Immunph ä notypisierung h ä matologischer Neoplasien: Ergebnisse des Ringversuchs 2002 R. Schabath Robert-Rössle-Klinik Medizinische Klinik m. S. Hämatologie,

Immunphänotypisierung hämatologischer Neoplasien:

Ergebnisse des Ringversuchs 2002

R. SchabathRobert-Rössle-Klinik

Medizinische Klinik m. S. Hämatologie, Onkologie u.Tumorimmunologie

INSTAND e.V.

INSTAND Ringversuch Gruppe 214

Aussendung vom 26. Juni 2002

Ergebnisse des Ringversuchs Immunphänotypisierungin Zusammenarbeit mit INSTAND e.V. Düsseldorf

Zielsetzung des Ringversuchs...

...war die Evaluation von Laboren, die die immunologische Diagnostik Hämatologischer Neoplasien (Leukämien, Non-Hodgkin-Lymphome etc.) anbieten.

Viele dieser Erkrankungen sind nur immunphänotypisch eindeutig zu charakterisieren, die Diagnose ist für den Patienten mit einer dezidierten Therapie und Prognose verbunden.

Somit erlangt die Qualitätssicherung im Rahmen von Ringversuchen in diesem Bereich enorme Bedeutung und ist auch eine der Kernanliegen innerhalb des Teilprojekt IV – Immunphänotypisierung - des Kompetenznetzes „Akute und Chronische Leukämien“.



Methodik und im Vorfeld aufgetretene Probleme:

- Es wurden zwei Ausstrichpräparate und die dazugehörigen Ergebnisse der durchflusszytometrischen Messung als sogenannte „Listmode-Daten“ auf CD-Rom and die Labore versand.

- Auf Grund der Größe der Listmodefiles war eine Aussendung über Disketten nicht mehr möglich. Die CD´s waren jedoch nicht auf Anhieb bei allen Teilnehmern lesbar

- Einige Teilnehmer erkannten nicht, dass es sich um „dreifach“-Färbungen handelt und werteten den Versuch wie eine „zweifach“-Färbung aus



Das Gesamtergebnis

Gemeldete Teilnehmer (Anzahl der Proben-Aussendungen) = 86 (100%)Ausgefüllte rückgesandte Bearbeitungsbögen = 81 (94%) Zertifikat erhalten = 77 (95%)

Es gab 42 Punkte aus 5 Aufgaben zuzüglich 4 Extrapunkten (aus Aufgabe 5). Die Bestehensgrenze lag bei 60% entsprechend 25 Punkten.

Die Bewertung



Bitte stellen Sie an Hand des Ausstrichpräparats eine Diagnose !

(2x5 Punkte)

Frage 1



Morphologie Probe I



Morphologie Probe I



Morphologie Probe I




Frage 1 / Probe 1

AML

AML M0/M1

AML M2

AML M2/M3

AML M2/M3v

AML M3

AML M3/M5

AML M3v

AML M4

AML M4/M5

Häufigkeit

403020100

3

37

20

3

11

“Musterlösung“ AML M3v



Morphologie Probe II







ALLALL FAB L1, DD: PLL

ALL FAB L3ALL, Blastenschub bei CLL

B-CLL, B-PLLB-NHL

B-NHL, B-PLLB-NHL, CLL oder MZLB-NHL, DD: PLL, MZL

B-PLLB-PLL, DD: ALL

B-PLL, DD: blastäres MZLB-Zell-Leukämie

CLLCLL mit ProlymphozytenCLL, atypische DD MZL

ImmunozytomLP-IC

Mantelzell-LymphomPlasmazell-Leukämie

Plasmazell-Leukämie / M. WaldenströmSLVL (Milzlymphom)

Häufigkeit

403020100

6

33

19




Frage 1 / Probe 2

“Musterlösung“ B-PLL



Bitte stellen Sie an Hand des Immunphänotyps eine Diagnose !

