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Laborkurs 6. FS
Zytologie
Punktate,Bronchoalveoläre Lavage
TÄ Julia BreuerMedizinische Tierklinik
Untersuchungsmedien
• Abstriche: Haut, Maulhöhle, Auge
• Oesophagus, Magen, Darm
• Harnblase• Knochenmark
• Blut
• Harn• Liquor cerebrospinalis
• Bauchhöhlenpunktat• Pleurapunktat
• TTL: Trans-TrachealeLavage
• BAL: Broncho-Alveoläre Lavage
Aufarbeitung der Proben
• Ausstrich (direkt / nach Zentrifugation)oder Zytozentrifugation
• Trocknung– Lufttrocknung– Hitzefixation– Fixierspray
• Färbung– Pappenheim, Quick-Diff– Gramfärbung– …..
Beurteilungskriterien Zelle
• Zellzahl• Zelltyp• Zellgröße und –form• Einheitlichkeit• Zelluläre Variationen• Nukleäre Variationen• Nukleus/Zytoplasma-Verhältnis• Verteilung (einzeln / in Haufen)
Beurteilungskriterien Zelle
• Zellzahl
hgr.
ggr.
mgr.
Beurteilungskriterien Zelle
• Zelltyp
Becherzellen
Beurteilungskriterien Zelle
• Zelltyp
Neutrophile Granulozyten
Beurteilungskriterien Zelle
• Zelltyp
Eosinophiler Granulozyt
Beurteilungskriterien Zelle
• Zelltyp
Mitose, Makrophagen, Lymphozyten, rötliche Zellkerne mit Plasma
Beurteilungskriterien Zelle
• Zelltyp
Flimmerepithelzellen
Beurteilungskriterien Zelle
• Zelltyp
Mehrkernige Riesenzelle
Beurteilungskriterien Zelle
• Zelltyp
Schaumiger Makrophage
Beurteilungskriterien Zelle
• Nukleäre Variationen
Mitose
Beurteilungskriterien Zytoplasma
• Volumen• Form• Struktur• Färbung
• Organellen• Einschlüsse• Zellmembran• Funktionelle
Anpassung
Beurteilungskriterien Zytoplasma
• Einschlüsse
Beurteilungskriterien Zytoplasma
• Einschlüsse
Beurteilungskriterien Zytoplasma
• Einschlüsse
Hämosiderophage
Beurteilungskriterien Nukleus
• Zahl• Größe• Form• Lage
• Membran• Einschlüsse• Kernplasma,
Chromatin• Färbung• Nucleoli
Beurteilungskriterien Nukleus
• Zahl
Beurteilungskriterien Nukleus
• Zahl, Form,Größe, Lage
Weitere Beurteilungskriterien
• Fibrin• Blut• Schleim• Exsudat /
Transsudat
• Bakterien• Pilze• Schmutz• Detritus• Nekrose
Weitere Beurteilungskriterien
• Bakterien
Weitere Beurteilungskriterien
• Schleim / Curschmann-Spiralen
Weitere Beurteilungskriterien
• Pilze
Liquor cerebrospinalis
Liquor cerebrospinalis
• Zentralnervöse Erkrankungen– Viral
– Bakteriell– Parasitär
– Traumatisch– Raumgreifende Prozesse
– Gehirnferne Prozesse
Liquorgewinnung (Pferd)
• Postoccipitalpunktion im Foramenatlantooccipitale6 – 8 – 10 cm tief
• Lumbalpunktion auf dem Niveau des Foramen lumbosacrale, Ø ca. 2,5 cm, Nadellänge 15 – 20 cm
Liquorbeurteilung
• Liquordruck• Farbe, Aussehen• Zellzahl• Zelldifferenzierung• Chemische Untersuchung
Liquorbeurteilung: Farbe
• Physiologisch: klar, farblos
• Rotfärbung, die nach Zentrifugation nicht mehr besteht: iatrogen oder sehr geringe Blutung
• Gelbfärbung = Xanthochromie– Freies Bilirubin 48 h nach einer Blutung in den LCS– Konjugiertes Bilirubin kann die Blut-Hirn-Schranke
überwinden (starker Ikterus)– Proteinkonzentration > 1,0 g/l
LCS: Zellzahlbestimmung
• im Zellcounter: Leukozyten / µ l≤ 7 = Referenzwert
• Fuchs-Rosenthal-Zählkammer
LCS: Zellzahlbestimmung
• Fuchs-Rosenthal-Zählkammerwird mit 3 µl beschickt
≤ 20/3 Zellen = Referenzwertmononukleäre Zellen ↑ => Virusinfektionpolymorphkernige Zellen ↑ => bakterielle Infektion
x/3 Zellen = x Zellen in 3 µl Kammerinhalt→ 3/3 Zellen = 1 Zelle / µl
LCS: Zelldifferenzierung
• Zytozentrifuge• Färbung nach Pappenheim• Zellbild:
gesund: v.a. Lymphozyten und Monozyten
LCS: Zelldifferenzierung
