Technische Hinweise: Wieslab Funktionelle Komplement-Tests Technische Hinweise... · Technische Spezifikationen Komplement Classical Pathway Produktname Wieslab® Complement Classical

Technische Hinweise: Wieslab© Funktionelle Komplement-Tests

• Testspezifikationen • Kurzanleitung • Ergebnis-Interpretation • Präanalytik • Fallstricke, Hinweise • Forschungsmodifikationen • Support

I 1 Dok.-Nr. E-142-DE01 – Technische Informationen Funktionelle Komplement-Tests 2016-06-16

• Komplexes System aus einer sequentiellen Kaskade von über 35 Proteinen, Teil des unspezifischen Immunsystems

• Schrittweise Aktivierung durch proteolytische Spaltung von Proenzymen; endet immer in der Bildung des Membran-Angriffskomplexes MAC (C5b-9)

• Unterscheidung von drei Aktivierungswegen:

Klassisch

Lektin (MBL)

Alternativ

• Basis-Aktivierung erfolgt über unterschiedliche Auslöser, extern oder intern

• Zentrale Punkte sind:

Spaltung von C3, Opsonisierung

Bildung der Anaphylatoxine C3a, C5a (Entzündung)

Endpunkt ist Bildung von MAC und Lyse des Erregers

• Regulation auf unterschiedlichen Ebenen mittels löslicher und zell-gebundener Proteine (z.B. C1INH, Faktor H, DAF/CD55)

• Enge Verzahnung mit dem adaptiven Immunsystem und der Hämostase!

Das Komplementsystem Überblick

Dok.-Nr. E-142-DE01 – Technische Informationen Funktionelle Komplement-Tests I 2

• Euro Diagnostica hat 2005 zusammen mit führenden Komplementologen funktionelle Globaltests im ELISA-Format entwickelt; das Projekt wurde von der EU gefördert.

• Über Weg-spezifische Aktivatoren können alle drei Wege

im gleichen Testformat separat untersucht werden: • IgM: Klassischer Weg • LPS: Alternativer Weg • Mannan: Lektin-Weg (MBL)

• Az. BSA: Ficolin-3 Weg (Subtyp Lektin-Weg, nur für Forschungszwecke)

• Funktionalität im Reagenzglas:

Prinzipiell wird aufgrund spezifischer Aktivatoren nur die Neu-Enstehung des Membrane-Attack-Complex (MAC/ C5b-9) gemessen; dieser liegt gebunden an die Aktivatoren auf der Plattenoberfläche im Well vor.

• Korreliert mit klassischen, Erythrozyten-basierten hämolytischen Tests CH50, APH50 (≈ Lyse durch MAC)

• Patentschutz besteht für unseren funktionellen Test für den MBL/Lektin- und Ficolin-3/Lektin-Weg

Das Komplementsystem Wie bekommt man das Gesamtbild?


www.eurodiagnostica.com

Euro Diagnostica ELISA-Portfolio Komplement

Messung der funktionellen Aktivität

Produkte Bestellnummer Zur in-vitro-Diagnostik* Wieslab® Complement system Screen COMPL 300 Wieslab® Complement system CP COMPL CP310 Wieslab® Complement system MBL COMPL MP320 Wieslab® Complement system AP COMPL AP330 Nur für Forschungszwecke* Wieslab® Complement system Ficolin-3 COMPL F3 RUO *Verfügbarkeit länderabhängig, bitte lokalen Ansprechpartner kontaktieren


http://www.eurodiagnostica.com/

Technische Spezifikationen Komplement Classical Pathway

Produktname Wieslab® Complement Classical Pathway

Bestell-Nr. COMPL CP310*

Format ELISA, brechbare 96-well Platte (blau markiert)

Aktivator-Beschichtung IgM (human)

Reagenzien Ready-to-use (außer Waschpuffer, Positiv-/Aktivitäts-Kontrolle)

