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4. Analyse yon biologisehem Material 313 fugiert 10 rain bei 1500 U/rain. 3 ml der iiberstehenden LSsung werden in eine Photo- meterkiivette, die 1 ml des Sehwefels/~ure-SMzs~tnregemisches enthilt, pipettiert und 15 min auf 40 ~ C erw~rmt. Dann setzt man 1 m] 0,01 n Cer(IV)-ammoniumsulfat- 15sung zu (3,17 Cerammoniumsulfat werden in 300 ml Wasser gelSst, 84 nil konz. Sehwefelsiure zugesetzt und auf 500 ml aufgeffillt), man sehiittelt um, 1/~Bt das Gemiseh weitere 6 rain bei 40 ~ C stehen und mil~t dann die Extinktion in einem Beckman-Spektralphotometer B bei 420 m# gegen Wasser. -- KaliumarsenitlSsung. 4,95 g Arsentrioxyd werden in 100 ml koehendem Wasser gelSst, das 6 ml 5 n Kali- lauge enth~lt; man verdiinnt in einem 500 ml-l~IeBkolben auf etwa 300 ml mit Wasser, neutralisier~ mit 4,3 ml einer 7 n Sehwefels~ure-Salzs~urel5sung aus 98 ml konz. Sehwefels~ure und 50 g Natriumehlorid, gelSst in 500 ml Wasser und fiillt zur iV[arke auf; zu 2 Teilen dieser LSsung gibt man 3 Teile Wasser. 1 Scand. J. elin. Labor. Invest. 10, 272--277 (1958). Univ. Turku (Finnland). -- 2 BARKER, S. B., 3/I. J. HVMr~REY u. M. It. SOLEY: J. elin. Invest. 30, 55 (1951); vgl. diese Z. 135, 458 (1952). U~svLi BAv~x~ t~ber die Bestimmung des proteingebundenen radioaktiven Jods berichtet L. K . Ct:IRIST]~NS]~N 1. ])as Protein wird mit Triehloressigsiure gef~ll~ mid naeh sorgf~l~igem Auswaschen des radioaktiven, anorganischen Jods, wird die Aktivit~tt des Niedersehlages gemessen. -- Arbeitsweise. 12,5 ml Serum aus 40 ml Blur werden mit 4 ml 40~ Trichloressigsiure versetzt und durehgertihrt. Naeh einigen Minuten wird die LSsung 3 rain mit 2500 U/rain zentrifugiert. Die /iberstehende LSsung wird abgegossen, der I~fiekstand mit 1--2 ml l~ KaliumjodidlSsung versetzt. Naeh dem Durchrtihren fiillt man das Zentrifugenglas (16 mm • 112 ram) his knapp zur H~lfte mit l~ KaliumjodidlTsung, fiillt mit 20~ Trichlor- essigsiure auf und zentrifugiert wieder. Dieser Wasehvorgang wird mindestens drei- real wiederholt. Seren, die friiher Ms 24 Std naeh der Eingabe des Jodids untersueht werden, miissen f/infmal ausgewasehen werden. Der Niedersehlag wird 10 oder 30 rain in einem Seintillationszihler gepr/ift. Eine StandardlSsung wird zum Zeitpunkt der Eingabe angesetzt und auf i00 ml aufgeffillt; zum Zeitpunkt der Untersuehung des Niedersehlages wird 0,1 ml mit 3 ml Wasser verdfinnt und als Standard vermessen. 1Scand. J. elin. Labor. Invest. 10, 211--215 (1958). Gentofte Hospital, Kopenhagen (Dinemark). H. ZI~ME~ Eine spezifisehe 3lethode zur Bestimmung yon ]~isen in Serum griinden V. T. POSlTANO und L. L. ~u 1 auf die Bildung des Eisen(II)-farbkomlolexes mit 4,7- Diphenyl-l,lO-phenanthrolin (Bathophenanthrolin, BP), der sieh bei pl~4 mit Isoamylalkohol quantitativ extrahieren l~flt. Kupfer stSrt niehL -- Ausfiihrung. In einem 15 mm-Reagensglas versetzt man I ml Serum mit 1 ml 2 n Salzs~ure, riihrt, 1/~13t 10 rain stehen, ffig~ 1 ml 20~ Triehloressigs~ure hinzu, rtihrt, l~flt wieder 10 rain stehen und zentrifugiert naeh Bedeeken nit Polyithylenkappen 30 min bei 3000 U/rain. Zum 17berstand gibt man 3 ml 10~ Natriumaceta~lSsnng 2 mt 10~ HydroxylammoniumchloridlSsung, rfihrt, fiigt 1 ml 0,001 m BP- LSsung (0,0332 g in 50 ml J~thanol 15sen und mit 50 ml Wasser verdiinnen) hinzu, rfihrt gut und 1/~gt nnter gelegentliehem giihren 5 rain stehen. Nach Zugabe yon 5 ml Isoamylalkohol bedeekt man mit Polys sehfittelt 2 rain krifVig, zentrifugiert 5 min, mil3t die Extinktion in der organisehen Phase gegen einen Rea- gensblindwert bei 534 m/~ und vergleieht mit einer Standardkurve. Die Prozent- angaben sind in Gew.-Vol. Samtliehe Reagentien mtissen natiirlieh eisenfrei sein. i j. Lab. elin. Med. 52, 912--914 (1958). Brooklyn Hosp., N.Y. (USA). E. ~IffLLNR, Wfirzburg

Über die Bestimmung des proteingebundenen radioaktiven Jods

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Page 1: Über die Bestimmung des proteingebundenen radioaktiven Jods

