Heft 24 1954 (Jg. 41) K u r z e Or ig ina lmi t t e i lungen . 577

ein e n t s p r e c h e n d e s T e s t m e d i u m m i t d e m e ingesg ten Tes t - o r g a n i s m u s gelegt werden . Die E i g e n a r t der R i n g c h r o m a t o - graphie , dab die en twicke l t en Ylecken als schar fe B a n d e n ausgeb re i t e t s ind, g e w ~ h r t eine kre is f6rmige A u s b i l d u n g der n a c h der Bebr t i t ung e r s c h e i n e n d e n W a e h s t u m s z o n e n . Die ganze An lage einer q u a n t i t a t i v e n a u t o b i o g r a p h i s c h e n Be- s t i m m u n g folgt den Pr inz ip ien des P la t t en loch te s t e s . E ine Subs tanz , die ein Gemisch ve rsch iedener Der iva te eines Vit- a m i n s en thgl t , wird in mehre ren , in geomet r i s che r Reihe ab- ges tu f t en Dosen m i t e i n e m S t a n d a r d g e m i s c h b e k a n n t e r K o n - zen t ra t ionen , ebenfa l l s in geome t r i s che r Reihe, vergl ichen. Aui e i nem u m den M i t t e l p u n k t l iegenden Kre i s werden die S t a r t p u n k t e je nach erforder l icher A n z a h l beze ichne t ; 4 bis 6 S t a r t p u n k t e b le iben d e m S t a n d a r d g e m i s c h vo rbeha l t en . Ge- e igne te D o s i s - E r t r a g s k u r v e n werden zweckm~13ig in Vorver- suchen ausgew/ihl t . Als MaBs tab ffir e inen erz ie lbaren E r t r a g an B a k t e r i e n m a s s e d i en t der D u r c h m e s s e r der W a c h s t u m s - zonen, die en twede r yon H a n d oder du rch P ro jek t ion auf e inen Sch i rm gemessen werden . W'eitere A u s w e r t u n g k a n n n a c h g raph i sche r I n t e rpo l a t i on oder n a c h m a t h e m a t i s c h e r Berech- h u n g der F u n k t i o n der E r t r a g s k u r v e n erfolgen.

Besondere A n f o r d e r u n g e n s ind an die L 6 s u n g s m i t t e l zu stel len. E rwi in sch t s ind solche L6sungsmi t t e l , die das Ge- m i sch m6gl i chs t fiber die gauze L~nge des C h r o m a t o g r a m m s ver te i l en ; soll te dieses n i eh t zu er re ichen sein, so k a n n m a n n a c h d e m A u s s c h n e i d e n der Streifen den R e s t des C h r o m a t o - g r a m m s chemisch en twicke ln u n d n a c h E i npas sen der Streifen diese an den e n t s p r e c h e n d e n Stel len quer durehte i len . I n der Fig. t i s t als Beispiel eine c h r o m a t o g r a p h i s c h e T r e n n u n g yon Niko t ins~ure u n d N i k o t i n s ~ u r e a m i d a u f g e f f i h r t Die Biographie der Streifen erfolgte m i t der Here Toru la eremoris au f e inem e in fachen s y n t h e t i s c h e n N g h r m e d i u m , das alle n o t w e n d i g e n N i h r - u n d Wirks to f fe m i t A u s n a h m e der N i k o t i n s i u r e en th ie l t .

Diese Me thode ist auch au f q u a n t i t a t i v e ]3e s t i mmung yon A n t i v i t a m i n - u n d ande ren H e m m s t o f f g e m i s c h e n (Antibiot ika) anwendba r .

Anstall /iir Vitamin/orschung in Polsdam-Rehbriic]~e (Direk- tot: Pro/. Dr. SCHEUNERT).

GUNTHER MARTEN. Eingegangen am 22. Oktober t954.

Zur papierchromatographischen Blutzuckerbestimmung bei der Honigbiene.

Mit den b i sher zur B l u t z u c k e r b e s t i m m u n g bei I ton ig- b ienen a n g e w a n d t e n M e t h o d e n 1) wurde n u r Glukose im Bienen- b lur ge funden . Die p a p i e r c h r o m a t o g r a p h i s c h e U n t e r s u c h u n g gib t uns die M6gliehkeis nachzuwe i sen , dab es sich bei d e m als R e s t r e d u k t i o n er faBten Sacchar id u m F r u k t o s e hande l t . Das B l u t wurde aus I ebenden Bienen gewonnen , fr isch oder enteiweiBt "~ au f Pap ie r Sch le i che r& Schfill Nr. 597 u n d Nr. 2043bM aufge t r agen . Es wurde m i t d e m L 6sungsmi t t e l - gemisch B u t a n o l - - E i s e s s i g - - V V a s s e r (4:1 : 5) abs t e igend chro- m a t o g r a p h i e r t . Ffir Pap ie r Nr. 597 erwies sich eine Laufze i t yon 48 Std u n d ffir Pap ie r Nr. 2043bM yon 72 Std zur Glu- k o s e / F r u k t o s e - T r e n n u n g bei e twa 19 ~ C als aus re ichend . Tri- pheny l -Te t r azo l iumch lo r id , Si lberni t ra t , A n i l i n p h t h a l a t u n d Ani l inoxa la t k a m e n als En twick l e r zur A n w e n d u n g . Die m i t Ani l inoxa la t en twicke l t en Zucker w u r d e n p l a n i m e t r i e r t u n d q u a n t i t a t i v n a c h den e n t s p r e c h e n d e n E i e h k u r v e n w e r t e n be- ur te i l t .

