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10.04.2001 ETH Zürich / D-MAVT / Einführung in die Biotechnologie / Felix Gmünder 1 Biochemie und Stoffwechsel Biochemie Aufklärung der Stoffwechselwege und -teilschritte Identifikation der Ausgangs-, Zwischen- und Endprodukte (Stoffwechselprodukte) Enzyme sind Proteine mit Katalysatorwirkung. Jeder Stoffwechselschritte wird von einem Enzym katalysiert. Ungefähr die Hälfte der Trockensubstanz einer Zelle sind Proteine, davon 80-90% Enzyme. Stoffwechsel - Energiebereitstellung - Biomoleküle Endprodukte des Energiestoffwechsels: Milchsäure, Ethanol, Methan, Aceton, Butanol Primärmetabolite: Wichtige Funktion im Stoffwechsel; werden während dem Wachstum gebildet. Z.B. Zucker, Fettsäuren, Aminosäuren, Vitamine Sekundärmetabolite: Keine grundlegende Funktion im Stoffwechsel; Bildung meistens erst nach Abschluss des Wachstums. Z.B. Antibiotika, Toxine, Farbstoffe

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Biochemie und Stoffwechsel

• Biochemie– Aufklärung der Stoffwechselwege und -teilschritte

– Identifikation der Ausgangs-, Zwischen- und Endprodukte(Stoffwechselprodukte)

– Enzyme sind Proteine mit Katalysatorwirkung. JederStoffwechselschritte wird von einem Enzym katalysiert.Ungefähr die Hälfte der Trockensubstanz einer Zelle sindProteine, davon 80-90% Enzyme.

• Stoffwechsel - Energiebereitstellung - Biomoleküle– Endprodukte des Energiestoffwechsels: Milchsäure, Ethanol,

Methan, Aceton, Butanol

– Primärmetabolite: Wichtige Funktion im Stoffwechsel;werden während dem Wachstum gebildet. Z.B. Zucker,Fettsäuren, Aminosäuren, Vitamine

– Sekundärmetabolite: Keine grundlegende Funktion imStoffwechsel; Bildung meistens erst nach Abschluss desWachstums. Z.B. Antibiotika, Toxine, Farbstoffe

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Energiebereitstellung und Aufbau von Biomolekülen

Biomoleküle

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Die wichtigsten Biomoleküle

• Kohlenhydrate• Monosaccharide• Disacchaccharide• Oligosaccharide• Polysaccharide

• Proteine• Aminosäuren

• Nukleotide• Basen• Phosphat• Pentosezucker

• Lipide• Glycerin• Fettsäuren• Phosphat

Aus diesen Sustanzenkönnen von jeder Zelle diemeisten Biomolekülesynthetisiert werden.

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Kohlenhydrate: Funktionen und Aufgaben

• Energielieferanten, Ausgangssubstanzen für dieHerstellung anderer Stoffe (Monosaccharide,Disaccharide)

• Markierung von Proteinen (Oligosaccharide inGlykoproteinen)

• Energievorräte, Baustoffe (Polysaccharide)

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Kohlenhydrate: Aufbau

Kohlenhydrate bestehen aus

• Kohlenstoff• Wasserstoff• Sauerstoff

Meist im Verhältnis (C1H2O1)

z.B. Glucose: C6H12O6

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Zuckerketten

• Monosaccharide: 1 ZuckermolekülGlucose [Traubenzucker, Dextrose], Fructose[Fruchtzucker], Galactose

• Disaccharide: 2 ZuckermoleküleSaccharose [Rohrzucker], Lactose [Milchzucker]

• Oligosaccharide: 3-ca. 15 ZuckermoleküleStreptomycin [ein Antibiotikum] -> Glykoproteine

• Polysaccharide: lange Ketten von ZuckernStärken [Pektin, Amylose, Glykogen], Cellulose, Chitin

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Aufbau der Zucker: Ausgangspunkt Glycerinaldehyd

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Räumliche Struktur der Zucker

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Die wichtigsten Zucker

Disaccharide

Monosaccharide

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Polysaccharide

In der Natur - besonders imPflanzenreich - besonderszahlreiche, verschiedene Polymere:

• Stärken: Glykogen, Amylose,Pektin

• Cellulose

• Chitin ist ein Polymer aus N-Acetylglucosamin

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Proteine: Funktionen und Aufgaben

• Baustoffe (z.B. Kollagen, Matrixproteine, Cytoskelett)

• Katalysatoren (z.B. Enzyme)

• Transporteure (z.B. Hämoglobin)

• Motoren (z.B. Muskelproteine)

• Botenstoffe (z.B. gewisse Hormone)

• Energiereserve für Notzeiten

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Proteine: Aufbau

Proteine bestehen aus Aminosäuren,welche alle folgende gemeinsameGrundstruktur haben:

COOH

H N

R

HC2

Aminogruppe, basisch Säuregruppe

Rest

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Die 20 Aminosäuren

1 ReineKohlenstoffseitenkette

2 polare AS(nichtionisch)

3 Saure AS

4 Basische AS

• Essentielle AS für denMenschen

Valin

Leucin

Isoleucin

Phenylalanin

Tryptophan

Methionin

Threonin

Lysin

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Chemische Bindungen

Chemische Bindungen unterscheiden sich durch die Energie, diegebraucht wird, um sie zu lösen.

