Im vergangenen Jahr war unser Unternehmen trotz Wirtschaftskrise erfolg-reich. Wir sehen dies als Bestätigung unserer Strategie, hochwertige Produkte für Routine und Forschung in der Labordiagnostik anzubieten und diese mit einem maßgeschneiderten Service zu kombinieren. Unser Fokus liegt auf der Entwicklung z.T. einzigartiger Produktpaletten, die wir mit Unterstützung unserer Kunden und Kooperationspartner kontinuierlich weiterentwickeln. Dabei zielen wir vor allem auf die Bereiche Gastroenterologie, Herz-Kreislauf, Knochenstoff wechsel und oxidativer Stress. So wollen wir auch weiterhin IHREN Bedarf an Immunoassays und Immunochemikalien wecken und de-cken. Dieser Newsletter soll ebenfalls dazu dienen, den Dialog mit unseren Kunden, Kooperationspartnern und anderen Interessenten zu verstärken.

Wir freuen uns daher auf Ihr Feedback sowie die weitere Zusammenarbeit und wünschen Ihnen ein gesundes und erfolgreiches neues Jahr!

Dr. Franz Paul Armbruster, Vorstand

PRODUKTOPTIMIERUNG

Idealer Klinik-Test: MutaPLATE® Norovirus Kit jetzt auch für den SmartCycler

Der MutaPLATE® Norovirus real time RT-PCR Kit (TaqMan) ist ein qualitativer Test zum spezifi schen Nachweis von Noroviren der Ge-

nogruppen I und II in Stuhlproben. Der Assay läuft bereits auf den gängigen PCR-Mikrotiterplatten-systemen, z.B. den Laborautomaten von Applied Biosystems, Stratagene, Corbett Research (Rotor-Gene) und ist nun auch für den SmartCycler von Cepheid adaptiert. Damit ist der schnelle und zu-verlässige MutaPLATE® Norovirustest besonders geeignet für die klinische Routine und epidemio-logische Screenings.

MutaPLATE® Norovirus (KV 1934196)

Mehr Info unter: http://www.immundiagnostik.com/produkte/produkte_testkits.html

Saisonale Infl uenza und Schweinegrippe zuverlässig diagnostizieren mit nur einer RT-PCR

Der MutaPLATE® Infl uenza A & B (+ H1N1) PCR-Kit detektiert zuverlässig sowohl Infl uenza A als auch B Viren und darüber hinaus das H1N1-Virus als Erreger der Schweinegrippe. Die PCR wurde für den RotorGene konzipiert und ist somit auch auf dem Lightcycler 480 einsetzbar.

MutaPLATE® Infl uenza A & B (KE 19004)

MutaREX® und MutaPLEX® Norovirus Kits sichern RNA-Extraktion aus Stuhl

War die RNA-Extraktion überhaupt erfolgreich? Diese Frage beantworten die neuen Norovirus-Kits von Immundiagnostik. Sie verfügen über eine separate interne Kontrolle, die einen unab-hängigen Richtwert für die Extraktionseffi zienz der RNA aus den verwendeten Stuhlproben liefert.

MutaREX® Norovirus (KG 290196)

MutaPLEX® Norovirus (KG 190196)

1 01/ 2010

Newsletter

Immundiagnostik setzt auch 2010 auf Qualitätsprodukte und maßgeschneiderten Service

ID-PRODUKTNEUHEITEN

Zwei ELISA-Systeme ermöglichen erst-mals die personalisierte Überwachung von TNFα Blocker-Therapien

Zur gängigen Behandlung von Patienten mit chro-nisch entzündlichen Darmerkrankungen (CED) oder rheumatischen Beschwerden zählt die Gabe eines Tumor-Nekrose-Faktor-alpha (TNFα) Blockers wie z.B. Infl iximab (Remicade®), Adalimumab (Hu-mira®) oder Enbrel®. Die Langzeiteff ektivität der TNFα Blocker wird beeinfl usst von Bioverfügbar-keit, Pharmakokinetik und Immunogenität dieser Wirkstoff e. Durch Steuerung von Dosierung, Präpa-ratewahl und ggf. Zusatztherapie mit weiteren Im-munsuppressiva kann die Behandlung optimal auf den individuellen klinischen Verlauf eingestellt und Nebenwirkungen reduziert werden.

