11. Eignungsprüfung Hemmstoff Mai 2018 - QSE GmbH 11. Eignungspruefung...hemmstoff-freie Milch (Tabelle 1). Die metrologische Rückführbarkeit ist auf die zugehörige SI-Einheit

11. Eignungsprüfung Hemmstoff Mai 2018

Ergebnisendbericht

QSE GmbH Steingruber Straße 6

91746 Weidenbach/Triesdorf Deutschland

Tel.: +49 (0)9826 / 623-44 E-Mail: [email protected]

Triesdorf, den 28.06.2018

Ann-Kathrin Zwick stellv. Bereichsleitung Eignungsprüfungen

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Inhaltsverzeichnis

1 Ziel von Eignungsprüfungen ...............................................................................................3

2 Durchführung der Eignungsprüfung ....................................................................................3

3 Herstellung und Überprüfung des Probenmaterials ............................................................3

4 Teilnehmer ........................................................................................................................4

5 Ergebnisse und Bewertung .................................................................................................4

5.1 Testsysteme .................................................................................................................... 5

5.2 Darstellung der Einzelergebnisse ................................................................................... 5

5.3 Auswertung der Einzelergebnisse ................................................................................ 15

5.4 Bewertung der Einzelergebnisse .................................................................................. 17

5.5 Empfehlungen .............................................................................................................. 18

5.6 Vergleich der Ergebnisse der Eignungsprüfungen 2008 bis 2018 ................................ 19

6 Zusammenfassung ........................................................................................................... 21

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1 Ziel von Eignungsprüfungen

Eignungsprüfungen bieten als Instrument der externen Qualitätssicherung Laboratorien die Möglichkeit, ihre eigene Leistungsfähigkeit zu überwachen und im Vergleich zu anderen Laboratorien objektiv zu bewerten.

Ziel dieser Eignungsprüfung Hemmstoff war der Nachweis von Hemmstoffen bzw. Tierarzneimittelrückständen (Antibiotika) auf MRL-Niveau (maximaler Rückstandshöchstwert entsprechend Verordnung (EU) Nr. 37/2010) durch die Routine-Hemmstoff-Untersuchung des teilnehmenden Laboratoriums.

2 Durchführung der Eignungsprüfung

Anbieter der Eignungsprüfung ist die QSE GmbH. Die Organisation und Auswertung der Eignungsprüfung erfolgten unabhängig durch die QSE GmbH, nach DIN ISO / IEC 17043:2010. Die AiM GmbH ist Unterauftragnehmer der QSE GmbH und ist für die Herstellung und den Versand des Probenmaterials zuständig.

QSE GmbH Hochstatt 2 D-85283 Wolnzach

AiM GmbH Kaiser-Ludwig-Platz 2 D-80996 München

Ein Probenset bestand aus 15 codierten lyophilisierten H-Vollmilch-Proben. Eine definierte Menge an deionisiertem sterilem Wasser zum Resuspendieren des Probenmaterials und eine detaillierte Anleitung zur Aufbereitung des Probenmaterials waren jedem Probenset beigefügt.

Jedes Probenset enthielt insgesamt 8 Proben mit verschiedenen Antibiotika in der Konzentration des MRL. Es wurden mit Penicillin G, Cloxacillin, Ampicillin und Cefapirin Wirkstoffe ausgewählt, die häufig zur Behandlung von laktierenden Kühen eingesetzt werden. Bei den restlichen 7 Proben des Probensets handelte es sich um hemmstoff-freie Milch (Tabelle 1). Die metrologische Rückführbarkeit ist auf die zugehörige SI-Einheit Masse rückzuführen.

Tabelle 1: Zusammensetzung Probenset

Probenanzahl Hemmstoff Konzentration [µg/kg]

2 Penicillin G 4

2 Cloxacillin 30

2 Ampicillin 4

2 Cefapirin 60

7 - -

Der Versand des Probenmaterials erfolgte am 23. April 2018. Die Teilnehmer analysierten das Probenmaterial mit ihrem Testsystem, trugen die qualitativen Ergebnisse (positiv/negativ) in den Auswertungsbogen ein und schickten diesen bis zum 11. Mai 2018 an die QSE GmbH zurück. Alle Ergebnisse werden bei der QSE GmbH und dem Unterauftragnehmer AiM GmbH anonym und vertraulich behandelt.

