Prof. Iris Müller, Biologielehrerin, Colegiul Naţional George Coşbuc, Cluj-Napoca Informationen zum Thema DNA-Sequenzierung nach F. Sanger sind im Biologielehrbuch

Prof. Iris Müller, Biologielehrerin, Colegiul Naţional „George Coşbuc”, Cluj-Napoca

Informationen zum Thema DNA-Sequenzierung nach Informationen zum Thema DNA-Sequenzierung nach F. Sanger sind im F. Sanger sind im Biologielehrbuch für die 12. KlasseBiologielehrbuch für die 12. Klasse: :

Elena HuțanuElena Huțanu Crocnan Crocnan, , BIOLOGIE, Manual pentru BIOLOGIE, Manual pentru clasa a XII-a, clasa a XII-a, E.D.P., E.D.P., BucureBucurești, 200ști, 2007, Seite 32-337, Seite 32-33

zu finden. zu finden. Nützliche Links zum Thema:http://de.wikipedia.org/wiki/DNA-Sequenzierunghttp://www.wissenschaft-online.de/abo/lexikon/biok/3184http://www.dnalc.org/view/16036-Fred-Sanger-1975.html

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1. F. Sanger fand einen effizienten 1. F. Sanger fand einen effizienten Weg die DNA zu sequenzieren. Man Weg die DNA zu sequenzieren. Man nennt sein Verfahren nennt sein Verfahren die…………………………..- Methode.die…………………………..- Methode.KETTENABBRUCHKETTENABBRUCH

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2. Der Kettenabbruch wird 2. Der Kettenabbruch wird hervorgerufen durch das Eingliedernhervorgerufen durch das Eingliedern von .........................-Nukleosid-von .........................-Nukleosid-Triphosphat in den komplementären Triphosphat in den komplementären DNA-Strang.DNA-Strang.

DIDESOXYDIDESOXY

NNächste Frageächste Frage


3. 3. Die Pentose des Didesoxynukleosid-Die Pentose des Didesoxynukleosid-Triphosphats trägtTriphosphats trägt keine keine 3’3’................................-Gruppe, so ................................-Gruppe, so dass eine Verlängerung des DNA-dass eine Verlängerung des DNA-Strangs durch die DNA-Polymerase Strangs durch die DNA-Polymerase nicht mehr möglich ist.nicht mehr möglich ist.

HYDROXYHYDROXY



4. 4. Es entstehen DNA-Fragmente Es entstehen DNA-Fragmente unterschiedlicher …………………, die in unterschiedlicher …………………, die in jedem Ansatz immer mit dem jedem Ansatz immer mit dem gleichen Didesoxynukleosid-gleichen Didesoxynukleosid-Triphosphat enden.Triphosphat enden.

LÄNGELÄNGE



5. 5. Wurde dem Reaktionsgemisch Wurde dem Reaktionsgemisch eines Ansatzes Didesoxy-ATP eines Ansatzes Didesoxy-ATP beigemischt, enden alle beigemischt, enden alle synthetisierten DNA-Moleküle mit synthetisierten DNA-Moleküle mit der Stickstoffbase ……………….. .der Stickstoffbase ……………….. .ADENINADENIN



6. 6. Die markierten Abbruchprodukte aus Die markierten Abbruchprodukte aus jedem Ansatz werden der Länge nach jedem Ansatz werden der Länge nach nebeneinander aufgetrennt. Dies nebeneinander aufgetrennt. Dies geschieht mittels Gel-……………………….. .geschieht mittels Gel-……………………….. .ELEKTROPHORESEELEKTROPHORESE



7. 7. Durch die radioaktive Markierung Durch die radioaktive Markierung des Primers, können die des Primers, können die aufgetrennten DNA-Fragmente auf aufgetrennten DNA-Fragmente auf einem ……………………………. sichtbar einem ……………………………. sichtbar gemacht werden (Autoradiogramm).gemacht werden (Autoradiogramm).

RÖNTGENFILMRÖNTGENFILM



8. 8. Die Laufrichtung der DNA-Fragmente Die Laufrichtung der DNA-Fragmente im Elektrophorese-Gel ist der im Elektrophorese-Gel ist der Ableserichtung ………………………… .Ableserichtung ………………………… .ENTGEGENGESETZTENTGEGENGESETZT



9. Aus dem Bandenmuster der vier 9. Aus dem Bandenmuster der vier Reaktionsansätze kann die Sequenz Reaktionsansätze kann die Sequenz des ………………………….. DNA-Stranges des ………………………….. DNA-Stranges eindeutig abgelesen werden.eindeutig abgelesen werden.

KOMPLEMENTÄRENKOMPLEMENTÄREN



10. 10. Heutzutage wird die DNA-Heutzutage wird die DNA-Sequenzierung automatisch mithilfe Sequenzierung automatisch mithilfe von vier Fluoreszenz-…………………………, von vier Fluoreszenz-…………………………, die an die vier Basen gekoppelt die an die vier Basen gekoppelt werden, durchgeführt. Dass werden, durchgeführt. Dass Chromatogramm wird vom Computer Chromatogramm wird vom Computer direkt ausgewertet.direkt ausgewertet.

FARBSTOFFENFARBSTOFFEN


Glückwunsch!Glückwunsch!

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