Auswertung Qualitativ: Ratio (Probe - NC)/(PC - NC) x100 % oder quantitativ: 0 – 100% (6 Standards)

Kontrollen 2 (NC, PC; plus Leerwert)

Normbereich 69 – 129 % (2s-Bereich von 120 Blutspendern)

Probenmaterial, Menge Serum, 5 µl

Vorverdünnung 1:101

Probenmenge 100 µl

Substrat, Wellenlänge pNPP, 405 nm

Zeit bis zum Ergebnis 2 Stunden

Intraassay-Varianz 3%

Automation Validiert (Dynex)

Haltbarkeit des Kits 15 Monate ab Produktion

Ref: E-23-0162 – Bedienungsanleitung WIESLAB® Complement system, Classical Pathway *auch als RUO-Version für Forschungszwecke erhältlich: COMPL CP310 RUO


Kurzanleitung Komplement Classical Pathway

Schritte Lösung Verdünnte

Probe

Leerwert / Standards,

verdünnte Kontrollen

In die Wells pipettieren 100 µL 100 µL

60 min bei 37°C inkubieren

Die Wells dreimal mit 300 µL Waschpuffer waschen

Zugeben Enzym-Konjugat 100 µL 100 µL

30 min bei Raumtemperatur (20-25°C) inkubieren


Zugeben Substrat 100 µL 100 µL


Bei 405 nm messen (nach beendeter Inkubation innerhalb von 60 min)

Ausführliche Anweisungen in der Bedienungsanleitung

E-23-0162, WIESLAB® Complement system, Classical Pathway


Verdünnungsreihe der rekonstituierten Positivkontrolle: Verwendung als Master-Standard für quant. Auswertung

100 % = Verdünnung 1/101

75% 50% 25% 12,5% 0%

10 µl PC

1000 µl Verdünnungs-puffer

225 µl 100%


150 µl 100%


75 µl 100%


40 µl 100%




Technische Spezifikationen Komplement Alternative Pathway

Produktname Wieslab® Complement Alternative Pathway

Bestell-Nr. COMPL AP330*

Format ELISA, brechbare 96-well Platte (rot markiert)

Aktivator-Beschichtung Lipopolysaccharid (LPS)

Reagenzien Ready-to-use (außer Waschpuffer, Positiv-Kontrolle)

Auswertung Qualitativ: (Probe - NC)/(PC - NC) x100 % (Ratio)


Normbereich 30 – 113 % (2s-Bereich von 120 Blutspendern)


Vorverdünnung 1:18

Probenmenge 100 µl


Zeit bis zum Ergebnis 2 Stunden




Ref: E-23-0164 – Bedienungsanleitung WIESLAB® Complement system, Alternative Pathway *auch als RUO-Version für Forschungszwecke erhältlich: COMPL CP330 RUO


Kurzanleitung Komplement Alternative Pathway


Probe Leerwert /











Ausführliche Anweisungen in der Bedienungsanleitung E-23-0164

- WIESLAB® Complement system, Alternative Pathway


Technische Spezifikationen Komplement MBL Pathway

Produktname Wieslab® Complement MBL Pathway

Bestell-Nr. COMPL MP320*

Format ELISA, brechbare 96-well Platte (grün markiert)

Aktivator-Beschichtung Mannan




Normbereich 0 – 125 % (2s-Bereich von 120 Blutspendern); ND-Defekthäufigkeit 20-30%


Vorverdünnung 1:101

Probenmenge 100 µl


Zeit bis zum Ergebnis 2 Stunden 15 Minuten




Ref: E-23-0163 – Bedienungsanleitung WIESLAB® Complement system, MBL Pathway *auch als RUO-Version für Forschungszwecke erhältlich: COMPL CP320 RUO


Kurzanleitung Komplement MBL Pathway


Probe Leerwert /


Verdünnte Proben 15 min (maximal 60 min) bei Raumtemperatur stehen lassen











- WIESLAB® Complement system, MBL Pathway


Technische Spezifikationen Komplement-System Screen (3 Wege)

