Diagnostic Update

September 2014

NEU: Der Dermatophyten RealPCR Test - fr die schnelle und sichere Diagnose einerDermatophytose bei Hunden und Katzen

HintergrundDermatophyten sind hufige Ursachen von Pilzinfektionen der Haut. Bei Hunden und Katzen sind Microsporum canis, Microsporum gypseum und Trichophyton mentagrophytes die drei hufigsten Erreger einer Dermatophytose.1 90 % aller Katzen mit einer Dermatophytose sind mit Microsporum canis infiziert, einem Erreger, der sehr ansteckend ist und das hchste zoonotische Potenzial aufweist.2 Daher ist die zuverlssige und zeitnahe Diagnose einer Dermatophytose sehr wichtig.

PathogeneseGesunde Haut ist eine wirksame natrliche Barriere, die eine Invasion von Dermatophyten verhindert. Eine Infektion ist daher nur dann mglich, wenn diese Barriere unterbrochen ist. Bedingungen, welche die Haut fr eine Dermatophyteninfektion prdisponieren, sind unter anderem ein geringes Alter (unter 2 Jahren), eine Immunsuppression (durch Stress oder Medikamente bedingt), Grunderkrankungen, die die Integritt der Haut oder den Immunstatus beeintrchtigen, sowie eine Mangelernhrung und hohe Temperatur oder Feuchtigkeit. Schlechte Hygiene und die Haltung von Tieren in grossen Populationen knnen zu schweren klinischen Symptomen und einer raschen Ausbreitung auf Kontakttiere fhren, insbesondere, wenn Microsporum canis der Erreger ist. In der 1- bis 3-wchigen Inkubationszeit wachsen entlang des Haarschaftes Pilzhyphen, die eine dicke Schicht Sporen produzieren, so dass die Haare letztlich an der Hautoberflche abbrechen. Stoffwechselprodukte des Pilzes verursachen eine Entzndung des betroffenen Areals, was die Bildung von runden, rot umrandeten Flecken mit rauer, schuppiger Haut zur Folge hat. Bei den kreisrunden, haarlosen, rot umrandeten Bereichen mit abnorm vernderter Haut handelt es sich um die typischen Ringelflechten-Lsionen (engl. ringworm). Jedoch sind nicht alle Lsionen typisch, und betroffene Katzen knnen auch asymptomatische Trger bleiben.Bei immunkompetenten Katzen sind die Hautvernderungen meist auf den Kopf beschrnkt und bilden sich innerhalb einiger Wochen spontan zurck. Bei immunsupprimierten Katzen kommt es hufig zu einer generalisierten Hauterkrankung mit einer bakteriellen Sekundrinfektion.

bertragungDie Gefahr einer bertragung von Dermatophyten ist sehr hoch. Sowohl eine bertragung von Tier zu Tier als auch vom Tier auf den Menschen ist sehr hufig, sofern dies nicht durch geeignete Massnahmen zur frhzeitigen Detektion und Bekmpfung verhindert wird. Eine zustzliche Herausforderung ergibt sich dadurch, dass die Lsionen sehr klein und die Trger sogar asymptomatisch sein knnen. Zudem haften die infizierenden Sporen an den Haaren, die abbrechen bzw. ausfallen und in der Umgebung verteilt werden; diese Sporen bleiben bis zu 12 Monate infektis. Die Infektion eines Tieres mit Dermatophyten kann somit durch direkten Kontakt mit einem infizierten Tier oder ber die Umgebung erfolgen, wie zum Beispiel durch einen Kontakt mit kontaminierten Halsbndern, Brsten, Lagern, Teppichen, Mbeln oder Spielzeug. Freignger knnen sich beim Scharren im Erdboden mit geophilen Dermatophyten wie M. gypseum und mit dem von kleinen Nagern stammenden T. mentagrophytes infizieren.