Der G e s a m t z u c k e r g e h a l t i m B i e n e n b l u t s c h w a n k t in den b isher igen U n t e r s u c h u n g e n zwisehen 1700 u n d 3700 m g - % . J u n g b i e n e n u n d u n b e g a t t e t e K 6 n i g i n n e n h a b e n e inen h6he ren F r u k t o s e g e h a l t als gltere Stock- u n d F l ugb i enen u n d be- ga t t e t e K6n ig innen . I m Blu r eben geschlf ipf ter Arbe i t sb ienen w u r d e n bei e inem d u r c h s c h n i t t l i c h e n Gesamtzucke rgeha l s yon 2000 bis 2300 m g - % a n n ~ h e r n d 800 bis 1000 rag-% F r u k t o s e gefunden . Der F r u k t o s e a n t e i l im Blur gl terer B ienen s a n k auf 30% des Gesamtzuckersp iege l s . J u n g k 6 n i g i n n e n b l u t en th ie l t bis zu 35% F r u k t o s e ( t200 rag-%), w/ ihrend bei ein- u n d m e h r j g h r i g e n K 6 n i g i n n e n n u t bis zu 20% F r u k t o s e (700 rag- %) naehgewiesen wurden .

fnst i tut /r Tierziichtung und Haustiergenetik der Techni- schen Universitgit Berlin, A bteilung Bienenkunde, Berlin- Dahlem.

CARITAS V. CZARNOWSKI.

Eingegangen am a. November 1954.

*) B~VWLER, R.: Z. vi i . Physiol. 24, 71 (1937). 2) WALLENFEL8, K.: Angew. Chem. 65, 581 (1953). Naturwiss. 1954.

Die H20~-Empfindlichkeit INH-sensibler und -resistenter TuberkelbaMerienstiimme 1).

T u b e r k e l b a k t e r i e n ge l ten als besonders r e s i s t en t gegenfiber den tox i schen W i r k u n g e n yon H202 . Die ka ta l a t i s che Tr&g- heir INH-resislenter T u b e r k e l b a k t e r i e n s t i m m e 2 ) , a) l i s t je- doch v e r m u t e n , dab sich diese S t i imme ande r s ve rha l t en . U n t e r s u c h u n g e n darf iber l iegen b i sher n i ch t vor, Die Be- s t i m m u n g der tuberkulostatischen W i r k u n g des H202 (gr6gte Ve rd f innung m i t abso lu te r W a c h s t u m s h e m m u n g ) erfolgte im Yerd f innungs t e s t . (Subs t r a t , ,Sy -Der" n a c h 14[IRCHNER m i t e inem Zusa t z yon 0,05% Tween 80.) Geprfif t w u r d e n die H202-Verdf innungen 1 : 5000, 1 : t0000, 1:20000 : . . usf . bis 1 :640000. Die Grenzve rd t i nnungen , die noch eine to ta le ~vVachs tumshemmung bewirk ten , w u r d e n ffir die e inzeinen Tube rke lbak te r i ens t~ tmme n a c h einer Bebr i i tungsze i t von 15 T a g e n bei 3 7 ~ e rmi t te l t . Bei den S t ~ m m e n 13 und 14 der Tabel le 1 (Mycobact . phtei 169 u n d IVlycobact. phlei 169 Ir) erfolgte die Ab le sung der Versuchse rgebn i s se berei ts n a c h 5 t ig iger Bebrf i tungszei t . Die tuberkulocide ~Virkung des H202 wurde im S u s p e n s i o n s v e r s u c h b e s t i m m t Die R 6 h r c h e n w u r d e n m i t 4,7 m l N g h r s u b s t r a t (Subs t r a t , ,Sy -Ser" + 0,05 % Tween 80) besch ick t u n d m i t 0, i ml einer t : 2 m i t physiol . NaCI ve rd f i nn t en 14t/igigen D u b o s - K u l t u r be impf t . Anschlief3end w u r d e n 0,2 ml einer 5%igen bzw. 0 ,5%igen u n d 0 ,05%igen H20~-L6sung zugeffigt . N a e h einer E i n w i r k u n g s z e i t y o n 24 Std bei 3 7 ~ wurde das H202 du rch Zugabe yon B lu t - ka t a l a se zers t6r t u n d die R 6 h r c h e n zur B e s t i m m u n g der H2Oe- V e r d f i n n u n g m i t abso lu t e r Cidie wei tere 5 W o c h e n bebrf i te t .

