Tierversuchsfreie Forschung - uni-muenster.de · Grundgesetz Absatz II Artikel 20a (Schutz der Tiere im Sinne der Nachhaltigkeit)

Pharmakologie WS 06/07 1

Tierversuchsfreie Forschung

Christina LohmeierJulia MackJuliane MenkeBirgit MeyerKerstin MeyerAlexa Meyer-Schwickerath

http://www.kaninchenhilfe.at/de/img/tierversuch.jpg


Tierschutzgesetz• Schutz der Tiere ist gesetzlich festgelegt

im

• Grundgesetz Absatz II Artikel 20a(Schutz der Tiere im Sinne der Nachhaltigkeit)Artikel 20a Der Staat schützt auch in Verantwortung für die künftigen Generationen die natürlichen Lebensgrundlagen und die Tiere im Rahmen der verfassungsmäßigen Ordnung durch die Gesetzgebung und nach Maßgabe von Gesetz und Recht durch die vollziehende Gewalt und die Rechtsprechung


Tierschutzgesetz

Tierschutzgesetz §7(Tierversuche im gesetzlichen Rahmen definiert)

§ 7(1) Tierversuche im Sinne dieses Gesetzes sind

Eingriffe oder Behandlungen zu Versuchszwecken 1. an Tieren, wenn sie mit Schmerzen, Leiden oder

Schäden für diese Tiere oder2. am Erbgut von Tieren, wenn sie mit Schmerzen,

Leiden oder Schäden für die erbgutveränderten Tiere oder deren Trägertiere verbunden sein können.


Tierschutzgesetz(2) Tierversuche dürfen nur durchgeführt werden,

soweit sie zu einem der folgenden Zwecke unerlässlich sind:

1. Vorbeugen, Erkennen oder Behandeln von Krankheiten, Leiden, Körperschäden oder körperlichen Beschwerden oder Erkennen oder Beeinflussen physiologischer Zustände oder Funktionen bei Mensch oder Tier,

2. Erkennen von Umweltgefährdungen,3. Prüfung von Stoffen oder Produkten auf ihre

Unbedenklichkeit für die Gesundheit von Mensch oder Tier oder auf ihre Wirksamkeit gegen tierische Schädlinge

4. Grundlagenforschung


EU-Richtlinien (86/609/EWG)

• Zur Vereinheitlichung der bestehenden einzelstaatlichen Rechtsvorschriften

• Zur Beseitigung von Unterschieden für den gemeinsamen Europäischen Markt

• Enthalten genauere Anweisungen für die Durchführung von Tierversuchen


Betreuende StellenZEBET: Zentralstelle zur Erfassung und Bewertung von

Ersatz- und Ergänzungsmethoden zumTierversuch (1989)

- Dokumentation- Bewertung- Nationale & internationale Anerkennung

Anim Alt-ZEBET:- Datenbank für Alternativmethoden


Betreuende Stellen

ECVAM: European Centre for Validation of alternative methods (Italien)

- Entwicklung und Anerkennung von neuen tierversuchsfreien Testmethoden

DIMDI: Deutsches Institut für Medizinische Dokumentation und Information


Die Drei R´s

Nach Russel und Burch 1959


Die Drei R´s

• Konzept:- 1959 von englischen Wissenschaftlern vorgestellt- Wissenschaftliches Arbeiten und der humane Umgang

mit Tieren im Tierversuch stehen in einem engen Zusammenhang

• Grundsätze:Belastung für die Tiere vermindernAnzahl der Tiere reduzierenwenn möglich Alternativmethoden einsetzen


1.Reduce- Tierversuche mit Schweregrad 3 reduzieren

( Eingriffe, die beim Tier starke Schmerzen/ schwere Schäden/… auslösen)

Auswirkungen:+ Ab 2009 darf die Kosmetikindustrie keine Inhaltsstoffe

mehr am Tier testen!- Alternativmethoden nur zusätzlich angewendet (mehr

Werte/Informationen)- Nicht weniger Versuche, nur mehrmals am selben Tier

(hebt Statistik!)- Verlegung der Tierversuche in das Ausland


Reduce• CADD: Computer assisted

drug development

- Simulation der BindungskräfteWirkstoff <=> Rezeptor

- Manipulation der Stoffe am Computer

- Vorauswahl der wirksamstenStoffe bzw. erkennen toxischerSubstanzen

- kein Ersatz, aber Eliminationtoxischer und unwirksamerSubstanzen aus demEvaluationsverfahren


Refine

• Lebensumstände für das Tier verbessern- artgerechte Haltung:o Unterbringung, Umgebung …o Soziale Kontakte und arttypisches Verhalten

ermöglicheno Bewegungo Pflege

o Wohlbefinden


Refine

- Stress-Situationen vermeiden(gleiche Bedingungen sorgen für bessere Vergleichbarkeit der Daten)