4. Analyse yon biologisehem Material 313

fugiert 10 rain bei 1500 U/rain. 3 ml der i iberstehenden LSsung werden in eine Photo- meterkiivette, die 1 ml des Sehwefels/~ure-SMzs~tnregemisches en th i l t , p ipet t ier t und 15 min auf 40 ~ C erw~rmt. Dann setzt man 1 m] 0,01 n Cer(IV)-ammoniumsulfat- 15sung zu (3,17 Cerammoniumsulfat werden in 300 ml Wasser gelSst, 84 nil konz. Sehwefelsiure zugesetzt und auf 500 ml aufgeffillt), man sehiittelt um, 1/~Bt das Gemiseh weitere 6 rain bei 40 ~ C stehen und mil~t dann die Ext ink t ion in einem Beckman-Spektra lphotometer B bei 420 m# gegen Wasser. - - KaliumarsenitlSsung. 4,95 g Arsentr ioxyd werden in 100 ml koehendem Wasser gelSst, das 6 ml 5 n Kali- lauge enth~lt ; man verdi innt in einem 500 ml-l~IeBkolben auf etwa 300 ml mit Wasser, neutralisier~ mit 4,3 ml einer 7 n Sehwefels~ure-Salzs~urel5sung aus 98 ml konz. Sehwefels~ure und 50 g Natr iumehlorid, gelSst in 500 ml Wasser und fiillt zur iV[arke auf; zu 2 Teilen dieser LSsung gibt man 3 Teile Wasser.

1 Scand. J. elin. Labor. Invest . 10, 272--277 (1958). Univ. Turku (Finnland). - - 2 BARKER, S. B., 3/I. J . HVMr~REY u. M. It . SOLEY: J. elin. Invest . 30, 55 (1951); vgl. diese Z. 135, 458 (1952). U ~ s v L i B A v ~ x ~

t~ber die Bestimmung des proteingebundenen radioaktiven Jods ber ichte t L. K. Ct:IRIST]~NS]~N 1. ])as Protein wird mi t Triehloressigsiure gef~ll~ mid naeh sorgf~l~igem Auswaschen des radioaktiven, anorganischen Jods, wird die Aktivit~tt des Niedersehlages gemessen. - - Arbeitsweise. 12,5 ml Serum aus 40 ml Blur werden mit 4 ml 40~ Trichloressigsiure versetzt und durehgertihrt. Naeh einigen Minuten wird die LSsung 3 rain mit 2500 U/rain zentrifugiert. Die / iberstehende LSsung wird abgegossen, der I~fiekstand mi t 1- -2 ml l~ KaliumjodidlSsung versetzt. Naeh dem Durchrt ihren fiillt man das Zentrifugenglas (16 m m • 112 ram) his knapp zur H~lfte mit l~ KaliumjodidlTsung, fiillt mi t 20~ Trichlor- essigsiure auf und zentrifugiert wieder. Dieser Wasehvorgang wird mindestens drei- real wiederholt. Seren, die friiher Ms 24 Std naeh der Eingabe des Jodids untersueht werden, miissen f/infmal ausgewasehen werden. Der Niedersehlag wird 10 oder 30 rain in einem Seinti l lat ionszihler gepr/ift. Eine StandardlSsung wird zum Zei tpunkt der Eingabe angesetzt und auf i00 ml aufgeffillt; zum Zei tpunkt der Untersuehung des Niedersehlages wird 0,1 ml mi t 3 ml Wasser verdfinnt und als S tandard vermessen.

1Scand. J. elin. Labor. Invest . 10, 211--215 (1958). Gentofte Hospital, Kopenhagen (Dinemark) . H. ZI~ME~

Eine spezifisehe 3lethode zur Bestimmung yon ]~isen in Serum griinden V. T. POSlTANO und L. L. ~u 1 auf die Bildung des Eisen(II)-farbkomlolexes mit 4,7- Diphenyl-l,lO-phenanthrolin (Bathophenanthrolin, BP), der sieh bei pl~4 mi t Isoamylalkohol quant i ta t iv extrahieren l~flt. Kupfer stSrt niehL -- Ausfiihrung. In einem 15 mm-Reagensglas versetzt man I ml Serum mi t 1 ml 2 n Salzs~ure, ri ihrt , 1/~13t 10 rain stehen, ffig~ 1 ml 20~ Triehloressigs~ure hinzu, rtihrt, l~flt wieder 10 rain stehen und zentrifugiert naeh Bedeeken ni t Po ly i thy lenkappen 30 min bei 3000 U/rain. Zum 17berstand gibt man 3 ml 10~ Natriumaceta~lSsnng 2 mt 10~ HydroxylammoniumchloridlSsung, rfihrt, fiigt 1 ml 0,001 m BP- LSsung (0,0332 g in 50 ml J~thanol 15sen und mit 50 ml Wasser verdiinnen) hinzu, rfihrt gut und 1/~gt nnter gelegentliehem g i ih ren 5 rain stehen. Nach Zugabe yon 5 ml Isoamylalkohol bedeekt man mit Polys sehfittelt 2 rain krifVig, zentrifugiert 5 min, mil3t die Ext ink t ion in der organisehen Phase gegen einen Rea- gensblindwert bei 534 m/~ und vergleieht mi t einer Standardkurve. Die Prozent- angaben sind in Gew.-Vol. Samtliehe Reagent ien mtissen natiirlieh eisenfrei sein.

i j . Lab. elin. Med. 52, 912--914 (1958). Brooklyn Hosp., N.Y. (USA). E. ~IffLLNR, Wfirzburg