Die Analysenergebnisse mussten mit eigenem Personal und laboreigenen Geräten selbsttätig und ohne fremde Hilfe im eigenem Labor ermittelt werden.

Alle Eignungsprüfungs-Teilnehmer erhalten ein Teilnahmezertifikat. Eine erfolgreiche Teilnahme an der Eignungsprüfung wird mit einem Zertifikat bestätigt, wenn die Substanzen einer Antibiotikaklasse bzw. die hemmstofffreie Milch vollständig und korrekt erfasst wurde.

3 Herstellung und Überprüfung des Probenmaterials

Bei dem Probenmaterial handelt es sich um unkonservierte H-Vollmilch (3,5 % Fett), in die die jeweilige antibiotische Substanz, in der entsprechenden Konzentration gelöst wird. Das Probenmaterial wird in 5-mL Glasflaschen abgefüllt, mit einem Gummistopfen versehen und durch Lyophilisierung haltbar gemacht. Im Anschluss werden die Glasflaschen mit einem Aluminiumverschluss verbördelt. Die definierte Menge an deionisierten Wasser zum Resuspendieren, wird in 5-mL Glasflaschen abgefüllt und sterilisiert.

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Um sicher zu stellen, dass die Reihenfolge der Substanzen (Penicillin G, Cloxacillin, Ampicillin, Cefapirin und hemmstoff-freie Milch) in jedem Probenset variierte, wurden die Sets mit einer geeigneten Software randomisiert. Anschließend wurde abgesichert, dass alle Probensets hinsichtlich der Verteilung der Substanzen, als auch der Verteilung der positiven und negativen Proben variierten. Verwechslungen bei der Probenetikettierung wurden ausgeschlossen, indem die einzelnen Substanzen zeitlich getrennt voneinander hergestellt sowie etikettiert und erst anschließend zu Sets zusammengeführt wurden.

Die Homogenität der Abfüllung wird durch den Hersteller über die Bestimmung der Milchinhaltsstoffe in den Einzelproben ermittelt. Die Haltbarkeit der lyophilisierten Standards beträgt fünf Jahre und wird regelmäßig im Verlauf der Qualitätskontrolle der Standards durch den Hersteller verifiziert.

Zur Überprüfung der Konzentrationen an Penicillin G, Cloxacillin, Ampicillin und Cefapirin im Probenmaterial wurden pro Substanz jeweils zwei Probenflaschen zufällig aus dem gesamten Los entnommen. Die Proben wurden vor Beginn der Eignungsprüfung Hemmstoff, durch ein unabhängiges nach DIN EN ISO/IEC 17025:2005 akkreditiertes Prüflabor, mittels LC-MS/MS untersucht. Die Konzentrationen wurden bestätigt1.

1 Den Prüfbericht stellen wir auf Anfrage gerne zur Verfügung.

4 Teilnehmer

Es nahmen 150 Laboratorien und Kontrollverbände der Milchindustrie und Lebensmittelsicherung aus insgesamt 17 Ländern an der Eignungsprüfung teil (Abbildung 1).

Abbildung 1: Herkunft der Teilnehmer an der Eignungsprüfung

5 Ergebnisse und Bewertung

Insgesamt wurden 183 Probensets an die Teilnehmer verschickt. Für 177 Probensets gingen Rückmeldungen ein. Da einige der Teilnehmer mit mehreren Betriebsstätten, Testsystemen etc. an der Eignungsprüfung teilnahmen, standen insgesamt 379 Testreihen für die Ergebnisauswertung zur Verfügung (Tabelle 2).

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5.1 Testsysteme

Die Hemmstoff-Untersuchung wurde bei 182 Testreihen mit einem mikrobiologischen Test und bei 142 Testreihen mit einem Schnelltest durchgeführt. Bei 55 Testreihen wurde nicht angegeben, welche Testmethode verwendet wurde.

Es wurde eine große Anzahl verschiedener Testsysteme eingesetzt. Bei den mikrobiologischen Testmethoden waren der BRT Hemmstofftest (AiM GmbH), der Delvotest BR (DSM) und der Delvotest SP (DSM) am häufigsten vertreten. Bei den Schnelltests dominierten Charm-Test (Charm Sciences, Inc.), BetaStar (Neogen), und Snap-Test (IDEXX GmbH). Die Angaben zum Testsystem wurden freiwillig von den Teilnehmern zur Verfügung gestellt.

