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Bestandsspezifische Immunprophylaxe bei Legehennen D. Köhler-Repp, M. Metzner RIPAC-LABOR GmbH, Potsdam Bestandsspezifische Immunprophylaxe bei Legehennen

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Bestandsspezifische Immunprophylaxe

bei Legehennen

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Bestandsspezifische Immunprophylaxe

bei Legehennen

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Bestandsspezifische Immunprophylaxe

bei Legehennen

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Produktionszyklus bestandsspezifischer Vakzine

Bestand

Tierarzt, Landwirt

Proben

Diagnostik

Stammauswahl

Bestandsspezifische

Impfstoffe

Impfung

Labor

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Bestandsspezifische Immunprophylaxe

bei Legehennen

D. Köhler-Repp, M. Metzner RIPAC-LABOR GmbH, Potsdam

Stamm-Auswahl nach Differenzierung

Bestandsisolate

MALDI-TOF MS

Sero-, Toxotypisierung

Virulenz-PCRs Virulenz-PCRs

(APEC, Toxin-Gene..)

Auswahl

E.rhus.

P.m.

E. coli

Adjuvans

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bei Legehennen

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Voraussetzungen für bestandsspezifische Impfung

• Verwendung von Isolaten aus dem Bestand

• Kein zugelassener Impfstoff vorhanden oder lieferbar

• Zugelassener Impfstoff wirkt nicht (UAW)

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Impfstoffe mit bakteriellen Komponenten

Bestandsspezifische Impfung Zugelassener Impfstoff*

Avibacterium paragallinarum Typ A, B, C

Brachyspira spp. nicht vorhanden

Campylobacter spp. nicht vorhanden

Clostridium perfringens nicht vorhandenClostridium perfringens nicht vorhanden

Enterococcus cecorum nicht vorhanden

Escherichia coli O78

Erysipelothrix rhusiophatiae nicht vorhanden

Gallibacterium anatis nicht vorhanden

Mannheimia haemolytica nicht vorhanden

Mycoplasma gallisepticum x

Mycoplasma synoviae x

Ornithobacterium rhinotracheale Serotyp A

Pasteurella multocida nicht vorhanden

Salmonella enterica Enteritidis, Typhimurium

*Quelle: PEI, Stand Mai 2019

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Bestandsspezifische Immunprophylaxe

bei Legehennen

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1. Clostridium perfringens

2. Ornithobacterium rhinotracheale

3. Escherichia coli

Stammauswahl am Beispiel von

3. Escherichia coli

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• Erreger der Nekrotisierenden Enteritis (NE)

• Subklinische NE ökonomisch wichtig

• Exotoxine für Pathogenese relevant

Clostridium perfringens

• Exotoxine für Pathogenese relevant

• Toxoidimpfstoffe

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Low Alpha (4 NU) Medium Alpha (8-16 NU) High Alpha (>16 NU)

Clostridium perfringens: Alphatoxin Quantifizierung durch den

Lezithovitellintest (LV)

1:4

+

1:16

-

1:64

-

1:4

+

1:16

+

1:64

-

1:4

+

1:16

+

1:64

+

• LV-Test zeigt Menge des aktiven Alphatoxins an

• ELISA zeigt Menge ohne Information zu Aktivität an

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1. Clostridium perfringens

2. Ornithobacterium rhinotracheale

3. Escherichia coli

Stammauswahl am Beispiel von

3. Escherichia coli

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A

29%

J

18%

K

2%

ORT serotypes in chickens

A

22%J

17%

K

2%

L

4%

ORT serotypes in turkeys

ORT in Puten und Hühnern (>800 strains 2016 – 2019, Polen): Serotypisierung FU Berlin, Hafez

B

2%

C

9%

D

4%E

5%

I

31%

A B C D E F G H I J K L

B

12%

C

2%

D

2%E

9%G

6%

H

1%

I

23%

A B C D E F G H I J K L

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Variant D11_0476

Ornithobacterium rhinotracheale: Neue Varianten – Neue Spezies?

MALDI-Types

III and V

16S Types

DSM 15997T

Variant D11_0476

Common ORT

Variant D12_1556

III and V

I, II and IV

IX

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D. Köhler-Repp, M. Metzner RIPAC-LABOR GmbH, Potsdam

80,0%

100,0%

120,0%

Ornithobacterium in Puten und Hühnern (>800 strains 2016 – 2019, Polen)

0,0%

20,0%

40,0%

60,0%

80,0%

rhinotracheale D11_0476 D12_1556

turkey

chicken

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Impfung von Legehennen mit Ornithobacterium Varianten

20000

25000

30000

Control

vaccination

un

its

0

5000

10000

15000

20000

20 30 40 50 60

Control

Common ORT

Variant D11_0476

Variant D12_1556

vaccination

EL

ISA

un

its

Age in days

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1. Clostridium perfringens

2. Ornithobacterium rhinotracheale

3. Escherichia coli

Stammauswahl am Beispiel von

3. Escherichia coli

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• Multiple Serotypen (Toxotypen) vorhanden

• Virulenz unterschiedlich stark ausgeprägt ist

Stammdifferenzierung und –Auswahl besonders wichtig wenn:

• Erreger sehr verbreitet ist

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E. coli: Serotypsisierung und Virulenzfaktoren

• O-Antigene: determinieren Serotyp und spezifisch für Immunantwort

• APEC-Gene: determinieren Virulenz

H-Antigen (>50): flagella (protein antigen)

O-Antigen (>190): lipopolysaccharides on wall

K-Antigen (>100): capsula out of polysaccharides

F-Antigen: fimbria (pili)

APEC-Gene

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E. coli: Erweitertes Agglutinations-Schema

Polyvalent Geflügel HP1

HP2 O44:K74

not typable (n.t.)

Objektträgeragglutination zur Bestimmung der O-Antigene

O1:K1

O2:K1

O18:K+

O78:K80

O24:K+

HP2

HP3O44:K74

O26:K60

O114:K90

O125:K70

O142:K86

O158:K-

O86:K61

O126:K71

O91:K-

O55:K59

O119:K69

O111:K58

O128:K67

O127:K63

O103:K-, O124:K72

O25:K11, O118:K-

O145:K-, O78:K80

O157:K-, O164:K-

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Gene Gene product / predicted function Size

(bp)

astA Heat-stable cytotoxin associated with

enteroaggregative E. coli / Toxin 116

iss Increased serum survival / Protectin 309

Virulence-associated genes among avian pathogenic E. coli (APEC)

and predicted gene products (Ewers et al., Avian Diseases 49:269-273, 2005)

Toxin

Protectiniss Increased serum survival / Protectin 309

irp2 Iron-repressible protein (yersiniabactin synthesis)

/ Iron-acquisition system 413

papC Pyelonephritis-associated fimbria / Adhesion to

host cells 501

iucD Gene responsible for the synthesis of the hydroxa

siderophore aerobactin / Iron-acquisition system 714

tsh Temperature sensitive hemagglutinin / Adhesion

to host cells 824

vat Vacuolating autotransporter toxin / Toxin 981

cva A/B

cvi cvaC

Structural genes of colicin V operon (microcin

colicin V) / Protectin 1181

Toxin

Protectin

Protectin

Adhesion

Adhesion

Iron aquisition

Iron aquisition

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4

5

6

7

Durchschnittliche Virulenzfaktoren (480 Isolate D, 221 Isolate PL)

Virule

nzfa

kto

ren

0

1

2

3

4

O1 O2 O18 O24 O78 n.t.

GE

PL

Virule

nzfa

kto

ren

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