Fr. B. Klein

Fr. Dr. N. Böckel-Frohnhöfer

Prof. Dr. J. Geisel

Praktikum - Niere

Einführung:

Im Praktikum werden selbstständig die Basis-

Urinuntersuchungen - Urinstatus und Urinsediment –

durchgeführt. Die Abklärung einer Proteinurie ist eine

häufige Fragestellung im Labor. Die Beurteilung der

Einzelproteine und der SDS-PAGE Elektrophorese werden

durchgeführt. Im zweiten Teil wird die Bedeutung der

glomerulären Filtrationseinschränkung für die

Pharmakotherapie ausgeführt. Verschiedene Verfahren zur

Beurteilung der glomerulären Filtrationsrate werden

vorgestellt. Die Inhalte des Urin-Praktikums werden im

Arbeitsbuch Abschnitt XV ausgeführt.

Praktikum Teil 1 – Urin-Teststreifen

Analytik

•Urin mischen, Teststreifen bis zur

Markierung kurz in den Urin eintauchen

•Streifen kurz längs abstreifen

•nach 1-2 Minuten anhand der

Vergleichsskala auswerten

Praktikum Teil 2 - Urin-Sediment

Präanalytik

- Frischer, konzentrierter Mittelstrahlurin

Analytik

- Zentrifugation: konstantes Ausgangsvolumen (10 ml),

konstante Zentrifugationsbedingungen (400g, 5 min)

- Definiertes Restvolumen über dem Sediment (0,5 ml)

- 20 µl auf Objektträger und mit Deckglas abdecken

Referenzwerte (Mikroskop mit 40er Okular)

- Erythrozyten: < 2 pro Gesichtsfeld

- Leukozyten: < 5 pro Gesichtsfeld

- vereinzelt Plattenepithelien

- keine bis wenige hyaline Zylinder

Praktikum Teil 2 - Urin-Sediment

Leukocyten, Erythrocyten, Epithelzellen

Praktikum Teil 2 - Urin-Sediment

Kristalle

Tripelphosphate Calciumoxalate amorphe Salze Harnsäurekristalle

III Spezial-Urin-Diagnostik

• Abklärung Proteinurie

• Glomeruläre Filtration

kleiner Proteine, große

Proteine werden zurückgehalten

• Tubuläre Reabsorption

kleiner Proteine (99 %)

• Proteinausscheidung

< 70 mg/24 Stunden

Grundprinzip

Praktikum Teil 4 – Beurteilung der Proteinurie anhand

der SDS-Page-Elektrophorese

1 2 3 S 4 5 6 7

IgG

Albumin

a1-Mikroglobulin freie LK

Transferin

Nummer unten rechts! 1-7 unterschiedliche Patienten, S: Standard

Die SDS-PAGE

Elektrophorese

trennt Proteine

nach Größe auf

III Spezial-Urin-Diagnostik

• Abklärung Proteinurie

- Gesamt-Protein

- Einzelproteine

Albumin (Glomerulär-selektiv)

IgG (Glomerulär-unselektiv)

a1-Mikroglobulin (tubulär)

Ratio IgG/Albumin (postrenale Proteinurie) > 0.2

Summe > 60 % am Urin-Gesamt-Protein

Bezug auf g Kreatinin besser als Bezug

auf Volumen

Praktikum Teil 3 –

Beurteilung der Proteinurie anhand von Einzelproteinen

Hämaturie?

Indikation für Parameter der Nierenleistung

• Beurteilung der glomerulären Filtrationsleistung

(akute und chronische Nierenerkrankungen,

Stoffwechselstörungen (Diabetes mellitus),

Hypertonie u.a.

• Therapie mit nephrotoxischen Medikamenten oder renal zu eliminierenden Medikamenten

Dosisanpassung wenn Clearance < 50 ml/min und

Qo < 0,5 (extrarenal eliminierte Fraktion eines

Medikamentes); www.dosing.de

I Parameter der Nierenleistung

1 Kreatinin (Serum/Plasma)

• Entsteht in der Muskulatur aus dem Zerfall von

Kreatinphosphat

• Bildung ist Abhängig von der Muskelmasse

• Kreatinin wird nahezu vollständig glomerulär filtriert

• Anstieg erst bei Einschränkung der glomerulären

Filtrationsleistung < 50 %

I Parameter der Nierenleistung

2 Harnstoff (Serum/Plasma)

• Entsteht als Endprodukt des Aminosäureabbaus

• Bildung ist Abhängig von Eiweisszufuhr

• Harnstoff wird glomerulär filtriert

• Anstieg erst bei Einschränkung der glomerulären

Filtrationsleistung < 25 %

I Parameter der Nierenleistung

3 Kreatinin-Clearance (ml/min)

• Erfasst genauer und früher eine Einschränkung der glomerulären Filtrationsleistung als Kreatinin im Plasma oder Serum

• Problem: Vollständige Sammlung des 24-Stunden Urins

CKrea (ml/Min.) = UKrea (mg/dl) x V (ml)

SKrea (mg/dl) x t (Min.)

CKrea (ml/Min. x 1,73 m2) = CKrea x 1,73

KOF

4 MDRD Formel

(Modification of diet in renal disease)

GFR (ml/min/1,73 m 2) =

186 x (Serum-Kreatinin) -1,154 x (Alter) -0,203 x (0,742 bei Frauen)

Referenzbereich: 80-140 ml/min (pro 1,73 m 2)

Indikation: Früherkennung der chronischen Nierenerkrankung

I Parameter der Nierenleistung

6 Cystatin C

• Wird von allen kernhaltigen Zellen gebildet

• Unabhängig von Einflussgrößen

• Anstieg bereits bei Einschränkung der glomerulären

Filtrationsleistung < 80 ml/min

• Nachteil: teurer als Kreatinin

GFR (mL/min) = 79,901 x Cystatin C (mg/L) -1,4389

Fall 1

Hier sind drei berechnete GFR

dargestellt. Die GFR unterscheiden

sich dabei deutlich. Ursache ist die

verminderte Muskelmasse des

Patienten

Patient: weiblich, 73 Jahre

Intoxikation durch Dabigatran bei nicht Berücksichtigung der

eingeschränkten glomerulären Filtrationsrate.