5.2 Darstellung der Einzelergebnisse

Einen Überblick über die Einzelergebnisse der Teilnehmer gibt Tabelle 2. Proben in denen ein Hemmstoff nachgewiesen wurde, wurden mit „+“, Proben in denen kein Hemmstoff gefunden wurde, mit „-“ gekennzeichnet. Wurden keine Ergebnisse zurückgemeldet, sind die entsprechenden Felder grau hinterlegt. Gleichartige Substanzen wurden in Tabelle 2 durchnummeriert. Die Nummerierung entspricht aufsteigend der Reihenfolge der Substanz im Probenset.

Tabelle 2: Darstellung der Einzelergebnisse

Test- reihe

Testmethode

Cloxacillin 30 µg/kg

Ampicillin 4 µg/kg

Penicillin G 4 µg/kg

Cefapirin 60 µg/kg

Hemmstoff-freie Milch

1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 3 4 5 6 7

1 A keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

1 B keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

2 A mikrobiologischer Test + + + + + + + + - - - - - - -

2 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

2 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


3 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

4 mikrobiologischer Test + + + + + + + + - - - - - - -

5 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

5 B mikrobiologischer Test + + + + + + + + - - - - - - -

5 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

5 D mikrobiologischer Test + + + + + + + + - - - - - - -


7 A mikrobiologischer Test - - + + + + + + - - - - - - -

7 B mikrobiologischer Test - - + + + + + + - - - - - - -

7 C mikrobiologischer Test - - + + + + + + - - - - - - -


8 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

8 C keine Angabe - - - - - - - - - - - - - - -

8 D Schnelltest - - - - - - - - - - - - - - -

8 E Schnelltest + + - + + + + + - - - - - - -


9 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



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Test- reihe

Testmethode


Ampicillin 4 µg/kg


Cefapirin 60 µg/kg


1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 3 4 5 6 7

10 C keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -





13 B Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -


14 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

14 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


15 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

17 A keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

17 B keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

17 C keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

17 D keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

18 A Schnelltest + + + - + + + + - - - - - - -


19 Schnelltest - + + + + + + + - - - - - - -

20 Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

21 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

22 A keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

22 B keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

23 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

25 A keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

25 B keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

26 A Schnelltest - - + + + + + + - - - - - - -

26 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



29 B Schnelltest - - + + + + + + - - - - - - -


30 B Schnelltest - - + + + + + + - - - - - - -


31 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

32 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



33 B Schnelltest - + - - + + + + - - - - - - -


34 B Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -



36 B keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

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Test- reihe

Testmethode


Ampicillin 4 µg/kg


Cefapirin 60 µg/kg


1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 3 4 5 6 7



38 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

38 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

38 D Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

39 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

40 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

41 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

42 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


43 A Schnelltest + + + + + - + + - - - - - - +

43 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

43 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

43 D mikrobiologischer Test - + + + + - + + - - - - - - -

43 E mikrobiologischer Test - - + + + + + + - - - - - - -

43 F mikrobiologischer Test - - + + + + + + - - - - - - -


44 B Schnelltest + + - + + + + + - - - - - - -



45 C Schnelltest + + + - + + + + - - - - - - -

45 D Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

46 A keine Angabe - - + + + + + + - - - - - - -

46 B keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

46 C keine Angabe - - + + + + + + - - - - - - -


47 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

48 A keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

48 B keine Angabe + + + - + + + + - - - - - - -


49 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



51 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



52 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



54 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -




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Test- reihe

Testmethode


Ampicillin 4 µg/kg


Cefapirin 60 µg/kg


1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 3 4 5 6 7


58 B Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -

58 C Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -

58 D Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -

58 E Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -


59 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

60 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


61 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -




62 C mikrobiologischer Test + + + + + + + + - - - - - - -

62 D Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

62 E Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -




63 D Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -




64 D Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

65 mikrobiologischer Test - - + + + + + + - - - - - - -

66 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


67 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


68 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


69 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


70 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



71 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

72 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


73 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



74 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

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Test- reihe

Testmethode


Ampicillin 4 µg/kg


Cefapirin 60 µg/kg


1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 3 4 5 6 7


75 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

76 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



77 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


78 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

79 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



80 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

81 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



82 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

84 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -



85 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


86 B Schnelltest + + - + + + + + - - - - - - -



87 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


88 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



90 AA Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

