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1961 4. Analyse yon biologisehem Material 79 Whatman-Papier Nr. 1 wurde mit KaliumcyanidlSsung zur Beseitigung katalytisch wirksamer Eisen- und Kupferspuren behandelt. Chromatographiert wurde mit dem LSsungsmittelsystem n-Butano]-Essigs~ure-Wasser (r 1 : 5). Die Ringzonen wurden siehtbar gemaeht dureh die Fluorescenz im filtrierten UV-Lieht dureh Reaktion a) mit einer L6sung yon 2~ Si]bernitrat in 2~ Ammoniak (Empfindliehkeit des Naehweises durch Sehw/irzung ca. 1 #g Aseorbins~ure), b) mit einer LSsung yon 0,45 g Na-aeetat und 0,3 g Pheny]hydrazin in 10 ml Wasser sowie e) mit der L6sung yon 0,4 g 2,6-Diehlorphenolindophenol in 1 1 Methanol (Empfindlichkeit 1 #g). AscorbinsEure ist leieht mit den Reagentien a und e zu identifizieren, w~hrend Dehydroaseorbins~Lnre sowohl mita und b reagiert. -- Von den Harnproben wurden 3 Tr. aufgetragen, jeder wurde eintroeknen gelassen. Die Harnchromatogramme zeigten nach Bespriihen mit Reagens a nun farbige l~ingzonen, entsprechend ebensovielen reduzierenden Substanzen. Im frisehen Ham lieg sich Ascorbins~ure naehweisen (Rf ~ 0,5~), im alten Ham war Dehydroaseorbins/~ure (Rf = 0,56) zu erkennen. Im Ham nach Ascorbinsgurebelastung wurde noeh tin Metabolit yon Ketonchar~kter (~ = 0,30) unbekannter Xonstitution festgeste]lt. 1 Chem. analit. (Warszawa)4, 183--189 (1959) [Polniseh]. (Mit engl. Zus.fass.) Medizin. Akad. Poznafi (Posen). -- -~ Z. Naturforsehg. 8B, 374 (1953); vgl. diese Z. 148, 382 (1954). H. FI~EYTAG Einen Naehweis fiir Pantothens~ure in biologisehen Fliissi~keiten unter Ver- wendung yon Lactobacillus ~lantctrum oder Tetrahymena 2~yri/ormis fiihren H. BA- KE1L O. FI~NJ~, I. PAS~E1L A. DINNERSTEIN und H. SOBOT~ 1 dureh. Die Kulturen (L. plantarum ATCC 8014 oder T. pyriformis Var. I, Mating Typ II) werden in 2,5 ml NghrlSsung (Zusammensetzung im Original) angesetzt. Die spezielle Teehnik ist in 2 besehrieben. Die zu untersuehende Probe wird zugesetzt, 3 Tage bei 37 ~ C inkubiert und die optische Diehte der LSsung gemessen. Fiir die Bestimmung im Blut wird dieses (bei der Entnahme mit Citrat versetzt) 1:10 mit Enzym-Puffer- 16sung (siehe unten) verdfirmt, inkubiert und dann 15 rain im Autoklaven erhitzt, um die Re~ktion zu stoppen und alles EiweiB zu f~llen. Man filtriert und verwendet 0,25, 0,5 nnd 1,0 ml des Filtrates zur Messung. Zur Bestimmung im Urin verdiinnt man diesen 1:20 mit Citratpuffer (siehe unten), erhitzt 10 rain im Autoklaven, filtriert und bestimnlt die Diehte in 0,5, 1,5 und 2,5 ml. Zur Bestimmung in der Riickenmarlcsfliissiglceit wird diese wie das Blur vorbehandelt, nur verdiirmt m~n 1 : 5 mit der Enzym-Pufferl6sung. Zur Messung verwendet man dieselben Nengen wie bei Urin. -- Enzym-Pu//erlSsung. 0,2 g Clarase (Fisher Sei. Co., New York) werden in 100 ml Citratpuffer, io~ 5,6 gel6st. -- Citrat-Pu//erldsung. 5 g KMiumeitrat- monohydrat und 1 g Citronensgure in 1000 ml Wasser 15sen. 1 Clin. Chemistry 6, 36--42 (1960). Mount Sinai Kosp., New York (USA). -- 2 :BAKER, H., V. HERBERT, O. FRANK, S. tt. HVTNER, L.R. WASSE!~ANN U. H. SOBOTKA: Clin. Chemistry 5, 275 (1959). -- HUTNE~, S. H., A. CURY u. H. BA- KER: Analyt. Chemistry 80, 849 (1958). UI~SULA BAr'ANN Uber Agar-Papierelektrophorese yon Hiimoglobin A und F berichten F. I~AP~A- Point und M. I%AEINOVlTZ 1. In Anlehnung an bekannte Methoden arbeiten Verff. ein Verfahren aus, mit dem es bei Einhalten der umfangreichen Vorsehriften gelingt, die b eiden tI~moglobine gut zu trennen und, falls eKorderlieh, aueh densitometriseh oder naeh Elution zu bestimmen. Verff. benutzen eine yon ihnen bereits besehriebene Apparatur 2. 1 Clin. ehim. Aeta (Amsterdam) 4, 535--538 (1959). Municipal ttosp., Tel-Aviv (Israel). -- 2 I%~PAPORT, F., n. M. RAm~OVlTZ: Clin. ehim. Aota (Amsterdam) 4, 531 (1959). E. Mi~LLER, Wiirzburg

Über Agar-Papierelektrophorese von Hämoglobin A und F

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Page 1: Über Agar-Papierelektrophorese von Hämoglobin A und F

