Die funktionelle Rolle von Optineurin

Institut der AnatomieFakultät für Humananatomie und EmbryologieUniversität Regensburg

Glaukom

Optineurin

DMEM high glucose 37°C pH 7.4? Mikroskop

WT-OPTN

„gefloxtes“ OPTN

OPTN KO (frameshift)

komplett KO Mäuse (EIIA Cre Rekombinase, schneidet ab 2 Zell-Stadium, KO ist vererblich, Rekombinase wurde wieder raus gekreuzt)

CTGF: Überexpression unter beta B1 Crystallin Promotor, aktiv in der Linse -> erhöhter Augeninnendruck! Als Glaukommodell, um die Frage zu beantworten, ob Zellen ohne Optineurin evtl. sensibler auf schädigende Einflüsse reagieren

OPTN KO Mäuse mit und ohne CTGF-Überexpression

Genotypisierungen

200300400500

1000

3000

100

200

300400500

1000

3000

100

200300400500

1000

3000

CTGF-PCR (SV40) Flox-PCR

Exon 3-PCR

Spermien

Isolation aus Nebenhoden, in Zellkulturmedium unter dem Mikroskop

(Phasenkontrast) beobachtet. Medium: DMEM high glucose 37°C pH 7.4

Ergebnis: Morphologisch kein Unterschied zwischen KO und WT und

beide motil sowie fruchtbar.

WT KO

OPTN KO Mäuse 6 Monate alt: Axonanzahl und Retinadicke (noch nicht fertig) sowie Elektronenmikroskopie (deshalb haben wir perfundiert)

Ausblick