Jurnal Anpang Langen 7

7/26/2019 Jurnal Anpang Langen 7

1/5

PRAKTIKUM PEMELIHARAAN KULTUR MIKROORGANISME

FAKULTAS TEKNOLOGI INDUSTRI PERTANIAN

UNIVERSITAS PADJADJARAN

Langen Kinanti (24021014010!

Departemen Teknologi Industri Pangan Universitas Padjadjaran, Jatinangor

Jalan Raya Bandung-Sumedang Km !", Jatinangor, Sumedang #$%$$ Te"#$&$!!' (()**##, (()+($

Fa%$&$!!' (()+(*$ E&ai"kinantilangengmail.om

A'STRAK

Pemeli/araan kultur mikroorganisme 0ertujuan untuk mengam0il atau meminda/kan

mikroorganisme yang terdapat di alam dan menum0u/kannya dalam suatu medium 0uatan

Pemeli/araan kultur mikroorganisme dilakukan dengan menginku0asi medium yang tela/ di inokulasi

mikroorganisme dari sampel 0a/an pangan yang diamati Pemeli/araan kultur mikroorganisme dapat

dilakukan dengan metode gores dengan .ara langsung, kuadran, dan radian dengan media 12B

&Eosin Methylene Blue' dan dengan metode tuang dengan media 34 &Nutrient Agar' Selain itu dapat

juga dilakukan dengan pemeli/araan kultur .air dengan media 3B &Nutrient Broth' dan pemeli/araan

kultur padat dengan metode agar tegak dan agar miring dengan media 34 5asil pengamatan dari

semua metode pemeli/araan kultur menunjukkan /asil positi6 yaitu tum0u/nya mikroorganisme

dalam sampel susu murni 2ikroorganisme yang mungkin tum0u/ yaitu Staphylococcus aureus,

Salmonellasp, Campylabactersp,P. aerugenosa, danEscherichia coli.

Kata )n*i+ 2ikroorganisme, metode tuang, metode gores, kultur .air, agar tegak, agar miring

PENDAHULUAN

2ikroorganisme dapat diperole/ dari

lingkungan air, tana/, udara, su0strat yang

0erupa 0a/an pangan, tanaman, dan /e7an

Jenis mikroorganismenya dapat 0erupa 0akteri,

k/amir, kapang, dan se0againya Populasi dari

mikro0a yang ada di lingkungan ini sangatla/

0eranekaragam se/ingga dalam mengisolasi

diperlukan 0e0erapa ta/ap penanaman se/ingga

0er/asil diperole/ koloni yang tunggal Koloni

yang tunggal ini kemudian yang akan

diper0anyak untuk suatu tujuan penelitianmisalnya untuk mengisolasi D34 mikro0a

yang dapat mendeteksi mikro0a yang tela/

resisten ter/adap suatu anti0ioti. &8ardia9,

"))!' Pemurnian merupakan .ara untuk

memisa/kan atau meminda/kan mikro0a

tertentu dari lingkungannya, se/ingga diperole/

kultur murni atau 0iakan murni Kultur murni

iala/ kultur yang sel-sel mikro0anya 0erasal

dari pem0ela/an dari satu sel tunggal

&Suria7iria, !$$+'

2edia atau medium 0ertujuan untuk

mem0iakkan mikroorganisme yang kitainginkan, se/ingga mikroorganisme dapat

tum0u/ 0aik dalam suatu medium yang tela/di0uat, komponen dasar medium tela/ di

sesuaikan dengan jenis nutrisi yang di perlukan

ole/ mikroorganisme, medium terse0ut /arus

memenu/i syarat-syarat, antara lain adala/

/arus mengandung semua 9at /ara yang muda/

digunakan ole/ mikroorganisme, /arus

mempunyai tekanan osmosis, tegangan

permukaan dan p5 yang sesuai dengan

ke0utu/an mikroorganisme yang akan

ditum0u/kan, tidak mengandung 9at-9at yang

dapat meng/am0at pertum0u/an

mikroorganisme, /arus 0erada dalam keadaansteril se0elum digunakan, agar mikroorganisme

yang di tum0u/kan dapat tum0u/ dengan 0aik

&D7idjoseputro, !$$+'

