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1961 4. Analyse yon biologisehem Material 79
Whatman-Papie r Nr. 1 wurde mit KaliumcyanidlSsung zur Beseitigung katalyt isch wirksamer Eisen- und Kupferspuren behandelt . Chromatographiert wurde mit dem LSsungsmittelsystem n-Butano]-Essigs~ure-Wasser (r 1 : 5). Die Ringzonen wurden siehtbar gemaeht dureh die Fluorescenz im filtrierten UV-Lieht dureh Reakt ion a) mit einer L6sung yon 2~ Si]bernitrat in 2~ Ammoniak (Empfindliehkeit des Naehweises durch Sehw/irzung ca. 1 #g Aseorbins~ure), b) mit einer LSsung yon 0,45 g Na-aeeta t und 0,3 g Pheny]hydrazin in 10 ml Wasser sowie e) mit der L6sung yon 0,4 g 2,6-Diehlorphenolindophenol in 1 1 Methanol (Empfindlichkeit 1 #g). AscorbinsEure ist leieht mit den Reagent ien a und e zu identifizieren, w~hrend Dehydroaseorbins~Lnre sowohl m i t a und b reagiert. - - Von den Harnproben wurden 3 Tr. aufgetragen, jeder wurde eintroeknen gelassen. Die Harnchromatogramme zeigten nach Bespriihen mi t Reagens a nun farbige l~ingzonen, entsprechend ebensovielen reduzierenden Substanzen. Im frisehen H a m lieg sich Ascorbins~ure naehweisen (Rf ~ 0,5~), im alten H a m war Dehydroaseorbins/~ure (Rf = 0,56) zu erkennen. I m H a m nach Ascorbinsgurebelastung wurde noeh t i n Metabolit yon Ketonchar~kter ( ~ = 0,30) unbekannte r Xons t i tu t ion festgeste]lt.
1 Chem. analit. (Warszawa)4, 183--189 (1959) [Polniseh]. (Mit engl. Zus.fass.) Medizin. Akad. Poznafi (Posen). - - -~ Z. Naturforsehg. 8B, 374 (1953); vgl. diese Z. 148, 382 (1954). H. FI~EYTAG
Einen Naehweis fiir Panto thens~ure in biologisehen Fliissi~keiten un te r Ver- wendung yon Lactobacillus ~lantctrum oder Tetrahymena 2~yri/ormis fiihren H. BA- KE1L O. FI~NJ~, I. PAS~E1L A. DINNERSTEIN und H. SOBOT~ 1 dureh. Die Kul turen (L. p lan ta rum ATCC 8014 oder T. pyriformis Var. I , Mating Typ II) werden in 2,5 ml NghrlSsung (Zusammensetzung im Original) angesetzt. Die spezielle Teehnik ist in 2 besehrieben. Die zu untersuehende Probe wird zugesetzt, 3 Tage bei 37 ~ C inkubier t und die optische Diehte der LSsung gemessen. Fiir die Bestimmung im Blut wird dieses (bei der En tnahme mi t Citrat versetzt) 1:10 mit Enzym-Puffer- 16sung (siehe unten) verdfirmt, inkubier t und dann 15 rain im Autoklaven erhitzt , um die Re~ktion zu stoppen und alles EiweiB zu f~llen. Man filtriert und verwendet 0,25, 0,5 nnd 1,0 ml des Fi l t rates zur Messung. Zur Bestimmung im Urin verdi innt man diesen 1:20 mi t Citratpuffer (siehe unten), erhi tzt 10 rain im Autoklaven, filtriert und best imnl t die Diehte in 0,5, 1,5 und 2,5 ml. Zur Bestimmung in der Riickenmarlcsfliissiglceit wird diese wie das Blur vorbehandelt , nu r verdiirmt m~n 1 : 5 mit der Enzym-Pufferl6sung. Zur Messung verwendet man dieselben Nengen wie bei Urin. - - Enzym-Pu//erlSsung. 0,2 g Clarase (Fisher Sei. Co., New York) werden in 100 ml Citratpuffer, io~ 5,6 gel6st. - - Citrat-Pu//erldsung. 5 g KMiumeitrat- monohydra t und 1 g Citronensgure in 1000 ml Wasser 15sen.
1 Clin. Chemistry 6, 36--42 (1960). Mount Sinai Kosp., New York (USA). -- 2 :BAKER, H., V. HERBERT, O. FRANK, S. t t . HVTNER, L . R . WASSE!~ANN U. H. SOBOTKA: Clin. Chemistry 5, 275 (1959). -- HUTNE~, S. H., A. CURY u. H. BA- KER: Analyt . Chemistry 80, 849 (1958). UI~SULA BAr'ANN
Uber Agar-Papierelektrophorese yon Hiimoglobin A und F ber ichten F. I~AP~A- Point und M. I%AEINOVlTZ 1. I n Anlehnung a n bekannte Methoden arbei ten Verff. ein Verfahren aus, mi t dem es bei E inha l t en der umfangreichen Vorsehrif ten gelingt, die b eiden tI~moglobine gut zu t r ennen und, falls eKorderlieh, aueh densitometriseh oder naeh Elut ion zu best immen. Verff. benu tzen eine yon ihnen bereits besehriebene Appara tu r 2.
1 Clin. ehim. Aeta (Amsterdam) 4, 535--538 (1959). Municipal t tosp., Tel-Aviv (Israel). - - 2 I%~PAPORT, F., n. M. RAm~OVlTZ: Clin. ehim. Aota (Amsterdam) 4, 531 (1959). E. Mi~LLER, Wiirzburg