Überdauerung und Nachweis von Viren in Lebensmitteln€¦ · Enterovirus - Poliomyelitis, Meningitis + a. Adenovirus - Gastroenteritis + a. Frühsommer-Meningo-Enzephalitis-Virus

1

Schrader et al., 2003

Überdauerung und Nachweis von Viren in Lebensmitteln

Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013

2

Viren sind Parasiten und benötigen lebende Zellen zur

Vermehrung – keine Vermehrung im Lebensmittel!

Viren sind keine Lebewesen!


3

Foodborne Viruses Virus Spezies Hülle

Norovirus -

Sapovirus -

Hepatitis A-Virus -

Hepatitis E-Virus -

Rotavirus -

Astrovirus -

Enterovirus -

Adenovirus -

Frühsommer-Meningo-Enzephalitis-Virus

+

unbehüllte Viren sind

umweltstabiler als

behüllte!


4

Gemeldete Viruserkrankungen in Deutschland 2009 – 2011 (Robert Koch Institut, Berlin)

Virus Erkrankungen „foodborne“

2009 2010 2011

Norovirus 172.300 140.500 115.668 16 – 20 % (Europa)

Hepatitis A-Virus 916 773 827 5 %

Hepatitis E-Virus 108 220 229 ?

2012: 112.364 Norovirus Erkrankungen 2013:(41. KW) 68.000 Norovirus Erkrankungen


5

„Foodborne Viruses“ = Lebensmittel übertragbare Viren Virus Spezies Hülle Erkrankung Zellkultur

Norovirus - Gastroenteritis -! Sapovirus - Gastroenteritis - Hepatitis A-Virus - Hepatitis +a

Hepatitis E-Virus - Hepatitis - Rotavirus - Gastroenteritis + Astrovirus - Gastroenteritis +a

Enterovirus - Poliomyelitis, Meningitis

+a

Adenovirus - Gastroenteritis +a

Frühsommer-Meningo-Enzephalitis-Virus

+ Meningo-enzephalitis

+a a nicht alle Isolate sind kultivierbar; Wildstämme sind oftmals schwer zu kultivieren (Greening G.E., 2006)


6

Amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach § 64 LFGB 00.00 111 Dez. 2007

Untersuchung von Lebensmitteln

Qualitativer Nachweis von Noroviren der Genogruppe I und II auf glatten, festen Oberflächen von Lebensmitteln durch real-time RT-PCR


7

http://www.crlcefas.org/softprotocol.asp

seit November 2012 frei verfügbares Protokoll CEN/ISO TS 15216-2


8 Barbara Becker, 2. Fresenius Praktikertagung Analytik & QS, 2012


9

Forschungsprojekt 2007-2009

Einfluss technologischer Prozesse auf die Inaktivierung und Tenazität

von Norovirus in Lebensmitteln

Das Forschungsvorhaben (AiF-FEI 15215 N) wurde im Programm zur Förderung der „Industriellen Gemeinschaftsforschung (IGF)” vom Bundesministerium für Wirtschaft und Technologie (via AiF) über den Forschungskreis der Ernährungsindustrie e.V. (FEI) gefördert.


10

Viren aus Lebensmitteln extrahieren

Aufkonzentrierung durch Ultrafiltration (Vivaspin)

Verdau freier RNA/RNase Inhibition

RNA-Extraktion MS2 Extraktionskontrolle

real-time RT-PCR


11

Food product Process, treatment Process conduct/parameters

NV reduction [log10] ±SEM

NV reduction (nominal)

Frozen pizza Heating Baking in table oven, 12 min at 200 °C > -4 ±0.36 +

Frozen pizza Freezing Storage in freezer, 14 days at -18 °C -1.1 ±0.92 ▬

Mincemeat Heating Cooking in boiling liquid, 30 min at 100 °C > -7 ±0.29 +

Mincemeat Freezing Storage in freezer, 8 days at -18 °C 0.0 ±3.06 ▬

Mincemeat Cooling Storage in refrigerator, 2 days at +6 °C 0.0 ±0.61 ▬

Apple Cooling Storage in refrigerator, 7 days at +11 °C -0.2 ±0.76 ▬

Iceberg lettuce Cooling Storage in refrigerator, 5 days at +11 °C 0.1 ±0.15 ▬

Reduction of human norovirus in selected food matrices during different processes and storage conditions


12 Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013

13

Übertragungswege Lebensmittel-assoziierter Viren primäre Kontamination von Lebensmitteln (z.B. Früchte, Muscheln)

sekundäre Kontamination bei Produktion, Verarbeitung und Zubereitung

− Arbeitsflächen

− Verpackungen

− Maschinen

− Transportbänder

− Transportkisten

− Latexhandschuhe

− usw.


14

Forschungsprojekt 2011 - 2013

Tenazität und Inaktivierung von humanem Norovirus auf unterschiedlichen Werkstoffen von Bedarfsgegenständen in der Lebensmittelproduktion und -verarbeitung

Das Forschungsvorhaben (AiF 16970 N) wird im Programm zur Förderung der „Industriellen Gemeinschaftsforschung (IGF)” vom Bundesministerium für Wirtschaft und Technologie (via AiF) über den Forschungskreis der Ernährungsindustrie e.V. (FEI) gefördert.


15

Tenazität von hNV auf Werkstoffen real-time RT-PCR

hNV

kein Unterschied der Virusstabilität auf getesteten Materialen (Edelstahl, Plastik)


16

Wirkstoffgruppe/-basis (Aktive) Substanz Wirkstoffkonz. [V-%]

Alkoholpräparate

Ethanol 30 %, 62 %, 70 %, ≥90 % 1-Propanol (n-

Propanol) 30 %, 62 %, 70 %, ≥90 %

2-Propanol (Isopropanol)

30 %, 62 %, 70 %, ≥90 %

Aldehyd Glutaraldehyd 0,1 %, 0,5 % 2,5 %

Aktiv-Chlor-/ Halogenverbindungen

Natriumhypochlorit 0,01 %, 0,1 %, 1 % Elektrolyse-Wasser

(Chlorverbindungen) 5 %, 10 %

Organische Säure Peressigsäure 0,1 %, 0,5 %, 2 %

Wirkstoffprüfung mit Desinfektionsmittelkomponenten

Einwirkzeiten Umgebungstemperatur

0,5, 5 und 60 Min +/- 10 s 21 °C und 7 °C +/- 1 °C

Humanes Norovirus (NV), Felines Calicivirus (FCV), Murines Norovirus (MNV)


Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit!

Prof. Dr. Barbara Becker, Dr. Sascha Mormann Institut für Lebensmitteltechnologie-NRW (ILT-NRW) FB4 – Life Science Technologies

Telefon +49 5261 702 -5909 Telefax +49 5261 702 -404 [email protected] www.hs-owl.de/fb4

Das Forschungsvorhaben (AiF 16970 N) wurde im Programm zur Förderung der „Industriellen Gemeinschaftsforschung (IGF)” vom Bundesministerium für Wirtschaft und Technologie (via AiF) über den Forschungskreis der Ernährungsindustrie e.V. (FEI) gefördert.

Documents

Überdauerung und Nachweis von Viren in Lebensmitteln€¦ · Enterovirus - Poliomyelitis, Meningitis + a. Adenovirus - Gastroenteritis + a. Frühsommer-Meningo-Enzephalitis-Virus