Dikenal 0e0erapa .ara atau metode

untuk memperole/ 0iakan murni dari suatu

0iakan .ampuran Dua diantaranya yang paling

sering digunakan adala/ metode .a7an gores

dan metode .a7an tuang :ang didasarkan pada

prinsip pengen.eran dengan maksud untuk

memperole/ spesies individu Dengan

anggapan 0a/7a setiap koloni dapat terpisa/

dari satu jenis sel yang dapat diamati &46rianto,!$$#'
mailto:[email protected]:[email protected]:[email protected]


2/5

METODOLOGI

'a,an -an a"at

Susu murni digunakan se0agai sampel

Ba/an yang digunakan untuk praktikum kali ini

adala/ alko/ol, 3a;l 6isiologis, 3utrient 4gar

&34', 3utrient Brot/ &3B', dan 1osin

2et/ylene Blue &12B'

4lat yang digunakan untuk pemurnian

kultur mikroorganisme yaitu, .a7an petri, pipet

volume, ta0ung reaksi, bulbpipet, ose, 0unsen,

dan rak ta0ung

Pengen*e.an

Disiapkan # ta0ung reaksi yang suda/

di0eri la0el pengen.eran "$-", "$-!, "$- lalu tunggu /ingga

mem0eku &mem0entuk agar' ;a7an di0ungkus

dan diinku0asi pada su/u


3/5

pangan, untuk mem0a7a stok kultur, untuk

pertum0u/an sampel pada uji 0akteri, dan

untuk mengisolasi organisme dalam kultur

murni 34 digunakan untuk pertum0u/an

mayoritas dari mikroorganisme yang tidak

selekti6, dalam artian mikroorganisme

/eterotro6

12B digunakan karena sampel yang

digunakan yaitu susu 2edia 1osin 2et/ylene

Blue mempunyai keistime7aan mengandung

laktosa dan 0er6ungsi untuk memila/

mikroorganisme yang mem6ermentasikan

laktosa seperti S. aureus, P. aerugenosa, dan

Salmonella, 12B4 &Eosin Metilena Blue Agar'

untuk mem0edakan golongan

Enterobacteriaceae terutama Escherichia coli

dengan Enterobacter aerogenes 12B

merupakan media selekti6, di6erensial media ygdigunakan untuk isolasi dan identi6ikasi gram

negati6 1osin dan pe7arna 0iru metilena

0er6ungsi untuk meng/am0at pertum0u/an

0akteri gram positi6 dan sukrosa dimasukkan

untuk memungkinkan di6erensial isolat

didasarkan pada 6ermentasi laktosa 2enurut

8ardia9 &"))!', sala/ satu 0akteri yang dapat

mem6ermentasikan laktosa adala/ koli6orm

Pada 12B jika Escherichia coli tum0u/ ini

akan mem0erikan kemilau /ijau metalik k/as

karena 7arna metachromatic merupakan

pe7arna Escherichia coli dan untukmengeta/ui adanya Spicies citrobacter dan

enterobacter akan menampakkan jenis koloni

sangat gelap, /ampir /itam, jika diamati se.ara

langsung ter/adap .a/aya

Pemeli/araan kultur dengan

menggunakan medium .air 3B dengan

menggunakan sampel pada pengen.eran "$-"

Nutrient Broth (NB) merupakan medium

0er0entuk .air yang merupakan kategori

medium umum yang dapat digunakan untuk

pertum0u/an semua jenis mikroorganisme

2edia ini 0iasa digunakan untuk isolasi, karenamengandung semua senya7a esensial untuk