Produktname Wieslab® Complement System screen

Bestell-Nr. COMPL 300*

Format ELISA, brechbare 4x8x3-well Platte CP blau, MP grün, AP rot

Aktivator-Beschichtung Separat mit IgM, Mannan, LPS




Normbereiche CP 69–129 %, MP 0-125 %, AP 30-113 % (2s-Bereich von 120 Blutspendern)

Probenmaterial, Menge Serum, 5 / 5 / 20 µl

Vorverdünnung 1:101 / 1:101 / 1:18

Probenmenge 100 µl


Zeit bis zum Ergebnis 2 Stunden 15 Minuten

Intraassay-Varianz 3 / 5 / 7%



Classical Pathway MBL Pathway Alternative Pathway

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

A Dil CP P2 Dil MP P2 Dil AP P2 B Dil CP P2 Dil MP P2 Dil AP P2 C PC etc PC etc PC etc D PC PC PC E NC NC NC F NC NC NC G P1 P1 P1 H P1 P1 P1

Ref: E-23-0161 - WIESLAB® Complement system, Screen *auch als RUO-Version für Forschungszwecke erhältlich: COMPL CP300 RUO


Kurzanleitung Complement Screen (3 Wege)

Schritte Lösung Alle drei

verdünnten Proben

Leerwert / alle drei verdünnten

Kontrollen Nur die verdünnten Proben des MP 15 min (maximal 60 min) bei Raumtemperatur stehen lassen (mit der Weiterbearbeitung von CP und AP warten!)











- WIESLAB® Complement system, Screen


Berechnung der Komplement-Funktion

• Bezugspunkt ist die standardisierte Positiv-Kontrolle. Dies ist ein Serumpool aus definierten Blutspendern mit normaler Komplementfunktion (= 100%)

• Nach Blank-Abzug das Ergebnis der Komplement-Funktion in % wie folgt berechnen:

(Probe - Negativkontrolle)/(Positivkontrolle - Negativkontrolle) x100

In Bezug auf die Normalsituation enthält die Probe also alle zur Funktion notwendigen Komponenten oder nicht

Die Auswertung mittels Zwei-Punkt-Kalibration kann prinzipiell eine Verlaufsbeurteilung (Anstieg, Abfall) der in % angegebenen funktionellen Werte ermöglichen (Grafik: Beispiel klassischer Weg)


Normbereiche (Interne Studie, Erwachsene)

40 54 68 82 96 110 124 138 152

CP

0

10

20

30

40

n Mittelwert (%)

±2 SD (%) Median (%)

Klassischer Weg (CP) 120 99 69-129 100 Alternativer Weg (AP) 120 71 30-113 73 Lektin-Weg (MP) 120 49 0-125 56

CP AP MP

0 14 28 42 56 70 84 98 112 126

AP

0

10

20

30

0 2 4 6 8 10

AP

Empfehlung: Jedes Labor sollte seine eigenen Referenzwerte ermitteln!

Ref: IFU E-23-0162 WIESLAB® Complement system, Classical Pathway

IFU E-23-0164 - WIESLAB® Complement system, Alternative Pathway

IFU E-23-0163 - WIESLAB® Complement system, MBL Pathway


Interpretation der Testergebnisse

A. Werte im Normbereich: Normale Komplement-Funktion Kein signifikanter Hinweis auf eine Störung der Gesamt-Funktion

Generell Anamnese und weitere Laborparameter beachten!

B. Werte unterhalb des Normbereichs: Verminderte Komplement-Funktion Gründe für eine verminderte Funktion: - Verbrauch nötiger Komponenten (Auslöser ist Aktivierung des Komplementsystems) - Erbliche oder erworbene Komplement-Defekte (insbesondere bei Werten ≤ 5%) - Unsachgemäße Handhabung der Probe (falsch-niedrig durch Abbau-Prozesse!)

