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Selivanov und GOD
Nachweise von Ketohexosen bzw. Glucose
Der Glucoseoxidase-Test
(GOD-Test)Nachweis von Glucose
GOD
Der Glucoseoxidase-Test ist ein spezifischer Nachweis für Glucose. Er dient zum Beispiel zur leichten Unterscheidung von Glucose und Fructose.
GOD
Der Test erfolgt mit Hilfe des Enzym Glucoseoxidase, das aus Schimmelpilzen der Gattungen Aspergillus und Penicillium gewonnen wird.
GOD
Die Glucoseoxidase, eine Dehydrogenase, ist ein Protein mit Flavin-adenin-dinucleotid (FAD) als prosthetischer Gruppe. Glucoseoxidase katalysiert die Oxidation von -D-Glucose zur Gluconsäure.
GOD
-D-Glucose wird zur Gluconsäure katalytisch oxidiert und Wasser zu Wasserstoffperoxid reduziert.
GOD
Da H2O2 farblos ist, befindet sich auf dem gelb grundierten Teststäbchen der Indikator o-Toluidin(2-Aminotoluol 2-Methylanilin), der zu einem blauen Farbstoff oxidiert wird. Zusammen mit dem gelben Grund ergibt das eine grüne Färbung, anhand derer Schattierung die Menge der anfänglichen Gesamtglucose abgelesen werden kann.
GOD
Wie bereits besprochen besteht zwischen der -D-Glucose,der offenen D-Glucose und der -D-Glucose ein Gleichgewicht. (37:0,3:63)
GOD
Da dieses Gleichgewicht besteht,wird bei Umsetzung der -D-Glucose zur Gluconsäure das Verhältnis zu Gunsten der -D-Glucose verschoben und die Glucose kann auch quantitativ bestimmt werden.
GODStörende Faktoren:
- Anwesenheit von Oxidationsmittel
- Tatsache, das Glucose mit Fructose in
einem Gleichgewicht steht
GOD
Zusammenfassung
Selivanov
Nachweis für Ketosen
Alexej Myschjak Selivanov‘s Reagenz
Die Selivanov- Reagenz dient zum Nachweis von
Ketohexosen
Selivanov
Versuch
Selivanov
• 2 ml Probelösung werden mit 2 ml Selivanov - Reagenz vermischt. Der Ansatz wird langsam und gleichmäßig erhitzt (Schutzbrille !). Falls die Lösung siedet und noch keine Farbänderung auftritt, ist das Testergebnis negativ, und der Versuch kann beendet werden.
• Optimal ist eine Temp. Von ca. 70°
SelivanovDie Selivanov Reagenz besteht aus folgenden Substanzen:
- Resorcin in 5%Ethanol (EtOH)
- HCl als H3O+- Lieferant
Selivanov
Erwartung
Selivanov
• Fructose: tiefrot• Saccharose: rot• Glucose: hellrot
Selivanov
Erklärung
Selivanov
Auch bei der Fructose besteht ein Gleichgewicht
SelivanovBei der Fructose aber reagiert die offene Form.
Unter dem katalytischen Einfluss von H3O+ wird Wasser abgespalten und es entsteht 5-Hydroxymethylfurfural.
SelivanovDas gebildete 5-Hydroxymethylfurfural reagiert nun mit der Diketoform von Resorcin unter Wasserabspaltung weiter zu einem roten Farbstoff
Selivanov
Die Selivanov-Reagenz ist leider kein spezifischer Nachweis für Fructose, da:
-Saccharose neben dem Monomer Glucose auch aus Fructose aufgebaut ist. Eine saure Hydrolyse der Saccharose, die bei diesem Versuch stattfindet, führt zu beiden Monosacchariden.
Selivanov
Hier geht die Umwandlung von Glucose in Fructose über die Ketoenoltauto-merie nicht (nur im Alkalischen)
Selivanov
Zusammenfassung
Vielen Dank für ihre Aufmerksamkeit
und wir wünschen ihnen noch einen
erholsamen LK Chemie
Vormittag
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