Aula 15 Replicacao - fenix.ciencias.ulisboa.pt€¦ · As topoisomerasesintroduzemum nick noDNA,...

Replicação de DNA

• A Replicação é semi-conservativa.

• Replicação e ciclo celular.

• Origens de replicação. Reacção de síntese de DNA.

• As cadeias líder e atrasada. Fragmentos de Okazaki.

• O problema topológico.

• Actividades duma DNA polimerase.

• Replicação nos telómeros.

Bibliografia

• Bruce Alberts, Dennis Bray, Karen Hopkin, Alexander Johnson, Julian Lewis, Martin Raff, Keith Roberts and Peter Walter (2004) Essential Cell Biology 2ª ed. Garland Science Publishing. Cap.6.

Sumário

Replicação e Ciclo CelularReplicação e Ciclo Celular

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Albertset al(2004)EssCell Biol2/e

Klug/Cummings (1997) 5/e

Replicação da Dupla HéliceReplicação da Dupla Hélice

Griffiths et al (2000) 7/e

A Replicação do DNA é SemiA Replicação do DNA é Semi--ConservativaConservativa

Experiência de Experiência de MeselsonMeselson--Stahl Stahl (1958)(1958)

Klug/Cummings (1997) 5/e

Replicação: SemiReplicação: Semi--ConservativaConservativa

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Origens de ReplicaçãoOrigens de Replicação

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Direcção da ReplicaçãoDirecção da Replicação

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Reacção de Síntese de DNAReacção de Síntese de DNA

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Cadeia ‘Atrasada’ e Cadeia ‘Atrasada’ e Fragmentos de Fragmentos de OkazakiOkazaki

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

DNA DNA PolimerasesPolimerases: Síntese e : Síntese e ReparaçãoReparação

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

O Problema O Problema TopológicoTopológico

A separação das duas cadeias na extremidade livre (i.e., no garfo replicativo) cria forças de torsão crescentes e faz com que o DNA ainda não separado fique mais fortemente enrolado.

As topoisomerases introduzem um nick no DNA, permitindo arotação duma cadeia em torno da outra e aliviando a força de torsão que se acumula à frente do garfo replicativo. O nick é

transitório, sendo re-ligado imediatamente após atopoisomerase I ter libertado a outra cadeia.

MecanismMecanismo deo de acacção ção das das topoisomerasetopoisomerasess

E.coli � 4 000 kb (400 000 voltas de hélice)

Replica-se em 20 min � rotação a 20 000 rpm!

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http://www.usd.edu/~jfallan/risticb413sp2001/lec6.h13.jpg

Mecanismo de Síntese de DNAMecanismo de Síntese de DNA

Resumo dos Acontecimentos Resumo dos Acontecimentos no Garfono Garfo ReplicativoReplicativo

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Replicação nos Replicação nos TelómerosTelómeros

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e