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nina-smith
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Referat klin. Chemie
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HIVDiagnostik und Verlaufskontrolle
Referat
KlassifizierungFamilie der RetrovirenHIV-1 (Gruppe M,N,O; Subtypen A-K)HIV-2 (Subtypen A-F)in Europa/ USA: v. a. HIV-1 M:B
Herkunfthnliche Viren bei Affen sehr verbreitet (SIV)Vor 70-80 Jahren bergang auf den Menschen:In Zentralafrika: HIV-1In Westafrika: HIV-2Durch Globalisierung weltweite Ausbreitung v. a. des HIV-1
Allgemeinesbertragung durch Sexualkontakte, BlutCharakteristisch: lange Inkubationszeit von 10-15 JahrenDoppelinfektionen mit 2 verschiedenen Typen mglichIm Verlauf evtl. VirusmutationAnonymisierte Meldepflicht
Das VirusKapsid mit 2 linearen RNA-GenomenSpike-tragende Auenhlle
TestverfahrenEinverstndniserklrung des Patienten ntigOberste Regel: Ausschluss von Irrtmern im gesamten ArbeitsablaufBei reaktiver Probe: IMMER 2. Blutprobe abnehmen und erneut kontrollieren
Test auf HIV-AntikrperELISA: gentechnologisch hergestelltes Antigen aus VirusstrukturkomponentenTests sollten alle HIV-1/-2-Subtypen erfassen3- 4 Wochen nach Infektion (lebenslang) nachweisbare Antikrperbildungpositives Ergebnis wird mit alternativen Methoden berprft (v. a. Western-Blot), da evtl. Kreuzreaktion anderer Antikrper
Alternative MethodenWestern-Blot: Elektrophorese der HIV-Strukturproteine, dann wie ELISA mit definierten AntigenenMindestzahl von Immunkomplexen schliet unspezifische Kreuzreaktion aus
Alternative MethodenRadioimmunprzipitationsassay :hnlich wie Western-BlotRadioaktiv markierte HIV-Strukturkomponenten werden mit Antikrpern inkubiertPrzipitation, Dissoziation, Elektrophorese, autoradiographische Darstellung
Alternative MethodenIndirekte Immunfluoreszenz:charakteristische Fluoreszenzmuster von an infizierte Zellen gebundenen Antikrpern
Alternative MethodenLiquorprobe:Antigen-Antikrper-Reaktion im Vergleich zum PlasmaWenn reaktive Banden sichtbar: intrathekale AntikrperproduktionFolge einer zustzlichen ZNS-Infektion mit HIV
Test auf HIV-AntigeneSeparater Test auf alle Strukturproteine des HIVPositiv: wenn Reaktion mit gp120 oder gp41 und min. einem weiteren StrukturproteinKontrolle mit 2. BlutprobeBesttigt seropositiv: HIV-Trger3-6 Wochen nach Infektion Antigene im Serum nachweisbar
Test auf HIV-AntigeneMessung des p24-Antigens (Hauptkomponente der inneren Viruskapsel)Bis zu 10 Tage frher positiv als AntikrpertestNur im Einzelfall durchgefhrt (Kosten-Nutzen-Analyse)
Virusisolierungaus EDTA-Blut, Plasma, isolierten Lymphozyten, mononukleren Zellen Dauer: ca. 6 WochenNicht fr RoutinemessungBestimmung des Infektionstiters ber freigesetztes p24-AntigenHinweis zur Prognose
Molekularbiologische VerfahrenBestimmung der Virmie mittels HIV-RNA im PlasmaDer quantitativen HIV-Antigen-Messung berlegenAuerordentlich hohe Sensitivitt und SpezifittPCR hat sich durchgesetztNachteil: relativ teuer
Molekularbiologische VerfahrenPCR:Untere Nachweisgrenze: 200 Virusquivalente/ lHIV-RNA bereits 1-2 Wochen nach Infektion im Plasma nachweisbarPrognostisch ungnstig: > 10000 Genomkopien
Molekularbiologische VerfahrenGenotypisierung:cDNA-Sequenzierung des HIV-Stammes, wenn Verdacht auf therapieresistente Variation des Virus Virmieanstieg unter Therapie Therapiewechsel
Virmie (Viruslast)Therapie-/Verlaufskontrolle: Absinken der HIV-Replikation unter Nachweisgrenze ist TherapiezielMenge der HIV-RNA im Plasma korreliert mit Krankheitsprogression & berlebenszeitVirmie ist entscheidender Prognosefaktor
VerlaufskontrollenBlutbildHIV-Serologie (anti-p24-Antikrper, p24-Antigen)Lymphozytentypisierung (CD4/ CD8)Quotient CD4-/ CD8-Zellzahl 2-MikroglobulinEvtl.Serumspiegel der antiretroviralen Medikamente
VerlaufskontrollenHIV-RNA-Bestimmung alle 3-4 Monate fr Prognose/ TherapiekontrolleWenn Therapieentschluss: auch unmittelbar vor Beginn, nach 4 Wochen, alle 3 Monate Therapieeffekt an Zunahme der CD4-Zellen und Rckgang der Viruslast feststellbar
Ungnstige PrognoseErhhte Viruslast (>10000 Kopien/ml) bei 1. UntersuchungAnstieg der Viruslast, Persistenz bei >10000 Kopien/mlAbfall der CD4-ZellzahlAnstieg des 2-MikroglobulinProgression des klinischen StagingsSpter Therapiebeginn
FragenWelche Testverfahren werden beimHIV-Screening angewendet?DNA-SequenzierungTest auf HIV-AntikrperVirusisolierungTest auf HIV-AntigenUrinsediment
FragenAlternativ durchfhrbare Methoden der HIV-Diagnostik sind?RadioimmunprzipitationsassayIndirekte ImmunfluoreszenzLiquordiagnostikTest auf occultes Blut im StuhlELISA auf HIV-Antikrper
FragenWichtige Marker zur Prognose derHIV-Infektion sind?CD4-ZellzahlThrombozytenzahlHmoglobinGlucose im UrinVirmie
QuellenThomas, Lothar: Labor und Diagnose, 7. Auflage, TH-BooksHusstedt, I. W. (Hrsg.): HIV & AIDS, SpringerHirschel, Bernhard: AIDS- Diagnose, Betreuung, Behandlung, 2. Auflage, Hans HuberRenz, Harald: Praktische Labordiagnostik, de GruyterHerold, Gerd: Innere Medizin 2011
Vielen Dank fr eure Aufmerksamkeit!