Protein Engineering und
Proteintechnologie
Übungen im Sommersemester 2010
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Übung 7 Frage 1
Wie können Sie bei der enantioselektiven Ketonreduktion durch
Ganzzellkatalyse kostengünstig Reduktionsäquivalte bereit stellen?
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Übung 7 Frage 1
Wie können Sie bei der enantioselektiven Ketonreduktion durch
Ganzzellkatalyse kostengünstig Reduktionsäquivalte bereit stellen?
Co-Produktion einer Glukoseoxidase, die irreversibel oxidativ Glucose
zu Gluconsäure umsetzt und dabei NAD(P)H generiert
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Übung 7 Frage 2
Die Produktion eines Proteins als Fusion mit Elastin like Protein ELP
erlaubt dessen Aufreinigung ohne Anwendung von
Säulenchromatographie. Wie funktioniert das?
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Übung 7 Frage 2
Die Produktion eines Proteins als Fusion mit Elastin like Protein ELP
erlaubt dessen Aufreinigung ohne Anwendung von
Säulenchromatographie. Wie funktioniert das?
Elastin-like polypeptides (ELPs) are
biopolymers of the pentapeptide repeat
Val-Pro-Gly-Xaa-Gly that undergo an
inverse temperature phase transition. They
are soluble in aqueous solutions below
their transition temperature (Tt) but
hydrophobically collapse and aggregate at
temperatures greater than Tt.
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Übung 7 Frage 3
Welcher Vorteil besteht darin, für eine reduktive Aminierung eines
Ketons anstelle eines chemischen Reduktionsmittels ein Enzym zu
verwenden?
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Übung 7 Frage 3
Welcher Vorteil besteht darin, für eine reduktive Aminierung eines
Ketons anstelle eines chemischen Reduktionsmittels ein Enzym zu
verwenden?
Eine enantioselektive Dehydrogenase kann enantioselektiv nur eines der
beiden R oder S Enantiomere generieren. Damit entfällt die kostspielige
Aufarbeitung des Racemats (Beispiel Aminosäuredehydrogenase)
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Übung 7 Frage 4
Zeichen Sie schematisch den Grundaufbau eines Single Chain Antibody
Fragments (Sc Fv). Kritisch ist die Länge des Linkers zwischen Schwerer und
leichter Kette. Was passiert, wenn Sie diesen länger machen? Lässt sich dieser
Effekt nutzen?
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Übung 7 Frage 4
Zeichen Sie schematisch den grundaufbau eines Single Chain Antibody
Fragments (Sc Fv). Kritisch ist die Länge des Linkers zwischen Schwerer und
leichter Kette. Was passiert, wenn Sie diesen länger machen? Lässt sich dieser
Effekt nutzen?
Lösung: Langer Linker erlaubt die Ausbildung von Dimeren
(Diabodies)
Vorteil: Möglichkeit der Herstellung bispezifischer Antikörper (z.B. BITES)
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Übung 7 Frage 4
Bites
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Übung 7 Frage 5
Beschreiben Sie kurz die Strategie, um ausgehend von einem Metagenom (was
ist das?) an ein Enzym gewünschter Aktivität heranzukommen?
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Heute ist es problemlos möglichin kurzer zeit ungeheuer viel DNA-
Sequenzinformation zum Beispiel durch Metagenomsequenzierung zu erhalten.
Die Sequenzierung von mehreren hundertausend DNA-Molekülen dauert nur
noch einen Vormittag. Wie funktioniert diese Technologie (Stichwort 454)
Übung 7 Frage 6 (zum selbst Erarbeiten)
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Quelle: Roche
Übung 7 Frage 6 (zum selbst Erarbeiten)
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Quelle: Roche
Übung 7 Frage 6 (zum selbst Erarbeiten)
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Quelle: Roche
Übung 7 Frage 6 (zum selbst Erarbeiten)