4. Analyse yon biologisehem 1V[aterial 343 zentrifugiert. Die ~2Brige Schicht wird eingedampft, der Rfieks~an4 in Wasser gelSst un4 in einem aliquoten Tell das Sulfat mit Benzidin gefs i Bioohim. biophysioa Acta (Amsterdam) 31, 272--274 (1959). McLean Hosp., Waverley, und Harvard ivied. School, Boston, Mass. (USA). -- ~ V~ SLu D. D., u. J. FOLCH: J. biol. Chemistry 186, 509 (1940); F~Rn~GTO~, P. S., C. :N~zg~_~ u. E. H. Sw~T: Analy% Chemistry 21, 1423 (1949); vgl. diese Z. 182, 146 (i951). -- 3 ViN SLX~KE, D. D., u. W. Rrm3~.Iq: J. biol. Chemistry 156, 743 (1944). URSULi B i v ~ _ ~ ]~ine photometrische Methode zm" Bestimmung yon Etsen in Pferdeserum wird yon I. Rv~uI6 un4 V. GR~Gor, ow~i beschrieben. Das Eisen wird mit Trichlor- essigsanre bei 90--95~ C extrahiert uncl cl~nn in den Dipyridylkomplex iibergefiihr~. Die verwendeten Reagentien, Filter, Glasgerate mfissen mSglichst eisenfrei ge- macht werden. Bei der Blutentnahme diirfen nut niehtrostende Nadeln ohne Spritzen verwendet werden. -- Ausfi~hrung. In einer ProberShre werden 2 nil Serum mit 6 ml Wasser un4 2 nil 200/0iger w/~Briger Tlichloressigs/iure vermiseht und unter 5~terem Sehiitteln 10 rain l~ng im Wasserbad bei 90--95~ C erhitzt. AnscblieBend wird auf Ranmtemperatur abgekiihlt und filtriert. 5 ml des klaren Filtrates werden in eine Eprouvette ~bpipettiert, die bei 15 ml eflie t~Iarke trag~. Die Blindprobe wird in gleicher Weise vorbereite~. 1 nil 20~ Trichloressigsiure wird mit 4 ml Wasser 10 rain lang im Wasserbad bei gleicher Temperatur erhitzt und d~nn abgekiihlt. In jede Eprouvette kommen 0,3 ml 10~ Natronlauge, 2 mt Re~gens (6,6045 g Natxiumacetat -k 9 mt Eisessig -{- 0,5 g ce,~'-Dipyridyl, auf 100 ml aufgeffiIIt) und 0,2 ml stets ffisch hergestellte 20/oige waBrigc tIydrochinon- tSsung. Dann wird auf 15 ml aufgef/illt unfl bei 520 nm in 3 em-Kiivetten ge- messen. Die Eichkurve w~rd mit einer ans Eisen(III)-ammoniumsul~atbereiteten StandardlSsung atffgeste]lt. Die Werte Mind gleieh verlaBlich fiir Konzentrationen zwisehen 0 und 5/zg Eisen nn4 wer4en clutch die Bestandtefle des Serums nieht beeinfluBt. l~Iikroehim. Acta (Wien) 1959, 294--298. Zentrales med.-chem. Lab., Zagreb (Jugoslawien). R. ELL~[EI% Zm" Bestimmung yon ~Eisen und Eisen-59 in biologischem Material geben T. P. LEF~NCWFZ~, G. S. ~Env~nv jr. und R. W. RIESS i eine neue Methode an, bei tier alas Eisen. als Phenanthrolinkomplex extro~hier~ und ~pe~tralpho~ometrisch bestimmt wird, wihrend tier Eisen-59-Gehal$ der Probe durch Messung der fl-Strah- lung in einem Fliissigkeits-fi-Scintillationszahler effaBt wird. Die Eml0findlichkeit der ]~isen-59-bestimmung wird dutch fl-l~essung an Stelle der sonst iibliehen ?-t~[essung gesteigert. -- Ausfiihrung. l~an erhitzt z.B. 0,2 ml der Blutprobe mit 1 ml konz. Schwefels~nre bis Nebel a~dtreten, setz~ nach dem Abk/ihten 5 ml Wa.sser zu, ta~t nochmals abkiihlen, ~g~ 0,1 ml Ttfioglykolsaure, 2 ml 25~ TrichloressigsattrelSsung und i0 nil gesatt. Natriumaee~atlSsung zu (der p~-Wer~ so]/jetzt 5 betragen) und zentri~ugier~ 10 rain lang. Die lflare, iiberstehende Fltissig- keit wfl'd dekantiert, mR 5 ml Isoamy]a]kohol (IAA) geschiittelt, und die Alkohol- phase verwoden. ~an setzt nun 5 nil einer 0,5o/oigen o-PhenanthrolirdSsungin IAA zu, schiit~elt, und photome~rier~ in der tAA-Phase bei 512 m/z. -- Diese L5sung wird nach dem Pho~omefirieren mit 7 ml mSglichst C-14-~reiem, absoluten J~thanol und tl ml Scintillationsfliissigkeit versetzt [5,45 g 2,5-Di-phenyloxazol und 0,18 g 2,2'-p-Phenylen-bis-(5-phenylox~zol) in 1 1 To]uol], duroh 3--5 rain langes Dureh- leiten yon Argon yon Sauerstoff befreit~ auf -- 5~ C abgekiihlt und die fl-Aktivit/~t der Probe bestimmt. 1 J. Lab. elin. IVied.58, 622--628 (1959). Univ. Austin, Tex. und U.S. Air Force ~es. Cant. (USA). K/~Aus BRODERSEN

Zur Bestimmung von Eisen und Eisen-59 in biologischem Material

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Page 1: Zur Bestimmung von Eisen und Eisen-59 in biologischem Material