1961 4. Analyse yon biologisehem Material 79

Whatman-Papie r Nr. 1 wurde mit KaliumcyanidlSsung zur Beseitigung katalyt isch wirksamer Eisen- und Kupferspuren behandelt . Chromatographiert wurde mit dem LSsungsmittelsystem n-Butano]-Essigs~ure-Wasser (r 1 : 5). Die Ringzonen wurden siehtbar gemaeht dureh die Fluorescenz im filtrierten UV-Lieht dureh Reakt ion a) mit einer L6sung yon 2~ Si]bernitrat in 2~ Ammoniak (Empfindliehkeit des Naehweises durch Sehw/irzung ca. 1 #g Aseorbins~ure), b) mit einer LSsung yon 0,45 g Na-aeeta t und 0,3 g Pheny]hydrazin in 10 ml Wasser sowie e) mit der L6sung yon 0,4 g 2,6-Diehlorphenolindophenol in 1 1 Methanol (Empfindlichkeit 1 #g). AscorbinsEure ist leieht mit den Reagent ien a und e zu identifizieren, w~hrend Dehydroaseorbins~Lnre sowohl m i t a und b reagiert. - - Von den Harnproben wurden 3 Tr. aufgetragen, jeder wurde eintroeknen gelassen. Die Harnchromatogramme zeigten nach Bespriihen mi t Reagens a nun farbige l~ingzonen, entsprechend ebensovielen reduzierenden Substanzen. Im frisehen H a m lieg sich Ascorbins~ure naehweisen (Rf ~ 0,5~), im alten H a m war Dehydroaseorbins/~ure (Rf = 0,56) zu erkennen. I m H a m nach Ascorbinsgurebelastung wurde noeh t i n Metabolit yon Ketonchar~kter ( ~ = 0,30) unbekannte r Xons t i tu t ion festgeste]lt.

1 Chem. analit. (Warszawa)4, 183--189 (1959) [Polniseh]. (Mit engl. Zus.fass.) Medizin. Akad. Poznafi (Posen). - - -~ Z. Naturforsehg. 8B, 374 (1953); vgl. diese Z. 148, 382 (1954). H. FI~EYTAG

Einen Naehweis fiir Panto thens~ure in biologisehen Fliissi~keiten un te r Ver- wendung yon Lactobacillus ~lantctrum oder Tetrahymena 2~yri/ormis fiihren H. BA- KE1L O. FI~NJ~, I. PAS~E1L A. DINNERSTEIN und H. SOBOT~ 1 dureh. Die Kul turen (L. p lan ta rum ATCC 8014 oder T. pyriformis Var. I , Mating Typ II) werden in 2,5 ml NghrlSsung (Zusammensetzung im Original) angesetzt. Die spezielle Teehnik ist in 2 besehrieben. Die zu untersuehende Probe wird zugesetzt, 3 Tage bei 37 ~ C inkubier t und die optische Diehte der LSsung gemessen. Fiir die Bestimmung im Blut wird dieses (bei der En tnahme mi t Citrat versetzt) 1:10 mit Enzym-Puffer- 16sung (siehe unten) verdfirmt, inkubier t und dann 15 rain im Autoklaven erhitzt , um die Re~ktion zu stoppen und alles EiweiB zu f~llen. Man filtriert und verwendet 0,25, 0,5 nnd 1,0 ml des Fi l t rates zur Messung. Zur Bestimmung im Urin verdi innt man diesen 1:20 mi t Citratpuffer (siehe unten), erhi tzt 10 rain im Autoklaven, filtriert und best imnl t die Diehte in 0,5, 1,5 und 2,5 ml. Zur Bestimmung in der Riickenmarlcsfliissiglceit wird diese wie das Blur vorbehandelt , nu r verdiirmt m~n 1 : 5 mit der Enzym-Pufferl6sung. Zur Messung verwendet man dieselben Nengen wie bei Urin. - - Enzym-Pu//erlSsung. 0,2 g Clarase (Fisher Sei. Co., New York) werden in 100 ml Citratpuffer, io~ 5,6 gel6st. - - Citrat-Pu//erldsung. 5 g KMiumeitrat- monohydra t und 1 g Citronensgure in 1000 ml Wasser 15sen.

1 Clin. Chemistry 6, 36--42 (1960). Mount Sinai Kosp., New York (USA). -- 2 :BAKER, H., V. HERBERT, O. FRANK, S. t t . HVTNER, L . R . WASSE!~ANN U. H. SOBOTKA: Clin. Chemistry 5, 275 (1959). -- HUTNE~, S. H., A. CURY u. H. BA- KER: Analyt . Chemistry 80, 849 (1958). UI~SULA BAr'ANN

Uber Agar-Papierelektrophorese yon Hiimoglobin A und F ber ichten F. I~AP~A- Point und M. I%AEINOVlTZ 1. I n Anlehnung a n bekannte Methoden arbei ten Verff. ein Verfahren aus, mi t dem es bei E inha l t en der umfangreichen Vorsehrif ten gelingt, die b eiden tI~moglobine gut zu t r ennen und, falls eKorderlieh, aueh densitometriseh oder naeh Elut ion zu best immen. Verff. benu tzen eine yon ihnen bereits besehriebene Appara tu r 2.

1 Clin. ehim. Aeta (Amsterdam) 4, 535--538 (1959). Municipal t tosp., Tel-Aviv (Israel). - - 2 I%~PAPORT, F., n. M. RAm~OVlTZ: Clin. ehim. Aota (Amsterdam) 4, 531 (1959). E. Mi~LLER, Wiirzburg