Die v e r w e n d e t e n S t g m m e H 37 R v u n d Sbek sowie das a p a t h o g e n e Mycobact . phle i 169 s ind al te S a m m l u n g s s t g m m e ; die dazugeh6r igen I r - S t i m m e s ind ihre du reh P a s s a g e n au f I N H - h a l t i g e n N ~ h r m e d i e n res i s t en t gewordenen Var i an t en . Die I N H - s e n s i b l e n S t g m m e Gr. 1, 4 u n d 5 sowie die I N H - r e s i s t en ten SUhnme Or. 21, 27 u n d 28 w u r d e n a u s t ube r - ku l6 sem Mater ia l eines P a t i e n t e n isoliert. Die le tz te ren (Gr. 21, 27 u n d 28) k 6 n n e n als du rch die I N H - T h e r a p i e resi- s t e n t gewordene V a r i a n t e n der e rs te ren (Gr. 1, 4 u n d 5) auf- gefaBt werden. Das gleiche gilt Iiir die S t g m m e Bra . 20 n n d 21, die aus d e m S p u t u m eines ande reu P a t i e n t e n isoliert wurden .

I n Tabel le t s ind die Versuchse rgebn i s se fiber die t ube r - ku los t a t i sche sowie tuberku loc ide W i r k s a m k e i t des H202 zu- s a m m e n g e s t e l l t D a n a c h s ind die INt- I - res is ten ten S t ~ m m e e twa 10mal so empf ind l ich gegeni iber 17120 ~ wie die I N H - sens ib len St l imme. Die gr613ere E m p f i n d l i e h k e i t der res i s ten- t en St~tmme wird ihre U r s a c h e in d e m U n v e r m 6 g e n h ab en , H202 ka t a l a t i s ch zu spa l ten . Diese A n n a h m e wird ges t i i tz t du rch die wei tere Fes t s te l lung , dab die tube rku loc ide W i r k u n g des H202 gegent iber Mycobact . phle i in G e g e n w a r t yon I N H , das die ka t a l a t i s che Aktivit~it des S t a m m e s hemmt2 ) , e r h 6 h t ist.

Tabelle 1. H~O~-Emp~qndlichkeit INH-sensibler Mycobakterienstdmme und ihrer INH-resistenten Varianten.

Lfd. Nr.

7 8 9

I0 11 12 13 14

der

Mycob. tuherc, var. hom. S tamm

H 37 Rv . . . . . H 37 Rv Ir . . . . Sbek . . . . . . Sbek Ir . . . . . Gr. 1 *) . . . . . Gr. 4*) . . . . . , Gr. 5*) . . . . . Gr. 21 * ) . . . . . Gr. 27") . . . . . Gr. 28*) . . . . . Bra. 20*) . . . .

INH I,, . ITuberkulo- ~,, ata'l statisehe lase Wirkung

sensibel resistent sensibel resistent ; sensibel + sensibel + sensibel + resistent - - resistent resistent sensibel +

Bra. 21 *) . . . . . resistent Myeobaet. phlei 169 i sensibel Myeob. phlei 169Ir ! resistent

*) Ich danke Frau Doz. Dr. G. MEISSNER fiir die Tuberkelbakterienst~inlme Nr. 5 bis t2.

f: 10000 1 : 8 0 0 0 0 1 : 1 0 0 0 0 1:160000 I: 10000 1 : t 0 0 0 0 1 : 1 0 0 0 0 l : 80000 1 : 8 0 0 0 0 1:160000 1: 5000 t : 80000 1 : 2 0 0 0 0 1:160000

Tuberkulo- cide

Wirkung

f: 500 1:5000 I: 500 1:5000 I: 500 I: 500 I: 500 1:5000 1:5000 1:5000 I: 500 1 : 5 o o o n. geprfift n. geprfift

Qberlassung

Tuberkulose-Forschungsinstitut Borstel, Insti tut /iir Experi- mentelle Biologie und Medizin (Direklor: Pro/. Dr. Dr.

E. FREERKSEN). RUDOLF ]~6NICKE.

Eingegangen am 22. Oktoher 1954.

i) Untersuehungen fiber den Wirkungsmechanislnus des Tuber- kulostatikums Isonicotins~iurehydrazid (INH), 4. Mitteilung.

2) ]36NICKE, R.: Naturwiss. 41, 430 (1954). a) MIDDLEBROOK, G.: Amer. Rev. Tubereul. 69, 471 (1954).

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