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CINtec® PLUS – Klarheit für die Frauund Sicherheit für den Arzt
CLARITY AND CONFIDENCE
CINtec® PLUS - Die einzigartige Biomarker Kombination: p16 PLUS Ki-67
Die Rolle von p16Unter physiologischen Bedingungen• Die Expression des p16INK4a-Proteins (p16) in normalen Zellen führt zu einem Zellzyklusarrest.
Dies bedeutet, dass p16 in Zellen unter physiologischen Bedingungen einen anti-proliferativen Effekt hat.
In zervikalen Zellen mit dereguliertem Zellzyklus• Wenn die Zellzykluskontrolle in Läsionen des zervikalen Epithels im Verlauf von hrHPV ausgelösten
onkogenen Transformationen gestört wird, können diese Zellen trotz einer Überexpression von p16 proliferieren. Der anti-proliferative Effekt von p16 ist hier aufgehoben.
• Der Nachweis einer Überexpression von p16 kann daher als Biomarker für präkanzeröse bzw. kanzeröse Läsionen der Zervix genutzt werden.
Ki-67 Expression• Die Expression des Ki-67 Proteins ist streng an die Zellproliferation gebunden. Ki-67 wird im Zellkern
proliferierender Zellen exprimiert.
Gleichzeitige Expression von p16 und Ki-67• Die Co-Expression des anti-proliferativen Tumorsupressorproteins p16 und des Proliferationsmarkers
Ki-67 schließt sich unter physiologischen Bedingungen gegenseitig aus. Daher kann ein Nachweis von Zellen, die beide Biomarker gleichzeitig exprimieren, der Identifizierung von höhergradigen, zervikalen Dysplasien dienen.
CINtec® PLUS Doppelfärbung
Die gleichzeitige Expression von p16 PLUS Ki-67 inner- halb einer Zelle kann durch eine immunzytochemischeDoppelfärbung beider Proteine nachgewiesen werden:
Zellen, in denen beide Biomarker parallelnachweisbar sind, zeigen ein braunes Zytoplasmaund rote Kernfärbung.
- Die Braunfärbung des Zytoplasmas zeigt eine Überexpression von p16 an.
- Die Rotfärbung des Zellkerns belegt eine Expression von Ki-67.
Bei einer doppelt-gefärbten Zelle im Präparat ist das Testergebnis CINtec® PLUS positiv.
Färbebeispiele: CINtec® PLUS positiv
Pap II-p / ASC-US Zelle, p16/Ki-67 positi v
Der Nachweis von mindestens einer doppelt-gefärbten Zelle (braunes Zytoplasma PLUS roter Zellkern inner-halb einer Zelle) entweder als Einzelzelle oder im Zellverband, liefert ein positi ves CINtec® PLUS Ergebnis.
Pap IIID2 / HSIL Zelle,p16/Ki-67 positi v
Pap III-p / ASC-H Zelle,p16/Ki-67 positi v
Pap III-x / Atypische glanduläre Zellen,p16/Ki-67 positi v
Pap IIID1 / LSIL Zellen,p16/Ki-67 positi v
Pap IVa-p / HSIL Zelle,p16/Ki-67 positi v
Ausreifende metaplasti sche Zellen, nur p16 Signal fokal nachweisbar
Einzelsignale einer p16 oder einer Ki-67 Expression sowie komplett negati ve immunzytochemische Färbe-Reakti onen werden als CINtec® PLUS negati v bewertet.
Endozervikale glanduläre Zellen, nur Ki-67 Signal nachweisbar
Unreife metaplasti sche Zelle, nur Ki-67 Signal nachweisbar
ASC-US, Kontroll-bedürft iger Pap-Befund, keine doppeltgefärbten Zellen
Endozervikale glanduläre Zellen, nur fokales p16-Signal nachweisbar
LSIL mit Koilozytose,keine Immunreakti on
Färbebeispiele: CINtec® PLUS negativ
Zellverbände
Eine genaue Auswertung der Zellverbände ist sehr wichti g. Verwenden Sie eine stärkere Vergrößerung und nutzen Sie die Mikrometerschraube Ihres Mikroskops. CINtec® PLUS positi ve Zellverbände weisen häufi g eine „diff use“ d. h. durchgängige p16 Färbung auf, in welche die roten Zellkerne eingebett et und nicht in einer anderen Ebene gelagert sind. Am Rand der Zellverbände ist die Identi fi zierung doppelt-gefärbter Zellen am einfachsten.
Ergebnis: CINtec® PLUS negati v
Zellverband mit fokaler p16 Färbung und vereinzelt
in anderer Ebene liegenden, Ki-67 positi ve Zellkernen.
Ergebnis: CINtec® PLUS positi v
Zellverband mit diff user, d.h. durchgängiger p16 Färbung aller Epithelzellen. Die Mehrheit der Zellen zeigt zusätzlich eine rote
Ki-67 Färbung des Zellkerns.
Ergebnis: CINtec® PLUS positi v
Einschichti ge Zellgruppe mit doppelt-gefärbten Zellen
ohne Überlagerungen.
Auswertung von Zellverbänden
Sind doppelt-gefärbte Zellen am Rand des Verbandes erkennbar?
Testergebnis positi v,doppelt-gefärbte Zellen vorhanden
Keine weitere Auswertung
(Verband negati v)
nein
ja
eingebett et
aufgelagert oder
unterliegend
fokal
unspezifi sche Färbung
spezifi sche Färbung
diff us
Braune Anfärbung = spezifi sches p16-Signal?
p16 Färbemuster im Verband
Rote Zellkerne (Ki-67 Signal)Mikrometerschraube verwenden!
Färbebeispiele: Automatisierte Färbung auf BenchMark
Zellverband, CINtec® PLUS positi v
Einzelzelle, CINtec® PLUS positi v
Verband aus zwei Zellen, CINtec® PLUS positi v
Färbebeispiel: Konventioneller Pap-Abstrich
Konventioneller Abstrich, Pap-Färbung
Derselbe konventionelle Abstrich nach p16/Ki-67 Doppelfärbung:
CINtec® PLUS positiv
Färbebeispiel: Dünnschichtzytologie
Roche Diagnostics Deutschland GmbHSandhofer Straße 116 68305 MannheimGermany
© 2014 Roche Diagnostics. Alle Rechte vorbehalten.
www.roche.de
www.roche.de/CINtecPLUS
Herausgeber
06734294001 1214 – 1.0 Kn
SurePath™, CINtec® PLUS positiv ThinPrep®, CINtec® PLUS positiv