C. Werte oberhalb des Normbereichs: Hinweis auf eher unspezifische Entzündungsaktivität (Akute-Phase)


Beispiel: Interpretation der Ergebnisse für den klasssischen Weg (CP)

Aktivität (%) Genetischer Defekt oder sehr starker Verbrauch/Aktivierung

Verminderte Funktion: Fehlende oder verbrauchte Komponenten

Normale Funktion Unspezifische Entzündung

< 5% Ref: E-23-0162 – Bedienungsanleitung WIESLAB® Complement system, Classical Pathway


Test follow-up - Stufendiagnostik

• IMMER abnormale/verminderte Funktionsergebnisse mit einer neuen Probe gegentesten (Sicherstellung der korrekten Präanalytik)

• Wenn ein erneuter Test mit einer frischen Probe weiterhin eine verminderte Funktion zeigt:

-> Verbrauch/Aktivierung oder genetischer Defekt?

oder neu: Blockade durch Medikamente

• Weitere Untersuchungen müssen zeigen:

Welche individuellen Komponenten fehlen?

(Hinzufügen von vermuteten Einzelkomponenten und Test wiederholen)

Autoantikörper gegen Komplement?

Genetische Defizienz?

Mittleres Ergebnis –> Aktivierungsmarker!? Verlaufskontrolle

Anamnese, weitere relevante Laborparameter


Empfehlung für die Stufendiagnostik des Komplementsystems

Tudoran/Kirschfink, J Lab Med 2012


Screening-Test für alle drei Wege: Zusätzliche Hinweise auf Defekte beteiligter Komplement-Komponenten

= normale Funktion verminderte Funktion

Dok.-Nr. E-142-DE01 – Technische Informationen Funktionelle Komplement-Tests 20

Fallbeispiel: Diagnose von kompletter C2-Defizienz Lennart Truedsson MD/PhD, Section of Microbiology, Immunology and Glycobiology, Dept of Laboratory Medicine, Lund University, Lund, Schweden

Vorstellung des Falls Ein 8-jähriges Mädchen wurde mit einer plötzlichen fiebrigen Erkrankung mit Kopfschmerz ins Krankenhaus eingeliefert. Dort wurde sie mit Verdacht auf Meningitis oder Sepsis mit Antibiotika behandelt. Eine Kultur der Rückenmarksflüssigkeit zeigte ein Wachstum von Meningokokken. Sie hatte schon einmal im Alter von 2 Jahren an von Pneumokokken verursachter Lungenentzündung und Sepsis gelitten. In der Familie gibt es keine erhöhte Infektionsanfälligkeit. Bewertung und Diagnose Eine Analyse des Immunsystems inklusive Immunglobuline und Komplement wurde durchgeführt. Die IgG-Konzentrationen mit allen Subklassen sowie IgM waren normal. Die IgA Konzentration lag unterhalb der Norm, war aber nicht so niedrig wie bei einer selektiven IgA-Defizienz. Eine Analyse der Komplementfunktion mit dem Wieslab® Complement system screen Test ergab keine Aktivität des klassischen und des Lektin-Wegs, aber eine normale Aktivität des alternativen Wegs. Weitere Untersuchungen mit Messungen der individuellen Komponenten des klassischen Wegs (C1q, C2 und C4) ergaben eine vollständige C2-Defizienz. Diskussion und Schlussfolgerung Eine vollständige C2-Defizienz geht mit einer erhöhten Anfälligkeit für Infektionen mit verkapselten Bakterien wie Pneumokokken und einem erhöhten Risiko für SLE einher. Aus der Ergebnissen der funktionellen Analyse kann nicht erkannt werden, ob auch eine MBL-Defizienz vorliegt, da C2 im klassischen und im Lektin Weg vorkommt. Dann ist eine MBL-Messung erforderlich. Es gibt einige Hinweise darauf, dass eine Defizienz-Kombination wie z.B. von C2 und MBL die Anfälligkeit für Infektionen erhöht.