90 AAA Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -


90 BB Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

90 BBB Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -


90 CC Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

90 CCC Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -


90 DD Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

90 DDD Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -

90 E mikrobiologischer Test + + + + + + + + - - - - - - -

90 EE Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

90 EEE Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

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Test- reihe

Testmethode


Ampicillin 4 µg/kg


Cefapirin 60 µg/kg


1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 3 4 5 6 7


91 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


92 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

93 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

94 Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



96 B Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -


98 Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


99 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


100 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

101 A keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

101 B keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -





104 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


105 B keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

105 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


106 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

106 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

107 A mikrobiologischer Test + - + + + + + + - - - - - - -



108 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

109 A Schnelltest + - + + + + + + - - - - - - -


110 A keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

110 B keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

111 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


112 A Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -

112 B Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -




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Test- reihe

Testmethode


Ampicillin 4 µg/kg


Cefapirin 60 µg/kg


1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 3 4 5 6 7


114 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

114 D Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

114 E Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


115 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


116 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -




117 D Schnelltest + + - + + + + + - - - - - - -

117 E Schnelltest - - + + + + + + - - - - - - -

118 A mikrobiologischer Test + + + + + + + + - - + - - - -

118 B mikrobiologischer Test + + + + + + + + - - + - - - -

118 C mikrobiologischer Test + + + + + + + + - - + - - - -

118 E Schnelltest + + + + + + + + - - + - - - -




120 E Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



121 D Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



122 E Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -




123 D Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

123 E Schnelltest - + + + + + + + - - - - - - -


124 B keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -


124 E keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

125 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - -


126 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

127 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

128 A Schnelltest + + - + + + + + - - - - - - -

128 B Schnelltest + + - + + + + + - - - - - - -

128 C mikrobiologischer Test + + - + + + + + - - - - - - -

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Test- reihe

Testmethode


Ampicillin 4 µg/kg


Cefapirin 60 µg/kg


1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 3 4 5 6 7


129 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

130 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

130 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

131 A keine Angabe + + - - + + + + - - - - - - -

131 B keine Angabe - - + + + + + + - - - - - - -



133 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

133 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



136 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -


137 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

137 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


139 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


140 A Schnelltest + + - - + + + + - - - - - - -



142 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -





143 E mikrobiologischer Test + + + + + + + + - - - - - - -

143 F mikrobiologischer Test + + + + + + + + - - - - - - -

143 G mikrobiologischer Test + + + + + + + + - - - - - - -

143 H mikrobiologischer Test + + + + + + + + - - - - - - -


144 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



146 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

147 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


147 C mikrobiologischer Test - - + + + + + + - - - - - - -


149 A keine Angabe - - + + + + + + - - - - - - -

149 B keine Angabe - - + + + + + + - - - - - - -


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Test- reihe

Testmethode


Ampicillin 4 µg/kg


Cefapirin 60 µg/kg


1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 3 4 5 6 7


150 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


151 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -




153 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


154 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -







159 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -



160 keine Angabe - - + + + + + + - - - - - - -


162 A keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

162 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

163 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

163 B keine Angabe - - + + + + + + - - - - - - -

164 mikrobiologischer Test - - - - - - - - - - - - - - -


165 B keine Angabe + + + - + + + + - - + - - - -

165 C keine Angabe + + - + + + + + - - - - - - -



166 C Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -


167 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

168 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

169 Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

170 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

171 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -


172 B Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

173 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

174 Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

175 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

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Test- reihe

Testmethode


Ampicillin 4 µg/kg


Cefapirin 60 µg/kg


1 2 1 2 1 2 1 2 1 2 3 4 5 6 7

176 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

177 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

178 Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

179 Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

180 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

182 keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

183 A Schnelltest + + + + + + + + - - - - - - -

183 B Schnelltest - - - - - - - - - - - - - - -

185 A keine Angabe + + + + + + + + - - - - - - -

185 B keine Angabe - - + + + + + + - - - - - - -

Kein Ergebnis zurückgemeldet, da der Kunde nicht mehr genügend Probenmaterial zur Verfügung hatte.

Die Testreihen 16, 24, 83, 119, 141 und 181 wurden nicht zurückgemeldet.

