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Die Zelle – ein komplexes Ding
RNA-Polymerasen
PM
MM
FeatureProbe Pair
Wilcoxon test• nicht-parametrisch• gepaart • Testet PM > MM
Gesättigter Wert
Berechnung eines repräsentativen Expressionswertes und einer Signifikanz
75% Perzentil der PM-Intensitäten
Expressionsanalyse in der Krebsforschung
GenexpressionProteinexpression
Phänotyp
DifferenzielleGenexpression
DifferenzielleProteinexpression
Kandidatengen: differenziell exprimiert in Tumorzellenfür Diagnostik und Therapie
Am Beispiel des Bronchialkarzinoms
Oligo-Array-Experiment
Extraktion der poly-A-RNA
Fragmentierung Hybridisierung
Färbung
Amplifikation und Markierung
der RNA
cDNA-Array Technology
Microarray
1. Microarray preparation
PCR-Amplificationof the genes of interest(one gene - one tube)
Spotting of each cDNAon a defined place
3. Hybridization
2. Sample preparation
4. Image and data analysis
Cell collection
mRNA extraction, amplification
FlourecenceLabeling
Red/Green-ratiobackground corrected intensity