Überwachung des Wirkstoff spiegels

Die Therapiewirkung der TNFα Blocker hängt in be-sonderem Maße von der Serum-Konzentration des Medikamentes ab. Eine Überwachung des Wirk-stoff spiegels (v.a. des Talspiegels) ist daher ange-zeigt, um sicher zu gehen, dass eine ausreichende Konzentration in der Zirkulation vorliegt und um ggf. Dosierungs-Anpassungen vorzunehmen.

Nachweis therapiegefährdender Antikörpern

Daneben bedingt eine individuell unterschiedliche Immunogenität, dass einige Patienten Antikörper gegen TNFα Blocker (Anti-Drug-Antibodies, ADA) bilden, die einerseits die Wirksamkeit reduzieren und andererseits zu schweren allergischen Reakti-onen führen können. Bei Therapieproblemen sollte daher zusätzlich der ADA-Spiegel bestimmt wer-den.

ELISA-Komplettpaket von Immundiagnostik

Neben der umfassenden Diagnostik zur Diff erenti-aldiagnostik von CED bietet Immundiagnostik nun auch die passenden Werkzeuge für die individuelle Überwachung der TNFα Blocker-Therapie: Unsere ELISAs zur quantitativen Bestimmung des Wirk-stoff spiegels (z.B. Remicade®, Humira®) erlauben die Einschätzung der Bioverfügbarkeit und unsere ELISAs zur ADA-Messung geben Auskunft über die Immunogenität des jeweiligen TNFα-Blockers (z.B. Remicade®, Humira®, Enbrel®). Diese Assays sind die ideale Kombination zum Therapiemonitoring, zur Steuerung der Medikation und damit zur Verwirk-

lichung eines umfassenden Therapieerfolgs mit reduzierten Nebenwirkungen. Zur Erfolgskontrolle können außerdem Darm-Entzündungen bei CED-Patienten mit unserem PhiCal®-Calprotectin-ELISA überwacht werden.

Abb. aus Bendtzen K et al. (2009) Scand J Gastroenterol: Spiegel-messung und ADA-Bestimmung ermöglichen eine individuali-sierte TNFα-Blocker Therapie

Die Notwendigkeit der individuellen Steuerung der TNFα-Therapie war Gegenstand eines von Immun-diagnostik durchgeführten Satellitensymposiums (gesponsort von der Essex Pharma GmbH) auf dem Viszeralmedizinkongress im Oktober 2009.

Bild rechts: Podiums-diskussion zu Diagnos-tik u. Therapie von CED auf unserem DGVS-Satellitensymposium 2009 mit Prof. Dignaß, Priv.-Doz. Dr. Sturm, Prof. Stein (v.l.n.r.).

ELISAs zum TNFa-Blocker-Monitoring

Remicade® (K 9655)

Humira® (K 9657)

ELISAs zum Anti-TNFa-Blocker Nachweis

Humira® (K 9652)

Remicade® (K 9650)

Enbrel® (K 9653)

ELISA zur Calprotectin-Bestimmung

PhiCal® Calprotectin (Stuhl) (K 6937)

secondary non-responders and 1/3 are sustained

responders [38�42]. A similar distribution is seen

in patients with rheumatoid arthritis [43]. To thera-

pists, this poses a challenge that has not yet been

thoroughly addressed. There is, for example, no

consensus on how to continue treatment of patients

with Crohn’s disease that lose response to TNF

inhibitors. At present, the clinician may either con-

tinue treatment and hope for an effect over time,

increase the dosage or decrease the dosing interval,

shift to another TNF inhibitor, or change to another

therapy (pharmacological or surgical). Obviously,

such course of action is not optimal.

With prolonged use of protein drugs, it seems

likely that reliable measurements of bioavailability,

pharmacokinetics and immunogenicity may help

optimize the use of these expensive therapies. In

the case of IBD patients treated with anti-TNF

drugs, primary non-responders with low drug levels

and no antibody formation may benefit from an

increased dosage or decreased dosing interval. In

contrast, primary or secondary non-responders with

either high drug levels or presence of ADAs are not

likely to benefit from increased dosage and should

probably shift to other therapies. In fact, further

complexities may arise when dealing with secondary

non-responders. We have therefore designed an

algorithm which, though not yet validated in clinical

studies, may prove useful in dealing with these

complexities.