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5.3 Auswertung der Einzelergebnisse

Ein Teilnehmer (Testreihe 175) gab an, dass sich das Lyophilisat schlecht resuspendieren ließ. Der Nachweis von Hemmstoff-Substanzen wurde dadurch nicht negativ beeinflusst (Tabelle 2).

Tabelle 3: Zusammenfassende Ergebnisdarstellung

Hemmstoff-

freie Proben

Hemmstoff- haltige Proben


Ampicillin 4 µg/kg


Cefapirin 60 µg/kg

Inhalt je Probenset 7 8 2 2 2 2

Verschickte Proben 1281 1464 366 366 366 366

Rückgemeldete Proben 1238 1416 354 354 354 354

Alle Testmethoden

Rückgemeldete Ergebnisse 2653 3032 758 758 758 758

Ausbleibende Ergebnisse 1 0 0 0 0 0

Anzahl negative Resultate 2646 162 90 54 10 8

Anzahl positive Resultate 6 2870 668 704 748 750

Negative Resultate [%] 99,7 5,3 11,9 7,1 1,3 1,1

Positive Resultate [%] 0,2 94,7 88,1 92,9 98,7 98,9

Keine Resultate [%] 0,1 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0

Mikrobiologische Testmethoden






Schnelltestmethoden






Sonstige Testmethoden / Testmethoden ohne Angaben


Ausbleibende Ergebnisse 1 0 0 0 0 0





Keine Resultate [%] 0,26 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0

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Die Auswertung der Einzelergebnisse zeigte, dass die hemmstoff-freie Milch insgesamt zu 99,7 % als hemmstoff-negativ identifiziert wurde. Insgesamt traten 6 falsch-positive Ergebnisse in 6 von 379 ausgewerteten Testreihen auf (Tabelle 2 und 3, Abbildung 2).

Die Auswertung aller Testmethoden (mikrobiologische Tests, Schnelltests und sonstige/nicht spezifizierte Tests) zeigte, dass Cloxacillin zu 88,1 %, Ampicillin zu 92,9 %, Penicillin G zu 98,7 % und Cefapirin zu 98,9 % als hemmstoff-positiv detektiert wurden. Insgesamt wurden in der Eignungsprüfung damit 94,7 % der hemmstoff-haltigen Proben als hemmstoff-positiv bewertet (Tabelle 3, Abbildung 2).

Abbildung 2: Richtigkeit der Einzelergebnisse [%] unter Berücksichtigung aller Testmethoden (mikrobiologische Tests, Schnelltests und sonstige/nicht spezifizierte Tests)

2

Abbildung 3: Richtigkeit der Einzelergebnisse [%] unter Berücksichtigung aller mikrobiologischen Testmethoden2

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Abbildung 4: Richtigkeit der Einzelergebnisse [%] unter Berücksichtigung aller Schnelltestmethoden

2

Cloxacillin wurde mit mikrobiologischen Testmethoden zu 84,6 % als hemmstoff-positiv detektiert. Mit Schnelltests wurden 94,4 % und mit sonstigen/nicht spezifizierten Tests wurden 83,6 % der Cloxacillin-Proben als positiv bewertet (Tabelle 3, Abbildung 3 und 4).

Ampicillin wurde mit mikrobiologischen Tests zu 99,2 % als hemmstoff-positiv erfasst. Mit Schnelltests wurde Ampicillin zu 84,5 % und mit sonstigen/nicht spezifizierten Tests zu 93,6 % als hemmstoff-positiv detektiert (Tabelle 3, Abbildung 3 und 4).

Penicillin G haltige Proben wurden mit mikrobiologischen Tests zu 99,2 % als hemmstoff-positiv erfasst. Mit Schnelltests wurde Penicillin G zu 98,2 % und mit sonstigen/nicht spezifizierten Tests ebenfalls zu 98,2 % als hemmstoff-positiv detektiert (Tabelle 3, Abbildung 3 und 4).

Cefapirin wurde mit mikrobiologischen Testsystemen zu 99,5 %, mit Schnelltests zu 98,6 % und mit sonstigen/nicht spezifizierten Tests zu 98,2 % als hemmstoff-positiv detektiert (Tabelle 3, Abbildung 3 und 4).

