1:38 Br~ves communications - Kurze Mitteilungen

tent of epiphyseal cartilage, shaft and marrowL Since high resolution autoradiography of mineralized and de- mineralized preparations have shown intense labelling of newly synthesized chondroitin sulfate in bone and in the

t00

0istal spiphyseal cartilage

Arlicular cartilage

+ 1 ,~ . Dislal epiphyssal

• =- ~ marrow space

N I _ I]istal metaphysis

I ~}d-shafl cortex • ,,, + +

1.0 ~ h y s e a l re.arrow space

Light 2' -o • i i

(ogoo-2mo) (zmo-o90o)

h after injection

The patterns of S m sulfate uptake in the femurs of rats injected at different times (09:00 and 21:00) wi th in a 24 h period,

EXPERIENTIA XX]3

cells of cartilage for at least 24 h 7. s despite a rapid deple- tion of S a6 in serum dialysates 0, the labelling after 4 h in epiphyseal cartilage at least suggests a true variabili ty in cellular activity. Although, in these undecalcified prepa- rations, changes in the amount of ground substance elaborated by very active metaphyseal bone cells may be masked by the presence of S s5 associated with the mineral phase ~, it is probable tha t the uniform labelling of articu- lar cartilage and mid-shaft cortical bone in both time series accurately reflects the relatively quiescent popu- lations of cells in these tissues.

Rdsumd, Du radio-soufre a dtd administrd intraveineuse" ment ~, des rats g 09.00 h e t k d'autres ~ 21.00 h, et ils ont dt6 sacrifi6s 2-3, 4, 8 et 12 h apr~s l 'injection. L'analyse microdensitomdtrique d'autoradiographies des fdmurs a indiqu6 que la concentration et la rStention du traceur dans le cartilage de conjugaison dtaient plus grandes danS les rats traitds/~ 09.00 h. Les tissus non-cartilagineux n 'on t pas montrd de changements pareils.

D. J. SIMmonS

Radiological Physics Division, Argonne National Laboratory, Argonne (Illinois, U.S.A.), November 2t, t963.

L. F. BI~LANGER, Canad. J. Biochem. Physiol. 32, 161 (1954). s D. D. DZlEWIATKOWSKI, J. exp. Med. 93, 451 (1951). 9 D. D. DZI~WlATKOWSm, Radioisotopes and Bone (P. Lacroix and

A. M. Budy, Eds., Blackwell, Oxford 1962), p. 277.

H i i m o g l o b i n v o m ¢¢ A l e x a n d r a - T y p u s , i m ers ten Lebensjahr

Bei Neugeborenen und S~uglingen lassen sich oft ldeinste Mengen eines anomalen H~moglobins (Hb) nach- weisen, das die elektrophoretische Wanderungsgeschwin- digkeit des Hb Alexandra besitzt. In einer frfiheren Arbeit wurde mitgeteilt, dass die anomale Frakt ion im ersten Lebensjahr in 49 yon 109 untersuchten F~llen und im 2. Lebensjahr bei I yon 17 untersuchten Kindern gefunden wurde 1. Die gr6sste Hiiufigkeit war im 2. und 3. Lebens- monat zu beobachten, im Zeitpunkt, da Hb F rasch zu- rfickgeht und Hb A s in Erscheinung tr i t t . Die anomale Hb-Frakt ion war in allen F i l len in der Elektrophorese erst nach Benzidinf/irbung sichtbar. Die jetzige Mitteilung berichtet fiber die Fortsetzung der Untersuchungsserie und fiber erste spektrophotometrische Messungen der anomalen Fraktion.