(2x10 Punkte)

Frage 2



Immunphänotyp Probe I



Immunphänotyp Probe I – das verwendete Panel(entspricht dem „core Panel“ des Kompetenznetzes „Akute und Chronische Leukämie“, Teilprojekts IV, Immunphänotypisierung)

cy cy-NC cy-NC cy-NCcy TdT cyCD79 cyCD3cy MPO CD34 CD45cy MPO LF 15s NC NC NCs CD10 CD19 CD13s CD7 HLA-DR CD33s kappa lambda CD19s CD2 CD1 CD3s CD34 "7.1" CD117s CD65 CD56 CD45s CD61 CD14 CD45s 36 GlyA 13s 64 AC133 13



Immunphänotyp Probe I



Frage 1 / Probe 1

AML

AML M0

AML M0, DD: M1

AML M1

AML M1/M3

AML M2

AML M2 mit t(8;21)

AML M2/M3

AML M3

AML M3, DD: CMML

AML M3/M3v

AML M3v

AML M3v, DD: AML M0

AML M4

Hybridleukämie AML M

MDS

Häufigkeit

403020100

11

37

15

“Musterlösung“ AML M3




Immunphänotyp Probe II – das verwendete PanelDieses Panel nur für diesen Ringversuch entworfen und soll durchgängiges CD19-Gating ermöglichen

cy NC NC NCcy HLA-DR CD45 CD19cy CD20 CD56 CD19cy CD22 CD10 CD19s CD23 CD38 CD19s FMC7 CD11c CD19s CD25 CD3 CD19s CD103 CD19 CD19s CD43 CD20 CD19s CD79b CD138 CD19s kappa lambda CD19s CD2 CD1a CD3s CD4 CD8 CD3s TZR g/d TZR a/b CD3



Immunphänotyp Probe II










Frage 1 / Probe 2

Mantelzell-Lymphom

B-NHL

Häufigkeit

403020100

3

8

8

18

9

31

“Musterlösung“ Reifzelliges B-NHL

B-PLL

B-CLL

LP-IC

SLVL

B-ALL

Diffus großzelliges B-NHL

Follikläres NHL



80 13 96 84.75 11.150

N Minimum Maximum MittelwertStandard-abweichung

% maligner Zellen

Probe 1

Frage 3

Bitte geben Sie für Probe I und Probe II den Blastenanteil in % an !(2x2 Punkte)

80 57 98 82.65 7.027

N Minimum Maximum Mittelwert

% maligner Zellen

Probe 2 Standard-abweichung

I_BLAST

II_BLAST

100806040200



Frage 3

Bitte geben Sie für Probe I und Probe II den Blastenanteil in % an !

Probe I

Probe II



Frage 4

Bitte geben Sie für Probe I und Probe II den Anteil in % der Granulozyten, Monozyten, Lymphozyten und malignen Zellen an!

(2x4 Punkte)



Frage 4




Frage 4


Zellen n Minimum Maximum Mittelwert Standardabweichung

Granulozyten 57 0 90 6,5 16,47

Monozyten 49 0 5 1,0 1,31

Lymphozyten 73 1 15 5,1 1,87

Path. Population

77 13 99 86,2 11,04



Frage 4


Zellen n Minimum Maximum Mittelwert Standardabweichung

Granulozyten 65 0 15 2,9 3,92

Monozyten 50 0 10 1,9 2,05

Lymphozyten 52 0 99 24,4 34,21

Path. Population 78 57 99 84,7 6,79



Frage 5

Welche zusätzlichen Untersuchungen hätten Sie durchgeführt ?(2x2 Punkte zusätzlich)

Beispiele

Probe I Probe II

• Wiederholung MPO2 • CD34, TdT• CD15 • zytoplasmatisches Cyclin D1• PML/RAR alpha • IgM

2 Wurde von vielen Teilnehmern angemahnt – tatsächlich wurde die Messung auch wiederholt

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