5.4 Bewertung der Einzelergebnisse

Das Ziel von Eignungsprüfungen ist in erster Linie die Beurteilung der Leistungsfähigkeit der teilnehmenden Laboratorien. Gesteigert werden kann die Leistungsfähigkeit beispielsweise durch die Identifizierung potentieller Fehlerquellen. In der vorliegenden Eignungsprüfung wurden deshalb falsche Ergebnisse2 mit besonderer Aufmerksamkeit betrachtet.

Der Großteil der Teilnehmer machte freiwillige Angaben zum verwendeten Testsystem. Die Bewertung der eingesetzten Testsysteme ist nicht das Ziel der vorliegenden Eignungsprüfung, auf Grund der ausführlichen Informationen konnten die eingesetzten Testsysteme in der folgenden Bewertung jedoch mit berücksichtigt werden.

Betrachtung der falsch-positiven hemmstoff-freien Proben

Bei 3 von 150 Teilnehmern wurde hemmstoff-freie Milch als falsch-positiv detektiert (Tabelle 2). Eine mögliche Ursache für falsch-positive Ergebnisse ist die Verschleppung von hemmstoff-haltiger auf hemmstoff-freie Milch während der Untersuchungsdurchführung. Wurden hemmstoff-haltige Proben ebenfalls nicht korrekt detektiert (dies war bei 2 Testreihen der Fall), kann auch ein Vertauschen von hemmstoff-freien mit hemmstoff-haltigen Proben innerhalb des Probensets nicht ausgeschlossen werden. Eine Verwechslung bei der Etikettierung der Proben kann ausgeschlossen werden (Kapitel 3).

2 Zu den „falschen Ergebnissen“ zählen alle hemmstoff-haltigen Proben, die hemmstoff-negativ erfasst wurden bzw. alle hemmstoff-freien Proben,

die hemmstoff-positiv erfasst wurden. Zu den „richtigen Ergebnissen“ zählen alle hemmstoff-haltigen Proben, die hemmstoff-positiv erfasst wurden bzw. alle hemmstoff-freien Proben, die hemmstoff-negativ erfasst wurden.

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Betrachtung der falsch-negativen hemmstoff-haltigen Proben

Werden hemmstoff-haltige Proben als falsch-negativ detektiert, kann dies verschiedenste Ursachen haben. So können sich Fehler in der Probenaufbereitung oder Testdurchführung, z. B. zu kurze Inkubationszeiten oder die Nicht-Beachtung von Herstellerangaben ungünstig auf das Endergebnis auswirken. Auch die Nachweistoleranzen der Testsysteme und die Wiederholgrenzen der Lesegeräte müssen berücksichtigt werden. So gaben Teilnehmer auch dieses Jahr wieder an, dass Untersuchungsergebnisse im Grenzbereich der Einstufung lagen. Wie solche „grenzwertigen“ Ergebnisse in der Routineuntersuchung eingestuft werden, liegt letztendlich im Verantwortungsbereich und in der Zielsetzung der jeweiligen Laboratorien.

Ziel der vorliegenden Eignungsprüfung war der Nachweis von Antibiotika in der Konzentration des MRLs. Die Substanzen Ampicillin, Cloxacillin, Cefapirin und Penicillin G wurden in entsprechenden Konzentrationen zugesetzt (Tabelle 1) und das Probenmaterial durch ein unabhängiges Institut geprüft und bestätigt (Kapitel 3).

Auffällig war, dass bei der Substanz Cloxacillin meist beide Proben negativ detektiert wurden, unabhängig welche Testmethode verwendet wurde. Insgesamt wurde Cloxacillin bei 48 von 379 ausgewerteten Testreihen falsch-negativ detektiert (Tabelle 2).

Bei 33 von 379 ausgewerteten Testreihen wurden mit Ampicillin versetzte Proben falsch-negativ detektiert (Tabelle 2). Ampicillin wurde v. a. mit Schnelltests nicht korrekt auf MRL-Niveau nachgewiesen.

Von den 379 ausgewerteten Testreihen wurden 6 Penicillin G haltige Proben falsch-negativ bewertet (Tabelle 2). Die falsch-negativen Ergebnisse waren unabhängig von der Testmethode.

Cefapirin wurde bei 4 von 379 Testreihen falsch-negativ bewertet, alle falschen Bewertungen wurden mit einem Schnelltest erzielt (Tabelle 2). Die falsch-negativen Ergebnisse waren unabhängig von der Testmethode.