- schmerzfreie bzw. schmerzarme, schnelle Durchführung

- Wenn nötig schnelle, schmerzfreie Euthanasie


Replace

• In-vivo-Versuche durch In-vitro-Versuche ersetzen

• Alternativmethoden:o Zellkultureno Computermethodeno TecnoMouseo HET-CAMo …


Alternativ-Methoden

1. HET-CAM-Test (hens egg test-chorio-allantoic membrane)

Draize-Test HET-CAM-Test


Alternativ-Methoden• Draize-Test:- Applikation evtl. augenreizender Substanzen in

das Kaninchenauge

• Testprinzip HET-CAM:- Wirkungen von Prüfsubstanzen auf Chorion-

Allantois-Membran eines 9 Tage bebrüteten Hühnereis

- Das zeitabhängige Auftreten verschiedener Reaktionstypen wird erfasst (5min)


Alternativ-Methoden

- Mögliche Reaktionen:o Hämorrhagieo Gefäßlysiso Koagulation

- zeitliches Auftreten der Reaktionen korreliert mit der Reizstärke

- Videoanalyse zur Beobachtung


HET-CAM-Vorbereitung


HET-CAM-Reaktionstypen

Unbehandelte Chorion-Allantois-Membran Hämorrhagien

Lysis von Kapillaren und Gefäßen Intravasale Koagulation


Alternativ-Methoden

• Tests auf Genotoxizitäta) Comet-Assay

Inkubation mit PrüfsubstanzenDetektion von einzelnen Zellen, die DNA-Schäden aufweisen mit Hilfe von elektrophoretischer Technologie

b) Mikro-Kerntest Wenn Zellkerne bei Zugabe der Testsubstanz kleine (Mikro-) Kerne abspalten, so ist das ein Hinweis auf krebserzeugende oder erbgutverändernde Wirkung. Je mehr Mikro-Kerne, desto gefährlicher die Substanz.

Test bei Mensch und Tier


Alternativ-Methoden• Der Bioreaktor

Er ersetzt qualvolle Mäuseversuche. Im Bioreaktor werden in zwei Kammern monoklonale Antikörper produziert. Eine Membran zwischen den Kammern lässt in die eine Richtung die Nährflüssigkeit für alle Zellen durch, in die andere werden schädliche Zellausscheidungen abgeleitet.

• Plazenta (Nachgeburt) Die Nachgeburt ist ein vielseitig anwendbares Modell zur Testung von Zellschädigungen durch Giftsubstanzen sowie zur Filtration von Nährstoffen. Auch eignet sie sich wegen ihrer feinen und feinsten Blutgefäße zur Übung von Nähten in der Mikrochirurgie


Alternativ-Methoden• Limulus-Test

Limulus ist ein Pfeilschwanzkrebs, dessen Lymphe bei Gifteinwirkung geliert. Nach schmerzfreier Entnahme wird das Tier unversehrt freigelassen.

• Episkin Menschliche Hautzellen (Keratinozyten) eines dreidimensionalen künstlichen Hautmodells lassen eine Prüfung zu, ob eine auf die Haut aufgetragene Substanz Reizungen verursacht. Bisher wurden diese Stoffe auf rasierte Kaninchenhaut aufgetragen und die Hautschädigung protokolliert.


Alternativ-Methoden• Pyrogentest (Prof. Wendel, Dr. Hartung,

Konstanz) Eine kleine Menge menschlichen Blutes wird im Reagenzglas zur Prüfungssubstanz gegeben. Der Botenstoff des Immunsystems, der dem Organismus eine eventuelle Fieberreaktion meldet, wird exakt gemessen. So lassen sich bakterienverunreinigte Medikamentenbestandteile finden, die hohes Fieber und tödliche Schocks auslösen.

Früher wurden diese Substanzen Kaninchen eingespritzt und deren Fieber gemessen.


Alternativ-MethodenTest auf Embryotoxizität• EST (Embryonaler Stammzellen-Test)

- Stammzellen der Maus werden mit Test- Substanzen versetzt

Nach 10 Tagen Zählung der kontrahierenden Myokardeje weniger, desto toxischer ist die Test-Substanz

Es kann nur auf embryotoxische Substanzen getestet werden


Alternativ-Methoden


Alternativ-Methoden

• DSSDecision Support System

- Computergestütztes System

hilft halbstrukturierte Probleme zu lösen

Zugang und Nutzung von Daten und analytischen Modellen


Diskussion• Nicht reproduzierbare

Ergebnisse

• Tests an kompletten Organismen notwendig, gerade über lange Zeit

• Schweregrad III „Komplettverwertung“ reduziert Tieranzahl

• Computersimulationen können Tierversuche einschränken

• Ersatzmethoden können Tierversuche teilweise reduzieren

• Allgemeine Tierversuchsanzahl Versuche im Ausland


Diskussion• Volksentscheide

(Schweiz) schließen Tierversuche nicht aus

• Grundbedarf gesetzlich vorgeschrieben aber Risiko variabler Versuchsergebnisse durch inhomogene Lebensbedingungen

• Artgerechte Haltung


Diskussion• Nur bei 3%,

meistens Schmerzlinderung

• Keine reproduzierbaren Zellkolonien

• In Deutschland LD 50 Tests nicht mehr notwendig

• Qualvoller Tod der Tiere

• Verwendung von „Operationsmüll“

• Arzneimittel die in die USA exportiert werden, LD 50 Werte notwendig


Diskussion

• Ab 2009 verboten

• Dokumentations- stellen vorhanden Infos zu bereits durchgeführten Tierversuchen

• Tierversuche für Kosmetika

• Doppelt- und Dreifach- Tests

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