pertum0u/an mikroorganisme Komposisi 3B

sama dengan Nutrient Agar &34', /anya saja

3B tidak memiliki kandungan bacto agaratau

9at pemadat seperti 34

Pemeli/araan kultur mikroorganisme

dengan medium padat dapat dilakukan dengan

dua a.ara yaitu agar miring dan agar tegak

dengan menggunakan medium 34 4gar tegak

0er6ungsi untuk mengamati mikroorganisme

anaero0 dengan menggunakan metode tusuk

yaitu dengan menusukkan ose tegak pada

0agian tenga/ agar Sedangkan agar miring

0er6ungsi untuk mengamati jumla/

mikroorganisme dalam jumla/ yang 0anyak,

jelas, dengan menggunakan metode gores dan

mikrooorganisme yang 0iasa tum0u/ yaitu

mikroorganisme yang 0ersi6at aero0

Pemeli/araan kultur mikroorganisme

ini dengan menginku0asi medium yang tela/ di

inokulasi mikroorganisme dari sampel 0a/an

pangan yang diamati Su/u dan 7aktu inku0asi

disesuaikan dengan medium dan

mikroorganisme jenis apa yang diinginkan

untuk tum0u/ dan diamati 3amun, dalam

melakukan praktikum /arus dalam kondisi

steril se/ingga 0akteri atau mikroorganisme

lainnya yang dari lingkungan mengkontaminasi

dan ikut tum0u/ dalam medium Sala/ satunya

alat-alat yang digunakan /arus dilakukan

sterilisasi terle0i/ da/ulu2enurut 8ardia9 &"))!', sterilisasi

sendiri merupakan suatu proses untuk

mem0unu/ semua jasad renik yang ada,

se/ingga jika ditum0u/kan di dalam suatu

medium tidak ada lagi jasad renik yang dapat

0erkem0ang 0iak Sterilisasi /arus dapat

mem0unu/ jasad renik yang paling ta/an panas

yaitu spora 0akteri Sterilisasi yang umum

dilakukan antara lain sterilisasi kering,

sterilisasi 0asa/, penyaringan, sterilisasi kimia

dan sterilisasi dengan radiasi &4rt/ur et al,

")%!' Aingkungan /arus dipastikan sterilse/ingga meminimalisir kontaminasi

mikroorganisme dari lingkungan dapat

dilakukan dengan mem0ersi/kan meja kerja

dengan al.o/ol ($ dan kegiatan dilakukan

tidak le0i/ dari !+ .m disekitar 0unsen yang

menyala dan setela/nya pastikan sum0at kassa

tertutup rapat

Reaksi positi6 pada uji agar tuang, agar

tegak, dan agar miring dengan media 34

ditandai dengan adanya titik-titik atau noda

puti/ pada agar Reaksi positi6 pada untuk

media .air 3B yaitu terjadi peru0a/an 7arnasetela/ inku0asi, ditandai dengan kekeru/an

agar Kekeru/an ini dikarenakan adanya

aktivitas 0akteri dalam sampel yang terdapat di

agar .air Reaksi positi6 pada agar 12B

menunjukkan adanya koloni 0er7arna gelap

dengan kilap logam

Berikut ini /asil pengamatan dari

0er0agai pemeli/araan kultur mikroorganisme

0aik dalam pemeli/araan dengan menggunakan

medium .air atau padat &agar miring dan

tegak', pemeli/araan kultur dengan metode

tuang, dan gores


4/5

Tae" 1$ Hai" Penga&atan Pe&e"i,a.aan K)"t). Mi.//.gani&e

Ke" Me-ia Pa-at NA N' EM' Aga.

Tega

Aga.

Mi.ing10 104

" C C C C C C

! C C C C C C

< C C C C

Tidak

tersedia

C C

# C C C C C C

+ C C C C C C

% C C C C C C

( C C C C C C


5/5

* C C C C C C

) C C C C C C

"$ C C C C C C

Berdasarkan /asil pengamatan pada

ta0el ", dari semua pemeli/araan kultur dengan

jenis medium dan metode yang 0er0eda

semuanya menunjukkan /asil yang positi6 yang

0erarti terdapat mikroorganisme yang tum0u/

dalam sampel yang diujikan Pada agar 12B

dari setiap kelompok menunjukkan adanya

koloni gelap dengan kilap logam Pada media.air 3B menunjukkan peru0a/an 7arna atau

kekeru/an Pada agar tegak dan miring pun

menunjukkan adanya koloni pada permukaan

agar yang se0elumnya terkena ose

2enurut Djaa6ar et al. &!$$+',

mikroorganisme yang suda/ 0anyak

teridenti6ikasi dan sering men.emari susu antara

lain Staphylococcus aureus, Salmonella sp,

Campylabacter sp, P. aerugenosa, dan

Escherichia coli. 2enurut Badan Standar

3asional, susu murni memiliki .emaran

mikro0a maksimum Stap/ylo.o..us aureus

se0anyak "$! ;8UmA 1ntero0a.teria.eae

se0ayak "$

Documents

Jurnal Anpang Langen 7