Tierheime und Tierpensionen sind aufgrund von metabolischem Stress und hoher Besatzdichte von Tieren mit hufig unbekannter Krankengeschichte besonders anfllig fr Dermatophytose-Ausbrche.

Diagnose Da sich die durch Dermatophyten verursachten Hautlsionen oft nicht von anderen Hautkrankheiten unterscheiden lassen, sollte eine Dermatophytose bei allen Tieren mit Hautvernderungen als Verdachtsdiagnose in Betracht gezogen werden. Mehrere einfache Techniken wie die Untersuchung mit der Woodschen Lampe und die mikroskopische Untersuchung von Haaren sind als diagnostische Verfahren weit verbreitet. Beide weisen jedoch eine hohe Rate an falsch negativen und falsch positiven Ergebnissen auf. Nur 50 % der M. canis-Isolate sind mit der Woodschen Lampe detektierbar, und andere Dermatophyten fluoreszieren berhaupt nicht. Die Sensitivitt der mikroskopischen Untersuchung ist unzureichend, weil Sporen oft schwer erkennbar sind, und ihre Spezifitt aufgrund des Vorhandenseins von Saprophyten am Haarschaft mangelhaft sein kann.

Bislang ist die Kultur auf speziellen Medien der Goldstandard fr die Diagnose einer Dermatophytose. Dieses Untersuchungsverfahren weist eine hohe Sensitivitt auf und ermglicht die Identifizierung der Spezies. Dermatophyten-Nhrmedien fr die praxisinterne Anwendung enthalten in der Regel Indikatoren, die durch einen Farbwechsel positives Wachstum anzeigen. Allerdings bewirken auch viele Nicht-Dermatophyten-Pilze einen Farbwechsel und knnen dadurch zu falsch positiven Ergebnissen fhren. Fr die korrekte Auswertung einer Pilzkultur ist daher besonderes Fachwissen erforderlich. Darber hinaus kann ein zuverlssiges negatives Ergebnis aufgrund des langsamen Pilzwachstums erst nach bis zu 28 Tagen gewhrleistet werden. Der lange Zeitraum bis zum Erhalt von Ergebnissen und das erforderliche Fachwissen schrnken den Nutzen der kulturellen Untersuchungen zur Prvention dieser hoch ansteckenden Infektion ein.

Ein molekulardiagnostischer Test ermglicht einen schnellen, sensitiven und spezifischen Nachweis von Dermatophyten.4, 5

Polymerasekettenreaktion fr die Diagnose einer DermatophytoseDie real-time PCR ist als neuer Goldstandard, insbesondere fr die Diagnose der Onychomykose (Pilzinfektion des Nagels) beim Menschen, vorgeschlagen worden.2 Der IDEXX Dermatophyten RealPCR Test ist ein schnelles und sicheres diagnostisches Hilfsmittel zur Diagnose der Dermatophytose bei Katzen und Hunden. Ergebnisse sind 2-4 Tage nach Eingang der Probe bei uns verfgbar. Der Test weist Microsporum spp. und Trichophyton spp. mittels real-time PCR nach und besitzt eine Sensitivitt von mehr als 95 % sowie eine Spezifitt von mehr als 99 %.

Im Anschluss an alle Microsporum spp. positiven Ergebnisse wird automatisch eine Spezifikations-PCR auf Microsporum canis durchgefhrt, da etwa 90 % aller Dermatophytosen bei Hunden und Katzen von diesem Erreger verursacht werden.In denjenigen Fllen, in denen das Screening auf Microsporum spp. positiv, die PCR auf Microsporum canis jedoch negativ ist, empfehlen wir eine kulturelle Untersuchung, da andere Microsporum-Spezies Ursache fr die Erkrankung sein knnen. Wenn in einer auf Trichophyton spp. positiv getesteten Probe ein Nachweis der Spezies erforderlich ist, empfehlen wir ebenfalls das Anlegen einer Kultur als weiterfhrende diagnostische Massnahme.

