1
150 Bericht: Spezielle analytisehe Methoden Bd. 196 dal~ bis zu Eiweil~konzentrationen yon 30 #g/ml e~ linearer Zusammenhang zwisehen Einsehnit~iefe und Konzentration besteht. Bei gr51~eren Konzentrationen (300 #g/ml) ergibt sich besonders bei Albumin eine immer geringere Zunahme tier Einsehnittiefe bis schliel~lich, bei noeh hSheren Konzentrationen ein konstanter, yon der Konzentration unabh~ngiger Wert erreieht wird. Die Einschnittiefe ver- ringert sich bei Hgmoglobin und Ovalbumin mJr zunehmendem p~-Wert; besonders ausgepr~gt ist dieser Effekt bei h5heren Temperaturen. ])as Potential des Ein- sehni~tes versehiebt sich mit steigendem pri-Wert zu negativeren Werten. Bei H~moglobin nimmt die Einsehnittiefe mit zunehmender Temperatur ab. Maxima der Funktion Einsehnittiefe/Temperatur wurden bei 50--60~ beobaehtet. Bei Albumin ist dieses Maximum besonders ausgepr~gt und tritt schon zu ]3egirm des Versuches bei etwa 60 ~C auf. Verf. zieht aus dem identisehen Verhalten yon H~mo- globin und Ovalbumin den Schlul~, dal~ die oseillographischen Eigensehaften nieht dureh die prosthetisehe Gruppe, sondern dureh die Eiweil~molekfile bestimmt werden. 1 Chem. Zvesti 16, 395--398 (1962). Biochem. Zentrallab., Bulgar. Akad. Wiss., Sofia (Bulgarien). G. SC~6B~R Die Schnellbestimmung der Eiweiflfraktionen des Blutserums naeh S.A. K~a~PIu~: 1 ist eine 1Ylodifikation'des Verfahrens yon J.C .AvLL und W. IV[. I~cCoRD2. -- Reagentien. A. Phosphatstamm168ung. Man versetzt eiae LSsung yon 33,5 g Na- triumhydroxid in 400 ml Wasser mit 226,8 g MonokMiumphosphat, schiittelt bis zur vSlligen LOsung und f'tillt naeh Abkfihlen auf Zimmertemperatur mit Wasser auf 500 ml auf. B. Verdi~nnte Phosphatl6sungen. 1. 123,5 g A werden in einem 100 ml- MeBkolben unter Sehiittein mit dest. Wasser zur Marke aufgeffillt. Analog werden bereitet: 2. aus 100 g A, 3. bus 78,5 g A und 4. aus 65 g A. Auf je 100 ml LSsung wird 1 Tr. Chloroform zugesetzt. -- Arbeitsweise. Eine Reihe yon seehs 10 ml- Probiergl/~sern wird mit 0--5 bezeichnet; 0 wird mit 5 ml 4est. Wasser, 1 --4 werden mit je 5 ml der entsprechenden LSsungen B und 5 wird mit 0,5 ml Serum, 0,75 ml dest. Washer und 3,75 ml A versetzt. Man verseMieBt Glas 5 mit dem Finger, kehrt es 5--6real urn, fibertr/igt je 0,5 ml des Gemisehes in 0--4 und mischt wie Nr. 5. Nach 15 rain wird die optische Dichte (OD) yon 1--4 mit einem Photo- elektroeolorimeter (z. B. FEK-M) oder mit einem Photometer (z. B. ttorizontal- photometer FMS) durch ein rotes Tilter Nr. 11 und in Kiivetten yon 10 mm Schicht- dieke gemessen. LSsung 0 dient als Kontrolle. -- Berechnung. OD (1--2) = OD (Albumine) ; OD (2--3) ~ OD(~-Globuline); OD (3--4) = OD (fl-Globuline); 0D (4) = OD (7-Globuline). Wird die Summe der optisehen Dichten der Albumine und aller Globulinfraktionen als 100~ angenommen, so ergibt sich der Gehalt jeder Fraktion in relativen Prozenten. Das GesamteiweiB (in g-0/0 ) wird refrakto- metrisch bestimmt. -- Die Reproduzierbarkeit betri~gt ffir Albumine 30/0, ffir ~-, fl- und y-Globuline bzw. 2,4, 1,2 und 1~ bezogen aufs Gesamt-SerumeiweiB. F. V. FLYxN und P. DE M~Yo a erzielten auf elektrophoretischem Wege dieselbe Genauig- keit. Die besehriebene Sehnellmethode, die 25--30 rain dauert, liefert fiir Albumine un4 fl-Globuline etwas hShere Werte als das elektrophoretisehe Verfahren; sie maeht Filtration (Zentrifugieren) un4 einen Thermostat entbehrlich. Stehen die erw/~hnten optischen Ger~te nicht zur Verfiigtmg, so kann ein gewShnliehes Duboscq- Colorimeter verwendet werden. In diesem Falle wird die Konzentra~ion der EiweiB- 15sungen nach T. GA~LEZ 4 bestimmt. 1 Lab. Delo 8, Nr. 7, 33--36 (1962) [Russiseh]. Lehrst. Chirurgie der therapeut. Fakult~t Lemberger Med. Inst. (UdSSR). -- 2 j. Lab. olin. Med. 46, 476 (1955); vgl. auch E~IKSE~, N. : Clin. Chemistry 2, 334 (1959) ; vgl. diese Z. 160, 223 (1958). -- a Lancet (London) 11, 235 (1951) ; vgl. aueh diese Z. 148, 41 (1954). -- ~WiadomogSi lekar. 9, 879 (1956). P. Hxxs

Die Schnellbestimmung der Eiweißfraktionen des Blutserums

  • Upload
    p-haas

  • View
    214

  • Download
    1

Embed Size (px)