• Bakterielle Prozesse: Anstieg der Neutrophilen und des Totalproteins
• Virale Infekte: Anstieg der Lymphozyten und des Totalproteins
LCS: Chemische Untersuchung
• Protein: ↑ bei Veränderung der Blut-Hirn-Schranke, ↑ lokale Synthese
• Protein und Zellzahl ↑: Entzündung / (Blutung)
• Protein ↑, Zellzahl nicht: degenerative Erkrankung, Virus
LCS: Chemische Untersuchung
• Albumin: wird nicht lokal produziert→ Hinweis auf Durchlässigkeit der BHS
• Bei intakter BHS entsprechend der Albuminkonzentration im Blut
• Albumin-Quotient (AQ): Albumin (LCS) mg/l x 10-3
Albumin (Serum) g/l• Erhöht, wenn > 6,15
LCS: Chemische Untersuchung
• Glukose - Konzentration im LCS:60 – 80 % der Blut-Glukose-Konzentrationist physiologisch
• Verhältnis ist vermindert bei bakteriellen Infektionen des LCS und evtl. bei Blutungen
• Normal bei hypo- und hyperglykämischenZuständen
LCS: Chemische Untersuchung
Enzyme (AST, LDH, CK) können bei verschiedenen Erkrankungen erhöht sein
• ↑ Durchlässigkeit der BHS• Freisetzung durch Entzündungszellen,
neoplastische Zellen, oder Mikroorganismen
• CK: verschiedene Isoenzyme beachten(BB, MB, MM)
• CK ↑ infolge Zytolyse der Neuronen
Bauchhöhlenpunktion
Bauchhöhlenpunktion
Bauchhöhlenpunktion
Bauchhöhlenpunktion
Bauchhöhlenflüssigkeit: Normalbefund
• Farblos bis gelblich• Klar• Wässrig• < 5 G Zellen /l• Vorwiegend Neutrophile (bis 90 %)• Mesothelzellen, Lymphozyten• Wenig Eosinophile (bis 2%)• Gesamteiweiß < 25 g/l
Mesothelzellen
Tumorzellen
Bauchhöhlenflüssigkeit
• Trübung bei erhöhter Zellzahl• Protein ↑ bei Entzündung oder
exsudativen Prozessen (Herzinsuffizienz)• Bilirubin, Kreatinin, Harnstoff, Triglyceride:
höhere Konzentration als im Serum = Zeichen für erhöhte Durchlässigkeit von Gallenblase /-gängen, Harnblase, Ductusthoracicus, Lymphbahnen; Pankreas (Amylase)
Bauchhöhlenflüssigkeit
• Transsudat• Exsudat• Hämorrhagisch• Hämolytisch
Bauchhöhlenflüssigkeit
Transsudat: • Klar, farblos• Protein < 25 g/l• Zellzahl < 5 G / l
Bauchhöhlenflüssigkeit
Transsudat – Ursachen: • Hypoproteinämie (↓ kolloidosmotischer
Druck)• Herzinsuffizienz (↑ hydrostatischer Druck
führt zu Rückstau in der Leber)• Chronische Lebererkrankungen
Bauchhöhlenflüssigkeit
Exsudat: • Folge erhöhter vaskulärer Permeabilität
bei Entzündung• Protein > 25 g/l• Zellzahl: > 5 G / l
Bauchhöhlenflüssigkeit
Exsudat – Ursachen:
Aseptisch: • nichtmikrobielle Irritation, z.B. durch sterile
Fremdkörper• Postoperativ (Trauma durch Manipulation der
Organe)
Septisch:• Mikroorganismen
• z.B. bei FIP
BAL
Bronchoalveoläre Lavage
BAL
Normalbefund: • Je > 40 % Lymphozyten und
Makrophagen• 2 – 9 % Neutrophile• 0 – 1 % Eosinophile• Rötliche Zellkerne mit / ohne Plasma
BAL
• RAO (Recurrent airway obstruction): Anteil der neutrophilen Granulozyten ist erhöht auf bis zu 90 %
• Anteil der Lymphozyten und Makrophagen sinkt entsprechend
• Pilzsporen, Curschmann-Spiralen, Schmutzpartikel
BAL
• Eosinophile, Mastzellen: Allergosen(Parasitenbefall)
• Makrophagen: Alveolarmakrophagen; vermindert bei Entzündungen
• Riesenzellen: Zeichen für gesteigerte Phagozytose
• Epithelzellen: bei akuter Bronchitis bzw. Exazerbation bei chron. Bronchitis
BAL
• Creola-Körperchen: Flimmerepithelzellverbände mit oder ohne Zilien, Störung der Regeneration; ↑ bei akuter Bronchitis
• Becherzellen: Zeichen für ZellmetaplasieVorkommen entsprechend Dyskrinie
• Curschmann Spiralen: Zeichen für zeitweilige Verstopfung; small airwaydisease
Einen schönen Nachmittag!
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