Folgende Spezies knnen mit dem IDEXX Dermatophyten RealPCR Test sicher nachgewiesen werden:

Microsporum spp. M. canis M. gypseum M. audouinii

Trichophyton spp. T. mentagrophytes T. tonsurans T. rubrum

Wann soll der Dermatophyten RealPCR Test verwendet werden?Der Test kann sowohl fr die Diagnose bei kranken Tieren als auch fr Screening-Zwecke verwendet werden.

Der Dermatophyten RealPCR Test sollte bei Tieren mit fleckiger Alopezie und schuppigen Hautvernderungen durchgefhrt werden. Aufgrund der usserst variablen klinischen Manifestation einer Dermatophytose sollte der Dermatophyten RealPCR Test in allen klinisch relevanten Fllen eingesetzt werden, auch wenn typische Hautlsionen fehlen.

Bei Tieren mit klinischen Hautvernderungen stellt der PCR-Nachweis einen Beweis fr eine Infektion dar, whrend ein positives Ergebnis der PCR-Analyse bei Tieren ohne Hautlsionen auf einen asymptomatischen Trger hinweist.

Der Dermatophyten RealPCR Test kann zudem in Betracht gezogen werden, wenn eine neue Katze, insbesondere aus einem Tierheim oder einer Tierpension, neu in einen Haushalt aufgenommen werden soll. Der Nachweis von Microsporum canis bei einer gesunden Katze bedeutet, dass die Katze ein asymptomatischer Trger der Infektion ist.

negativ

Trichophyton spp.Microsporum spp.

Microsporum canis PCR Differentialdiagnose

Diagnose Kultur

positiv positivepositiv

positivepositiv

negativ

negativ

Probenentnahme fr den Dermatophyten RealPCR Test Ausgezupfte Haare und Hautgeschabsel vom aktiven Rand der Lsionen in ein leeres, steriles Rhrchen fllen. Krallen mit Krallenbett-Geschabsel in einem verschlossenen Umschlag fr Pilzproben oder in einem sterilen Behlter

einsenden. Wenn keine deutlichen Lsionen sichtbar sind, die mittels grndlichem Ausbrsten mit einer Zahnbrste gesammelten Haare

in einen sterilen Behlter geben und einsenden.

Interpretation der Ergebnisse des Dermatophyten RealPCR Tests

Mikroskopie oder Nachweis mit der Woodschen Lampe

Dermatophyten- Nhrmedium (DTM) Pilzkultur

Dermatophyten RealPCR Test

Sporen mglicherweise schlecht zu sehen oder falsche Identifizierung aufgrund von Saprophyten aus dem Erdboden

Nur 50 % der M. canis-Stmme produzieren fluoreszierende Metaboliten geringe Sensitivitt, falsch negatives Ergebnis

Keine Fluoreszenz bei M. gypseum oder Trichophyton spp.

Talg und bestimmte Arzneimittel verursachen ebenfalls Fluoreszenz geringe Spezifitt, falsch positive Ergebnisse

Dauert bis zu mehreren Wochen

Interpretation kann schwierig sein

In einer Studie vermehrten sich nur 65,4 % der bekannten M. canis-Inokulate

Hoher personeller und zeitlicher Aufwand fr die praktische Durchfhrung und Gefahr einer zoonotischen bertragung

Besttigung eines negativen Ergebnisses dauert bis zu 28 Tage

Ermglicht die Identifizierung aller, selbst sehr seltener oder exotischer Spezies

Ergebnis nach 2-4 Tagen

Sehr gute Spezifitt und Sensitivitt

Positiver und negativer prdiktiver Wert >95 %

Vergleich verschiedener Methoden zur Diagnose einer Dermatophytose

Positives RealPCR-Testergebnis1. Ein positiver Test auf Microsporum spp. bedeutet, dass DNA von Microsporum spp. im Probe