Citation preview

150 Bericht: Spezielle analytisehe Methoden Bd. 196

dal~ bis zu Eiweil~konzentrationen yon 30 #g/ml e ~ linearer Zusammenhang zwisehen Einsehnit~iefe und Konzentration besteht. Bei gr51~eren Konzentrationen (300 #g/ml) ergibt sich besonders bei Albumin eine immer geringere Zunahme tier Einsehnittiefe bis schliel~lich, bei noeh hSheren Konzentrationen ein konstanter, yon der Konzentration unabh~ngiger Wert erreieht wird. Die Einschnittiefe ver- ringert sich bei Hgmoglobin und Ovalbumin m Jr zunehmendem p~-Wert; besonders ausgepr~gt ist dieser Effekt bei h5heren Temperaturen. ])as Potential des Ein- sehni~tes versehiebt sich mit steigendem pri-Wert zu negativeren Werten. Bei H~moglobin nimmt die Einsehnittiefe mit zunehmender Temperatur ab. Maxima der Funktion Einsehnittiefe/Temperatur wurden bei 50--60~ beobaehtet. Bei Albumin ist dieses Maximum besonders ausgepr~gt und tri t t schon zu ]3egirm des Versuches bei etwa 60 ~ C auf. Verf. zieht aus dem identisehen Verhalten yon H~mo- globin und Ovalbumin den Schlul~, dal~ die oseillographischen Eigensehaften nieht dureh die prosthetisehe Gruppe, sondern dureh die Eiweil~molekfile bestimmt werden.

1 Chem. Zvesti 16, 395--398 (1962). Biochem. Zentrallab., Bulgar. Akad. Wiss., Sofia (Bulgarien). G. SC~6B~R

Die Schnellbestimmung der Eiweiflfraktionen des Blutserums naeh S.A. K~a~PIu~: 1 ist eine 1Ylodifikation'des Verfahrens yon J.C .AvLL und W. IV[. I~cCoRD 2. - - Reagentien. A. Phosphatstamm168ung. Man versetzt eiae LSsung yon 33,5 g Na- triumhydroxid in 400 ml Wasser mit 226,8 g MonokMiumphosphat, schiittelt bis zur vSlligen LOsung und f'tillt naeh Abkfihlen auf Zimmertemperatur mit Wasser auf 500 ml auf. B. Verdi~nnte Phosphatl6sungen. 1. 123,5 g A werden in einem 100 ml- MeBkolben unter Sehiittein mit dest. Wasser zur Marke aufgeffillt. Analog werden bereitet: 2. aus 100 g A, 3. bus 78,5 g A und 4. aus 65 g A. Auf je 100 ml LSsung wird 1 Tr. Chloroform zugesetzt. - - Arbeitsweise. Eine Reihe yon seehs 10 ml- Probiergl/~sern wird mit 0--5 bezeichnet; 0 wird mit 5 ml 4est. Wasser, 1 - -4 werden mit je 5 ml der entsprechenden LSsungen B und 5 wird mit 0,5 ml Serum, 0,75 ml dest. Washer und 3,75 ml A versetzt. Man verseMieBt Glas 5 mit dem Finger, kehrt es 5--6real urn, fibertr/igt je 0,5 ml des Gemisehes in 0- -4 und mischt wie Nr. 5. Nach 15 rain wird die optische Dichte (OD) yon 1--4 mit einem Photo- elektroeolorimeter (z. B. FEK-M) oder mit einem Photometer (z. B. ttorizontal- photometer FMS) durch ein rotes Tilter Nr. 11 und in Kiivetten yon 10 mm Schicht- dieke gemessen. LSsung 0 dient als Kontrolle. -- Berechnung. OD (1--2) = OD (Albumine) ; OD (2--3) ~ OD(~-Globuline); OD (3--4) = OD (fl-Globuline); 0D (4) = OD (7-Globuline). Wird die Summe der optisehen Dichten der Albumine und aller Globulinfraktionen als 100~ angenommen, so ergibt sich der Gehalt jeder Fraktion in relativen Prozenten. Das GesamteiweiB (in g-0/0 ) wird refrakto- metrisch bestimmt. - - Die Reproduzierbarkeit betri~gt ffir Albumine 30/0, ffir ~-, fl- und y-Globuline bzw. 2,4, 1,2 und 1~ bezogen aufs Gesamt-SerumeiweiB. F. V. FLYxN und P. DE M~Yo a erzielten auf elektrophoretischem Wege dieselbe Genauig- keit. Die besehriebene Sehnellmethode, die 25--30 rain dauert, liefert fiir Albumine un4 fl-Globuline etwas hShere Werte als das elektrophoretisehe Verfahren; sie maeht Filtration (Zentrifugieren) un4 einen Thermostat entbehrlich. Stehen die erw/~hnten optischen Ger~te nicht zur Verfiigtmg, so kann ein gewShnliehes Duboscq- Colorimeter verwendet werden. In diesem Falle wird die Konzentra~ion der EiweiB- 15sungen nach T. GA~LEZ 4 bestimmt.

1 Lab. Delo 8, Nr. 7, 33--36 (1962) [Russiseh]. Lehrst. Chirurgie der therapeut. Fakult~t Lemberger Med. Inst. (UdSSR). -- 2 j . Lab. olin. Med. 46, 476 (1955); vgl. auch E~IKSE~, N. : Clin. Chemistry 2, 334 (1959) ; vgl. diese Z. 160, 223 (1958). -- a Lancet (London) 11, 235 (1951) ; vgl. aueh diese Z. 148, 41 (1954). -- ~ WiadomogSi lekar. 9, 879 (1956). P. Hxxs