As shown in Figure 4, the combined results of

anti-TNF drug (trough) levels and ADA levels in

the circulation provide four possible scenarios for

insufficient clinical responses in IBD patients trea-

ted with anti-TNF antibodies:

1. Low drug trough levels without significant ADA

formation. In such cases, the low drug trough levels

can result from altered kinetics due to low bioavail-

ability (local administration) and/or decreased half-

life in the circulation, for example due to high

consumption in severe disease activity. Conse-

quently, these patients would in theory benefit

from administration of an increased amount of the

currently used anti-TNF drug, using increased

dosage or decreased dosing interval. This seems to

be a more rational approach than changing to

another anti-TNF drug approved for use in IBD,

as evidence indicates that these biologicals are

equally effective (in the absence of ADA).

2. Low drug trough levels combined with high antibody

levels. In such patients, ADAs can prevent the drug

from entering the circulation (local administration),

and/or enhance clearance through immune complex

formation with precipitation in vessels and removal

in the spleen, and/or prevent the drug from entering

sites of inflammation, and/or neutralize the ability of

the drug to inhibit TNF. All of this yields an

insufficient capacity to block TNF and control

disease activity. These patients can in theory benefit

from changing to another TNF inhibitor for which

the patient has not yet developed ADAs. This seems

to be a far more rational and economical approach

than intensifying the current anti-TNF regimen,

Low

High

Drug(trough level)

ADA (trough level)

Low High

Pharmacodynamicproblem

(is TNF involved?)

Non-neutralizing ADA?Low-avidity ADA?

ADA resulting inbioavailability and/or

pharmacokinetic problem

Bioavailability and/orpharmacokinetic problem

Shift to other anti-TNF drug

Repeat test forneutralizing ADA

More intensiveanti-TNF therapy

Shift to other treatment

1. 2.

3. 4.

Figure 4. Four scenarios encountered in patients with insufficient clinical response to anti-TNF antibody drugs. Functional serum trough

levels of anti-TNF drug and trough levels of anti-drug antibodies (ADA) are measured by radioimmunoassays as outlined in Figure 2 and in

the text. Relevant cut-offs for both drug and ADA levels need to be determined by clinical validation (in preparation).

Individual medicine in inflammatory bowel disease 779

Downloaded By: [Medizinische Haupbibliothek] At: 11:33 28 August 2009

Klinische Szenarien bei mangelnderEff ektivität von anti-TNF-Antikörpern

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Newsletter

An dieser Stelle stellen wir wissenschaftliche Publika-tionen vor, deren Autoren unsere Assays verwendet haben.

ß-Defensin-2: Verlässlicher Stuhl-Marker für Colitis ulcerosa und mehr

ß-Defensine sind anti-mikrobielle Peptide zum Schutz der Darmmukosa, die Krankheitserreger durch Membranpermeabilisation unschädlich ma-chen. Die gesunde Darmschleimhaut exprimiert konstitutiv ß-Defensin1, während ß-Defensin2 nur bei Entzündung gebildet wird. Für die Laboranaly-tik ist die hohe Stabilität von ß-Defensin2 im Stuhl (1 Woche bei 4°C) von besonderem Vorteil.

Die Publikation von Kapel et al. (s. grauer Kasten) beschreibt eine französische Pilotstudie, die fä-kale ß-Defensin-2 Spiegel bei Kindern als Marker zur Unterscheidung von entzündlichen und nicht entzündlichen Darmerkrankungen untersucht hat. Dazu wurden Stuhlproben von 46 Kindern (dar-unter 15 gesunde Kontrollen) mit bestätigter ent-zündlicher Darmerkrankung (einschl. Endoskopie, Histologie, Radiologie) analysiert. Die Konzentrati-on von fäkalem ß-Defensin-2 wurde mit unserem quantitativen ELISA gemessen und mit den Ent-zündungsparametern Calprotectin und TNFα ver-glichen.

Abb 1.: ß-Defensin-2 Konzentrationen (HBD2) von 46 Kindern mit Morbus Crohn (CD), Colitis ulcerosa (UC), entzündlicher Co-litis, bzw. gesunden Kontrollen (Controls), gemessen mit dem Immundiagnostik-ELISA. (Fig. 2 aus Kapel et al., 2008)

Unser ELISA detektierte reproduzierbar ß-Defen-sin-2 in allen Stuhlproben. Bei gesunden Proban-den lag die ß-Defensin-2 Konzentration im Mittel bei 13 ng/g, während IBD Patienten einen deut-lich höheren Wert von 125 ng/g aufwiesen. Von

diesen lieferten 5 Colitis Ulcerosa Patienten mit 356 ng/g im Mittel die höchsten Konzentrationen (s. Abb.1). Trotz deutlicher Darmentzündung lag interessanterweise der ß-Defensin-2 Wert bei den Morbus Crohn Patienten nie über 200 ng/g. Die ß-Defensin-2 Werte korrelierten positiv mit den Cal-protectin-Konzentrationen.