5.5 Empfehlungen

Wenn Hemmstoffe auf MRL-Niveau nicht nachgewiesen wurden bzw. hemmstoff-freie Milch falsch-positiv detektiert wurde, kann dies verschiedene Ursachen haben. Werden Fehler wie zum Beispiel Probenverwechslungen ausgeschlossen, sollte die Probenaufbereitung und Testdurchführung genau überprüft werden. Dazu empfiehlt es sich die Vorgehensweise Schritt für Schritt mit den Vorgaben des Herstellers zu vergleichen und bei der Testdurchführung besonders auf Probenmenge, -temperatur und -beschaffenheit zu achten. Typische Fehlerquellen sind:

Aufbereitung und Lagerung des Probenmaterials

Pipettierfehler, Verschleppungen und kontaminierte Laborgeräte

Verwechslung, falsche Lagerung und Überschreitung des MHD von Chemikalien

Falsche Lagerung und Überschreitung des MHD des Testkits

Mischung der Testkit- und Chemikalien-Chargen (Schnelltests)

Inkubation der Testsysteme (Temperatur, Zeit)

Funktion und Kalibrierung des Lesegerätes

Generell empfehlen wir bei der Hemmstoffuntersuchung und zur Kalibrierung der Lesegeräte die Verwendung von geeigneten Positiv- und Negativstandards. Zum einen kann damit die Funktionsfähigkeit der Testsysteme überprüft werden, zum anderen geben diese einen Anhaltspunkt für die Einstufung der Ergebnisse. Bei den mikrobiologischen Testsystemen wird durch den Farbumschlag des Negativstandards außerdem der optimale Auswertezeitpunkt bestimmt.

2 Zu den „falschen Ergebnissen“ zählen alle hemmstoff-haltigen Proben, die hemmstoff-negativ erfasst wurden bzw. alle hemmstoff-freien Proben, die hemmstoff-positiv erfasst wurden. Zu den „richtigen Ergebnissen“ zählen alle hemmstoff-haltigen Proben, die hemmstoff-positiv erfasst wurden bzw. alle hemmstoff-freien Proben, die hemmstoff-negativ erfasst wurden.

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5.6 Vergleich der Ergebnisse der Eignungsprüfungen Hemmstoff 2008 bis 2018

Die Abbildungen 5 bis 7 zeigen die Ergebnisse der vorliegenden Eignungsprüfung Hemmstoff im Vergleich zu den Ergebnissen der Eignungsprüfungen Hemmstoff aus den Jahren 2008 bis 2017. Die Hemmstoff-Substanz Cefapirin wurde 2011 zum ersten Mal in der Eignungsprüfung eingesetzt.

Abbildung 5: Vergleich der Eignungsprüfungs-Ergebnisse der Jahre 2008 bis 2018 unter Berücksichtigung aller Testmethoden (mikrobiologische Tests, Schnelltests und sonstige/nicht spezifizierte Tests)

2

Abbildung 6: Vergleich der Eignungsprüfungs-Ergebnisse der Jahre 2008 bis 2018 unter Berücksichtigung der mikrobiologischen Testmethoden

2 2 Zu den „falschen Ergebnissen“ zählen alle hemmstoff-haltigen Proben, die hemmstoff-negativ erfasst wurden bzw. alle hemmstoff-freien Proben, die hemmstoff-positiv erfasst wurden. Zu den „richtigen Ergebnissen“ zählen alle hemmstoff-haltigen Proben, die hemmstoff-positiv erfasst wurden bzw. alle hemmstoff-freien Proben, die hemmstoff-negativ erfasst wurden.

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Abbildung 7: Vergleich der Eignungsprüfungs-Ergebnisse der Jahre 2008 bis 2018 unter Berücksichtigung der Schnell-

testmethoden2

Die Ergebnisse von Penicillin G, Cefapirin und der hemmstoff-freien Milchproben wurden im Vergleich zum Vorjahr weitestgehend bestätigt und recht sicher erfasst.

Cloxacillin wurde mit mikrobiologischen Testmethoden im Vergleich zum Vorjahr mit einer etwas geringeren Sicherheit erfasst, während sich die Effizienz der Ergebnisse für die Schnelltestmethoden um circa 10 % verbesserte. Ampicillin wurde mit Schnelltestmethoden im Vergleich zum Vorjahr mit einer weitaus geringeren Sicherheit erfasst (84,5 %) im Gegensatz zu den mikrobiologischen Testmethoden (99,2 %) hier wurden die Ergebnisse bestätigt. Cloxacillin-haltige und Ampicillin-haltige Proben wurden insgesamt nur bedingt zuverlässig nachgewiesen (Abbildung 5 bis 7).


