1 2 3 4 5 6

SD-TRP-URA SD-TRP-URA X-gal –LEU-TRP

Experiment A: Ergebnisse der X-gal-Topagar-Detektion der -Galaktosidase-Aktivitätaller in der ersten Serie isolierten Mutanten

Gr. 1

Gr. 2

Gr. 3

Gr. 4

Gr. 5

Gr. 6

Gr. 7

wt

1

X-gal –LEU-TRP

Experiment A: Ergebnisse der X-gal-Topagar-Detektion der -Galaktosidase-Aktivitätaller in der zweiten Serie isolierten Mutanten

Gr. 1

Gr. 2

Gr. 3

Gr. 4

Gr. 5

Gr. 6

Gr. 7

wtwtwtwt

2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

13-1

13-2

13-3

13-4

13-5

13-6

13-7

wt

Die Auswertung der Kreuzung dieser Serie dauert noch an.

CDC11

mutD-ha2

CDC11

mutD-ha2

CDC11

mutD-ha2

Experiment C: Cycloheximide Chase Analyse von DHFR-mutD-HA

Experiment C: Quantifizierung der Western Blot Signale von DHFR-mutD-HAnormalisiert gegen die CDC11-Signale

CDC11 DHFRmutD-HA

Experiment C: Quantifizierung der Western Blot Signale von PUP1/2

ON = over nightPup1

PGK

0 1 2 ON

DHFRwt-GFP DHFRmutC-GFP

mutant DHFR proteins fused to GFP

form microscopically detectable aggregates

cells often containdsingle aggregates

no aggregates

Versuch E

Kreuzungen nach Replika

SD ohne Leu, Trp

SD ohne Leu, Trp, His

SD ohne Leu, Trp, Ade

GBDGBD-O

DC

GAD

GAD-ODC

GAD-Oaz1

Two hybrid assay

Versuch C 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

1 JD47-13C ("Wildtyp")2 ump1∆3 beta14 beta2 5 beta36 beta4 7 beta5 8 beta6 9 beta7 10 UMP1-HA

anti-alpha7

anti-beta2

anti-Rpt5