4. Analyse yon biologisehem 1V[aterial 343

zentrifugiert. Die ~2Brige Schicht wird eingedampft, der Rfieks~an4 in Wasser gelSst un4 in einem aliquoten Tell das Sulfat mit Benzidin gefs

i Bioohim. biophysioa Acta (Amsterdam) 31, 272--274 (1959). McLean Hosp., Waverley, und Harvard ivied. School, Boston, Mass. (USA). -- ~ V ~ SLu D. D., u. J. FOLCH: J. biol. Chemistry 186, 509 (1940); F~Rn~GTO~, P. S., C. :N~zg~_~ u. E. H. Sw~T: Analy% Chemistry 21, 1423 (1949); vgl. diese Z. 182, 146 (i951). -- 3 ViN SLX~KE, D. D., u. W. Rrm3~.Iq: J. biol. Chemistry 156, 743 (1944).

URSULi B i v ~ _ ~

]~ine photometrische Methode zm" Bestimmung yon Etsen in Pferdeserum wird yon I. Rv~uI6 un4 V. GR~Gor, ow~i beschrieben. Das Eisen wird mit Trichlor- essigsanre bei 90--95 ~ C extrahiert uncl cl~nn in den Dipyridylkomplex iibergefiihr~. Die verwendeten Reagentien, Filter, Glasgerate mfissen mSglichst eisenfrei ge- macht werden. Bei der Blutentnahme diirfen nut niehtrostende Nadeln ohne Spritzen verwendet werden. -- Ausfi~hrung. In einer ProberShre werden 2 nil Serum mit 6 ml Wasser un4 2 nil 200/0iger w/~Briger Tlichloressigs/iure vermiseht und unter 5~terem Sehiitteln 10 rain l~ng im Wasserbad bei 90--95~ C erhitzt. AnscblieBend wird auf Ranmtemperatur abgekiihlt und filtriert. 5 ml des klaren Filtrates werden in eine Eprouvette ~bpipettiert, die bei 15 ml eflie t~Iarke trag~. Die Blindprobe wird in gleicher Weise vorbereite~. 1 nil 20~ Trichloressigsiure wird mit 4 ml Wasser 10 rain lang im Wasserbad bei gleicher Temperatur erhitzt und d~nn abgekiihlt. In jede Eprouvette kommen 0,3 ml 10~ Natronlauge, 2 mt Re~gens (6,6045 g Natxiumacetat -k 9 mt Eisessig -{- 0,5 g ce,~'-Dipyridyl, auf 100 ml aufgeffiIIt) und 0,2 ml stets ffisch hergestellte 20/oige waBrigc tIydrochinon- tSsung. Dann wird auf 15 ml aufgef/illt unfl bei 520 nm in 3 em-Kiivetten ge- messen. Die Eichkurve w~rd mit einer ans Eisen(III)-ammoniumsul~at bereiteten StandardlSsung atffgeste]lt. Die Werte Mind gleieh verlaBlich fiir Konzentrationen zwisehen 0 und 5/zg Eisen nn4 wer4en clutch die Bestandtefle des Serums nieht beeinfluBt.

l~Iikroehim. Acta (Wien) 1959, 294--298. Zentrales med.-chem. Lab., Zagreb (Jugoslawien). R. ELL~[EI%

Zm" Bestimmung yon ~Eisen und Eisen-59 in biologischem Material geben T. P. LEF~NCWFZ~, G. S. ~Env~nv jr. und R. W. RIESS i eine neue Methode an, bei tier alas Eisen. als Phenanthrolinkomplex extro~hier~ und ~pe~tralpho~ometrisch bestimmt wird, wihrend tier Eisen-59-Gehal$ der Probe durch Messung der fl-Strah- lung in einem Fliissigkeits-fi-Scintillationszahler effaBt wird. Die Eml0findlichkeit der ]~isen-59-bestimmung wird dutch fl-l~essung an Stelle der sonst iibliehen ?-t~[essung gesteigert. -- Ausfiihrung. l~an erhitzt z.B. 0,2 ml der Blutprobe mit 1 ml konz. Schwefels~nre bis Nebel a~dtreten, setz~ nach dem Abk/ihten 5 ml Wa.sser zu, ta~t nochmals abkiihlen, ~g~ 0,1 ml Ttfioglykolsaure, 2 ml 25~ TrichloressigsattrelSsung und i0 nil gesatt. Natriumaee~atlSsung zu (der p~-Wer~ so]/jetzt 5 betragen) und zentri~ugier~ 10 rain lang. Die lflare, iiberstehende Fltissig- keit wfl'd dekantiert, mR 5 ml Isoamy]a]kohol (IAA) geschiittelt, und die Alkohol- phase verwoden. ~ a n setzt nun 5 nil einer 0,5o/oigen o-PhenanthrolirdSsung in IAA zu, schiit~elt, und photome~rier~ in der tAA-Phase bei 512 m/z. -- Diese L5sung wird nach dem Pho~omefirieren mit 7 ml mSglichst C-14-~reiem, absoluten J~thanol und t l ml Scintillationsfliissigkeit versetzt [5,45 g 2,5-Di-phenyloxazol und 0,18 g 2,2'-p-Phenylen-bis-(5-phenylox~zol) in 1 1 To]uol], duroh 3--5 rain langes Dureh- leiten yon Argon yon Sauerstoff befreit~ auf -- 5 ~ C abgekiihlt und die fl-Aktivit/~t der Probe bestimmt.

1 J. Lab. elin. IVied. 58, 622--628 (1959). Univ. Austin, Tex. und U.S. Air Force ~es. Cant. (USA). K/~Aus BRODERSEN