Bindungsstärke Länge

[kJ/Mol] [nm]

Kovalente Bindung (C–C) 345 0.15

Schwache Bindungen

Ionische Bindung 12 0.25

Wasserstoffbrückebindung 4 0.3

Van-der-Waal-Bindung 0.4 0.35

Thermische Bewegung bei RT 2.5

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Bindungsarten in Proteinen(und anderen Makromolekülen)

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Entstehung von Proteinen

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Wechselwirkungen zwischen Biomolekülen

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Enzyme:Biologische Katalysatoren

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Proteine

• Primärstruktur: Aminosäurensequenz („Backbone“)• Sekundärstruktur: Helixstruktur / Faltblatt• Tertiärstruktur: Faltung zu einem globulären Protein• Quartärstruktur: Verbund von mehreren

globulären Proteinen• (z.B. Hämoglobin)

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Zytoskelett: Knochen und Muskeln der tierischen Zellen

Keratinfasern in einer tierischen Zelle

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Kollagen

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Muskelfasern

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Muskelkontraktion

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Lipide: Funktion und Aufgaben

• Energielieferanten• Baustoffe (Zellmembranen [s. vorne], Körperfett)

Lipide: Aufbau

• Lipide oder Fette bestehen aus den Grundbausteinen:

• Fettsäuren

• Glycerin

• Phosphor mit Resten wie Cholin, Serin, etc.

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Lipide: Aufbau

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Nukleotide: Funktion und Aufgaben

• In Nukleinsäuren:

• Träger der Erbsubstanz (DNS, genetischeBibliothek, Bauanleitung für Biomoleküle)

• Synthesevorlagen (RNS)

• Proteinsynthesemaschinen (RNS)

• Andere Funktionen:• Träger von chemischer Energie (ATP)• Bestandteile von Enzymen (Coenzym A)• Signalmoleküle (cAMP)

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Nukleotide: Aufbau

Aufbau der DNS

DNS- und RNS-Moleküle bestehen aus:

• Einem Pentosephosphatrückgratentweder Ribose (RNS) oderDeoxyribose (DNS) [S-P-S-P-S-P]

• und den Basen Thymin (T, nur DNS),Cytosin (C) oder Uracil (U, nur RNS)Guanin (G) und Adenin (A)

Andere Funktionen der Nukleotide• Energieüberträger

• Teile von Enzymen (CoenzymA)

• Signalstoffe

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Stoffwechselschema

Kohlenhydrate(Glykogen, Glucose,Fructose, etc.)

Pyruvat Acetyl-CoA

Purine (Nukleinsäuren)

HistidinPhenylalanin,

Tryptophan

LysinMethioninThreonin, Isoleucin

Oxalacetat

Citrat

Succinat

2-Ketoglutarat

Glutamat GlutaminProlin

Pyrimidine(Nukleinsäuren)

Harnstoff

AlaninLactat

Äthanol

FettsäuresyntheseFettsäureoxidation

LeucinValin

Porphyrine(Hämoglobin)

Aspartat

Lipide

Tyrosin

SerinGlycinCystein

AspartatArginin

Asparagin

Glykolyse

Pentose-phosphat-zyklus

Shikimisäure-weg

TCC

Harnstoff-zyklus

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Energiestoffwechsel Wärme

Mensch, Tiere,PflanzenVieleMikroorganismen:

• Kohlenhydrate• Fett• Proteine• Sauerstoff

Mikroorganismenkönnen auch ausanderen Quellen, z.B.anorganischenSubstanzen, Energiebeziehen.

Kohlendioxidund Wasser

(Oxidation)

ADPATP ➜ Kreatinphosphat

➜ NADH

Wärme

Zellarbeit

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Katabolismus: Energiebereitstellung

Stufe 1: Abbau grosserMakromoleküle zueinfachen Einheiten

Stufe 2: Abbau dereinfachen Einheiten zuAcetylCoA undbegrenzter Mengen vonATP und NADH

Stufe 3: KompletteOxidation von AcetylCoAzu H2O und CO2 undgrossen Mengen von ATPund NADH

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Glykolyse

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Mitochondrien: Citronensäurezyklus(Citratzyklus, Tricarbonsäurezyklus)

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Atmungskette

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Bakterielle H+-Transportsysteme

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Elektronenableitung

Die Elektronen aus der Glykolyse werdenauf NADH2 und von dort auf dasEndprodukt der Glykolyse übertragenund von der Zelle ausgeschieden

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Chloroplasten: Kohlenstofffixierung

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Photophosphorilierung