• Komponenten des Komplement-Systems sind instabiler als andere Standard-Laborparameter; Präanalytik ist somit wichtig für korrekte Ergebnisse

• Stabilität bei Beachtung einiger Spielregeln gar nicht so problematisch

• Probenmaterial: Für Funktionalität nur Serum (Gerinnung komplett abgelaufen!)

• Probentransport und kurzfristige Lagerung:

– Optimal -20°C; kaum Risiken: Bei Raumtemperatur mehrere Stunden, gekühlt bis 24 Stunden

– Empfehlung: Etablierung eines praktikablen, standardisierten Vorgehens (wichtig für Verläufe)

• Verwendung eingefrorener Patienten-Proben:

– Im 37°C Wasserbad schnell auftauen und dann zügig verarbeiten; im Probenpuffer verdünnt bis zu einer Stunde bei Raumtemperatur stabil; wiederholtes Auftauen (1-2x) kein Problem

• Lagerung der Kit-Bestandteile:

– Positiv-Kontrolle (+ Aktivitätskontrolle CP): lyophilisiert bei -20°C; aufgelöst, dann portioniert bei -70°C

– Restliche Bestandteile des Kits (frisch oder geöffnet) bei 2-8°C

• Interpretation der Ergebnisse:

– Normale oder erniedrigte funktionelle Aktivität des Komplement-Systems

– Im Falle einer verminderten Funktion, Bestätigung mit einer frischen Probe (Ausschluss falsch-niedriger Ergebnisse durch fehlerhafte Präanalytik; falsch-normale Funktion aufgrund Testdesign nicht möglich)

– Ergänzung klinisches Bild, Aktivierungsmarker wie z.B. C3d, sTCC (Plasma), weitere Laborparameter

• Instand Ringversuche (Nr. 246) verfügbar für funktionelle Komplementsystem-Tests (Euro Diagnostica nimmt teil, ebenso an lokalen Ringversuchen in Schweden und Holland)

Qualitätssicherung


Automatisierte Abarbeitung: Validierte Protokolle für Dynex-Geräte

• Protokolle für alle drei Komplement-Wege vorhanden

• Alle Euro Diagnostica Komplement-Kits werden international auf DSX- und DS2-Geräten (sowie anderen ELISA-Prozessoren) abgearbeitet


Komplement: Probengewinnung/Präanalytik

• Kein Plasma für die funktionelle Komplement-Testung verwenden!

• Normales Serum sollte aus Vollblut ohne Antikoagulantien gewonnen werden; 60 – 65 Min. gerinnen lassen

• Serum kann maximal 24h bei Raumtemperatur gelagert werden, 48h gekühlt bei 4°C

• Zur längeren Lagerung Aliquots einfrieren (empfohlen bei -70°C); wiederholtes Einfrieren und Auftauen vermeiden

• Plasma sollte nicht verwendet werden


Komplement: Interne Erfahrungen mit Plasma

0

20

40

60

80

100

120

CP MP AP

Serum

Heparin

EDTA

Citrate

Mittelwert von 6 Proben (in %)


Komplement: Proben-Stabilität/Lagerung (interne Daten)