Material and Methodik. Von 163 Neugeborenen und S~uglingen des ersten Lebensjahres wurden Blutproben untersucht, welche aus verschiedenen Kinderkliniken zur Best immung der H~moglobine und der Glucose-6-phos- phu~dehydrogenase eingesandt wurden. Es handelte sich um Citratblut, vorwiegend yon F/illen mit Icterus oder Aniimien diverser Genese unter Ausschluss aller H~mo- globinopathien. Die Herstellung des Hi~molysates aus ge-

waschenen Erythrocyten, die Technik der Stlirkeblock- Etektrophorese und die Hb F-Bestimmung mittels Alkali- denaturierung sind andernorts ausftihrlich beschrieben =. Fiir die Elektrophorese wurden Proben zu 0,05 mt einer ca. 15 g-prozentigen Hb-L6sung aufgetragen. Zur spektro- photometrisehen Untersuchung wnrden 7 anomale Frak- t ionen mit 3 ml Aqua. dest. eluiert. Die Messung des Hb- Spektrums erfolgte mit einem selbstregistrierenden Beck- man-DB-Geriit.

Ergebnisse. Himolysate ohne nachweisbare Hb A2- Fraktion wiesen nie ein anomales Hb auf (Figur 1). Hin- gegen enthielten H/imolysate mit sehr geringen Mengen Hb A v dessen Frakt ion erst nach Benzidinreaktion sicht- bar wurde, sehr oft auch kleinste Mengen eines anomalen Hb (Figur 2) mit der Wanderungsgeschwindigkeit yon Hb Alexandra 3,4. Die H/iufigkeit dieses anomalen Hb ist

x H. R. MARTI, Proe. of the 9th Congr. of the Europ. Soe. of Haema- tology Lisbon 1963 (Karger, Basel-New York, im Druck). H. R. MARTI, Pathologic und Klinik in ginzeldarstdlung, Bd. XIII (Springer, Berlin-G6ttingen-Heidelberg 1963).

a PH. FESSAS~ N. MASTROKALO$ nnd G. FOSTIROPOULOS, Nature

(Lond.) 183, 30 (1959). 4 F. V~LLA, Nature (Lond.) 184, 272 (1959).

15. III. 1964 Brevi comunieazioni - Brief Reports 139

HAufigkeit eines anomalen Hiimoglobins vom Typus des Hb Alexandra im ersten Lebensjahr. Untersuehung yon I63 Neugeborenen und S~tuglingen

Tag der 1. Monat 2. Monat 3. Monat 4. Monat 5.-12. Total Geburt ab 2. Tag Monat 1. Lebensjahr

Blutproben mit Hb ~ Alexandra, 2 26 Blutprobe ohne Hb ~ Alexandra~ 18 57 Total der untersuchten Sfiuglinge 20 83 Prozentsatz Proben mit Hb ~Alexandra~ 10% ,31~

17 6 3 6 60 4 2 6 16 103

21 8 9 22 163 s1% 75% 33% 27% 37%

i n de r Tabe l le wiedergegeben . D u r c h Mischung eines N a b e l s c h n u r - H g m o l ~ s a t e s ohne M i n o r k o m p o n e n t e n rn i t Sgug l i ngsp l a sma liess s ich hie e ine F r a k t i o n m i t a n o m a l e r W a n d e r u n g s g e s c h w i n d i g k e i t e rzeugen, D a alle H g m o -

Hb Az

lib F

HbA2 .~ Starllinte

T

==

1 2 3

Fig. 1. H~molysat eines Neugeborenen ohne Minorfraktionen SUirkeblock-Elektrophorese pH 8,6 Puffer Veronal/Veronal-Na, 600 V, 75 mA, 4°C, 14 h. 1 = KontrollhAmolysat eines normalen Erwachsenen. 2=H~irnolysat eines 4 Tage alten Neugeborenen.

3 = gleiches Hiimolysat wie Nr. 2 nach Benzidinfarbung.

l ib

Az

I =

,,Alexandra,,

3=

1 2 3

Fig. 2. H~imolysat eines Neugeborenen mit Hb Az und Hb yore Alexandra-Typus. $t~irkebloek-Elektrophorese pH 8,6 " Puffer Veronal/Veronal-Na, 600 V, 70 mA, 40C, 13x/~ h. l=H~molysat eines 4 Tage alten Neugeborenen nach Benzidinfarbung. 2~---Gleiche Probe vor Benzidinfiirbung; die Minorfraktionen sind nicht erkenn-

bar. 8 = KontroUh~molysat eines normalen Erwachsenen.

lysa te ger inge Mengen K CN en t h i e l t en , k a n n es s ich be i de r a n o m a l e n F r a k t i o n a u c h n i c h t u m M e t h g m o g l o b i n h a n d e l n . Bei Kon t ro l l e y o n 687 H g m o l y s a t e n y o n m e h r als 2 jghr igen K i n d e r n u n d E r w a c h s e n e n w u r d e bei glei- che r U n t e r s u c h u n g s t e c h n i k ke ine i ihn l iche B e n z i d i n - pos i t ive F r a k t i o n b eo b a~h t e t .

