46 Z. Anal. Chem., Band 267, Heft 1 (1973)

Thin-Layer Chromatographic Separation of Copper, Nickel, Cobalt and Bismuth as Diethyl Dithiocarbamate Complexes Diinnschicht-ehromatographisehe Trennung yon Kupfer, Nickel, Kobalt und Wismut als Digthyldithio- carbamatkomplexe

Trenn. yon Kupfer, Nickel, Kobalt, Wismut; Chromatogra- phie, Diinnsehicht; DDC-Komplexe

A. L. J. Rao and Surinder Singh Chemistry Department, Puniabi University, Patiala-4, India

Received March 3, 1973

I n the p resen t s t u d y some of the me ta l d i e thy l d i t h i o c a r b a m a t e complexes which are eoloured a n d d i rec t abso rp t iome t r i c d e t e r m i n a t i o n is poss ible have been s epa ra t ed on si l ica gel G layers for which comple te e x t r a c t i o n d a t a are avai lab le .

Experimental. Different aliquote of metal ion solutions are extracted with carbon tetrachloride containing 0.01 to 0.03 M NaDDC at pH 6.

Solvent systems used are 1. methylene dichloride/petroleum ether (60--80 ~ C) (5: 3); 2. methylene dichloride/cyclohexane (5: 3). Running time

is 20--30 rain. Thin-layer chromatography was carried out on glass

plates (10 • 20 cm) coated with 250 ~zm thick layers of silica gel G according to Stahl on the air dried chromateplates activated at 110--120~ for 30 min. 10 ~l of the extracts were applied on a line 1.5 em fr(~m the lower edge of the

Table 1. Rf X 100 values of metal-DDO complexes

Metal ion Colour Rf X 100 values in solvents 1 2

Cu brown 56 46.2 Ni yellow 45 40 Co green 27 30 Bi yellow 21 22.3

plates and 1.5 em apart from each other. Complete separa- tion was achieved in 20--30 rain. Results are presented in Table 1.

Inter/erences. Molybda te , t ungs ta t e , chromate , ch romium a n d a lumin ium do no t in ter fere wi th the ex t rac t ion . Mercury, cadmium, lead, t ha l l i um and manganese are also e x t r a c t e d under s imi lar condi t ions b u t being colourless do no t in terfere wi th the TLC sepa ra t ion of Co, Ni, Bi and Cu.

Discussion. I n th is m e t h o d the s epa ra t ed consti- t uen t s can also be de t e rmined q u a n t i t a t i v e l y b y per- fo rming the TLC sepa ra t ion on the p r e p a r a t i v e scale, ex t r ac t i ng the ind iv idua l me ta l ion spots wi th carbon t e t raeh lo r ide and measur ing the colours wi th a spee t ropho tome te r a t the following wave leng ths : B i -DDC 3 6 6 - - 3 7 0 n m , Co-DDC 3 6 7 n m , N i .DDC 326 nm, Cu-DDC 436 nm.

Dr. A. L. J. Rao Chem. Dept. Punjabi University Patiala.4 India

Zur diinnschicht-chromatographischen Trennung und Ermittlung der Nachweisgrenzen von Adrenalin und Noradrenalin an aktivierten Fertigfolien* mit unterschiedlichen Spriihreagentien Thin-Layer Chromatographic Separation and Determination of the Detection Limits of Adrenaline and Noradrenaline on Activated Ready-Made Foils using Various Spray Reagents

Trenn. yon Adrenalin und Noradrenalin; Chromatographic, Diinnsehieht; Fertigfolien

H. Thielemann Eingegangen am 2. April 1973

Potter u. Mitarb. [6] trennten Adrenalin, Noradrenalin und einige Metaboliten dieser Verbindungen mit dem Fliel3-

* Verwendet wurden Silufol l%rtigfolien UV254 der Fa. Skl~rny Kavalier (~SSR) mit folgender Zusammen- setzung: Sorptionsmittel: Kieselget ftir Chromatographic mit einem Luminescenzindicator; Unterlage: Aluminium- folie; Bindemittel: St~rke.