• Bei Raumtemperatur (RT) gelagert

– 24 Stunden: Ok

– 48 Stunden: Aktivitätsverlust von 15-20%

– 72 Stunden: Problematisch, da 40-80% Aktivitätsverlust

• Bei +4 0C gelagert

– 48 Stunden: Ok

– 72 Stunden: Aktivitätsverlust von 10-20%

• Bei -20 0C gelagert

– 1 Monat: Ok

– 2 Monate: Ok, Lektin-Weg beginnt an Aktivität zu verlieren

– 4 Monate: Probleme beginnen generell

• Bei -70 0C gelagert

– Generell ok für längere Lagerung


Externe Daten aus Lausanne*: Bestätigung der Probenstabilität

Tabelle 1

Dauer S1 S2 S3 S4 S1 S2 S3 S4

3 Tage 101 98 96 98 92 88 84 85

1 Tag 100 97 99 99 93 98 99 97

4 Stunden 98 95 96 97 99 68 68 100

2 Stunden 99 97 100 99 90 96 96 98

1 Stunde 6 74 89 99 100 97 99 99

0 Stunden/

Messung 90 98 92 104 90 98 92 104

Lagerung bei 4°C Lagerung bei 25°C

Tabelle 2

Gefrier und Auftau-Zyklen S1 S2 S3 S4

0x, Messung 100 81 101 97

1x 98 79 101 96

2x 98 81 101 96

3x 98 79 101 96

* Mit freundlicher Genehmigung: Dr. Vincent Aubert, Institut für Immunologie, Universität Lausanne, 2015


Komplement-ELISAs: Fallstricke, Hinweise

• Präanalytik beachten: Falsche Lagerung (Abbau der Komplement-Komponenten) führt zu falsch-niedrigen Ergebnis-Interpretationen (= Komplement-Störung/Defekt)

• Lyophilisierte Positivkontrolle sorgfältig und vollständig auflösen. Danach sofort verwenden oder portioniert wegfrieren (-70°C)

• 1. Inkubationsschritt bei 37°C

- Wichtig für korrekte Komplement-Aktivierung (Neu-Enstehung von MAC/C5b-9)

- Falls nur Brutschrank vorhanden, ohne CO2 verwenden! (sonst falsch-niedrige Ergebnisse für Lektin, Ficolin-3)

- 60 Minuten Inkubation insbesondere für den alternativen Weg einhalten! (exponentielle, enzymatische Kinetik bei AP, linear bei CP und MP)

• Nur den jeweiligen Weg-spezifischen Probenverdünnungspuffer verwenden (Inhibition der anderen Wege); 15 min Vorinkubation Lektin-Weg beachten (Blockade CP)

• Achtung: Beim Alternativen Weg ist eine andere Verdünnung nötig (1:18 statt 1:101); strikt einhalten!

• Weitere Probenverdünnungen in der Regel nicht nötig, bzw. können die Ergebnisse (AP) verfälschen

• Nur die jeweilige Weg-spezifische Positiv-Kontrolle verwenden, siehe Beschriftung Fläschchen-Etikett. Prinzipiell existieren zwei Versionen PC CPMPAP = PC MP und PC CP = PC AP

• Waschpuffer und Substrat sind in allen Komplement-Kits identisch, Konjugat bedingt (lot-spezifisch)


Hinweise zur Lagerung der Positiv- und Aktivitäts-Kontrolle (CP)

• Achtung: Beim Versand befinden sich Kit-Box und eine separate Schachtel für die Kontrollen gemeinsam in einer Plastiktüte. Alles wird vom Zentrallager in Malmö ungekühlt verschickt. Nach Erhalt, die Kit-Box bei 2-8°C lagern und nur die lyophilisierten Kontrollen (zweite Schachtel) bei -20°C sofort einfrieren.

• Die Lagerung der lyophilisierten Positiv-Kontrollen (PC, AC) bei Raumtemperatur ist bis zu einer Woche ok. Ein versehentliches Einfrieren des gesamten Kits bei -20°C oder sogar bei -80°C führt zu keiner Beeinträchtigung der Ergebnisse.

• Positivkontrollen nicht mehrmals auftauen und wieder einfrieren; nach dem Auflösen portioniert wegfrieren!

• Nach dem Auflösen des Lyophilisats ist die Positivkontrolle bei -20°C ca. 12 Wochen, bei -70°C mind. 52 Wochen stabil.

• Die Positiv-Kontrolle ist nicht Kit-Lot-spezifisch; das standardisierte Material aus einem Pool von definierten Normalspendern kann separat bestellt werden.

