Selivanov und GOD

Nachweise von Ketohexosen bzw. Glucose

Der Glucoseoxidase-Test

(GOD-Test)Nachweis von Glucose

GOD

Der Glucoseoxidase-Test ist ein spezifischer Nachweis für Glucose. Er dient zum Beispiel zur leichten Unterscheidung von Glucose und Fructose.

GOD

Der Test erfolgt mit Hilfe des Enzym Glucoseoxidase, das aus Schimmelpilzen der Gattungen Aspergillus und Penicillium gewonnen wird.

GOD

Die Glucoseoxidase, eine Dehydrogenase, ist ein Protein mit Flavin-adenin-dinucleotid (FAD) als prosthetischer Gruppe. Glucoseoxidase katalysiert die Oxidation von -D-Glucose zur Gluconsäure.

GOD

-D-Glucose wird zur Gluconsäure katalytisch oxidiert und Wasser zu Wasserstoffperoxid reduziert.

GOD

Da H2O2 farblos ist, befindet sich auf dem gelb grundierten Teststäbchen der Indikator o-Toluidin(2-Aminotoluol 2-Methylanilin), der zu einem blauen Farbstoff oxidiert wird. Zusammen mit dem gelben Grund ergibt das eine grüne Färbung, anhand derer Schattierung die Menge der anfänglichen Gesamtglucose abgelesen werden kann.

GOD

Wie bereits besprochen besteht zwischen der -D-Glucose,der offenen D-Glucose und der -D-Glucose ein Gleichgewicht. (37:0,3:63)

GOD

Da dieses Gleichgewicht besteht,wird bei Umsetzung der -D-Glucose zur Gluconsäure das Verhältnis zu Gunsten der -D-Glucose verschoben und die Glucose kann auch quantitativ bestimmt werden.

GODStörende Faktoren:

- Anwesenheit von Oxidationsmittel

- Tatsache, das Glucose mit Fructose in

einem Gleichgewicht steht

GOD

Zusammenfassung

Selivanov

Nachweis für Ketosen

Alexej Myschjak Selivanov‘s Reagenz

Die Selivanov- Reagenz dient zum Nachweis von

Ketohexosen

Selivanov

Versuch

Selivanov

• 2 ml Probelösung werden mit 2 ml Selivanov - Reagenz vermischt. Der Ansatz wird langsam und gleichmäßig erhitzt (Schutzbrille !). Falls die Lösung siedet und noch keine Farbänderung auftritt, ist das Testergebnis negativ, und der Versuch kann beendet werden.

• Optimal ist eine Temp. Von ca. 70°

SelivanovDie Selivanov Reagenz besteht aus folgenden Substanzen:

- Resorcin in 5%Ethanol (EtOH)

- HCl als H3O+- Lieferant

Selivanov

Erwartung

Selivanov

• Fructose: tiefrot• Saccharose: rot• Glucose: hellrot

Selivanov

Erklärung

Selivanov

Auch bei der Fructose besteht ein Gleichgewicht

SelivanovBei der Fructose aber reagiert die offene Form.

Unter dem katalytischen Einfluss von H3O+ wird Wasser abgespalten und es entsteht 5-Hydroxymethylfurfural.

SelivanovDas gebildete 5-Hydroxymethylfurfural reagiert nun mit der Diketoform von Resorcin unter Wasserabspaltung weiter zu einem roten Farbstoff

Selivanov

Die Selivanov-Reagenz ist leider kein spezifischer Nachweis für Fructose, da:

-Saccharose neben dem Monomer Glucose auch aus Fructose aufgebaut ist. Eine saure Hydrolyse der Saccharose, die bei diesem Versuch stattfindet, führt zu beiden Monosacchariden.

Selivanov

Hier geht die Umwandlung von Glucose in Fructose über die Ketoenoltauto-merie nicht (nur im Alkalischen)

Selivanov

Zusammenfassung

Vielen Dank für ihre Aufmerksamkeit

und wir wünschen ihnen noch einen

erholsamen LK Chemie

Vormittag