mittel n-Butanol, das mit 3 N HCI ges/~ttigt war, auf Cellu- lose-Schiehten mit Kammers/ittigung (6,5 g Cellulose MN-300, 45ml Methanol; Schichten 10 min bei 105~ trocknen). Noradrenalin und Adrenalin wurden z.B. mit dem Fliel3- mittel n-Butanol/Eisessig/Wasser (40 q- 10 -k 50) ebenfalls auf Cellulose-Sehichten (20 g M:N-Cellulose 300 G, 100 ml Wasser; Schichten 2 h bei 100~ troeknen) chromatogra- phiert. Bei Verwendung des genannten essigsauren Fliefl- mittels oder neutraler Flieflmittel t r i t t beim Auftragen der Basensalze oder bei Anwesenheit st~rkerer S/~uren als der zur FlieBmittelherstellung verwendeten, auf dem Startfleck die schon yon der Papier-Chromatographie her bekannte Doppelfleckbildung auf; deren Ursache yon Beckett u. Choulis [1] nochmals erSrtert wurde.

Auf Fertigfolien ist die Doppelfleckbildung in geringem Umfang zu beobachten. Dureh die in solchen Schiehten vorhandenen Metall- und Schwermetallverunreinigungen wird jedoch die Oxydationsempfindlichkeit der Adrenalin- abkSmmlinge erhSht. Daher werden Adrenalin und Nor- adrenalin mit 10~ Athanol auf gepufferten Kieselgel- G-Schichten (SSrensen-Puffer6,8), die unter Zusatz yon Natriumhydrogenbisulfit hergestellt waren, chromatogra- phiert [7].

Die Sympathomimetica und die durch Oxydation ent- stehenden Sekund~irprodukte neigen aul3erdem zur Komplex.

Kurze Mitteilungen 47

salzbildung, was sich durch langgezogene Flecke ~uBert. Zur Trennung yon Adrenalin, l%radrenalin und verschiede- nen Substanzen ~hnlicher Struktur mit dem FlieSmittel Aeeton/Ameisens~ure/Wasser (70 -{- 10 + 20) wurden Kie- selgel-Sehichten, die mit 0,1 M EDTA hergestellt waren, verwendet[5]. Halmekoski[3] benutzte das Komplex- bildungsvermSgen der Sympathomimetica vom Adrenalin- typ, um auf gepufferten Kieselgel-Sehiehten, die Molybdat-, Wolframat- oder Boraxanteile enthielten, eine Aufschliisse- lung zu erreichen.

~ber eine MSglichkeit der dfinnsehieht-ehromatographi- sehen Trennung und Identifizierung yon Adrenalin und Noradrenalin an Fertigfolien UV 254 wurde bereits be- richter [8].

Die Diinnschicht-Chromatographie der beiden Verbin- dungen wird noch an anderer Stelle besehrieben [2]. Zur quantitativen Bestimmung yon Adrenalin wurde das Tri- acetylderivat hergestellt und die Fleckengr5Be naeh Aus- schiitteln mit Methylenchlorid, Chromatographie auf Kiesel- gel-G-Sehichten mit dem Flieflmittel Chloroform/Methanol (90 -~ 10) und Anf/irben mit Phosphormolybd~ns~ure aus- gewertet [9]. Um Adrenalin und Noradrenalin aus biolo- gisehem Material zu isolieren, wurden yon anderen Autoren [4] die relativ stabilen Tetraphenylboranat-Derivate her- gestellt, diese durch Diinnschicht-Chromatographie getrennt und naeh Anf~rben mit Eisen(III)-chlorid-Kaliumhexa- cyanoferrat-Reagens mit einem Extinktionsschreiber quan- titativ bestimmt.

Die Nachweisempfindlichkeit yon Adrena l in u n d Noradrenal in sollte mi t unterschiedl ichen Spriih- reagent ien an ak t iv ie r ten :Fertigfolien ermit te l t wer-

den.