Die Autoren schließen aus den Daten, dass ß-Defensin-2 bei gesunden Individuen nur in gerin-gen Mengen im Stuhl zu fi nden ist. Bei entzündli-chen Darmprozessen hingegen wird das ß-Defen-sin-2 hochreguliert und in den Stuhl abgegeben. Weiterhin schlagen sie ß-Defensin-2 als Diff eren-zialmarker zwischen Colitis Ulcerosa und Mor-bus Crohn vor, da sich diese CED-Subtypen durch eine unterschiedliche Regulation der mukosalen Abwehrmechanismen unterscheiden.

Abb. 2: Struktur des

humanen β-Defensin 2

ELISA-Test-Kits aus unserem Portfolio:

HNP 1-3 (= human neutrophile peptides 1-3, = α-Defensine 1-3) (KHHK317)

β-Defensin 2 (hBD2) (K 6500)

β-Defensin 5 (hBD5) (K 6515)

β-Defensin 6 (hBD6) (K6516)

Daneben bieten wir eine Vielzahl von Antikör-pern mit den entsprechenden immunogenen Peptiden (Antigenen) an.

Kapel et al. (2008) Fecal β-Defensin-2 in Children With Infl ammatory Bowel DiseasesJ Ped Gastroenterol and Nutr 48:117–120

ID-PRODUKTE IM LITERATURSPIEGEL

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TERMINE TERMINE TERMINE

• Online-Seminar der GanzImmun Akademie (http://www.ganzimmun.de/):„Die Rolle von ADMA/SDMA zur Vorhersage kardiovaskulärer Ergeignisse“ Dr. Karl-Heinz Kellner (Termin noch off en)

• 5th Congress of ECCO (European Crohn’s and Colitis Organisation)25. – 27. Februar 2010, Prag, CZ

• Osteologie-Kongress03. – 06. März 2010, Berlin

• 53. Symposium der Deutschen Gesellschaft für Endokrinologie03. – 06. März 2010, Leipzig

IN VINO SANITAS

Photometrische Tests bestimmen antioxidative Wirkung von Wein

Antioxidantien nehmen eine Schlüsselfunktion bei der Vorbeugung von Herzinfarkt ein. So verhindern sie u. a. die Anlagerung von Blutfetten an die Arte-rienwände und senken somit das Thromboserisiko. Weintrauben besitzen wirkungsvolle Antioxidan-tien, die bei der Weinherstellung extrahiert und angereichert werden. Besonders Rotwein enthält viele Antioxidanzien–etwa zehnmal mehr als Weiß- oder Roséwein. Doch welche Sorte und wieviel davon eignet sich zum Schutz des Herz-Kreislauf-Systems?

Senden Sie uns eine Weinprobe!

Wir analysieren für Sie die antioxidative Kapazität und erstellen Ihnen ein aussagekräftiges Zertifi kat über die Schutzwirkung im Vergleich zu Vitamin C.

Praxis auf den Punkt gebracht

TIPP Aktualisierte ELISA-Arbeitsanleitungen

beachten

Die Immunoassays von Immundiagnostik werden fortlaufend im Dialog mit Anwen-dern für die Praxis optimiert. So können sich beispielsweise Inkubationszeiten oder Re-ferenzbereiche zur Messung verändern. Bei Neubestellungen bzw. neuen Chargen sollte daher auf Änderungen im Protokoll geachtet werden. Im Zweifelsfall steht unser Laborper-sonal gerne für Rückfragen zur Verfügung.

Für die Analyse setzen wir unsere photometrischen Testsysteme zur Bestimmung des oxidativen Po-tentials (PerOx) und der antioxidativen Kapazität (ImAnOx) ein. Die Assays bestimmen das Verhältnis von oxidativen und antioxidativen Stoff en und sind für den Einsatz in der medizinischen Diagnostik zur Ermittlung der oxidativen Stressbelastung entwi-ckelt worden.

Immundiagnostik AGStubenwald-Allee 8aD-64625 Bensheim Tel.: +49 (0) 62 51/70 19 00Fax: +49 (0) 62 51/84 94 30 info@immundiagnostik.comwww.immundiagnostik.com 4

01/ 2010

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