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6 Zusammenfassung

Organisation und Auswertung der Eignungsprüfungen erfolgten unabhängig durch die QSE GmbH. Herstellung und Versand des Probenmaterials wurde von der AiM GmbH im Unterauftrag durchgeführt.

Ein Probenset bestand aus 15 lyophilisierten Vollmilch-Proben. Jedes Probenset enthielt die Hemm- bzw. Wirkstoffe Cloxacillin (zwei Proben), Ampicillin (zwei Proben), Penicillin G (zwei Proben) und Cefapirin (zwei Proben), jeweils in Konzentration des MRLs. Bei den restlichen sieben Proben des Probensets handelte es sich um hemmstoff-freie Milch.

Es nahmen 150 Laboratorien und Kontrollverbände der Milchindustrie und Lebensmittelsicherung aus 17 Ländern an der Eignungsprüfung teil. Insgesamt flossen die Ergebnisse aus 379 Testreihen in die Auswertung mit ein, wobei bei 182 Testreihen mikrobiologische Testmethoden und bei 142 Testreihen Schnelltestmethoden eingesetzt wurden. Bei 55 Testreihen wurde nicht angegeben, welche Testmethode verwendet wurde.

Die Auswertung aller Einzelergebnisse zeigte, dass die hemmstoff-freie Milch zu 99,7 % als hemmstoff-negativ identifiziert wurde. Bei 6 von 379 ausgewerteten Testreihen wurde hemmstoff-freie Milch falsch-positiv detektiert.

In der Eignungsprüfung, die die Routine-Hemmstoff-Untersuchung widerspiegelt, wurden 5,3 % der hemmstoff-haltigen Proben als hemmstoff-negativ bewertet.

o 11,9 % der Proben, die Cloxacillin enthielten, wurden in der Eignungsprüfung nicht als hemmstoff-positiv erfasst.

o 7,1 % der Proben, die Ampicillin enthielten, wurden in der Eignungsprüfung nicht als hemmstoff-positiv erfasst.

o 1,3 % der Proben, die Penicillin G enthielten, wurden in der Eignungsprüfung nicht als hemmstoff-positiv erfasst.

o 1,1 % der Proben, die Cefapirin enthielten, wurden in der Eignungsprüfung nicht als hemmstoff-positiv erfasst.

Mit mikrobiologischen Tests wurde Cefapirin zu 99,5 %, Penicillin G zu 99,2 %, Ampicillin zu 99,2 % und Cloxacillin zu 84,6 % als hemmstoff-positiv erfasst. Mit Schnelltests wurde Cefapirin zu 98,6 %, Penicillin G zu 98,2 %, Ampicillin 84,5 % und Cloxacillin zu 94,4 % als hemmstoff-positiv nachgewiesen.

Generell kann von einer recht sicheren Erfassung von Cefapirin und Penicillin G auf MRL-Niveau in der Praxis ausgegangen werden. Im Vergleich zum Vorjahr haben sich die mikrobiologischen Testmethoden leicht verschlechtert, wohingegen sich die Schnelltestmethoden verbessert haben. Cloxacillin und auch Ampicillin wurden nur bedingt zuverlässig erfasst, wobei Ampicillin speziell mit Schnelltests deutlich weniger häufig detektiert wurde als mit mikrobiologischen Testsystemen. Die Erfassung von Cloxacillin hat sich insgesamt aber im Vergleich zu den Vorjahren leicht verbessert.

Zur Ursachenfindung für abweichende Ergebnisse wurden in Abschnitt 5.5 dieses Berichtes Empfehlungen zusammengestellt. Können laborintern die Gründe für falsche Ergebnisse2 nicht ermittelt werden, berät der Veranstalter der Eignungsprüfung die Teilnehmer gerne individuell.


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11. Eignungsprüfung Hemmstoff Mai 2018 - QSE GmbH 11. Eignungspruefung...hemmstoff-freie Milch (Tabelle 1). Die metrologische Rückführbarkeit ist auf die zugehörige SI-Einheit