’-H), 3.60 (dd, J&,& = 10.8 Hz, 1 H, 6a-H), 3.64 (dd, J3,4 = 8.6 Hz, IH, 3-H), 3.66 (dd, IH, 6b-H), 3.69-3.77 (m, 2H, 6a’-H,

(m, 2H, 5”-H, 6a”-H), 4.02 (dd, J4,5 = 10.0 Hz, l H , 4-H), 4.11 (ddd,

2.17 ( 5 ~ , 15H, COCH,), 2.32 (d, J3.,OH = 10.0 Hz, l H , OH),

6b’-H), 3.76 (ddd, J5,6a = 2.2, J5.5, = 3.6 Hz, IH, 5-H), 3.99-4.04

J2,3 = 10.4 HZ, JZ,NH = 8.6 Hz, IH, 2-H), 4.18 (dd, J5,,,6b., = 4.8, Jfjaa,6b” = 12.8 Hz, 1 H, 6b”-H), 4.45 (d, J = 12.0 Hz, 1 H, CHzPh), 4.46 (d, J = 12.0 Hz, IH, CH,Ph), 4.52 (d, Ji.,? < 0.5 Hz, IH, 1’- H), 4.54 (d, J = 12.0 Hz, IH, CHZPh), 4.64 (d, J = 12.0 Hz, IH, CHZPh), 4.66 (d, J = 12.0 Hz, 1 H, CH,Ph), 4.70 (d, J = 12.0 Hz, IH, CH,Ph), 4.88 (d, J = 12.0 Hz, IH, CHzPh), 4.89 (d, J1-,2- = 2.0 Hz, IH, 1”-H), 4.95 (d, J1,2 = 3.6 Hz, IH, I-H), 5.00 (d, J =

12.0 Hz, IH, CHzPh), 5.22 (d, J2 ,NH = 8.6 Hz, IH, NH), 5.26 (dd, J2*,3,, = 3.0 Hz, 1 H, 2-H), 5.30 (dd, Jp,5- = 9.0 Hz, 1 H, 4-H), 5.34 (dd, J3-,4. = 9.8 Hz, IH, 3”-H), 7.19-7.39 (m, 20H, Ph).

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143669-65-2 / 21: 143669-66-3 / 22 (a-Anomer): 143669-67-4 / 22 (p-Anomer): 143730-16-9 / 23 (a-Anomer): 143669-68-5 / 23 (p- 27-5 / 17: 143669-63-0 / 18: 126417-63-8 / 19: 143669-64-1 / 20:

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Anomer): 143730-17-0 / 24: 20226-80-6 / 25 (a-Anomer): 143669- 69-6 125 (0-Anomer): 143669-70-9 1 26 (a-Anomer): 143669-71-0 1 26 (p-Anomer): 143669-72-1 / 27: 143669-73-2 / 28: 55287-49-5 / 29: 143669-74-3 130: 143669-75-4 31: 143669-76-5 / 32: 143669- 77-6 / 33: 143730-18-1 / 34: 143669-78-7 / 35: 143669-79-8 / 36: 143669-80-1 137: 143669-81-2 138: 143669-82-3 / 39: 143669-83-4 / 40: 143669-84-5 / GIcNAc-T I: 102576-81-8 / GIcNAc-T 11: 91755- 74-7

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Bausteine von Oligosacchariden, CIV. Synthese von verzweigten Tetrasaccharid- und Pentasaccharid-Strukturen von N-Glycoproteinen, methyliert an 4′-OH des Verzweigungsgliedes