M i t d e m H g m o l y s a t e ines 2 M o n a t e a l t e n Sgugl ings m i t s eh r a u s g e p r g g t e r a n o m a l e r F r a k t i o n ge l ang es ers t rnals , i m E l u a t d e r e n t s p r e c h e n d e n St i i rkezone e in e indeu t iges O x y - H b - S p e k t r u m nachzuweisen . D a b e i w u r d e n fo lgende E x t i n k t i o n e n gemessen : 630 m ~ = 0 , 0 0 3 9 , 578 m ~ = 0 , 0 1 5 0 , 560 m ~ = 0 , 0 1 3 2 , 540 m ~ = 0,0168, 415 m ~ = 0,1029. H i n - gegen w a r es bei Messungen im U V - B e r e i c h n i c h t m6g l i ch zu en t sche iden , ob das S p e k t r u m der a n o m a l e n F r a k t i o n bei 290 m ~ d e m j e n i g e n des H b F oder des E r w a c h s e n e n - H b en t s p r i ch t . S t 6 r e n d e B e i m e n g u n g e n i m E l u a t bee in - t r g c h t i g t e n die Messgenauigkei t .

Diskussion. Alle b i sher igen U n t e r s u c h u n g e n lassen d en Schluss zu, dass es s ich bei der n a c h g e w i e s e n e n a n o m a l e n F r a k t i o n u m eine besonde re H b - V a r i a n t e h a n d e l t , die in d en e r s t en L e b e n s m o n a t e n geb i lde t wird , w e n n die H b A S- S y n t h e s e e inse tz t . Das an o m~l e H b wi rd e in ige ~¥ochen l ang in e t w a gle icher Menge p r o d u z i e r t wie H b A 2 u n d v e r s c h w i n d e t n a c h h e r wieder . D a die e l e k t r o p h o r e t i s c h e W a n d e r u n g s g e s c h w i n d i g k e i t dieser H b - V a r i a n t e der je - n igen des seh r se l t en bei N e u g e b o r e n e n b e o b a c h t e t e n H b A l e x a n d r a en t sp r i ch t , wird die neue M i n o r f r a k t i o n des B l u t f a rb s t o f f e s als H b v o m ,Alexandra -Typus ,~ bezeich- net , bis e ine .weitere C h a r a k t e r i s i e r u n g mSgl ich is t 5.

Summary. F r o m a series of 163 h a e m o l y s a t e s f rom in-, r an t s in t h e i r f i r s t y e a r of life, 60 c o n t a i n e d a m i n u t e h a e m o g l o b i n f r ac t i on w i t h t h e e l e c t ro p h o re t i c m o b i l i t y of H b A l e x a n d r a . T h e a b n o r m a l h a e m o g l o b i n was v is ib le in all cases o n l y a f t e r b e n z i d i n e s t a in ing . T h e h i g h e s t ~re- q u e n c y is f o u n d d u r i n g t h e 2nd a n d 3rd m o n t h of life a n d concurs w i t h t h e a p p e a r a n c e of H b A S. S p e c t r o p h o t o - me t r i c ana lys i s of the a b n o r m a l f r ac t i on revea l s t h e t yp i - cal p i c tu re of o x y h a e m o g l o b i n .

H . R . MARTI

Medizinische Universit~tspoliklinik Basel ( Schweiz), 20. Deaember 19a3.

6 Die Arbeit wurde dutch einen Beitrag des Schweizexischen N~ttio, nalfonds zur F6rderung der wissensehaftlichen Forschung er= m~glicht. Ich danke Frl. L. BARGETZl und Frl. CH. PERN~R for ihre wertvolle Hilfe bei allen Untersuehungen.