STRUKTURAUFKLARUNG DES Vi-ANTIGENS AUS Citrobacter freundii (E. co&) 5396138

K. HEYNS KIND G. KIE~~LING Chemisches Staatsinstitut, Institut fw Organ&he Chemie, Uniuersitlit Hamburg (Deutschkmd~

(E5igegange.n den I. JuIi 1966; modifkiert den 6. August 1966)

Friihere Untersuchungen’ habengezeigt, daB das aus mehreren Mikroorganismen nach verschiedenen Methoden2*3 erhaltliche Vi-Antigen ein hochacetyliertes Poly- saccharid ist. Es besteht im wesentlichen aus einer Aminohexurons2ure1, die durch Vergleich mit authentischem Material als 2-Amino-a-desoxy-n-galaktopyranuron- saure (D-Galaktosaminuronsaure) identitiziert werden konnte4. In den letzten Jahren sindinPolysaccharidenandererMikroorganismenzus~~chGlucosaminurons~ureund MannosaminuronsBure aufgefunden worden’-*. Genaue Strukturangaben liegen nur fur das Staphylococcen-Polysaccharid-Antigen vor*. Versuche, die Struktur des Vi--Antigens durch Perjodatspaltung zu erschlieBen, haben ergeben, da13 das Poly- saccharid kein Perjodat verbraucht’. Dieser BefundftihrtezurAnnahme,imVi-Antigen seien die Monosaccharide durch glykosidische I+ 3 Bindungen verkniipft.

In der vorliegenden Arbeit wird die Strukturaufkl%ung des Vi-Antigens auf dem klassischen Wege der Methylierung beschrieben. Dieses aufwendigere Verfahren Whrt such hier zu einer sicheren Aussage der Bindungsart, weil die Hydrolysenprodukte des methylierten Polysaccharids charakteristische Bruchstiicke des Vi-Antigens repr&en- tieren. Das Bauelement 1 des Vi-Antigens kann entweder in einer 1-tpodereiner 144- Verkniipfung irmerhalb der Polysaccharidkette vorliegen. Durch direkte Methylierung

l--t3VerkniiPfUng

R’= H, AC R’= Saccharidkette

R=‘=H,AC

, -4 VerkniipfUng R’= H. AC

(1) R’= H.Ac R’s Saccharidkette

des Vi-Antigens und anschlieI3ende Hydrolyse so&e es mSglich sein, AufschluB iiber die Struktur des Polysaccharids zu erhalten. Die Stellung der Methylgruppen in den Hydrolyseprodukten w2ire dann ein unmittelbarer Beweis fur die Verkniipfungsart der Monosaccharide im Polysaccharid. Die in dieser Richtung durchgeftirthen Ana- lysen sind zur Zeit noch nicht auswertbar, da die zur Identifizierung benatigten Methylgther der Galaktosaminuronsaure unbekannt sind.

Carbohydrate Res., 3 (q&9 3~0-353

VI-ANTIGENS AUS Citrobacter freundii 353

(from I) and 2-amino-2-deoxy-3,6-di-O-methyl-D-galactopyranose (3,6-d&O-methyl-

galactosamiue) (from z), respectively. The occurrence of these two compounds,

as well as the absence of 2-amino-2-deoxy-4-O-methyl-D-galactopyraranose and 2-

amino-2-deoxy-4,6-di--di--methyi-D-galactopyranose, conclusively demonstrates z-t4

glycosidic bonds in the polysaccharide.

The products formed by hydrolysis were quantitatively determined and identified

using authentic control substances in the amino acid analyser of Moore, Spa&man,

and Stem by means of a special buffer. From these results a model of the structure of

the Vi-antigen is presented.

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