ExperimenteUes

Ffir die Untersuehungen dienten Folien, die 30 min bei 100~ im Troekenschrank aktiviert waren. Die Aktivierung erseheint problematiseh, sofern die Platten nieht sofort in einem Exsieeator gelagert werden und beim Probenauf- tragen nicht besonders raseh verfahren wird. Zum Ausgleich mit der umgebenden Atmosphere kommt es bereits in den ersten Minuten; die Erfahrung zeigt, dal~ naeh dora Grad der relativen Luftfeuehtigkeit das Gleichgewieht bereits in 10--20 min erreieht wird, naeh weleher Zeit die aktivierte Platte der urspriinglich nicht aktivierten gleicht. Die Nach- weisgrenzen yon Adrenalin und Noradrenalin mit unter- sehiedliehen Sprfihreagentien sind der Tabelle zu ent- nehmen.

Herstellung der Spris

I. Rhodamin B. _~thanolisehe L5sung (0,025--0,05~ an- schliel]endes Beobaehten der Folien im langwelligen UV- Licht.

H. Diazotierte Sul/anilsgiure (Paulys Reagens). 4,5g Sulfanils~ure werden in 45 ml 12 N Salzs~ure nnter Er- w~rmen gel5st und die L5sung mit Wasser auf 500 ml

Tabelle 1. Diinnsehieht-ehromatographisehe Naehweisgren- zen yon Adrenalin und Noradrenalin an Fertigfolien

Verbindung Spriihl5sung

I I I I I I IV V

1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 ~zg ~g ~g ~g ~g ~g ~tg ~g ~zg ~g

Adrenalin 0,2 -- 0,061,0 0,1 1,0 0,2 1,0 0,1 2,0 Noradrenalin0,2 -- 0,1 1,0 0,1 2,0 0,2 2,0 0,2 2,0

1 = erkennbar ab; 2 = naehweisbar ab.

verdiinnt. 10 ml der verdfirmten LSsung werden im Eisbad gekiihlt und 10 ml einer kalten NatriumnitritlSsung (4,5~ in Wasser) hinzugefiigt. Man h~lt die Misehung 15 min bei 0~ (sie ist bei dieser Temperatur 1--2 Tage bestgndig) und setzt kurz vor dem Bespriihen das gleiehe Volumen einer NatriumearbonatlSsung (10~ in Wasser) zu.

III . Kaliumhexacyano/errat(III). Spriihl6sung: 0,6g Kaliumhexacyanoferrat(III) werden in 100 ml Natronlauge (0,5~ gel5st.

IV. Molybdatophosphorsgure. SpriihlSsung: 5 oder 10% in _~thanol.

Naehbehandlung: Erw~rmen der Folien auf 120~ bis zur optimalen Fleekausbildung.

Bemerkung: Durch Einstellen der Folien in eine mit Ammoniakl5sung beschiekte Kammer (250/0) wird der Untergrund farblos.

V. 2,6-Dibromchlnonchlorimid. SpriihlSsung: 2,6-Dibrom- chinonehlorimidl5sung (0,1--1~ in absolutem Athanol). Naeh etwa 15 min treten die Farbfleeke deutlieh hervor. Die L5sung sollte frisch zubereitet werden.

Literatur

1. Beekett, A. H., Choulis, N. H.: J. Pharm. Pharmacol. 15, 236 T (1963)

2. Choulis, N. M. : Chimica Chronika 80 A, 37 (1965) 3. tIalmekoski, J., Hannikainen, H.: Suom. Kemistilehti

B 86, 24 (1963) 4. Hauptmann, S., Winter, J. : J. Chromatog. 21, 341 (1966) 5. Nishimoto, u Toyoshima, S.: J. Pharm. See. Japan

85, 327 (1965) 6. de Potter, W.P., Vochten, R.F. , de Schaepdryver,

J. F., Heymans, C.: Experentia (Basel) 21, 482 (1965) 7. Teichert, K., Mutsehler, E., Roehelmeyer, H.: Deut.

Apoth.-Ztg. 100, 283 (1960) 8. Thielemann, H.: im Druck 9. Waldi, D.: Arch. Pharm. 295, 125 (1962)

Dr. rer. nat. H. Thielemann DDR-36 Halberstadt Wasserturmstr. 10 Deutsche Demokratisehe Republik