• Die Negativkontrolle kann im Kühlschrank gelagert werden (hitze-inaktivierter Serumpool).

• Positiv-, Negativ- und Aktivitätskontrolle werden wie die Patientenproben in der jeweiligen Weg-spezifischen Verdünnung im Test eingesetzt.

• Zusätzliche Aktivitätskontrolle (klassischer Weg): Für die quantitative Auswertung des klassischen Wegs (CP), wird die Positivkontrolle als Masterstandard für die Herstellung der Standarkurve verwendet. Für jeden Testlauf muß die Standardkurve immer frisch aus weggefrorenen Portionen des Masterstandards hergestellt werden. Als unabhängige, neue Positivkontrolle dient dann die sogenannte „Aktivitätskontrolle“ im CP-Kit.


Robustes Testsystem: Optionen zu Modifikationen bei Forschungsanwendungen

• Geeignet für die Testung von Inhibitoren der Komplement-Funktion:

– Die Positiv-Kontrolle kann z.B. als standardisiertes Normalspender Kontroll-Material verwendet werden

– Hinweis: Bei Titrationen von Substanzen den potentiellen Stör-Einfluss von Ionen oder pH in Relation auf den Standardansatz des Wieslab© ELISA-Systems (Serum!) kontrollieren

• Bei vermuteter Defizienz einer Komplement-Komponente kann durch Zugabe der selbigen die Annahme geprüft werden:

– Mögliches Testdesign: Das funktionelle Protein in der für Normalspender üblichen Konzentration zugeben (z.B. in drei verschiedenen Konzentrationen wie: niedriger, gleich, höher), ein paar Stunden bei 4°C inkubieren, dann das Serum mit und ohne vermutetem Defekt-Protein im entsprechenden Wieslab© Kit messen


Ergebnisse von Forschungsuntersuchungen der Pädiatrischen Nephrologie, Universität Freiburg: Einflüsse von Pufferbedingungen auf den Alternativen Weg

Mit freundlicher Genehmigung von St. Michelfelder, 2015


www.eurodiagnostica.com/complement – Informative Website

• Übersicht

• Diagnostik

• Therapie

• Support:

– Technische Informationen

– Videos

– Fallbeispiele

– Literatur

– Webinar

– Kongress-Teilnahmen


• Die ELISA-Systeme von ED bieten eine einfache und standardisierte Untersuchung der Funktionalität aller drei Wege:

– Untersuchung der Einzelwege separat möglich oder alle drei Wege auf einer Platte gleichzeitig

– Sehr ähnliche Testdurchführung für alle drei Wege, kein Spezialwissen nötig

– Laborausstatttung: 37°C Inkubator + Wasserbad, ELISA-Reader (405 nm), -20°C (-80°C) Gefrierschrank

– Ergebnisse innerhalb von 3 Stunden, niedrige VK´s

– Geringe Probenmengen (5, 20 µl Serum je nach Weg)

– Ergebnis:

• Normale oder verminderte Gesamtfunktion des Komplementsystems

• Auswertung aller drei Wege gleichzeitig: Hinweis auf betroffene Einzelkomponenten

• Optimiert für Kleinserien:

– Brechbare Streifen; Notfall-Untersuchung für einen Patienten mit nur zwei Kontrollen ansetzbar

– Stabile Reagenzien auch nach dem Öffnen (bis zu 15 Monate)

• Automation möglich, validierte Protokolle (Dynex) verfügbar

• Etablierte Labormethode:

– CE-markierte Kits, validiert mittels internationaler Multicenter-Studie (2005), Publikationen verfügbar

– Zuverlässige Alternative für aufwendige, hämolytische Tests (CH50, APH50)

Basis-Anforderung der Kliniker kann zeitnah, einfach und kosteneffizient bedient werden

Zusammenfassung: Routinetauglichkeit


Öresund-Brücke (Malmö-Kopenhagen)

Bei Fragen, können Sie uns gerne über [email protected] kontaktieren


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